TET甲基胞嘧啶双加氧化酶2和DNA甲基化转移酶3A基因表达水平与骨髓增生异常综合征分型及预后的关系

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作者 李素欣 王友君 +4 位作者 冯丽倩 王苗 李栋梁 安乐 文文 《中国医药》 2025年第1期90-94,共5页

目的探索TET甲基胞嘧啶双加氧化酶2(TET2)、DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)基因表达水平与骨髓增生异常综合征(MDS)患者临床分型及预后的关系。方法回顾性选取2015年1月至2022年12月河北省石家庄市人民医院收治的97例MDS患者纳入观察组,另... 目的探索TET甲基胞嘧啶双加氧化酶2(TET2)、DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)基因表达水平与骨髓增生异常综合征(MDS)患者临床分型及预后的关系。方法回顾性选取2015年1月至2022年12月河北省石家庄市人民医院收治的97例MDS患者纳入观察组,另选取同期本院体检不合并血液系统疾病者90例纳入对照组、再生障碍贫血患者87例纳入相似对照组。比较3组TET2、DNMT3A基因表达水平,对比MDS各分型以及各预后分级患者基因表达水平差异。结果观察组TET2基因表达水平均低于对照组和相似对照组,DNMT3A基因表达水平均高于对照组和相似对照组(均P<0.001),但在MDS不同分型患者间比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。随着预后危险程度增加,TET2基因表达水平整体呈现降低趋势,DNMT3A基因表达水平整体呈现升高趋势(均P<0.001)。TET2基因表达水平与MDS预后不良呈负相关(r=-0.664,P<0.001),DNMT3A基因表达水平与MDS预后不良呈正相关(r=0.639,P<0.001)。结论TET2、DNMT3A基因表达水平在MDS各分型间无明显差异,但与MDS预后显著相关,临床上对于患者预后判断具有参考意义。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合征 TET甲基胞嘧啶双加氧化酶2 DNA甲基化转移酶3a 预后

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miR-101靶向甲基化转移酶3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭 被引量：5

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作者 胡可可 邓赫男 +2 位作者 谭琛 彭丽秀 肖斌梅 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期791-795,共5页

背景与目的:mi R-101在胃癌、结肠癌、乳腺癌以及前列腺癌中表达下调,有类似抑癌基因样作用,然而,其在卵巢癌中的作用尚未明确。该研究旨在探讨mi R-101是否通过靶向调控甲基化转移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭,从而进一步揭... 背景与目的:mi R-101在胃癌、结肠癌、乳腺癌以及前列腺癌中表达下调,有类似抑癌基因样作用,然而,其在卵巢癌中的作用尚未明确。该研究旨在探讨mi R-101是否通过靶向调控甲基化转移酶3A(DNMT3A)抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭,从而进一步揭示mi R-101的抑瘤机制。方法:采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测22例卵巢癌组织及癌旁正常卵巢组织中mi R-101的表达改变;将mi R-101 mimics转染于卵巢癌SKOV3细胞,以DNMT3A si RNA为阳性对照,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测外源过表达mi R-101对DNMT3A蛋白表达水平的影响;采用噻唑蓝(thiazolyl blue,MTT)和Transwell侵袭实验检测外源高表达mi R-101对人卵巢癌细胞生长与侵袭能力的影响。结果:q RT-PCR检测结果显示,mi R-101在22例卵巢癌组织中的表达水平较癌旁正常组织明显下调;Western blot检测结果显示,外源过表达mi R-101或沉默DNMT3A能下调SKOV3细胞DNMT3A蛋白的表达水平;MTT检测结果显示,转染mi R-101 mimics或沉默DNMT3A 48、72和96 h后D值与对照组比较明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验显示,转染mi R-101 mimics或沉默DNMT3A 36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(105±7)个和(107±13)个,与对照组(213±11)个比较能明显减缓SKOV3细胞的穿膜能力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:mi R-101通过靶向调控DNMT3A抑制人卵巢癌细胞生长与侵袭。 展开更多

关键词 miR-101 卵巢癌 甲基化转移酶3a 生长和侵袭

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DNA甲基化转移酶3A调控心肌成纤维细胞活化过程中胶原的表达

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作者 代晨 陶辉 +1 位作者 石开虎 徐盛松 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第12期1237-1241,共5页

目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试... 目的目前关于甲基化对心肌纤维化形成的作用机制仍不明确。文章旨在探讨DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化过程中胶原表达变化的调控。方法选取50只乳鼠,提取培养SD乳鼠心肌成纤维细胞(CFs),进行细胞转染,根据CFs转染的试剂分为5组:DNMT3A组(CFs转染重组的DNMT3A基因过表达质粒)、空载体组(CFs转染p EGFP-C3空载体质粒)、DNMT3A siRNA组(CFs转染小干扰DNMT3A siRNA)、DNMT3A siRNA NC组(CFs转染DNMT3A siRNA NC空载体质粒)、空白对照组(CFs不作转染处理)。ELISA检测空白对照组、DNMT3A组、DNMT3A siRNA组细胞上清液胶原变化。qRT-PCR检测5组相关mRNA的表达,Western blot法检测除DNMT3A siRNA NC组外其余4组CFs中ColⅠ、ColⅢ和DNMT3a蛋白的表达及CCK8法检测4组细胞的增殖活性。结果 DNMT3A组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原明显高于空白对照组(P<0.05),DNMT3A siRNA组的Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量明显低于空白对照组(P<0.05)。DNMT3A组的ColⅠ、ColⅢ及DNMT3A表达量较空白对照组、空载体组明显升高(P<0.05),而DNMT3A siRNA组明显低于空白对照组及空载体组(P<0.05)。DNMT3A组细胞活力(2.087±0.317)明显高于空载体组(1.063±0.223)、空白对照组(1.082±0.207),差异有统计学意义(P<0.05); DNMT3A siRNA组(0.463±0.087)明显低于空载体组、空白对照组(P<0.05)。结论 DNMT3A可以促进CFs的活化增殖,并且能够增加胶原的表达,从而对心肌纤维化产生促进作用。 展开更多

关键词 心肌成纤维细胞 心肌纤维化 DNA甲基化转移酶3a 增殖 ColⅠ ColⅢ

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胃癌中DNA甲基化转移酶3A的表达与幽门螺杆菌感染的关系 被引量：1

4

作者 杨梦迪 王学红 +6 位作者 潘世锐 马雪芹 郜茜 绽永华 李源化 李春霞 安琪 《癌症进展》 2021年第4期360-363,406,共5页

目的探讨胃癌患者胃黏膜上皮组织中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法选取胃癌(GC)、腺瘤性息肉(GA)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者各30例,比较不同患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的表... 目的探讨胃癌患者胃黏膜上皮组织中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)表达与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法选取胃癌(GC)、腺瘤性息肉(GA)、慢性萎缩性胃炎(CAG)、慢性非萎缩性胃炎(CNAG)患者各30例,比较不同患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的表达水平及Hp的感染情况。结果4种胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量比较,差异有统计学意义(P﹤0.01)。随着病情的发展,DNMT3A mRNA的相对表达量呈逐渐升高趋势。GC患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于CAG和CNAG患者,GA患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于CNAG患者(P﹤0.05)。在同种疾病的胃黏膜组织中,Hp感染胃部疾病患者胃黏膜组织中DNMT3A mRNA的相对表达量高于非Hp感染的胃部疾病患者(P﹤0.05)。低分化、伴有淋巴结转移GC患者GC组织中DNMT3A mRNA的相对表达量分别高于高中分化、不伴淋巴结转移的GC患者(P﹤0.05)。结论Hp感染可诱导胃黏膜中DNMT3A高表达,DNMT3A表达的上调可能促进GA、GC的发生发展,Hp感染和DNMT3A可协同作用参与从慢性炎症向GC发展的过程。 展开更多

关键词 胃癌 DNA甲基化 DNA甲基化转移酶3a 幽门螺杆菌

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甲基化转移酶样蛋白3在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对缺氧缺血所致心肌细胞损伤的调节作用 被引量：6

5

作者 周钰 白峰华 +3 位作者 张君 詹峰 董小莉 吴奎 《广西医学》 CAS 2021年第9期1095-1100,1148,共7页

目的探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对急性缺氧/缺血(HI)所致心肌细胞损伤的调节作用。方法(1)收集60例急性心肌梗死患者和60例健康者的血浆和血清,采用酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链... 目的探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)在急性心肌梗死患者外周血中的表达及对急性缺氧/缺血(HI)所致心肌细胞损伤的调节作用。方法(1)收集60例急性心肌梗死患者和60例健康者的血浆和血清,采用酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链反应法分别检测血清和血浆中METTL3的表达水平。(2)取人心肌细胞AC16,分为对照组、HI-2h组、HI-4h组、siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组;对照组不进行任何处理,HI-2h组、HI-4h组使用1%O 2和1%胎牛血清培养基诱导HI心肌细胞模型,siMETTL3+HI-2h组、siNC+HI-2h组分别转染有效沉默METTL3的小干扰RNA序列、阴性对照小干扰RNA序列后建立HI心肌细胞模型。检测各组AC16细胞的增殖率和凋亡率,METTL3、激活型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-Caspase3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)。将溶酶体抑制剂巴弗洛霉素A1添加至培养基后,按照上述方法进行分组及干预,检测微管相关蛋白1轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)、人死骨片1(SQSTM1)的蛋白表达水平。结果(1)心肌梗死患者血浆METTL3 mRNA相对表达水平以及血清中METTL3表达水平均高于健康者(P<0.05)。(2)与对照组比较,HI-2h组、HI-4h组AC16细胞的增殖率降低,细胞凋亡率升高,METTL3蛋白、cleaved-Caspase3蛋白、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1蛋白的表达上调,而LC3B-Ⅱ的蛋白表达下调(均P<0.05)。与HI-2h组和siNC+HI-2h组比较,siMETTL3+HI-2h组的细胞增殖率升高,细胞凋亡率降低,METTL3、cleaved-Caspase3、Bax/Bcl-2比值、SQSTM1的蛋白表达下调,LC3B-Ⅱ的蛋白表达上调(均P<0.05)。结论METTL3在心肌梗死患者体内和HI诱导的急性心肌细胞损伤模型中的表达均升高,沉默METTL3可以抑制HI心肌细胞的凋亡并增加自噬通量,从而促进细胞增殖的恢复。 展开更多

关键词 急性心肌梗死 急性缺血缺氧损伤 N 6-甲基腺苷 甲基化转移酶样蛋白3 细胞增殖 细胞凋亡 细胞自噬

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人DNA甲基化转移酶3B1真核表达载体的构建和鉴定

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作者 姜树原 邵国 +3 位作者 张胜 黄丽华 龚向峰 周立社 《包头医学院学报》 CAS 2010年第5期1-2,6,共3页

目的:构建人DNA甲基化转移酶3B1(DNMT3B1)真核表达载体pCMV-DNMT3B1。方法:根据Genebank中人DNMT3B1cDNA序列设计并合成特异性引物,提取HCT116细胞总RNA,利用PCR技术扩增出DNMT3B1,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中。结果:PCR... 目的:构建人DNA甲基化转移酶3B1(DNMT3B1)真核表达载体pCMV-DNMT3B1。方法:根据Genebank中人DNMT3B1cDNA序列设计并合成特异性引物,提取HCT116细胞总RNA,利用PCR技术扩增出DNMT3B1,并将扩增产物克隆到真核表达载体pCMV-2B中。结果:PCR扩增得到人DNMT3B1的cDNA片段大小为2.6kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到真核表达载体pCMV-DNMT3B1。结论:成功构建了人DNMT3B1真核表达载体,为进一步研究DNMT3B1提供了条件。 展开更多

关键词 DNA甲基化转移酶3B1 构建 鉴定

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DNA甲基化转移酶3B在脑胶质母细胞瘤中的差异表达

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作者 白宇 陈彦 +6 位作者 国添柱 刘庆阳 杨雪 冯颖 闫卓红 王丽佳 张权庚 《首都医科大学学报》 CAS 2013年第3期380-384,共5页

目的脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中存在广泛的基因组低甲基化,本研究检查了DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DMNT3B)是否在这种肿瘤中的表达和突变情况,以期寻找肿瘤基因组低甲基化发生的原因。方法用RNA抽提试剂盒... 目的脑胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中存在广泛的基因组低甲基化,本研究检查了DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DMNT3B)是否在这种肿瘤中的表达和突变情况,以期寻找肿瘤基因组低甲基化发生的原因。方法用RNA抽提试剂盒从25例人脑胶质母细胞瘤组织中提取总RNA,用反转录聚合酶链反应方法扩增DNMT3B的cDNA,然后测序,所得序列经DNASTAR软件与NCBI发表的正常序列进行比对。结果从25例脑胶质母细胞瘤样本中的成功扩增了全长DNMT3B cDNA,测序分析结果显示DNMT3B基因在该肿瘤样本中差异性存在多种剪接变异体,以DNMT3B-V1、DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主。没有发现改变氨基酸序列的点突变。结论 DNMT3B基因在脑胶质母细胞瘤中没有点突变,但存在多种剪接变异体(以DNMT3B-V3、DNMT3B-V7为主),其是否为脑胶质母细胞瘤的广泛基因组低甲基化的原因尚有待进一步研究。 展开更多

关键词 脑胶质母细胞瘤 基因组低甲基化 DNA甲基化转移酶3B

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甲基化转移酶样蛋白3对颞下颌关节骨关节炎滑膜巨噬细胞NLRP3炎性小体和焦亡的影响 被引量：2

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作者 庞春燕 方婕 +1 位作者 祁荷栩 肖力 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期565-572,共8页

目的:探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)巨噬细胞NLRP3炎性小体和焦亡的调控效应。方法:将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和TMJOA模型组。采用H&E染色、阿利新蓝染色和番红固绿染色观察关节软骨组织关节... 目的:探讨甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)巨噬细胞NLRP3炎性小体和焦亡的调控效应。方法:将16只雄性SD大鼠随机分为对照组和TMJOA模型组。采用H&E染色、阿利新蓝染色和番红固绿染色观察关节软骨组织关节炎情况,并进行Mankin’s和骨关节炎软骨损伤分级(OARSI)评分。采用脂多糖(LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导巨噬细胞RAW264.7以构建焦亡细胞模型,被转染METTL3过表达质粒和小干扰RNAs(siRNAs)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测颞下颌关节滑液或RAW264.7细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)的活性;免疫印迹检测滑液巨噬细胞或RAW264.7中METTL3,NLRP3炎性小体和焦亡相关蛋白,IκBα和p65磷酸化水平。结果:在体内实验中,与对照组比较,TMJOA模型组大鼠出现关节软骨组织损伤,Mankin’s评分和OARSI评分升高;大鼠颞下颌关节滑液中乳酸脱氢酶(LDH)活性增强;颞下颌关节滑液巨噬细胞中METTL3,NLRP3炎性小体和焦亡相关蛋白表达水平增加。在体外实验中,METTL3过表达显著协同LPS联合ATP诱导的RAW264.7细胞NLRP3炎性小体形成和细胞焦亡,增强LDH活性,并激活IκBα和p65磷酸化;然而,通过转染siRNAs敲低METTL3表达能够显著抑制LPS联合ATP诱导的RAW264.7细胞NLRP3炎性小体形成和细胞焦亡,抑制LDH活性,减少IκBα和p65磷酸化水平。结论:METTL3沉默可通过拮抗NF-κB信号通路抑制NLRP3炎性小体和焦亡改善TMJOA软骨损伤。 展开更多

关键词 甲基化转移酶样蛋白3 颞下颌关节骨关节炎 巨噬细胞 NLRP3炎性小体 细胞焦亡

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类甲基化转移酶3(METTL3)在免疫细胞和造血干细胞中的作用研究进展 被引量：1

9

作者 邓丽娇 张纪岩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期557-562,共6页

腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰(m6A)是真核生物mRNA中最常见的甲基化修饰,m6A作为一种动态可逆修饰,参与众多生物学过程.类甲基化转移酶3(METTL3)是构成m6A甲基转移酶复合体的核心组分,负责催化RNA发生m6A修饰.近年的研究发现,ME... 腺嘌呤第6位氮原子上发生的甲基化修饰(m6A)是真核生物mRNA中最常见的甲基化修饰,m6A作为一种动态可逆修饰,参与众多生物学过程.类甲基化转移酶3(METTL3)是构成m6A甲基转移酶复合体的核心组分,负责催化RNA发生m6A修饰.近年的研究发现,METTL3通过调控m6A水平,调节T淋巴细胞的分化和功能的维持、巨噬细胞的活化和极化以及树突状细胞的激活等过程,进而调控免疫反应和有关疾病的发生和发展;同时很多研究也报导,METTL3在内皮造血转化、造血干细胞的自我更新、增殖分化以及细胞周期调控方面也具有重要作用,这为临床上治疗血液系统的有关疾病提供了新思路. 展开更多

关键词 腺嘌呤第6位氮原子甲基化修饰(m6A) 类甲基化转移酶3(METTL3) 免疫细胞 造血干细胞 综述

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m^(6)A甲基化转移酶3在糖尿病性白内障发病中的作用机制 被引量：1

10

作者 陈思 叶巍 +4 位作者 唐韵 王文喆 葛轶睿 王雪莹 黄振平 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1250-1259,共10页

目的:探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化转移酶3(METTL3)在糖尿病性白内障发病中的作用机制。方法:用低糖和高糖培养基培养人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)24h后,采用RT-qPCR和Western blot实验检测细胞的上皮-间质转分... 目的:探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)甲基化转移酶3(METTL3)在糖尿病性白内障发病中的作用机制。方法:用低糖和高糖培养基培养人晶状体上皮细胞系(SRA01/04)24h后,采用RT-qPCR和Western blot实验检测细胞的上皮-间质转分化(EMT)指标:E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、N-钙黏蛋白(N-Cadherin)、紧密连接蛋白1(ZO-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化情况;transwell和划痕实验检测细胞迁移能力。采用免疫荧光染色检测人晶状体前囊膜组织中METTL3的表达量及定位,m^(6)A dot blot实验检测在低糖和高糖培养基中培养24h细胞的m^(6)A甲基化水平,RT-qPCR和Western blot实验检测细胞中METTL3的RNA和蛋白表达量。加入METTL3抑制剂的培养基中培养24h的细胞,RT-qPCR和Western blot实验检测EMT指标的变化情况;m^(6)A dot blot实验检测细胞m^(6)A甲基化水平;Transwell和划痕实验检测细胞迁移能力。免疫荧光染色检测细胞中转化生成因子β(TGFβ1)的表达;RT-qPCR和Western blot实验检测细胞中的TGFβ1和SNAIL的表达量。结果:与低糖条件相比,高糖条件能够促进细胞EMT的发生,促进METTL3的表达和上调了细胞总RNA的m^(6)A甲基化水平(P<0.05)。高糖能够促进细胞的迁移能力。糖尿病性白内障患者晶状体前囊膜中METTL3表达较单纯年龄相关性白内障患者增高。与高糖+DMSO组相比,加入METTL3抑制剂STM2457,能够抑制细胞的EMT发生,抑制TGFβ1和SNAIL的表达,抑制细胞总RNA的m^(6)A甲基化水平(均P<0.05)。加入METTL3抑制剂STM2457后细胞迁移能力较高糖+DMSO组降低。结论:m^(6)A甲基化转移酶METTL3通过激活TGFβ1/SNAIL通路促进了在高糖条件下人晶状体上皮细胞的EMT发生从而诱导糖尿病性白内障的发生。 展开更多

关键词 糖尿病性白内障 甲基化转移酶3(METTL3) N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A) 上皮-间质转分化

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组蛋白去乙酰化酶2在帕金森病中的作用及机制研究

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作者 刘韵 冯丹 +6 位作者 刘纷纷 左方娅 郭修红 刘钰淇 陈兰兰 王玉洁 田锦勇 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第21期43-51,共9页

目的旨在探究组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)通过类甲基化转移酶3(METTL3)/细胞因子信号抑制因子3(SOCS3)轴调控帕金森病(PD)中神经元死亡的作用机制。方法SH-SY5Y细胞分组:Control组、MPP^(+)组、MPP^(+)+HDAC2抑制剂组、MPP^(+)+HDAC2抑制... 目的旨在探究组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)通过类甲基化转移酶3(METTL3)/细胞因子信号抑制因子3(SOCS3)轴调控帕金森病(PD)中神经元死亡的作用机制。方法SH-SY5Y细胞分组:Control组、MPP^(+)组、MPP^(+)+HDAC2抑制剂组、MPP^(+)+HDAC2抑制剂+sh-NC组、MPP^(+)+HDAC2抑制剂+sh-METTL3组。观察各组细胞在细胞死亡、细胞活性、HDAC2、METTL3、SOCS3、组蛋白H3赖氨酸18乳酸化(H3K18la)方面的差异。比较oe-NC组及oe-METTL两组SOCS3的m6A修饰水平、METTL3在SOCS3上的富集程度、METTL3表达、SOCS3表达、SOCS3 mRNA稳定性。结果MPP^(+)组与Control组相比,HDAC2基因和蛋白相对表达量升高(P<0.05),细胞死亡率升高(P<0.05),细胞活性及H3K18la在METTL3上的富集程度降低(P<0.05),METTL3、H3K18la、SOCS3均下调(P<0.05)。MPP^(+)+HDAC2抑制剂组与MPP^(+)组相比,细胞死亡率降低(P<0.05),细胞活性及H3K18la在METTL3上的富集程度升高(P<0.05),METTL3、H3K18la、SOCS3上调(P<0.05)。MPP^(+)+HDAC2抑制剂+sh-NC组与MPP^(+)+HDAC2抑制剂组在细胞死亡率、细胞活性、METTL3表达、SOCS3表达上无差异(P>0.05)。MPP^(+)+HDAC2抑制剂+sh-METTL3组与MPP^(+)+HDAC2抑制剂+sh-NC组相比,细胞死亡率升高(P<0.05),细胞活性降低(P<0.05),METTL3及SOCS3表达下调(P<0.05)。Oe-METTL3与oe-NC组比较,SOCS3的m6A修饰水平及METTL3在SOCS3上的富集程度升高(P<0.05),METTL3及SOCS3升高(P<0.05),SOCS3 mRNA稳定性升高(P<0.05)。结论在PD中HDAC2通过诱导METTL3组蛋白去乳酸化抑制METTL3表达,这一机制引起SOCS3的m6A修饰水平降低,并导致SOCS3表达下调,进而促进PD发病。 展开更多

关键词 帕金森病 组蛋白去乙酰化酶2 类甲基化转移酶3 细胞因子信号抑制因子3

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TGF-β1刺激心肌成纤维细胞活化过程中DNMT3A的表达变化 被引量：5

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作者 陈泽文 石开虎 +6 位作者 陶辉 吴君旭 徐盛松 宣海洋 曹炜 沙纪名 占红英 《安徽医药》 CAS 2014年第10期1841-1843,共3页

目的探讨转化生长因-β1(TGF-β1)刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死,取大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养大鼠心肌成纤维细胞... 目的探讨转化生长因-β1(TGF-β1)刺激大鼠心肌成纤维细胞活化过程中DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)的表达变化情况。方法将30只雄性SD大鼠处死,取大鼠心肌组织,以组织块酶消化法分离细胞,通过差速贴壁离心法收集、培养大鼠心肌成纤维细胞。模型组的心肌成纤维细胞分别给予TGF-β1 1、5、10μg·L-1,建立体外心肌成纤维细胞活化模型。MTT法检测细胞增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液胶原含量,Western blot法检测DNMT3A和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。结果与正常对照组相比较,模型组TGF-β1刺激细胞12、24、48 h后,血清中I型胶原和III型胶原的含量明显增高,细胞增殖活性明显增强,Western blot检测显示模型组DNMT3A和α-SMA的表达明显高于正常对照组。结论心肌纤维化的形成可能与DNMT3A表达上调有关,潜在的分子作用机制有待于进一步研究。 展开更多

关键词 心肌纤维化 转化生长因-β1 Α平滑肌肌动蛋白 DNA甲基化转移酶3a

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甲基化转移酶3对食管癌细胞增殖、迁移及谷氨酰胺代谢的影响

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作者 高川力 周锡 +8 位作者 邹江 杨密渊 文继林 袁梓纯 王琴 徐磊 马强 钟晓武 郭晓兰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第5期544-553,558,共11页

目的探讨甲基化转移酶3(methyltransferase like-3,METTL3)在食管癌中的表达及其对细胞增殖、凋亡、迁移和谷氨酰胺代谢的影响。方法采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测食管癌组织及其癌旁组织中METTL3基因的表达;CCK8试验、克... 目的探讨甲基化转移酶3(methyltransferase like-3,METTL3)在食管癌中的表达及其对细胞增殖、凋亡、迁移和谷氨酰胺代谢的影响。方法采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化法检测食管癌组织及其癌旁组织中METTL3基因的表达;CCK8试验、克隆形成试验、划痕试验和Transwell试验检测METTL3抑制剂STM2457对人食管鳞状癌细胞系Eca109和KYSE150增殖及迁移的影响;流式细胞术、TUNEL染色试验检测其对细胞周期及凋亡的影响;TMT/iTRAQ定量蛋白质组法分析其对下游相关信号通路的影响;谷氨酰胺和谷氨酸检测试验及Western blot法分析其对食管癌细胞谷氨酰胺代谢的影响。结果METTL3在食管癌组织中的表达显著上调(t=5.024,P<0.0001)。STM2457抑制Eca109和KYSE150细胞的METTL3表达后,显著抑制了细胞的增殖及迁移能力,细胞周期在G0/G1期发生阻滞,细胞凋亡率增加,同时降低了谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量,并下调了谷氨酰胺代谢相关蛋白丙氨酸-丝氨酸-半胱氨酸转运载体2(alanine-serine-cysteine transporter 2,ASCT2)、谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)和谷氨酸脱氢酶1(glutamate dehydrogenase 1,GLUD1)的表达。METTL3敲低后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量显著降低(谷氨酰胺摄取量:t为24.52~41.01,P均<0.01;谷氨酸生成量:t为8.431~11.83,P均<0.01);METTL3过表达后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺摄取量和谷氨酸生成量显著升高(谷氨酰胺摄取量:t分别为5.803和56.13,P均<0.01;谷氨酸生成量:t分别为11.06和4.695;P均<0.01)。METTL3敲低后,Eca109和KYSE150细胞中谷氨酰胺代谢相关蛋白ASCT2、GLS和GLUD1表达水平显著下调,而METTL3过表达后,ASCT2、GLS和GLUD1蛋白表达水平显著上调。结论METTL3在食管癌中高表达,并可能通过介导食管癌细胞谷氨酰胺代谢促进细胞增殖。 展开更多

关键词 食管癌 甲基化转移酶3 STM2457 谷氨酰胺代谢

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miR-26a-5p下调DNMT3A表达抑制心肌成纤维细胞活化增殖的机制研究 被引量：6

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作者 何涛 丁安 +1 位作者 周文杰 杨仁杰 《中国循证心血管医学杂志》 2020年第10期1179-1184,共6页

目的研究miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中的表达及通过下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法构建SD大鼠心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变,qRT-PCR检测miR-26a-5p的表达,Western blot... 目的研究miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中的表达及通过下调DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法构建SD大鼠心肌纤维化模型,HE和Masson法观察病理学改变,qRT-PCR检测miR-26a-5p的表达,Western blot法测定Col1A1、α-SMA、DNMT3A表达。TargetScan预测miR-26a-5p与DNMT3A间靶向结合关系,双荧光素酶报告基因实验进行验证;提取SD乳鼠心肌成纤维细胞,将miR-NC、miR-26a-5p、miR-26a-5p和pcDNA 3.1及miR-26a-5p和pcDNA 3.1-DNMT3A转染至细胞中,分别记为miR-NC组、miR-26a-5p组、miR-26a-5p+Vector组和miR-26a-5p+DNMT3A组。qRT-PCR检测miR-26a-5p、DNMT3A、Col1A1和α-SMA mRNA水平,Western blot测定DNMT3A、Col1A1和α-SMA蛋白表达,MTT法检测心肌成纤维细胞增殖能力。结果ISO组SD大鼠心肌细胞排列紊乱,组织胶原沉积明显增多,Col1A1、α-SMA、DNMT3A蛋白表达升高,miR-26a-5p表达降低。TargetScan预测DNMT3A是miR-26a-5p的潜在靶基因。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示,miR-26a-5p组心肌成纤维细胞中DNMT3A-Wt荧光素酶活性[(0.38±0.05)vs.(1.03±0.11),P<0.05]较miR-NC组显著降低,而miR-26a-5p组DNMT3A-Mut荧光素酶活性[(0.97±0.09)vs.(0.99±0.10),P>0.05]与miR-NC组比较无明显差异,提示DNMT3A是miR-26a-5p的一个靶基因。与miR-NC组比较,miR-26a-5p组心肌成纤维细胞中Col1A1[(0.42±0.04)vs.(1.04±0.09),(0.33±0.03)vs.(0.77±0.08),P<0.05]、α-SMA[(0.53±0.06)vs.(1.02±0.10),(0.36±0.04)vs.(0.86±0.09),P<0.05]和DNMT3A[(0.25±0.03)vs.(0.97±0.09),(0.32±0.03)vs.(0.75±0.08),P<0.05]的mRNA和蛋白表达及细胞增殖能力均显著降低,而外源回补DNMT3A可逆转miR-26a-5p对心肌成纤维细胞活化增殖的抑制作用。结论miR-26a-5p在SD大鼠心肌纤维化心脏组织中低表达,miR-26a-5p可能通过下调DNMT3A来抑制心肌成纤维细胞的活化增殖,从而改善心肌纤维化。 展开更多

关键词 miR-26a-5p DNA甲基化转移酶3a 心肌成纤维细胞 心肌纤维化

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DNMT3B对人脐带间质干细胞成骨分化能力的影响 被引量：1

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作者 吴周睿 胡笑 +3 位作者 徐委 孙晓晴 管晓菲 程黎明 《外科研究与新技术》 2012年第2期103-107,共5页

目的研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用。方法利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs)。在使用qPCR和免疫... 目的研究DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)调控人脐带间质干细胞骨生成的作用。方法利用RNA干扰法获得两株DNMT3B基因低表达的人脐带间质干细胞(Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells,hUMSCs)。在使用qPCR和免疫组织化学法确定DNMT3B表达缺失后,对hUMSCs进行骨生成定向诱导分化。并利用免疫组织化学法和茜素红染色评价突变型和野生型hUMSCs成骨能力差异。结果由RNA干扰获得的两株突变型hUMSCs中两株突变型中DNMT3B表达量分别下降至野生型hUMSCs的12.67±0.45%和35.60±0.76%(P<0.05)。而在DNMT3B突变型hUMSCs中间质干细胞标记物CD73和CD90基因mRNA的表达水平也分别下降(P<0.05)。CD73水平分别是野生型细胞的15.83±0.44%和16.60±0.37%(P<0.05);CD90的水平分别是野生型细胞的35.23±0.30%和58.64±0.71%(P<0.05)。在骨生成过程中,免疫组化染色后镜下比较显示DNMT3B突变型的细胞表达Osteocalcin较正常细胞低,qPCR结果表明RUNX2,IBSP和ALPL基因的mRNA表达量水平较正常细胞均明显下降(P<0.01),其中shD3B-1和shD3B-2的RUNX2基因表达水平分别为正常细胞的55.09±0.53%和53.77±0.47%(P<0.01);IBSP基因表达水平分别为正常细胞的53.21±0.81%和41.75±0.44%(P<0.01);ALPL基因表达水平分别为正常细胞的15.55±0.10%和17.86±24%(P<0.01)。同时茜素红染色检测也显示其成骨后细胞成骨功能减弱。结论 DNMT3B突变或缺失会导致hUMSCs骨生成能力下降。 展开更多

关键词 骨生成 间质干细胞 DNA甲基化转移酶3B DNA甲基化

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DNMT3a在肺腺癌中的表达及癌细胞迁移的影响分析

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作者 蒋梦龙 郑丽云 +3 位作者 葛威 康宁宁 许峰 张仁泉 《安徽医学》 2024年第8期946-953,共8页

目的探讨DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在肺腺癌中的表达水平及影响肺腺癌细胞迁移的分子机制。方法回顾性分析2023年1~12月在安徽医科大学第一附属医院胸外科接受手术治疗的41例肺腺癌患者临床资料,使用IHC和蛋白质印迹实验(WB)检测并分析DN... 目的探讨DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在肺腺癌中的表达水平及影响肺腺癌细胞迁移的分子机制。方法回顾性分析2023年1~12月在安徽医科大学第一附属医院胸外科接受手术治疗的41例肺腺癌患者临床资料,使用IHC和蛋白质印迹实验(WB)检测并分析DNMT3a在41例患者肺腺癌组织及癌旁组织中的表达水平;通过分析TCGA数据库揭示DNMT3a与肺腺癌患者预后关系。慢病毒介导SK-LU-1和A549细胞系过表达或敲低DNMT3a,通过IHC、WB、实时荧光定量聚合链反应(qRT-PCR)、DNMT3a抑制剂实验观察DNMT3a对蜗牛家族转录因子(Snail)表达的影响;细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测过表达或敲低DNMT3a对肺腺癌细胞迁移的影响。结果DNMT3a高表达对比DNMT3a低表达的肺腺癌患者生存期较短,差异有统计学意义(P<0.01);DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中较癌旁组织相比均高表达(P<0.01),且DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.612,P<0.01)。与对照组相比,过表达DNMT3a的SK-LU-1细胞中Snail表达上调并增加了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01),敲低DNMT3a的A549细胞中Snail表达下调并减少了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01)。结论DNMT3a在肺腺癌组织中高表达且与不良预后显著相关,DNMT3a通过上调Snail的表达促进肺腺癌细胞的迁移。 展开更多

关键词 肺腺癌 甲基化转移酶3a 蜗牛家族转录因子 迁移 上皮间质转化

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DNA甲基化转移酶3B基因和多巴胺D1受体基因交互作用与精神分裂症的关系 被引量：7

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作者 张晨 谢斌 +4 位作者 杜亚松 范娟 刘漪 禹顺英 方贻儒 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第43期3059-3062,共4页

目的 探讨DNA甲基化转移酶3B（DNMT3B）基因与多巴胺D1受体（DRD1）基因交互作用对精神分裂症患病风险的影响.方法 选取DNMT3B基因2个标签SNP（rs2424908和rs6119954）以及DRD1基因5个标签SNP（rs4532、rs5326、rs2168631、rs6882300和r... 目的 探讨DNA甲基化转移酶3B（DNMT3B）基因与多巴胺D1受体（DRD1）基因交互作用对精神分裂症患病风险的影响.方法 选取DNMT3B基因2个标签SNP（rs2424908和rs6119954）以及DRD1基因5个标签SNP（rs4532、rs5326、rs2168631、rs6882300和rs267418）,采用TaqMan探针SNP基因分型技术对365例精神分裂症患者和365名健康对照者进行检测,使用多因子降维法软件（MDR）分析基因-基因交互作用.结果 DNMT3B基因rs6119954位点基因型分布在患者组与对照组之间差异有统计学意义（χ2=8.06,P=0.018）;MDR分析结果显示DNMT3B与DRD1基因相互作用存在于两位点模型（rs6119954-rs267418）（OR=1.79,95%CI：1.29～2.47;χ2=12.51,P=0.0004）,三位点模型（rs6119954-rs5326-rs267418）（OR=2.36,95%CI：1.73～3.22;χ2=29.33,P＜0.0001）以及四位点模型（rs2424908-rs6119954-rs5326-rs267418）（OR=3.08,95% CI：2.24～4.24;χ2=48.88,P＜0.0001）.结论 DNMT3B与DRD1基因存在交互作用,并可能增加精神分裂症的发病风险. 展开更多

关键词 DNA甲基化转移酶3B 多巴胺D1受体 基因-基因交互作用 精神分裂症

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胃癌组织中METTL3的表达及其与患者临床病理特征及预后的关系 被引量：1

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作者 吴萌 杜佳璇 公小纪 《国际消化病杂志》 CAS 2024年第3期186-190,共5页

目的 探讨胃癌患者组织中甲基化转移酶3(METTL3)的表达水平,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法 选择2022年1月至2022年12月河北港口集团有限公司秦皇岛中西医结合医院收治的30例胃癌患者作为研究对象,收集手术切除的胃癌组... 目的 探讨胃癌患者组织中甲基化转移酶3(METTL3)的表达水平,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法 选择2022年1月至2022年12月河北港口集团有限公司秦皇岛中西医结合医院收治的30例胃癌患者作为研究对象,收集手术切除的胃癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤组织边缘>5 cm)。采用免疫组织化学染色法(SP法)检测组织中METTL3和甲胎蛋白(AFP)水平,并分析胃癌组织中METTL3的阳性表达率与患者临床病理特征的关系。采用Spearman相关性分析法探讨胃癌组织中METTL3与AFP水平的关系。采用电话和门诊复查的方式对所有入组患者自手术日起进行为期3个月的随访,计算无病生存(DFS)率。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,以Log-rank检验分析METTL3的表达与胃癌患者预后的关系。采用单因素及多因素Cox比例风险回归模型分析探讨胃癌患者预后的影响因素。结果 SP法染色结果显示,胃癌组织中METTL3的阳性表达率为86.67%,AFP的阳性表达率为76.67%,均显著高于癌旁正常组织(33.33%、30.00%),差异均有统计学意义(χ^(2)=17.778,P=0.000;χ^(2)=13.125,P=0.000)。Spearman相关性分析结果显示,胃癌组织中METTL3与AFP水平呈显著正相关(r=0.558,P=0.021)。低分化、有淋巴结转移、浸润深度为T3~T4期者的胃癌组织中METTL3的阳性表达率分别高于中高分化、无淋巴结转移、浸润深度为T1~T2期者,组间差异均有统计学意义(P均<0.05)。METTL3阳性表达者的DFS率显著低于阴性表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Cox比例风险回归模型分析结果显示,TNM分期、远处转移、浸润深度、脉管侵犯、METTL3均是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论 胃癌组织中METTL3的表达显著上调,且其与患者的临床病理特征和预后密切相关,其可能可以成为早期胃癌诊断和预后预测的新生物标志物。 展开更多

关键词 胃癌 甲基化转移酶3 甲胎蛋白 临床病理特征 预后

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急性心肌梗死患者急诊PCI术前血清METTL3和脂蛋白a表达与术后左心室重构发生的剂量反应关系

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作者 郑虎 闫杰 +1 位作者 党松 叶赫娜拉俊 《中国循证心血管医学杂志》 2024年第11期1369-1373,共5页

目的分析急性心肌梗死(AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术前血清甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)、脂蛋白a(Lpa)表达与术后左心室重构(LVR)发生的剂量反应关系。方法采取前瞻性研究,选择2021年4月至2023年4月于湖北省中西医结合医... 目的分析急性心肌梗死(AMI)患者急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术前血清甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)、脂蛋白a(Lpa)表达与术后左心室重构(LVR)发生的剂量反应关系。方法采取前瞻性研究,选择2021年4月至2023年4月于湖北省中西医结合医院收治的急诊PCI的AMI患者作为研究对象。采集患者PCI术前静脉血,检测血清METTL3、Lpa水平。患者急诊PCI术后随访1年,根据随访期间LVR发生情况分组并收集基线资料。采用二元Logistics回归分析血清METTL3相对表达量、Lpa水平对AMI患者急诊PCI术后LVR发生的影响;采用接受者操作特征曲线(ROC)评估血清METTL3相对表达量、Lpa水平预测AMI患者急诊PCI术后LVR发生价值;采用样条函数与Logistics回归相结合的限制性立方样条法分析血清METTL3相对表达量、Lpa水平与AMI患者急诊PCI术后LVR发生的剂量反应关系。结果LVR组METTL3相对表达量、Lpa水平高于无LVR组(P<0.05);二元Logistics回归结果显示,血清METTL3相对表达量和Lpa水平升高是AMI患者急诊PCI术后LVR发生的危险因素(OR>1,P<0.05);血清METTL3相对表达量和Lpa水平升高可增加AMI患者急诊PCI术后LVR发生风险,特别是当血清METTL3相对表达量>1.42、Lpa>3.60mmol/L时,AMI患者急诊PCI术后LVR发生风险随METTL3相对表达量和Lpa水平升高而升高。结论AMI患者急诊PCI术前血清METTL3相对表达量和Lpa水平与术后左心室重构密切相关,且术后LVR发生风险随血清METTL3相对表达量和Lpa水平升高而升高。 展开更多

关键词 急性心肌梗死 左心室重构 经皮冠状动脉介入治疗 甲基化转移酶样蛋白3 脂蛋白A

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克隆造血DNMT3A基因突变、Tet2基因缺失对慢性阻塞性肺疾病炎症反应调控作用的研究进展

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作者 严锐 朱梓良 +1 位作者 招轩娜 黎东明 《山东医药》 CAS 2024年第11期94-96,共3页

克隆造血是指造血系统体细胞基因突变的非恶性增殖性现象,可驱动基因突变后的突变白细胞比例升高。新近研究指出,由白血病驱动基因突变引起的克隆造血可通过促炎反应影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。越来越多的研究显示,克隆造血... 克隆造血是指造血系统体细胞基因突变的非恶性增殖性现象,可驱动基因突变后的突变白细胞比例升高。新近研究指出,由白血病驱动基因突变引起的克隆造血可通过促炎反应影响慢性阻塞性肺疾病(COPD)的发生发展。越来越多的研究显示,克隆造血是COPD的非传统、独立的危险因素,同时也是导致COPD发生的一种新机制。甲基化DNA转移酶3a(DNMT3A)基因突变及Tet2基因缺失是体细胞突变最常见的两种类型,二者可诱导炎症反应的发生,引起肺功能下降,从而导致COPD的发生发展。深入研究DNMT3A基因突变及Tet2基因缺失与COPD炎症反应的关系,可为研究COPD发生发展的相关机制提供新思路。 展开更多

关键词 克隆造血 慢性阻塞性肺疾病 基因突变 甲基化DNA转移酶3a Tet2基因 炎症反应

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