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适合转录组测序的葡萄叶片总RNA试剂盒提取法的改进 被引量：13
1
作者 杨晓燕 张波 +3 位作者 黄方爱 颜欢 李月荣 郑秋生 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期215-220,共6页
RNA试剂盒法是获取植物高质量RNA样品的常用技术,针对3种常见RNA提取试剂盒在红地球葡萄叶样品RNA提取效果进行评估和优化,以期找到适合红地球葡萄叶片RNA表达谱测序需求的高质量RNA提取策略。试验依据3种试剂盒推荐时间和条件进行RNA提... RNA试剂盒法是获取植物高质量RNA样品的常用技术,针对3种常见RNA提取试剂盒在红地球葡萄叶样品RNA提取效果进行评估和优化,以期找到适合红地球葡萄叶片RNA表达谱测序需求的高质量RNA提取策略。试验依据3种试剂盒推荐时间和条件进行RNA提取,并对时间等条件进行优化,比对了优化前后RNA质量。结果显示,试剂盒经优化后的方法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280在1.8-2.2之间,OD260/OD230大于2,28S与18S条带清晰完整,RNA-Seq测序质量及基因覆盖度符合要求。在红地球葡萄叶片上的RNA提取结果表明,延长提取试剂与样品的接触时间操作可以显著提高RNA提取质量(纯度/完整性)。 展开更多
关键词 红地球葡萄 rna提取 试剂盒法 转录组短枪测序法
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木本植物组织总RNA提取的要点与原理 被引量：89
2
作者 王玉成 杨传平 姜静 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期1-4,共4页
根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验 ,对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨 ,并提出了具体的解决方法。同时 ,对各种常用的RNA... 根据提取木本植物组织RNA时所获得的知识和经验 ,对木本植物组织总RNA提取时所遇到的提取产量低、RNA降解、多酚物质干扰、DNA干扰、多糖干扰、蛋白质干扰及杂质干扰等问题进行了探讨 ,并提出了具体的解决方法。同时 ,对各种常用的RNA提取方法进行了分类 ,并对它们的原理及优劣进行了论述与评价。 展开更多
关键词 木本植物 提取 总rna 工作原理 植物组织
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介绍一种简单高效的植物总RNA提取方法 被引量：72
3
作者 赵双宜 吴耀荣 夏光敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期337-338,共2页
在液氮中研磨小麦幼叶和不同发育时期的种子 ,经含 0 .1%SDS和 0 .1%十二烷基肌氨酸钠 (LDS)的尿素缓冲液裂解后 ,醋酸钠和氯仿沉淀变性蛋白质 ,异丙醇沉淀核酸 ,溶解后经 2 .5mol/LLiCl沉淀总RNA ,洗涤后就可得到高质量的总RNA ,其OD2 ... 在液氮中研磨小麦幼叶和不同发育时期的种子 ,经含 0 .1%SDS和 0 .1%十二烷基肌氨酸钠 (LDS)的尿素缓冲液裂解后 ,醋酸钠和氯仿沉淀变性蛋白质 ,异丙醇沉淀核酸 ,溶解后经 2 .5mol/LLiCl沉淀总RNA ,洗涤后就可得到高质量的总RNA ,其OD2 60 /OD2 80 为 2 .0 5～ 2 .10 ,2 8S和 18SRNA带清晰 ,叶片总RNA还可得到 2 3S和 16SRNA带 ,产率可达 5mgRNA/ 10g材料。当使用含 1%SDS和 1%LDS的尿素缓冲液裂解材料时 ,则可用于DNA的分离提取 ,其分子大小可达 5 0～ 10 0kb以上。 展开更多
关键词 植物总rna 提取方法 分离提取 尿素 氯化锂
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利用TRIzol 试剂和液氮提取大鼠胰腺高质量总RNA 被引量：10
4
作者 李冬民 任吴超 +6 位作者 王璇 王飞苗 高玉 韩燕 宁启兰 宋天保 吕社民 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期639-642,共4页
目的建立胰腺高质量总RNA快速、经济、稳定的提取方法。方法应用TRIzol试剂和液氮提取大鼠胰腺总RNA,通过总RNA含量和A260/280比值的测定及10 g/L非变性琼脂糖凝胶电泳评估总RNA的质量,并用RT-PCR检测大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-... 目的建立胰腺高质量总RNA快速、经济、稳定的提取方法。方法应用TRIzol试剂和液氮提取大鼠胰腺总RNA,通过总RNA含量和A260/280比值的测定及10 g/L非变性琼脂糖凝胶电泳评估总RNA的质量,并用RT-PCR检测大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶和β-actin的表达。结果利用TRIzol和液氮提取的大鼠胰腺总RNA量可达到3～6μg/mg胰腺组织,A260/280比值在1.75～1.89之间。在10 g/L非变性琼脂糖凝胶电泳时,均可见28S及18S条带,并且在28S、18S条带间可见明显的云雾状阴影。大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶、β-actin RT-PCR产物电泳结果显示均有清晰的条带。结论应用TRIzol试剂和液氮成功地提取了大鼠胰腺高质量的总RNA,后者可用于RT-PCR研究。 展开更多
关键词 大鼠胰腺 总rna提取 TRIzol试剂 液氮
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提取蕨类植物蜈蚣草总RNA的一种有效方法 被引量：18
5
作者 何振艳 徐文忠 +1 位作者 杨学习 麻密 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2005年第2期198-202,共5页
介绍了一种提取蕨类植物蜈蚣草(Pteris vittata L.)总RNA的有效方法。由于蜈蚣草富含多酚和多糖,用普通的RNA提取方法很难获得高质量的RNA。本方法通过优化提取缓冲液的条件来抑制多酚氧化,并利用RNA与多酚、多糖在不同浓度的2-丁氧乙... 介绍了一种提取蕨类植物蜈蚣草(Pteris vittata L.)总RNA的有效方法。由于蜈蚣草富含多酚和多糖,用普通的RNA提取方法很难获得高质量的RNA。本方法通过优化提取缓冲液的条件来抑制多酚氧化,并利用RNA与多酚、多糖在不同浓度的2-丁氧乙醇中溶解度不同的特性来去除多酚和多糖。本方法简便、快速,所提取的RNA质量较高,可直接用于cDNA合成、cDNA文库的构建以及RACE等分子生物学操作。 展开更多
关键词 有效方法 总rna 蕨类植物 蜈蚣草 rna提取方法 CDNA合成 CDNA文库 分子生物学 RACE 多酚 多糖 缓冲液 溶解度 质量
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一种植物总RNA的快速提取方法 被引量：7
6
作者 刘芬 于秀梅 刘大群 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2010年第2期140-144,共5页
为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiqui... 为验证NaAc/无水乙醇沉淀法提取植物总RNA的质量,本研究对小麦不同组织及其他不同种属植物花的总RNA进行提取和检验,结果表明,该方法提取的植物总RNA完整性好、纯度高。以Tubulin为参照对其余4个持家基因GAPDH、Actin、Rubisco和Ubiquitin的表达情况进行分析。扩增结果表明,选定的各持家基因在叶锈菌侵染不同时间的小麦叶片中的表达量并不一致,且各基因在小麦叶片中的丰度也存在差异。通过对几种基因的扩增,进一步证实该方法能够满足一般分子生物学下游操作的要求,是一种理想的植物总RNA提取方法。 展开更多
关键词 植物 总rna提取 持家基因 小麦 RT—PCR
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一种小量提取植物总RNA的有效方法 被引量：6
7
作者 李想 杨奇志 张飞雄 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第2期49-51,共3页
以水稻、玉米、辣椒为材料 ,摸索出了一套改良的异硫氰酸胍提取植物总RNA的方法 ,该方法简单、快速、纯度高、完整性强 ,方便有效 ,值得推广。
关键词 植物总rna 提取 异硫氰酸胍 降解 产量 完整性
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红树植物叶片总RNA提取方法比较与优化 被引量：5
8
作者 宋晖 王友绍 《生态科学》 CSCD 2011年第2期201-206,共6页
分别采用三种植物RNA提取试剂盒、改良的CTAB-LiCl法和CTAB-异丙醇法五种方法提取四种红树植物叶片总RNA,并用紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳、cDNA合成和real-time PCR等手段对提取效果进行鉴定。反复试验表明:五种方法对白骨壤Aricenniamar... 分别采用三种植物RNA提取试剂盒、改良的CTAB-LiCl法和CTAB-异丙醇法五种方法提取四种红树植物叶片总RNA,并用紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳、cDNA合成和real-time PCR等手段对提取效果进行鉴定。反复试验表明:五种方法对白骨壤Aricenniamarina叶片总RNA提取均有良好的效果。TiangenRNA提取试剂能够成功提取秋茄Kandeliacandel、桐花树Aegicerascorniculatum、白骨壤的总RNA,提取的木榄Bruguieragymnorrhiza总RNA浓度低、杂质较多,且稳定性较差,在对该方法改良后则能够成功提取木榄的总RNA。Invitrogen试剂盒对木榄和秋茄叶片均有良好的提取效果,但是对桐花树提取的RNA易受到蛋白的污染。CTAB-LiCl法和CTAB-异丙醇法提取的RNA总产量偏低,提取时间较长,且实时定量结果表明,两种方法反转录效率较试剂盒方法也偏低。 展开更多
关键词 红树植物 总rna 提取 方法比较
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一种简捷提取植物总RNA的方法 被引量：4
9
作者 孙娣 汪洋 +1 位作者 张丽娟 闫玉清 《黑龙江医药》 CAS 2005年第6期396-397,共2页
植物总 RNA 的提取历来是分子生物学实验中的重点及难点。在实验中,我们找到了一种改进的提取植物总 RNA 的方法。该方法不仅简单、快捷,而且经济、方便,尤其适用于 RNA 提取困难的豆科植物。
关键词 总rna 提取 豆科植物
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植物组织总RNA提取的常用方法及优化策略 被引量：14
10
作者 谷守芹 解灵君 范永山 《保定师范专科学校学报》 2005年第2期40-43,共4页
讨论了植物组织总RNA提取的常用方法及检测技术,并对如何消除酚类物质、多糖、蛋白质等对RNA提取的干扰以及降低RNase对RNA的降解作用进行了较详细地阐述.
关键词 植物组织 总rna提取 rnaSE
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改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的比较 被引量：1
11
作者 高冬玲 陈东 +3 位作者 殷智榕 姜国忠 张红新 张云汉 《开封医专学报》 2000年第4期3-4,共2页
目的 :比较改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的差别。方法 :应用两种方法分别提取 2 0例兔肝脏的总RNA ,对所提RNA的产率、纯度及完整性进行鉴定。结果 :对比两种方法所提的RNA的产率、纯度及完整性 ,均无显著性差异 ,且RT_... 目的 :比较改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的差别。方法 :应用两种方法分别提取 2 0例兔肝脏的总RNA ,对所提RNA的产率、纯度及完整性进行鉴定。结果 :对比两种方法所提的RNA的产率、纯度及完整性 ,均无显著性差异 ,且RT_PCR产生均扩增出了 β_actin的目的条带。 结论 :采用改良一步热酚法较之Trizol试剂盒更具有简便经济的特点 。 展开更多
关键词 rna 一步热酚法 TRIZOL试剂盒 提取
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RNA的提取及3种RNA提取试剂盒的比较 被引量：11
12
作者 曹建斌 《科技情报开发与经济》 2008年第10期206-207,共2页
概述了RNA的提取以及一些注意事项,并对实验室常用的3种RNA提取试剂盒进行了比较。
关键词 rna提取 纯化 试剂盒
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植物组织总RNA提取方法的比较 被引量：3
13
作者 杨晓娜 《科技视界》 2014年第34期157-157,244,共2页
本文综述了植物组织总RNA提取方法比较与难点对策分析。植物组织总RNA提取方法有化学试剂提取和试剂盒提取两种。化学试剂提取法有强变性剂法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、Li Cl-尿素法、阴离子去污剂法、皂土法、硅藻土-苯酚法... 本文综述了植物组织总RNA提取方法比较与难点对策分析。植物组织总RNA提取方法有化学试剂提取和试剂盒提取两种。化学试剂提取法有强变性剂法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、Li Cl-尿素法、阴离子去污剂法、皂土法、硅藻土-苯酚法。其中,除皂土法和硅藻土-苯酚法是近年提出的较新的植物组织总RNA提取方法外,其余的都被广泛应用。本文可为植物组织总RNA提取方法研究提供参考。 展开更多
关键词 植物组织 总rna提取 方法
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两种从多种组织提取总RNA的方法比较
14
作者 孙雅婕 董磊 《山东畜牧兽医》 2024年第7期17-19,共3页
本研究通过Trizol法和DNA清除/RNA吸附试剂盒法从小鼠的心、肝、脾、肺、肾和肠等组织中提取总RNA,有针对性地分析比较RNA的得率、质量以及提取效率。结果显示,Trizol法提取的各种组织的RNA得率略高于试剂盒法,其中Trizol法提取的脾脏... 本研究通过Trizol法和DNA清除/RNA吸附试剂盒法从小鼠的心、肝、脾、肺、肾和肠等组织中提取总RNA,有针对性地分析比较RNA的得率、质量以及提取效率。结果显示,Trizol法提取的各种组织的RNA得率略高于试剂盒法,其中Trizol法提取的脾脏组织的得率更高(2.76ng/g),试剂盒法提取的脾脏组织的得率为2.59ng/g;Trizol法提取的各种组织中A260/A280值在1.95~2.01之间,表明其总RNA纯度均较高,试剂盒法提取的各种组织中A260/A280值在2.04~2.13之间,提示其总RNA可能有轻微的降解;试剂盒法提取RNA的时间仅为Trizol法的1/7。以上结果表明,Trizol法和试剂盒法均能有效提取组织总RNA,但存在优势差异。其中,Trizol法获得RNA的得率更高,质量更好;试剂盒法提取RNA的效率更高且更加安全。 展开更多
关键词 组织 rna提取 TRIZOL法 试剂盒法
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石斛属植物茎部总RNA提取方法的研究 被引量：3
15
作者 单婷婷 陈晓梅 +2 位作者 郭顺星 王倩清 王爱荣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期54-58,共5页
获得快速提取高质量石斛属植物茎总RNA的方法,为深入开展分子生物学研究奠定基础。采用7种方法提取铁皮石斛茎总RNA,凝胶电泳和紫外分光光度法检测质量,筛选最佳方法,并对方法进行验证。结果显示,经过比较,用改良华越洋多糖多酚试剂盒法... 获得快速提取高质量石斛属植物茎总RNA的方法,为深入开展分子生物学研究奠定基础。采用7种方法提取铁皮石斛茎总RNA,凝胶电泳和紫外分光光度法检测质量,筛选最佳方法,并对方法进行验证。结果显示,经过比较,用改良华越洋多糖多酚试剂盒法(M7)提取的铁皮石斛茎总RNA的完整性、浓度和纯度均最好。用M7提取铁皮石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、球花石斛和重唇石斛的茎总RNA,以及提取不同生长条件(温室和大棚种植)和不同生长时间(大棚生长3个月、1年和2年)铁皮石斛的茎总RNA,所获样品的完整性、浓度和纯度均符合质量要求。M7操作简便,结果重复性好,适于石斛属植物茎总RNA的提取。 展开更多
关键词 石斛属植物 总rna提取 改良华越洋多糖多酚试剂盒法
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红花花冠总RNA提取方法的筛选研究 被引量：1
16
作者 康亚兰 裴瑾 +4 位作者 刘薇 罗静 刘维 陈翠平 吴清华 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第A02期313-316,331,共5页
筛选一种红花花冠总RNA提取方法。采用植物总RNA提取试剂盒法、传统佰烈法、改良Trizol法提取红花花冠总RNA。凝胶电泳、RT-PCR、紫外分光光度法检测三种方法提取所得总RNA，并将筛选得到的方法应用于红花愈伤组织总RNA的提取。改良Tri... 筛选一种红花花冠总RNA提取方法。采用植物总RNA提取试剂盒法、传统佰烈法、改良Trizol法提取红花花冠总RNA。凝胶电泳、RT-PCR、紫外分光光度法检测三种方法提取所得总RNA，并将筛选得到的方法应用于红花愈伤组织总RNA的提取。改良Trizol法提取得到的红花花冠总RNA凝胶电泳检测可见清晰的三条带，RT-PCR结果凝胶电泳检测可见清晰的一条带，紫外分光光度法检测符合要求，其余两种方法均不符合要求。改良Trizol法应用于红花愈伤组织总RNA提取，检测结果均符合要求。改良Trizol法可用于红花花冠总RNA提取，提取所得红花花冠总RNA可用于后续分子生物学实验。 展开更多
关键词 红花花冠 总rna提取 植物总rna提取试剂盒 传统Trizol法 改良Trizol法
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一种快速高质量植物总RNA提取方法介绍 被引量：2
17
作者 刘文宝 《山东蔬菜》 2007年第2期48-48,共1页
植物总RNA的提取方法很多，但是多数步骤烦琐，耗时较长，而且最后RNA的提取质量不高。采用Trizol法虽然所提RNA的质量较高，但是价格昂贵。本实验室在长期实践中摸索出一套快速高质量的植物总RNA的提取方法，现介绍如下：
关键词 rna提取方法 植物总rna 质量 TRIZOL 实验室 价格
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植物总RNA提取研究进展 被引量：1
18
作者 付占成 李艳 赵红星 《现代农业科技》 2014年第18期168-168,173,共2页
植物总RNA的提取尽管已成为一种常规的技术,但由于不同植物化学组分的差异,没有一种特定的方法适用于所有植物RNA的提取。该文介绍了异硫氰酸胍法、改进CTAB法、改进SDS法和Trizol试剂盒法提取植物总RNA的特点。
关键词 总rna提取 Trizol试剂盒法 改进SDS法
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葡萄总RNA提取方法的研究 被引量：115
19
作者 张今今 王跃进 +2 位作者 王西平 杨克强 杨进孝 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期178-181,共4页
针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了改进SDS/酚法、异硫氰酸胍法和市售总RNA提取试剂盒等不同的提取方法,3种改进方法均能从葡萄幼嫩叶片中提取到总RNA。其中改进的SDS/酚法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影... 针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了改进SDS/酚法、异硫氰酸胍法和市售总RNA提取试剂盒等不同的提取方法,3种改进方法均能从葡萄幼嫩叶片中提取到总RNA。其中改进的SDS/酚法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,能够从成熟的叶片和完熟果实的果皮中获得质量高、完整性好的总RNA,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,A260/A280介于1.8～2.0之间,A260/A230大于2.0,且总RNA产率高,其中幼叶总RNA产率为261.20μg/g,成熟叶产率为191.40μg/g,完熟果皮产率为31.50μg/g,完全适于进行DDRT-PCR、Northernbolt和cDNA文库构建等研究。且该方法具有快速、简单、有效的特点。 展开更多
关键词 葡萄 总rna 提取方法 改进SDS/酚法 异硫氰酸肌法 提取试剂盒 抗病遗传育种
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非洲菊花瓣总RNA提取方法的改进 被引量：46
20
作者 张玉进 孟祥春 +1 位作者 潘瑞炽 王小菁 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期722-726,共5页
利用异硫氰酸胍一步法和植物总RNA提取试剂盒 (RNeasyPlantMiniKit)提取非洲菊 (Gerberahy brida)花瓣中总RNA时存在多糖的干扰。实验中利用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,在RNA沉淀后 ,再次加入适量变性液 ,冻融 2次 ,再加热至 45℃使RN... 利用异硫氰酸胍一步法和植物总RNA提取试剂盒 (RNeasyPlantMiniKit)提取非洲菊 (Gerberahy brida)花瓣中总RNA时存在多糖的干扰。实验中利用异硫氰酸胍一步法提取总RNA ,在RNA沉淀后 ,再次加入适量变性液 ,冻融 2次 ,再加热至 45℃使RNA完全溶解 ;试剂盒提取时 ,适当延长各提取步骤的离心时间 ,并增加DEPCH2 O溶解RNA的时间。通过以上操作方法的改进可排除多糖的干扰 ,得到高质量的总RNA。为进一步利用Northern杂交技术研究非洲菊中花色素苷基因的表达 ,进行花色改良提供了方便、有效的实验手段。 展开更多
关键词 非洲菊花瓣 异硫氰酸胍一步法 rna提取试剂盒 总rna 提取方法 改进
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