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LncRNA人浆细胞瘤变体易位1介导miR-148b调控脂多糖诱导巨噬细胞自噬的机制研究 被引量:4
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作者 曹蔚堂 王文欣 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第7期698-705,共8页
目的目前LncRNA人浆细胞瘤变体易位1(LncRNA-PVT1)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞自噬的相关机制尚不清楚。文章旨在探讨LncRNA-PVT1介导miR-148b对LPS诱导的巨噬细胞自噬的相关机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,LPS刺激并分别转... 目的目前LncRNA人浆细胞瘤变体易位1(LncRNA-PVT1)在脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞自噬的相关机制尚不清楚。文章旨在探讨LncRNA-PVT1介导miR-148b对LPS诱导的巨噬细胞自噬的相关机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7,LPS刺激并分别转染PVT1 siRNA、miR-148b mimics、PVT1,分为LPS组(细胞不进行转染)、LPS+si-NC组(转染PVT1质粒阴性对照)、LPS+PVT1 siRNA转染组(转染PVT1 siRNA质粒)、LPS+miR-NC组(转染miR-148b mimics阴性对照)、LPS+miR-148b mimics组(转染miR-148b mimics)、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组(转染PVT1阴性对照和miR-148b mimics)、LPS+PVT1+miR-148b mimics组(转染PVT1和miR-148b mimics)。同时设置空白组,空白组RAW264.7细胞既不进行LPS处理也不进行转染。采用qRT-PCR检测细胞中LncRNA-PVT1、miR-148b的表达;CCK-8检测细胞活力;免疫荧光染色检测细胞中LC3的表达;ELISA检测细胞中炎症因子水平;双荧光素酶报告系统分析PVT1与miR-148b的靶向关系;蛋白免疫印迹法检测细胞中自噬蛋白表达。结果与空白组比较,LPS组PVT1 mRNA、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.05),miR-148b、p62表达显著降低(P<0.05)。与LPS组、LPS+si-NC组比较,LPS+PVT1 siRNA组PVT1 mRNA、p62、TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05),miR-148b、LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著升高(P<0.05)。CCK-8实验结果显示,与空白组细胞活力(100.00±0.00)比较,LPS组(73.46±3.25)显著降低(P<0.05);与LPS组细胞活力(73.46±3.25)、LPS+si-NC组(74.15±4.42)比较,LPS+PVT1 siRNA组(90.38±2.16)显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因结果表明,PVT1与miR-148b存在靶向关系。与LPS组、LPS+miR-NC组比较,LPS+miR-148b mimics组LC3阳性表达、LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著上调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著下调(P<0.05);与LPS+miR-148b mimics组、LPS+PVT1-NC+miR-148b mimics组比较,LPS+PVT1+miR-148b mimics组细胞LC3-II/LC3-I、Beclin-1表达显著下调(P<0.05),p62、TNF-α、IL-6水平显著上调(P<0.05)。结论脓毒症中LncRNA-PVT1靶向miR-148b抑制巨噬细胞自噬,PVT1可能是脓毒症治疗的潜在研究靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 LncRNA人浆细胞瘤变体易位1 miR-148b 脂多糖 巨噬细胞 自噬
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甲状腺癌组织中长链非编码RNA浆细胞瘤变体易位1和微小RNA-195-5p表达及临床意义 被引量:3
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作者 李小玲 邵馨 +1 位作者 郭玲 杨亚丽 《中国医药导报》 CAS 2021年第19期22-26,共5页
目的探究甲状腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变体易位1(PVT1)和微小RNA(miRNA)-195-5p表达及临床意义。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测江苏省常州市中医医院2017年4月至2020年1月收治的82例甲状腺癌组织、癌旁正常组织... 目的探究甲状腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤变体易位1(PVT1)和微小RNA(miRNA)-195-5p表达及临床意义。方法荧光实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测江苏省常州市中医医院2017年4月至2020年1月收治的82例甲状腺癌组织、癌旁正常组织及82例甲状腺良性肿瘤组织中lncRNA PVT1和miR-195-5p的表达,分析这两个指标与甲状腺癌患者临床病理参数的关系及其相关性。结果甲状腺癌组织中lncRNA PVT1相对表达量高于甲状腺良性肿瘤组织及癌旁正常组织、而miR-195-5p相对表达量低于甲状腺良性肿瘤组织及癌旁正常组织(均P <0.05)。甲状腺癌组织中,有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的lncRNA PVT1相对表达量高于无淋巴结转移及Ⅰ~Ⅱ期;有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期的miR-195-5p相对表达量低于无淋巴结转移及Ⅰ~Ⅱ期(均P <0.05);甲状腺癌组织中lncRNA PVT1表达与miR-195-5p表达呈负相关(r=-0.731,P <0.01)。结论甲状腺癌组织中lncRNA PVT1表达上调,而miR-195-5p表达下调,二者均与淋巴结转移和TNM分期有关,对评估患者病情及确定治疗靶点具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 甲状腺癌 长链非编码RNA浆细胞瘤变体易位1 微小RNA-195-5p 相关性
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circPVT1靶向调控miR-195-5p/SOX9轴影响结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化
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作者 刘光世 李涛 +3 位作者 李鹏 马占军 张旺 袁传威 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第12期2189-2195,共7页
目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HC... 目的:探究环状RNA浆细胞瘤变体易位1(circPVT1)靶向调控微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对结肠癌细胞增殖、凋亡及上皮间质转化(EMT)的影响。方法:体外培养人正常结肠上皮细胞NCM-460、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)至对数期,将SW480细胞分为对照组(正常培养SW480细胞不进行转染)、空载质粒组(转染空载质粒)、circPVT1沉默组[转染circPVT1小干扰RNA(siRNA)质粒]、miR-195-5p过表达组[转染miR-195-5p模拟物(mimics)质粒]、SOX9沉默组(转染SOX9 siRNA质粒)、circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组(转染circPVT1 siRNA和miR-195-5p siRNA质粒)。各组转染相应质粒后培养48 h。荧光定量PCR法检测NCM-460细胞、人结肠癌细胞系(SW480、HCT116、HCT29、LOVO、SW620)和各组SW480细胞circPVT1、miR-195-5p、SOX9 mRNA的表达;噻唑蓝和流式细胞仪分别检测各组SW480细胞增殖和凋亡;蛋白印迹法检测各组SW480细胞SOX9、凋亡和EMT相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9的靶向关系。结果:与NCM-460细胞比较,SW480细胞、HCT116细胞、HCT29细胞、LOVO细胞、SW620细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达显著升高,miR-195-5p表达显著降低(P<0.05);其中,SW480细胞中circPVT1、SOX9 mRNA表达最高,miR-195-5p表达最低;故选择SW480细胞进行后续实验。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组circPVT1、SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低,miR-195-5p表达显著升高(P<0.05);miR-195-5p过表达组miR-195-5p表达显著升高,SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);SOX9沉默组SOX9 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和空载质粒组比较,circPVT1沉默组、miR-195-5p过表达组、SOX9沉默组细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著升高(P<0.05)。与circPVT1沉默组比较,circPVT1沉默+miR-195-5p低表达组miR-195-5p、凋亡率、Bax、E-cadherin蛋白表达显著降低,SOX9 mRNA及蛋白、细胞增殖率、Bcl-2、Vimentin蛋白表达显著升高(P<0.05)。circPVT1与miR-195-5p、miR-195-5p与SOX9存在靶向调控关系。结论:沉默circPVT1可以靶向上调miR-195-5p表达,抑制SOX9表达,进而抑制SW480细胞增殖和EMT进程,促进其凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA浆细胞瘤变体易位1 微小RNA-195-5p 性别决定区Y框蛋白9 结肠癌 上皮间质转化
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胃癌组织中lncRNA-PVT1、Atg5的表达变化及临床意义 被引量:1
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作者 韦斌 黄俏莹 +5 位作者 黄顺荣 钟晓刚 麦威 牙韩清 朱州 张贵年 《山东医药》 CAS 2020年第10期49-52,共4页
目的探讨长链非编码RNA-浆细胞瘤变体易位1(LncRNA PVT1)和自噬相关基因5(Atg5)在胃癌组织及其癌旁正常组织中的表达变化及意义。方法选择103例胃癌患者,术中取癌组织及其癌旁正常组织,使用实时荧光定量PCR技术检测组织中的LncRNA PVT1... 目的探讨长链非编码RNA-浆细胞瘤变体易位1(LncRNA PVT1)和自噬相关基因5(Atg5)在胃癌组织及其癌旁正常组织中的表达变化及意义。方法选择103例胃癌患者,术中取癌组织及其癌旁正常组织,使用实时荧光定量PCR技术检测组织中的LncRNA PVT1和Atg5,同时分析二者与临床病理特征的关系。结果胃癌组织中的LncRNA PVT1和Atg5相对表达量均较癌旁正常组织高(P均<0.05)。胃癌组织中LncRNA PVT1的表达与淋巴结转移和TNM分期有关(P均<0.05),Atg5表达与分化程度和TNM分期有关(P均<0.05)。胃癌组织中LncRNA PVT1与Atg5的表达呈正相关(r=0.553,P=0.000)。结论LncRNA PVT1和Atg5在胃癌组织中表达升高,可能成为胃癌早期诊断和治疗的标志物。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA 浆细胞瘤变体易位1 自噬相关基因5
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下调环状RNA Hsa-circ-PVT1对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭及血管生成作用机制的影响 被引量:3
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作者 陈慧 郎茂竹 +2 位作者 王婧 朱亚莉 田艳 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第3期182-187,共6页
目的:探讨环状RNA浆细胞瘤变体易位1(Hsa-circ-PVT1)对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭和血管生成的影响,以及其对微小RNA145(miR-145)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因的调控机制。方法:qRT-PCR检测子宫腺肌病异位子宫内膜... 目的:探讨环状RNA浆细胞瘤变体易位1(Hsa-circ-PVT1)对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭和血管生成的影响,以及其对微小RNA145(miR-145)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因的调控机制。方法:qRT-PCR检测子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1、miR-145表达。双荧光素酶实验检测Hsa-circ-PVT1和miR-145的关系。生物信息数据库TargetScanHuman、miRDB、miRactDB预测miR-145的下游靶点。细胞分组:Hsa-circ-PVT1-inhibitor-NC+miR-145-antagomir-NC+si-MAPK1-NC(NC)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor(inhibitor)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-antagomir(inhibitor+antagomir)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-miR-145-antagomir+si-MAPK1(inhibitor+antagomir+si)、正常细胞(normal组)。EDU检测各组细胞增殖,Transwell小室检测各组细胞侵袭能力;小管形成实验检测各组细胞血管生成能力;Western blot法检测各组细胞中MAPK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,miR-145表达明显下降,双荧光素酶证实Hsa-circ-PVT1靶向miR-145的表达,miR-145下游靶标为MAPK1。与normal组Y14细胞相比,inhibitor组细胞增殖、侵袭及血管新生的性能明显降低,inhibitor+antagomir组能部分逆转这一抑制作用,而inhibitor+antagomir+si组能部分恢复这一作用,差异均有统计意义(均P<0.05)。结论:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,Hsa-circ-PVT1能靶向miR-145调控MAPK1表达,抑制Hsa-circ-PVT1表达能明显抑制间质细胞的增殖、侵袭及血管生成。 展开更多
关键词 环状RNA浆细胞瘤变体易位1 微小RNA-145 丝裂原活化蛋白激酶1 子宫腺肌病 子宫内膜间质细胞 增殖与侵袭 血管生成
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CircRNA PVT1在恶性肿瘤中的研究进展
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作者 缪炳文 张林强 缪辉来 《医学综述》 CAS 2022年第24期4826-4833,共8页
环状RNA(circRNA)在恶性肿瘤的发病过程中具有重要影响。由于具有特征性的圆形结构,circRNA对RNA的降解具有较强的抵抗力,可在体液中检测到其表达,因此可将circRNA作为疾病诊断和预后的标志物。circRNA浆细胞瘤变体易位1(PVT1)由PVT1基... 环状RNA(circRNA)在恶性肿瘤的发病过程中具有重要影响。由于具有特征性的圆形结构,circRNA对RNA的降解具有较强的抵抗力,可在体液中检测到其表达,因此可将circRNA作为疾病诊断和预后的标志物。circRNA浆细胞瘤变体易位1(PVT1)由PVT1基因的第2号外显子环化形成,可在恶性肿瘤中作为不同微RNA(miRNA)的分子海绵,下调miRNA的表达,诱导其下游致癌蛋白的产生,促进肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移以及耐药等。circRNA PVT1属于非编码RNA,深入研究其在肿瘤中的作用机制,对疾病的诊断、治疗以及患者的预后均具有重要意义。 展开更多
关键词 恶性肿 非编码RNA 环状RNA 浆细胞瘤变体易位1 分子海绵
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长链非编码RNA在膜性肾病中的作用研究进展
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作者 王珊珊 张雪琴 +1 位作者 杨淑芬 陆晨 《医学综述》 CAS 2023年第2期229-234,共6页
在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到... 在基因组非编码基因特异性的RNA分子表达产物中,长链非编码RNA(lncRNA)广泛参与代谢、免疫等关键病理生理过程,与肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病等的发生发展密切相关。随着lncRNA种类数量的不断增加,其在肾脏疾病中的作用越来越受到关注。膜性肾病(MN)是我国常见的原发性肾小球肾炎,严重威胁人们的健康和生命。lncRNA,尤其是X非活性特异性转录物、浆细胞瘤变体易位1参与MN的发生发展。但目前关于lncRNA在MN中的作用机制研究较少,深入研究lncRNA在MN中的作用机制,可能为MN的诊断及治疗提供新的治疗靶点。 展开更多
关键词 膜性肾病 长链非编码RNA X非活性特异性转录物 浆细胞瘤变体易位1 治疗靶点
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