猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中的新型应用

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作者 张满义 梁军 +3 位作者 于三科 冯泽泰 蒲小峰 张志刚 《中国动物保健》 2024年第8期10-11,共2页

口蹄疫作为一种高度传染性病毒性疾病,主要感染偶蹄类动物,如牛、羊和猪等,对养殖业造成严重影响。疫苗是口蹄疫防控的重要手段之一,近年来研究表明,猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中展现出了新的应用前景。本文就该疫苗的基本特点... 口蹄疫作为一种高度传染性病毒性疾病,主要感染偶蹄类动物,如牛、羊和猪等,对养殖业造成严重影响。疫苗是口蹄疫防控的重要手段之一,近年来研究表明,猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中展现出了新的应用前景。本文就该疫苗的基本特点、应用情况、免疫效果、安全性评估以及在口蹄疫防控中的作用等方面进行综述,旨在为猪矿化病毒样颗粒疫苗在口蹄疫防控中的更广泛应用提供参考。 展开更多

关键词 口蹄疫 猪矿化病毒样颗粒疫苗 防控 新型应用

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猪繁殖与呼吸综合征病毒及其病毒样颗粒疫苗的研究进展 被引量：4

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作者 王俊 马小元 +2 位作者 欧云文 张永光 张杰 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期81-84,共4页

自北美地区出现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)以来,此病已有几十年的历史,给养猪业带来了毁灭性的打击。感染此病后呼吸系统症状增加,主要侵袭肺部,病变明显而且继发其他病毒和细菌性疾病;怀孕母猪会产生繁殖障碍,导致流产,产死胎和木乃伊... 自北美地区出现猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)以来,此病已有几十年的历史,给养猪业带来了毁灭性的打击。感染此病后呼吸系统症状增加,主要侵袭肺部,病变明显而且继发其他病毒和细菌性疾病;怀孕母猪会产生繁殖障碍,导致流产,产死胎和木乃伊胎等。迄今为止临床上仍然使用灭活疫苗和弱毒疫苗来预防此病,但是这两种疫苗都有不可调和的缺陷,并不能提供完全保护力。新型基因工程疫苗病毒样颗粒(VLPs)疫苗是目前的研究热点,因其不具有感染性病毒的遗传物质,仅含有病毒的几种主要结构蛋白,不会造成感染,安全系数高,免疫效果好而被普遍接受。但是猪繁殖与呼吸综合征病毒的VLPs疫苗仍处于实验室开发阶段,不过已经给各类疾病疫苗的研发提供了一个新的思路。文章对猪繁殖与呼吸综合征及其病毒样颗粒疫苗进行综述。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征 免疫应答 常规疫苗 病毒样颗粒疫苗 表达系统

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增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒疫苗的制备、纯化及活性研究 被引量：1

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作者 王琳 王希 +3 位作者 杨铭 李岩 董轲 张惠中 《现代检验医学杂志》 CAS 2016年第4期1-4,9,共5页

目的 获得嵌合免疫增强佐剂CD40配体（CD40L）的Trop2-CD40L病毒样颗粒（VLPs）疫苗,为后续探究VLPs在肿瘤治疗中的免疫原性及免疫保护作用奠定基础。方法 通过重叠延伸PCR方法扩增以Trop2为靶点、嵌合免疫佐剂CD40L的Trop2-CD40L融合基... 目的 获得嵌合免疫增强佐剂CD40配体（CD40L）的Trop2-CD40L病毒样颗粒（VLPs）疫苗,为后续探究VLPs在肿瘤治疗中的免疫原性及免疫保护作用奠定基础。方法 通过重叠延伸PCR方法扩增以Trop2为靶点、嵌合免疫佐剂CD40L的Trop2-CD40L融合基因,构建杆状病毒表达载体pFastbacTM /Trop2-CD40L,并转化大肠埃希菌E.coli DH10bac,提取杆粒并经PCR鉴定成功命名为Trop2-CD40L Bacmid,后者转染Tn5昆虫细胞获得重组病毒Trop2-CD40L rBV,与Gag rBV共感染昆虫细胞制备重组病毒样颗粒,透析浓缩后蔗糖密度梯度离心纯化,Western Blot鉴定VLPs目的蛋白表达、电镜观察所制备VLPs形态,Cytokine ELISA方法检测Trop2-CD40L VLPs体外生物学活性。结果 成功扩增了Trop2-CD40L融合基因,通过杆状病毒表达系统、借助SIV Gag衣壳蛋白装配特点成功制备了增强型Trop2-CD40L 病毒样颗粒,与Trop2 VLPs比较具有更好的生物学活性,差异具有统计学意义（t=7.266,,P〈0.05）。结论 制备出具有一定生物学活性的增强型Trop2-CD40L病毒样颗粒,证实了CD40L作为免疫佐剂使用有免疫增强效应。 展开更多

关键词 Trop2 CD40L 病毒样颗粒疫苗

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端粒酶逆转录酶肽-核酸病毒样颗粒疫苗的制备及免疫原性鉴定 被引量：1

4

作者 郭红 郝嘉 +1 位作者 吴超 房殿春 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第22期2645-2649,共5页

目的:设计人端粒酶逆转录酶(hTERT)的新型病毒样颗粒疫苗,并鉴定其表达蛋白的免疫原性和疫苗转染效率．方法:合成阳离子抗原肽K18P9,同时将人粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)和hTERT克隆入真核双表达载体pTCAE中,再将多肽和核酸... 目的:设计人端粒酶逆转录酶(hTERT)的新型病毒样颗粒疫苗,并鉴定其表达蛋白的免疫原性和疫苗转染效率．方法:合成阳离子抗原肽K18P9,同时将人粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)和hTERT克隆入真核双表达载体pTCAE中,再将多肽和核酸疫苗结合于同一疫苗颗粒,并将其转染入真核细胞内.ELISA法和免疫印迹法检测hGM-CSF和hTERT的免疫原性,同时评价疫苗的转染效率．结果:酶切及测序结果证实已成功构建含hGM-CSF和 hTERT的载体pTGH,电镜等结果证实核酸被包装肽包裹形成病毒样颗粒,ELISA法和免疫印迹法证实疫苗在体外对真核细胞的转染效应以及hGM-CSF和hTERT 的免疫原性,与阳性对照DOTAP组比较,疫苗转染效率约可达78．5％．结论:成功构建了具有免疫原性的hTERT肽-核酸病毒样颗粒疫苗． 展开更多

关键词 端粒酶逆转录酶 病毒样颗粒疫苗 细胞毒T淋巴细胞

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hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗抗胃癌免疫的初步研究

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作者 郭红 郝嘉 +2 位作者 吴超 石云 房殿春 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期169-171,共3页

目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免... 目的设计新型的人端粒酶逆转录酶(hTERT)肽-核酸病毒样颗粒疫苗,并研究其抗胃癌的作用。方法将阳离子隐性表位肽和DNA疫苗协同性结合于同一疫苗形成病毒样颗粒,通过DNA阻滞试验、DNA沉淀试验、免疫组化等试验优化该疫苗参数,并鉴定其免疫原性和观察其体内激发特异性CTL反应的有效性。结果确定制备疫苗的参数为浓度为150mmol/LNaCl,电荷比为4。证实该疫苗可激发特异性CTL反应,并对胃癌细胞具有特异性杀伤活性,Elispot实验显示能够有效诱导的IFN-γ分泌。结论成功构建了具有特异性CTL杀伤活性的hTERT隐性表位肽-核酸病毒样颗粒疫苗,为进一步探索其体内抗胃癌免疫作用奠定了基础。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录酶 胃癌 隐性表位 肽-核酸病毒样颗粒疫苗 细胞毒T淋巴细胞

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3种TLR配体对猪圆环病毒2型病毒样颗粒疫苗佐剂活性的比较

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作者 李洋洋 宗扬 +4 位作者 程健 王亚杰 张鑫宇 夏晓莉 孙怀昌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期595-600,共6页

为比较3种TLR配体对猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)疫苗的佐剂活性,本研究利用重组大肠杆菌表达脑膜炎奈瑟菌Ag473脂蛋白、创伤弧菌FlaB鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70(Hsp70),采用镍亲和柱纯化获得该3种重组蛋白;分别将相同... 为比较3种TLR配体对猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)疫苗的佐剂活性,本研究利用重组大肠杆菌表达脑膜炎奈瑟菌Ag473脂蛋白、创伤弧菌FlaB鞭毛蛋白和结核分枝杆菌热应激蛋白70(Hsp70),采用镍亲和柱纯化获得该3种重组蛋白;分别将相同剂量(10μg)3种重组蛋白、ISA206佐剂(100μL)和不完全弗氏佐剂(FIA)(100μL)与PCV2 VLP疫苗(50μg)混合,肌肉注射免疫小鼠,初免后14 d加强免疫1次;初免后每周采血分离血清,采用ELISA检测抗原特异抗体;加强免疫后14 d利用PCV2攻毒,攻毒后7 d和14 d采血分离血清,采用荧光定量PCR检测病毒DNA拷贝数;攻毒后14 d迫杀小鼠,制备并培养其脾细胞,经PCV2 VLP疫苗刺激后,采用试剂盒检测细胞因子的表达。SDS-PAGE分析结果显示,3种TLR配体在重组大肠杆菌中均获得正确表达,纯化重组蛋白的纯度大于90%。从初免14 d起,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的PCV2抗体水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异不显著(p>0.05)。在PCV2攻毒前,3个分子佐剂组中Ag473佐剂组的小鼠脾细胞TNF-α和IFN-γ表达水平最高,但低于ISA206佐剂组却高于FIA组,差异显著(p<0.05);Hsp70佐剂组的IL-4表达水平最高,Ag473佐剂组次之,但均高于ISA206和FIA组。在攻毒后第7 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数均较对照组显著下降(p<0.05),但免疫组间差异不显著;在攻毒后第14 d,5个免疫组小鼠的病毒拷贝数进一步下降,免疫组间差异不显著。研究结果表明在测试的3种分子佐剂中,Ag473脂蛋白具有较强的总体免疫佐剂活性,有望进一步开发为PCV2等病毒的亚单位疫苗佐剂。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒疫苗 分子佐剂 活性比较

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人乳头瘤病毒衣壳蛋白L1病毒样颗粒疫苗免疫机制及其应用效果进展

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作者 李青 赵卫东 《妇产与遗传（电子版）》 2011年第1期39-42,共4页

目前国内外已公认高危型人乳头瘤病毒（humanpapilloma virus,HPV）持续感染是宫颈癌发生的必要条件,约90%的宫颈癌由HPV感染所致。据统计,全世界每年大约有50万例新发宫颈癌患者,约27.4万死亡,其中80%的死亡病例发生在发展中国家,是因... 目前国内外已公认高危型人乳头瘤病毒（humanpapilloma virus,HPV）持续感染是宫颈癌发生的必要条件,约90%的宫颈癌由HPV感染所致。据统计,全世界每年大约有50万例新发宫颈癌患者,约27.4万死亡,其中80%的死亡病例发生在发展中国家,是因为在这些国家筛查和健康体检很难普及, 展开更多

关键词 高危型人乳头瘤病毒 病毒样颗粒疫苗 免疫机制 衣壳蛋白 宫颈癌发生 死亡病例 HPV感染 发展中国家

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生物矿化的口蹄疫病毒样颗粒疫苗的免疫原性评价 被引量：1

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作者 李硕 张韵 +9 位作者 白满元 赵瑞翀 宋河涛 穆素雨 滕志东 董虎 马娥宁 孙世琪 郭慧琛 尹双辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1598-1607,共10页

生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,... 生物矿化技术可以增强口蹄疫(foot-and-mouth,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)的耐热性,但并无试验数据支撑矿化FMD VLPs用于临床的可行性。本研究旨在评价矿化FMD VLPs疫苗在牛和猪上的免疫原性。用VLPs和矿化VLPs免疫猪,采用液相阻断ELISA(LPBE)检测猪血清中的特异性抗体滴度,并经酶联免疫斑点试验(ELISpot)检测免疫猪外周血淋巴细胞(PBLs)经体外刺激后分泌的特异性IFN-γ。用矿化A型VLPs、矿化O型VLPs、矿化的A型和O型二价VLPs分别免疫牛,采用LPBE、中和试验、夹心ELISA检测血清中的特异性抗体、中和抗体以及IL-4和IFN-γ的含量。结果显示,VLPs与矿化VLPs免疫猪的血清抗体水平无显著差异,相对于VLPs,矿化VLPs免疫猪的PBLs分泌的IFN-γ水平高于VLPs免疫猪(P<0.05);3种疫苗免疫牛血清中IL-4和IFN-γ水平均高于PBS组,矿化二价疫苗与相应的矿化单价疫苗免疫牛的血清特异性抗体和中和抗体效价均无显著差异。综上所述,矿化VLPs对牛和猪均具有良好的免疫原性,不同血清型的矿化VLPs可以联合使用并且矿化壳层可增强VLPs诱导细胞免疫应答的能力。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 病毒样颗粒疫苗 生物矿化 动物免疫

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H9N2流感病毒样颗粒疫苗免疫效果的比较研究 被引量：2

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作者 杨刚强 《生物技术世界》 2015年第10期254-254,共1页

比较自制H9N2的油乳剂VLPs、VLPs和标准H9N2疫苗的免疫效果。取30只2周龄鸡,随机分为A、B、C三组,当母体抗体水平降为0时,对三组鸡进行皮下注射疫苗进行免疫。其中A组注射油乳剂VLPs,B组注射VLPs,C组注射标准流感疫苗,接种量为0.3ml/只... 比较自制H9N2的油乳剂VLPs、VLPs和标准H9N2疫苗的免疫效果。取30只2周龄鸡,随机分为A、B、C三组,当母体抗体水平降为0时,对三组鸡进行皮下注射疫苗进行免疫。其中A组注射油乳剂VLPs,B组注射VLPs,C组注射标准流感疫苗,接种量为0.3ml/只。用HI检测法检测抗体效价,每周测一次。结果表明:自制流感VLPs能够提供较高的抗体水平以及为机体提供较长的保护时间,且其提供的抗体保护与标准品在统计学上存在显著差异,油乳剂VLPs明显优于标准品。 展开更多

关键词 甲型流行性感冒病毒 病毒样颗粒疫苗 H9N2

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猪塞内卡谷病毒和圆环病毒2型嵌合病毒样颗粒疫苗的制备与抗体检测 被引量：1

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作者 何至远 吴冬荀 +4 位作者 张贺楠 王飞 吴珊珊 刘昕泽 肖进 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期27-31,37,共6页

为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系... 为了防控猪场塞内卡谷病毒(SVV)和圆环病毒2型(PCV2)的混合感染,本试验建立了一种猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗的制备方法并进行抗体检测。试验将猪SVV P 1基因部分VP 3序列替换为PCV2 ORF 2基因C端部分多肽序列,利用杆状病毒表达系统获得表达猪SVV、PCV2嵌合重组蛋白的重组杆状病毒,将病毒培养物纯化,经蛋白检测及电镜观察确定成功构建猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒(大小约30 nm)。结果表明,制备的猪SVV、PCV2嵌合病毒样颗粒疫苗可使试验猪同时产生针对猪SVV和PCV2的特异性抗体,充分显示出其作为一种针对猪场SVV和PCV2合并感染的安全有效疫苗的前景。 展开更多

关键词 猪塞内卡谷病毒 圆环病毒2型 嵌合病毒样颗粒疫苗 杆状病毒表达系统

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禽流感病毒样颗粒疫苗研究进展

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作者 张莹 王成玺 +1 位作者 王秀荣 李文超 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第22期31-35,共5页

禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)感染引起的一种禽类传染病,给家禽业造成了巨大的经济损失。AIV因抗原漂移和抗原转换可能会产生新的变异毒株和亚型,因此禽流感是在世界范围内需要被重点关注的禽类传染病。病毒样颗粒(... 禽流感是由禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)感染引起的一种禽类传染病,给家禽业造成了巨大的经济损失。AIV因抗原漂移和抗原转换可能会产生新的变异毒株和亚型,因此禽流感是在世界范围内需要被重点关注的禽类传染病。病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)能自组装成类似天然病毒结构的蛋白颗粒,易被免疫系统识别,但无遗传物质,安全性较高,是疫苗制备的新方向。禽流感VLPs是基于AIV蛋白模拟禽流感病毒外表面而构成的蛋白颗粒,具有很强的免疫原性,用其制成的疫苗具有无传染性、稳定和不易失活等优势,是一种安全性较高的疫苗类型。笔者就禽流感VLPs疫苗的研发基础、与疫苗有关的结构蛋白及疫苗的通用性和优缺点进行综述,以期对未来禽流感疫苗的研发和防控提供理论参考。 展开更多

关键词 禽流感 病毒样颗粒疫苗 禽流感疫苗 血凝素 神经氨酸酶 基质蛋白

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口蹄疫病毒矿化病毒样颗粒疫苗技术优点及其研制进展 被引量：1

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作者 张满义 梁军 +3 位作者 于三科 冯泽泰 蒲小峰 张志刚 《猪业科学》 2023年第12期66-68,共3页

引言。口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的急性传染病,广泛影响着牛、羊、猪等蹄类动物,其高传染性和快速传播特性对畜牧业造成了严重的经济损失和社会影响。为了有效控制口蹄疫的传播,疫苗的研发和应用一直是畜牧业防控口蹄疫的重要手段... 引言。口蹄疫是一种由口蹄疫病毒引起的急性传染病,广泛影响着牛、羊、猪等蹄类动物,其高传染性和快速传播特性对畜牧业造成了严重的经济损失和社会影响。为了有效控制口蹄疫的传播,疫苗的研发和应用一直是畜牧业防控口蹄疫的重要手段之一。近年来,矿化病毒样颗粒疫苗技术作为一种新兴的疫苗研发方法受到广泛关注。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 急性传染病 疫苗研发 病毒样颗粒疫苗 技术优点 畜牧业 传播特性 高传染性

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1种能抵抗致病性新城疫病毒且区分自然感染和疫苗免疫的病毒样颗粒疫苗研究

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作者 Park J K 刘萌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期173-173,共1页

在该研究中,作者利用昆虫细胞表达系统,构建了融合表达新城疫病毒(NDV)F蛋白和流感病毒M1蛋白的抗NDV的病毒样颗粒(VLPs)。本试验采用含有不同剂量(0.4、2、10、50μg VLP/0.5mL)的油乳剂新城疫病毒样颗粒疫苗免疫SPF鸡。免疫3周后,用... 在该研究中,作者利用昆虫细胞表达系统,构建了融合表达新城疫病毒(NDV)F蛋白和流感病毒M1蛋白的抗NDV的病毒样颗粒(VLPs)。本试验采用含有不同剂量(0.4、2、10、50μg VLP/0.5mL)的油乳剂新城疫病毒样颗粒疫苗免疫SPF鸡。免疫3周后,用商品化ELISA试剂盒检测该疫苗的免疫原性;利用新城疫强毒毒株进行功毒试验评价该疫苗的保护效果。结果表明,新城疫病毒样颗粒疫苗产生的抗新城疫抗体和攻毒保护效果是剂量依赖性的。虽然剂量为0.4或2μg的病毒样颗粒疫苗未达到高保护率,但是剂量为10或50μg的病毒样颗粒疫苗能完全保护攻毒后鸡胚,并能大大减少病毒散毒期。不仅如此,还能很容易地通过血凝抑制(HI)试验鉴别自然感染和疫苗免疫动物。结果表明,在家禽范围内利用新城疫病毒样颗粒疫苗可能是未来防控NDV最有潜力的策略。 展开更多

关键词 新城疫病毒 病毒样颗粒疫苗 自然感染 疫苗 免疫

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HPV病毒样颗粒疫苗成功地刺激了特异性体液与细胞的免疫应答

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《生物制品快讯》 2003年第7期15-15,共1页

关键词 HPV病毒样颗粒疫苗 特异性体液 特异性细胞 免疫应答 人乳头瘤病毒

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病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的应用

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作者 杨希川 《中国猪业》 2023年第5期107-110,共4页

一些猪病如猪瘟、猪圆环病毒病等,其病毒可能会通过肉类食品传播给人类,对人体健康造成威胁,且危害公共卫生安全。因此,猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位,不仅关系到养殖户的经济效益、我国肉类供应稳定,还关系着国家食品安全与... 一些猪病如猪瘟、猪圆环病毒病等,其病毒可能会通过肉类食品传播给人类,对人体健康造成威胁,且危害公共卫生安全。因此,猪病防控在养猪生产中占有至关重要的地位,不仅关系到养殖户的经济效益、我国肉类供应稳定,还关系着国家食品安全与公共健康。病毒样颗粒(VLPs)疫苗具有安全性高、免疫原性好等优势,是目前研究预防动物病毒性疾病的疫苗的最热关注点。文章结合实践经验,对病毒样颗粒及其表达系统进行简要介绍,并对病毒样颗粒疫苗在多种猪病防控中的应用情况进行综述,包括猪细小病毒病、猪圆环病毒病、猪传染性胃肠炎、猪乙型脑炎、猪瘟等,旨在为病毒样颗粒疫苗在猪病防控中的推广与使用提供更多依据。 展开更多

关键词 病毒样颗粒疫苗 猪病防控 猪细小病毒病 猪瘟

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改良霍乱全毒素CT-E29H可增强对重组诺沃克病毒样颗粒疫苗的免疫应答

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作者 栗克喜 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 2004年第2期91-92,共2页

关键词 霍乱全毒素 CT—E29H 重组诺沃克病毒样颗粒疫苗 免疫应答

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杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)表达的动物病毒样颗粒及疫苗研究进展

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作者 王炎 高婉宁 +3 位作者 范益阳 玉妹 张德荣 柏家林 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第1期203-208,共6页

杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自... 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自组装形成的纳米颗粒,由于缺乏病毒遗传物质,其安全性较高。VLP表面抗原排列高度有序,可有效诱导免疫反应,是一种新型的亚单位疫苗。本文综述了IBEVS在动物VLP疫苗中的应用现状,分析了当前IBEVS存在的问题及其解决策略,为动物VLP疫苗的进一步开发提供参考。 展开更多

关键词 病毒样颗粒 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS) 动物病毒样颗粒疫苗

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重组病毒样颗粒疫苗原液中苯甲基磺酰氟残留量反向高效液相色谱检测方法的建立及验证

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作者 秦海艳 马素娟 +5 位作者 张志豪 张钧淇 张继文 李晨 雷清 杨俊杰 《中国生物制品学杂志》 2025年第3期323-329,共7页

目的建立重组病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗原液中苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride,PMSF)残留量检测的反向高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并对其进行验证,... 目的建立重组病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗原液中苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride,PMSF)残留量检测的反向高效液相色谱(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)法,并对其进行验证,以期用于重组VLP疫苗原液中PMSF残留量的检测。方法通过筛选检测波长、流速、进样量和色谱柱建立PMSF残留量检测的RP-HPLC法,并对方法的专属性、线性和范围、定量限、检测限、准确性、精密度和耐用性进行验证。用建立的方法检测3批重组戊型肝炎疫苗原液PMSF残留量。结果建立的RP-HPLC法,色谱柱为Chrom-Core 300 C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温为25℃;检测波长为210 nm;进样量为100μL;以0.1%三氟乙酸(trifluoroacetic acid,TFA)/水和0.1%TFA/乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1 mL/min;检测时间为18 min。PMSF对照品及含PMSF的疫苗原液在5.0 min附近出现吸收峰,而疫苗原液及原液缓冲液未出现吸收峰;PMSF对照品在0~5.0μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,R2为0.999;该方法定量限为0.250μg/mL,检测限为0.125μg/mL;高、中、低浓度PMSF对照品回收率均在90%~110%之间;仪器、样品重复性以及中间精密度测定的保留时间、峰高和峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均<5%;流动相TFA浓度0.09%、0.1%和0.11%及柱温20、25和30℃条件下测定的保留时间、峰高和峰面积的RSD均<5%。3批重组戊型肝炎疫苗原液均未检出PMSF。结论建立的RP-HPLC法专属性、线性和耐用性良好,准确性和精密度高,可用于重组VLP疫苗原液中PMSF残留量的检测。 展开更多

关键词 苯甲基磺酰氟 反向高效液相色谱 病毒样颗粒疫苗

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大肠杆菌表达动物病毒样颗粒疫苗的研究进展 被引量：1

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作者 李幽幽 扶星星 +4 位作者 朱玲 王永胜 吴福文 张海 徐志文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期955-961,共7页

大肠杆菌表达宿主因其表达量高、周期短、成本低等诸多优势而被广泛用作异源蛋白质的表达。据统计,超过30%的重组蛋白质药物和50%重组蛋白质的制备是使用大肠杆菌作为表达宿主的。大肠杆菌是低成本表达重组蛋白的首选生物之一,这对于兽... 大肠杆菌表达宿主因其表达量高、周期短、成本低等诸多优势而被广泛用作异源蛋白质的表达。据统计,超过30%的重组蛋白质药物和50%重组蛋白质的制备是使用大肠杆菌作为表达宿主的。大肠杆菌是低成本表达重组蛋白的首选生物之一,这对于兽用疫苗的生产尤其重要。本文系统阐述了大肠杆菌表达系统在动物病毒样颗粒疫苗应用中的生产和研究进展,并且总结了大肠杆菌表达系统在疫苗应用中存在的问题及现有的解决策略,以期为以大肠杆菌作为表达宿主的动物病毒样颗粒疫苗研制提供参考。 展开更多

关键词 大肠杆菌 表达宿主 病毒样颗粒疫苗

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病毒样颗粒疫苗研究进展

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作者 张磊 杨艺凡 +2 位作者 马茜 张永峰 汪洋 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1404-1414,共11页

病毒样颗粒(VLPs)是一类能够自行组装,具有重复抗原表位,能够刺激机体免疫反应且不含病毒遗传物质的蛋白纳米颗粒。在疫苗研发、药物靶向运输和生物工程材料方面VLPs具有重要的研发价值和应用潜力。本研究对VLPs疫苗诱导免疫反应的机制... 病毒样颗粒(VLPs)是一类能够自行组装,具有重复抗原表位,能够刺激机体免疫反应且不含病毒遗传物质的蛋白纳米颗粒。在疫苗研发、药物靶向运输和生物工程材料方面VLPs具有重要的研发价值和应用潜力。本研究对VLPs疫苗诱导免疫反应的机制、现有的VLPs表达技术、防治病毒感染等方面的研究进展进行了综述,为VLPs疫苗的设计和研发提供参考。 展开更多

关键词 病毒样颗粒疫苗 免疫反应 蛋白纳米颗粒

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