胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)合成基因簇是揭示乳酸菌EPS构效关系的基础。本研究前期发现一株高产EPS的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarum YZH81菌株含有可能的2个EPS合成基因簇cps1和cps2,构建的YZH81?cps1菌株EPS产量...胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)合成基因簇是揭示乳酸菌EPS构效关系的基础。本研究前期发现一株高产EPS的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarum YZH81菌株含有可能的2个EPS合成基因簇cps1和cps2,构建的YZH81?cps1菌株EPS产量下降。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术敲除了YZH81菌株cps2基因簇。与YZH81相比,YZH81?cps1和YZH81?cps2的EPS产量分别下降了22.88%和35.42%,化学组成改变也较大,突变株均未检出鼠李糖单糖组分,而甘露糖和葡萄糖占比大幅提高。进一步利用蛋白质组学分析了不同发酵时间(10、32 h)两个不同cps簇的缺失相比于野生型YZH81菌株的差异蛋白29个和22个,京都基因与基因组百科全书和基因本体分析结果显示差异蛋白参与YZH81菌株的生物学过程、细胞组成的代谢与加工过程,但敲除cps2簇引起的差异蛋白功能更为丰富,包括脂质代谢、核苷酸代谢和肽聚糖的生物合成与代谢等。综上,本研究明确了YZH81菌株具有两个独立的不同cps簇,并分别承担了不同功能,为后期开展YZH81菌株的EPS益生功能构效关系的研究提供了理论支撑。展开更多
利用植物乳植杆菌BXM2对槐米进行发酵,提高槐米中芦丁的提取率,在单因素实验的基础上,通过响应面实验优化发酵工艺,确定最佳发酵工艺为:植物乳植杆菌BXM2接种量为4.6 m L/100 g、发酵时间40.3 h、发酵温度36.6℃,此时芦丁提取率为(22.47...利用植物乳植杆菌BXM2对槐米进行发酵,提高槐米中芦丁的提取率,在单因素实验的基础上,通过响应面实验优化发酵工艺,确定最佳发酵工艺为:植物乳植杆菌BXM2接种量为4.6 m L/100 g、发酵时间40.3 h、发酵温度36.6℃,此时芦丁提取率为(22.47±0.81)%。实际提取率与响应面预测值结果相近,证明响应面法优化槐米发酵工艺可靠,有一定的实用价值。发酵后的提取物与水提的提取物抗氧化活性对比,ABTS+自由基、DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力均有所提高,分别提高了1.77%、4.21%、6.86%和4.52%。利用植物乳植杆菌发酵槐米,不仅可以提高芦丁的提取率,也可以增加提取物的抗氧化活性。展开更多
文摘胞外多糖(exopolysaccharides,EPS)合成基因簇是揭示乳酸菌EPS构效关系的基础。本研究前期发现一株高产EPS的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarum YZH81菌株含有可能的2个EPS合成基因簇cps1和cps2,构建的YZH81?cps1菌株EPS产量下降。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术敲除了YZH81菌株cps2基因簇。与YZH81相比,YZH81?cps1和YZH81?cps2的EPS产量分别下降了22.88%和35.42%,化学组成改变也较大,突变株均未检出鼠李糖单糖组分,而甘露糖和葡萄糖占比大幅提高。进一步利用蛋白质组学分析了不同发酵时间(10、32 h)两个不同cps簇的缺失相比于野生型YZH81菌株的差异蛋白29个和22个,京都基因与基因组百科全书和基因本体分析结果显示差异蛋白参与YZH81菌株的生物学过程、细胞组成的代谢与加工过程,但敲除cps2簇引起的差异蛋白功能更为丰富,包括脂质代谢、核苷酸代谢和肽聚糖的生物合成与代谢等。综上,本研究明确了YZH81菌株具有两个独立的不同cps簇,并分别承担了不同功能,为后期开展YZH81菌株的EPS益生功能构效关系的研究提供了理论支撑。
文摘利用植物乳植杆菌BXM2对槐米进行发酵,提高槐米中芦丁的提取率,在单因素实验的基础上,通过响应面实验优化发酵工艺,确定最佳发酵工艺为:植物乳植杆菌BXM2接种量为4.6 m L/100 g、发酵时间40.3 h、发酵温度36.6℃,此时芦丁提取率为(22.47±0.81)%。实际提取率与响应面预测值结果相近,证明响应面法优化槐米发酵工艺可靠,有一定的实用价值。发酵后的提取物与水提的提取物抗氧化活性对比,ABTS+自由基、DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基清除能力均有所提高,分别提高了1.77%、4.21%、6.86%和4.52%。利用植物乳植杆菌发酵槐米,不仅可以提高芦丁的提取率,也可以增加提取物的抗氧化活性。
