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细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21在HHV-8病毒裂解复制周期的作用
1
作者 张庆 秦苏萍 +3 位作者 李小翠 王晓天 刘晓梅 周峰 《徐州医科大学学报》 CAS 2024年第2期95-99,共5页
目的研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂SAHA预处理后,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK... 目的研究细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21对人类疱疹病毒8型(human herpesvirus 8,HHV-8)病毒裂解复制周期的影响。方法组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂SAHA预处理后,倒置荧光显微镜观察红色荧光蛋白(RFP)阳性的iSLK.219细胞数,实时定量PCR检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8病毒相关基因的mRNA水平。脂质体转染p21-siRNA后,免疫印迹法检测iSLK.219和TREx-K-Rta BCBL-1细胞中p21蛋白表达,计算RFP阳性iSLK.219细胞百分率,检测TREx-K-Rta BCBL-1细胞中ORF50和PAN的mRNA水平,CCK-8法和台盼蓝染色观察细胞存活情况。结果SAHA显著增强iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50、PAN及K8.1的mRNA水平和p21蛋白表达,差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA沉默p21后,iSLK.219细胞RFP阳性率、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中HHV-8裂解复制周期相关基因ORF50和PAN mRNA水平显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),且保护SAHA介导的TREx-K-Rta BCBL-1细胞死亡。结论抑制HDAC活性通过调控p21促进HHV-8病毒裂解复制。 展开更多
关键词 人类疱疹病毒8型 病毒裂解复制周期 组蛋白去乙酰化酶 细胞周期蛋白激酶抑制调控蛋白p21 细胞死亡
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细胞周期蛋白激酶9（CDK9）对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）裂解复制周期的影响
2
作者 张庆 史震 +3 位作者 李小翠 王晓天 薛敏 周峰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期810-815,共6页
目的 探讨细胞周期蛋白激酶9（cyclin-dependent kinase 9，CDK9）在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（Kaposi′s sarcoma-associated herpesvirus，KSHV）裂解复制周期中的作用。方法 分别应用CDK9特异性抑制剂FIT-039处理或CDK9小干扰RNA（si... 目的 探讨细胞周期蛋白激酶9（cyclin-dependent kinase 9，CDK9）在卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（Kaposi′s sarcoma-associated herpesvirus，KSHV）裂解复制周期中的作用。方法 分别应用CDK9特异性抑制剂FIT-039处理或CDK9小干扰RNA（siRNA）转染iSLK.219及TREx-K-Rta BCBL-1细胞，四环素（Dox）或佛波酯（TPA）和丁酸钠刺激48 h后，分别采用荧光显微镜和实时定量PCR（qPCR）方法观察红色荧光蛋白（RFP，病毒裂解复制）阳性细胞数目及KSHV相关基因的mRNA转录水平。染色质免疫沉淀（ChIP）试验检测KSHV PAN启动子上RNA PolⅡ及其磷酸化CTD-S2的富集含量。结果 FIT-039处理和CDK9-siRNA转染后，iSLK.219细胞RFP阳性率显著降低、TREx-K-Rta BCBL-1细胞中KSHV裂解复制周期相关基因ORF50、PAN及K2的mRNA转录水平明显下降。且FIT-039处理后，TREx-K-Rta BCBL-1细胞中KSHV PAN启动子上结合的RNA PolⅡ及其磷酸化CTD-S2含量显著下降。结论 CDK9可能通过磷酸化RNA PolⅡ丝氨酸调控KSHV病毒裂解复制。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白激酶9 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 病毒裂解复制周期 基因转录延伸
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