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果蝇细胞系中反转录病毒样粒子的电镜观察 被引量:1
1
作者 曾庆韬 钱远槐 杨官品 《电子显微学报》 CAS CSCD 1999年第2期183-187,共5页
反转录病毒样粒子是反转录病毒样转座子copia的表达产物。完整的copiaDNA能在无copia的细胞系中表达,并能启动外源基因表达,因而可作为基因工程载体使用。为迅速鉴定出的细胞系中copia和确定其表达时期,本研... 反转录病毒样粒子是反转录病毒样转座子copia的表达产物。完整的copiaDNA能在无copia的细胞系中表达,并能启动外源基因表达,因而可作为基因工程载体使用。为迅速鉴定出的细胞系中copia和确定其表达时期,本研究用电子显微镜对黑腹果蝇黑条体突变型细胞系中的反转录病毒样粒子进行了观察。反转录病毒样粒子为圆形,直径约0.05μm,主要存在于稳定期细胞系的细胞核中,偶尔也能在细胞质中观察到,而在细胞分裂的指数增生期则完全观察不到。结果表明反转录病毒样粒子高效表达时期是细胞系的稳定期,这为选择外源基因的高效表达载体和受体系统以及分离表达产物提供了实验依据。 展开更多
关键词 反转录 病毒样粒子 果腹果蝇 细胞系 电镜观察
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凯米拉和现代嵌合病毒样粒子
2
作者 Rainer Ulrich 吴贤福 缪从容 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第4期38-40,共3页
凯米拉(Chimarea)是希腊神话中狮头、羊身、蛇尾的妖物。据说,它纵火焚烧了地处小亚西亚吕基亚王国的森林和田地,吕基亚国王派英雄柏勒洛丰去除掉怪物,同时企图让柏勒洛丰在交战中死去。然而,柏勒洛丰得到了神的相助,给他送来了双翼神... 凯米拉(Chimarea)是希腊神话中狮头、羊身、蛇尾的妖物。据说,它纵火焚烧了地处小亚西亚吕基亚王国的森林和田地,吕基亚国王派英雄柏勒洛丰去除掉怪物,同时企图让柏勒洛丰在交战中死去。然而,柏勒洛丰得到了神的相助,给他送来了双翼神马柏伽索斯。护佑女神雅典娜教会了柏勒洛丰如何驾驽柏伽索斯。柏勒洛丰骑上柏伽索斯升入天空,终于杀死了凯米拉。现代生物学已经掌握利用不同种类微生物的要素组成新的物种,与古代凯米拉相比。 展开更多
关键词 嵌合病毒样粒子 疫苗
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融合TAT重组猪细小病毒样粒子的构建及鉴定
3
作者 刘金凤 杜毅超 +4 位作者 覃绍敏 白安斌 张振江 陈凤莲 吴健敏 《动物医学进展》 北大核心 2018年第12期66-71,共6页
为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPV N株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆... 为表达和鉴定含TAT蛋白转导域的重组猪细小病毒(PPV)样粒子,以PPV N株为模板扩增其VP2基因,将具有穿膜功能的TAT蛋白转导域连接在VP2基因的N端,构建TAT-VP2融合基因,并用Bac-to-Bac杆状病毒/昆虫细胞表达系统构建含TAT-VP2基因的重组杆状病毒,感染昆虫细胞进行融合基因的表达,通过间接免疫荧光(IFA)、电镜观察及血凝试验对表达产物进行鉴定。IFA结果显示细胞表达产物能与鼠抗PPV抗体发生特异性反应,透射电镜观察到表达产物可装配形成典型的病毒样粒子结构,形态大小与野生型PPV及VP2病毒粒子相似;血凝试验证实融合TAT重组PPV-VLPs具有与全病毒相同的血凝活性。试验结果为进一步研制高效PPV亚单位疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪细小病毒 重组杆状病毒 TAT蛋白转导域 病毒样粒子
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非甲非乙型肝炎:黑猩猩和人血清病毒样粒子的检测
4
作者 kenji Abe 娄高明 《微生物学免疫学进展》 1990年第2期25-26,共2页
目前,NANB肝炎的病原体仍不清楚。已有报道NANB肝炎成功地转染给黑猩猩,但没有描述病原体的特征,电镜和血清学试验也未检查到病毒样粒子(VLP)。最近,据宣布:加州福尼亚生物技术公司Chiron已分离到NANB肝炎病毒,但未作详细报道。本篇通... 目前,NANB肝炎的病原体仍不清楚。已有报道NANB肝炎成功地转染给黑猩猩,但没有描述病原体的特征,电镜和血清学试验也未检查到病毒样粒子(VLP)。最近,据宣布:加州福尼亚生物技术公司Chiron已分离到NANB肝炎病毒,但未作详细报道。本篇通迅报道了在具有NANB肝炎的黑猩猩和人血清中VLP的检测情况。 血清样品来自实验性感染NANB肝炎的六只黑猩猩。用输血后感染肝炎的一个病例所分离出的NANB肝炎病原体F株接种动物后,均发生NANB肝炎所特有的肝细胞管状结构持续阳性三年多的慢性肝炎;并且已发现来自一只黑猩猩的少量慢性期血清(接种后49—51周)在受体黑猩猩中引起肝炎,这显示肝细胞管状结构持续阳性是NANB肝炎病毒携带者的重要标志。在人的病例中。 展开更多
关键词 非甲非乙肝炎 血清 病毒样粒子
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猪细小病毒VP_2蛋白在昆虫细胞中的表达及其特性 被引量:11
5
作者 吕建强 陈焕春 +2 位作者 赵俊龙 肖少波 王革非 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期675-679,共5页
将猪细小病毒 (PorcineParvovirus,PPV)vp2 基因重组到杆状病毒Bac To Bac表达系统的pFastBacⅠ质粒中 ,构建了pFast vp2 质粒。在DH10 Bac大肠杆菌中 ,pFast vp2 与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒 (AcNPV)基因组 (Bacmid)发生同源重... 将猪细小病毒 (PorcineParvovirus,PPV)vp2 基因重组到杆状病毒Bac To Bac表达系统的pFastBacⅠ质粒中 ,构建了pFast vp2 质粒。在DH10 Bac大肠杆菌中 ,pFast vp2 与改造过的苜蓿夜蛾核型多角体病毒 (AcNPV)基因组 (Bacmid)发生同源重组 ,从而获得重组穿梭载体Bac mid vp2 ,转染Sf9细胞得到重组病毒AcNPV vp2 。SDS PAGE和Western blotting分析可见大小约为 6 4kD的特异性带 ,表明AcNPV vp2 在Sf9细胞中成功地表达了PPVVP2 蛋白。红细胞凝集试验和间接ELISA进一步证实 ,表达的VP2 蛋白具有与全病毒相同的血凝活性和相似的抗原性。电镜观察VP2 蛋白的粗提物 ,发现VP2 蛋白可自行装配成许多病毒样粒子 (VLPs) 展开更多
关键词 猪细小病毒 VP2蛋白 昆虫细胞 表达 病毒样粒子
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水貂肠炎病毒VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达 被引量:5
6
作者 倪佳 张蕾 +6 位作者 柴秀丽 高晗 张海玲 赵建军 白雪 邵西群 闫喜军 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期97-100,共4页
利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFa... 利用昆虫杆状病毒表达系统表达水貂肠炎病毒(mink enteritis virus,MEV)VP2基因,表达的蛋白能够形成病毒样粒子,具有反应原性,为研究MEV新型疫苗奠定基础。采用PCR方法扩增MEVVP2基因,将PCR产物连接到pMD18-T载体,目的基因定向克隆到pFast-BacⅠ载体中,构建重组转座载体后转化DH10Bac感受态细胞,获得重组Bacmid质粒后转染Sf9昆虫细胞,传毒3代,对表达蛋白进行Western blotting鉴定。结果成功克隆MEVVP2基因。Western blotting结果证实,表达蛋白能够被MEV单克隆抗体识别。在Bac-To-Bac杆状病毒表达系统中成功的表达了MEV VP2蛋白,目的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 水貂肠炎病毒 VP2基因 病毒样粒子 杆状病毒表达系统
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蓝氏贾第鞭毛虫病毒研究进展 被引量:1
7
作者 刘全 张西臣 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第6期464-467,共4页
关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 病毒研究 利什曼原虫 贾第虫病毒 阴道毛滴虫 溶组织阿米巴 寄生虫学研究 原虫病毒 病毒样粒子 艾美尔球虫
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HIV-1核心蛋白Gag与IL-6共表达重组鸡痘病毒的构建及其免疫原性研究
8
作者 江文正 金宁一 +2 位作者 李子健 张立树 韩文瑜 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第11期31-34,共4页
分别将IL-6和HIV-1 gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫... 分别将IL-6和HIV-1 gag基因插入到鸡痘病毒表达载体质粒pUTAL串联启动子和复合启动子(ATI-P7.5)下游,构建了重组鸡痘病毒表达质粒pUTA-GAG-IL6。经同源重组和Western blot检测,获得重组鸡痘病毒,并将该重组病毒免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠血清抗体水平和特异性CTL杀伤活性。结果获得的重组鸡痘病毒可同时表达HIV-1核心蛋白和IL-6,并在感染细胞内形成病毒样粒子。重组病毒具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生特异性体液免疫和细胞免疫。 展开更多
关键词 鸡痘病毒 体液免疫 细胞免疫 艾滋病 病毒样粒子
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东方马脑炎病毒VLPs表达与免疫原性研究
9
作者 马金柱 王化磊 +5 位作者 郑学星 吴红霞 高玉伟 张志芳 杨松涛 夏咸柱 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期488-492,共5页
目的表达东方马脑炎病毒(EEEV)病毒样粒子(VLPs),研究其免疫原性。方法采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到供体质粒pFastBacTM1上,构建成重组质粒pFastBacTM1-C-E,然后重组质粒经过基因重组作用与家蚕核型多角体病毒(BmNPV)形成重... 目的表达东方马脑炎病毒(EEEV)病毒样粒子(VLPs),研究其免疫原性。方法采用PCR方法扩增目的基因,酶切之后连接到供体质粒pFastBacTM1上,构建成重组质粒pFastBacTM1-C-E,然后重组质粒经过基因重组作用与家蚕核型多角体病毒(BmNPV)形成重组病毒BmNPV-C-E,BmNPV-C-E被转染到BmN细胞后以表达VLPs。VLPs鉴定表达正确后,用纯化VLPs与弗氏佐剂乳化成免疫原免疫小鼠,免疫剂量为15μg/只,免疫途径为后肢肌肉注射,免疫2次且间隔时间为14 d。2免后第7天检测免疫小鼠外周血中CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,2免后第14天采用ELISA方法检测免疫小鼠血清内抗体IgG效价。结果研究结果显示实验组小鼠的CD4+T细胞/CD8+T细胞比例和细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α质量浓度与对照组相比差异均显著(P<0.01),免疫原实验组和VLPs免疫组2免后的血清效价分别为1∶128与1∶64,而对照组小鼠血清中没有产生IgG抗体。结论结果表明BmNPV-C-E能在BmN细胞中成功表达EEEV VLPs,并且VLPs能够刺激小鼠产生明显免疫反应,具有较强免疫原性,这为EEEV新型疫苗研究提供了重要参考。 展开更多
关键词 东方马脑炎病毒 载体构建 病毒样粒子 免疫原性
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寄生性原虫病毒研究进展
10
作者 刘全 张西臣 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第3期221-224,共4页
关键词 寄生性原虫 病毒研究 蓝氏贾第鞭毛虫 溶组织阿米巴 原虫病毒 病毒样粒子 阴道毛滴虫 艾美尔球虫 RNA病毒 利什曼原虫 生长特性 特异性 虫体 致病性 原虫学
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禽骨髓细胞瘤病自然病例的病理学研究 被引量:12
11
作者 赵振华 成子强 +5 位作者 顾玉芳 郝永清 杨玉莹 王海燕 高娃 张二芹 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第10期3-6,共4页
对禽骨髓细胞瘤病显性型病鸡、ELISA阳性的隐性型病鸡和阴性对照鸡进行了病理学研究。结果表明 ,临床症状明显的显性型病鸡肝、脾、肾、睾丸 (或卵巢 )、肺等组织有灰白色结节状病灶和不同程度的肿胀 ,甚至在股骨或肋骨等处出现大小不... 对禽骨髓细胞瘤病显性型病鸡、ELISA阳性的隐性型病鸡和阴性对照鸡进行了病理学研究。结果表明 ,临床症状明显的显性型病鸡肝、脾、肾、睾丸 (或卵巢 )、肺等组织有灰白色结节状病灶和不同程度的肿胀 ,甚至在股骨或肋骨等处出现大小不一的硬固肿块 ,镜检病变部位有大量髓细胞样瘤细胞 ,呈典型的骨髓细胞瘤病的病理特征。电镜下瘤细胞病变明显 ,瘤细胞胞膜下疑似病毒样粒子 ;在自然病例肾悬液感染的鸡胚成纤维细胞培养物中巨噬细胞的膜性结构上发现增殖的病毒样凸起。ALV JELISA抗体检测试剂盒检出阳性、无明显临床症状和眼观病变的隐性型病鸡 ,光镜下骨髓、肝、卵巢、心肌等组织中可见与显性型相同的髓细胞样瘤细胞 ,但数量较少。ELISA抗体检测阴性对照鸡骨髓中胞浆含有嗜酸性颗粒的髓细胞明显少于阳性鸡 ,除在肝、卵巢等组织中偶尔出现外 ,其他组织很少见到。 展开更多
关键词 自然病例 骨髓细胞瘤病 禽白细胞病毒J亚型 病理学 病毒样粒子 禽类
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病毒样颗粒疫苗研究新进展 被引量:2
12
作者 胡桂秋 梁红茹 +3 位作者 冯昊 王化磊 杨松涛 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第2期175-177,共3页
病毒样粒子由病毒衣壳蛋白或由衣壳蛋白和囊膜蛋白自我组装而成,在形态和结构上与天然病毒相似,但不含有遗传物质,因而具有较好的免疫原性和安全性,能够有效的刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应。病毒样粒子可成为预防病毒病的潜在候... 病毒样粒子由病毒衣壳蛋白或由衣壳蛋白和囊膜蛋白自我组装而成,在形态和结构上与天然病毒相似,但不含有遗传物质,因而具有较好的免疫原性和安全性,能够有效的刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应。病毒样粒子可成为预防病毒病的潜在候选疫苗。本文就几种病毒样颗粒疫苗国内外的研究进展进行综述,为颗粒疫苗的研发提供参考。 展开更多
关键词 病毒样粒子 免疫 疫苗 综述
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果蝇copia的克隆与分子特征 被引量:1
13
作者 曾庆韬 钱远槐 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第S1期46-47,共2页
果蝇copia的克隆与分子特征曾庆韬钱远槐(湖北大学生命科学系,武汉430062)CloningandMolecularCharacterizationofcopiainDrosophilamauritianZeng... 果蝇copia的克隆与分子特征曾庆韬钱远槐(湖北大学生命科学系,武汉430062)CloningandMolecularCharacterizationofcopiainDrosophilamauritianZengQingtaoQianYuanhu... 展开更多
关键词 病毒样粒子 黑腹果蝇 反转录 物理图 限制性内切酶 分子杂交 分子特征 培养细胞 生命科学 测序分析
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HIV-1 Gag蛋白的高效表达调控研究
14
作者 毛春生 金宁一 +5 位作者 郭志儒 王宏伟 马奉龙 司兴奎 李萍 殷震 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期108-108,共1页
LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like... LTR位于HIV前病毒同DNA基因组的两末端,Gag基因位于5′端LTR的下游。LTR对转录的调控作用主要是由5′端LTR进行的。LTR具有启动子的作用,在结构上具有真核启动子的典型特征。另外,HIV-1 Gag蛋白还有能够自我装配成病毒样粒子(virus like particle,VLP)并从细胞中释放出来的重要特性。 我们利用痘苗病毒表达系统。 展开更多
关键词 GAG蛋白 表达调控 重组痘苗病毒 HIV-1 病毒样粒子 启动子 高效表达 表达系统 GAG基因 重组病毒
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疫苗
15
《生物技术通报》 CAS CSCD 1996年第4期62-64,共3页
961375 β-丙内酯对DNA的失活[英]/Perrin, P.…//Biologi-cals.-1995,23(3).-207~211[译自DBA,1995,14(22),95-13090]
关键词 F基因 烟草花叶病毒 培养基 分枝杆菌 植物组织 外壳蛋白 病毒样粒子 连续细胞系 质粒 表达产物
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澳研制成子宫颈癌疫苗
16
《国际医药卫生导报》 1996年第5期28-28,共1页
澳大利亚医学家新近研制成一种 能防治子宫颈癌的疫苗(HPV),利用此疫苗能防止动物感染HPV病毒,从而避免癌症发生。 实验时,首先利用遗传工程改造了HPV模板,产生一种病毒样粒子(VLP)。VLP小得很像真的病毒,能刺激机体产生免疫反应;因它... 澳大利亚医学家新近研制成一种 能防治子宫颈癌的疫苗(HPV),利用此疫苗能防止动物感染HPV病毒,从而避免癌症发生。 实验时,首先利用遗传工程改造了HPV模板,产生一种病毒样粒子(VLP)。VLP小得很像真的病毒,能刺激机体产生免疫反应;因它没有病毒的基因,不会引起肿瘤发生。 展开更多
关键词 子宫颈癌 病毒样粒子 生殖器肿瘤 工程改造 动物感染 免疫反应 疫苗 肿瘤发生 癌症发生 医学家
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HPV疫苗进入后期临床试验
17
作者 王继麟 《生物制品快讯》 2001年第12期22-23,共2页
关键词 HPV疫苗 临床试验 病毒样粒子疫苗 官颈癌 乳头瘤病毒
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Production of CCHF Virus-Like Particle by a Baculovirus-Insect Cell Expression System 被引量:2
18
作者 Zhao-rui Zhou Man-li Wang Fei Deng Tian-xian Li Zhi-hong Hu Hua-lin Wang 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期338-346,共9页
Crimean-Congo Haemorrhagic Fever Virus (CCHFV) is a tick-born virus of the Nairovirus genus within the Bunyaviridae family,which is widespread and causes high fatality.The nucleocapsid of CCHFV is comprised of N prote... Crimean-Congo Haemorrhagic Fever Virus (CCHFV) is a tick-born virus of the Nairovirus genus within the Bunyaviridae family,which is widespread and causes high fatality.The nucleocapsid of CCHFV is comprised of N proteins that are encoded by the S segment.In this research,the N protein of CCHFV was expressed in insect cells using a recombinant baculovirus.Under an electron microscope,Virus-Like Particles (VLPs) with various size and morphology were observed in cytoplasmic vesicles in the infected cells.Sucrose-gradient purification of the cell lysate indicated that the VLPs were mainly located in the upper fraction after ultracentrifugation,which was confirmed by Western blot analysis and immuno-electron microscopy (IEM). 展开更多
关键词 Crimean-Congo hemorrhagic fever virus (CCHFV) Virus-Like Particle (VLP) Nucleocapsid (N)protein
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犬细小病毒VP2蛋白在家蚕/昆虫细胞中表达 被引量:2
19
作者 胡桂秋 郭鹤 +7 位作者 梁红茹 冯昊 王化磊 郑学星 赵永坤 赵丽丽 杨松涛 夏咸柱 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第7期577-580,共4页
目的犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)能够引起犬急性出血性肠炎,在幼犬中的死亡率很高,为我国养犬业和经济动物养殖业带来巨大的经济损失。因而,寻找一种新型、安全、高效的疫苗为细小病毒性肠炎的防控具有重要意义。方法本研究利用B... 目的犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)能够引起犬急性出血性肠炎,在幼犬中的死亡率很高,为我国养犬业和经济动物养殖业带来巨大的经济损失。因而,寻找一种新型、安全、高效的疫苗为细小病毒性肠炎的防控具有重要意义。方法本研究利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达CPV VP2蛋白的重组杆状病毒rBV-D-VP2。该重组病毒感染昆虫细胞和家蚕后,表达CPV VP2蛋白。体外表达的VP2蛋白自动装配成病毒样粒子。随后用蚕蛹中大量组装成的病毒样粒子分别通过口服和肌注两种途径免疫豚鼠。结果经电镜检测,观察到直径为25nm大小的球形病毒样粒子,表明重组杆状病毒表达的VP2能形成病毒样粒子,且在大小、形态上与天然病毒相似。间接免疫荧光检测表明成功构建了表达VP2的病毒样粒子。口服和肌注两种途径免疫豚鼠,均产生了血凝抑制效价。结论本研究为CPV新型亚单位疫苗的研究提供了依据。 展开更多
关键词 犬细小病毒 VP2 病毒样粒子 免疫原
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果蝇转座因子分布的多样性及一个新的copia样因子的初步研究
20
作者 曾庆韬 严冰 +4 位作者 杨勇 钱远槐 张菁 薛小桥 金珊 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期242-243,共2页
关键词 转座因子 生命科学 黑腹果蝇 湖北大学 黑条体 病毒样粒子 生物化学与分子生物学 突变型 重点学科 反转录
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