[目的]研究氯化锰对人骨髓神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)线粒体损伤、氧化应激、多巴胺分泌及PARK2表达的影响。[方法]0、100、300、500μmol/L浓度氯化锰染毒SH-SY5Y细胞24 h后,用MTT法测细胞抑制率(反映线粒体损伤情况),石墨炉原子吸...[目的]研究氯化锰对人骨髓神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)线粒体损伤、氧化应激、多巴胺分泌及PARK2表达的影响。[方法]0、100、300、500μmol/L浓度氯化锰染毒SH-SY5Y细胞24 h后,用MTT法测细胞抑制率(反映线粒体损伤情况),石墨炉原子吸收光谱法测定细胞内锰浓度,高度水溶性四唑盐(WST-1)法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,反相高效液相色谱-荧光法测定细胞内多巴胺(DA)含量,实时荧光定量-PCR检测PARK2 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测Parkin蛋白表达。[结果]与对照组比较,MnCl2浓度为300、500μmol/L时,细胞抑制率(线粒体损伤)增高(P<0.01)。与对照组比较,染锰组细胞内锰浓度升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,MnCl2浓度为300、500μmol/L时,SOD活性和DA含量降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01);细胞PARK2 m RNA表达和Parkin蛋白表达降低(P<0.01)。相关性分析显示,PARK2 m RNA表达与细胞抑制率(线粒体损伤)、细胞内锰浓度及MDA含量呈负相关,r值分别为-0.872、-0.880、-0.862(均P<0.01);PARK2 m RNA表达与SOD活性、DA含量以及Parkin蛋白表达呈正相关,r值分别为0.879、0.859、0.809(均P<0.01)。[结论]氯化锰暴露可引起SH-SY5Y细胞的线粒体损伤、氧化应激、DA分泌减少和PARK2表达下降。展开更多
文摘[目的]研究氯化锰对人骨髓神经母细胞瘤细胞株(SH-SY5Y)线粒体损伤、氧化应激、多巴胺分泌及PARK2表达的影响。[方法]0、100、300、500μmol/L浓度氯化锰染毒SH-SY5Y细胞24 h后,用MTT法测细胞抑制率(反映线粒体损伤情况),石墨炉原子吸收光谱法测定细胞内锰浓度,高度水溶性四唑盐(WST-1)法测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,反相高效液相色谱-荧光法测定细胞内多巴胺(DA)含量,实时荧光定量-PCR检测PARK2 m RNA表达,蛋白免疫印迹法检测Parkin蛋白表达。[结果]与对照组比较,MnCl2浓度为300、500μmol/L时,细胞抑制率(线粒体损伤)增高(P<0.01)。与对照组比较,染锰组细胞内锰浓度升高(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,MnCl2浓度为300、500μmol/L时,SOD活性和DA含量降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01);细胞PARK2 m RNA表达和Parkin蛋白表达降低(P<0.01)。相关性分析显示,PARK2 m RNA表达与细胞抑制率(线粒体损伤)、细胞内锰浓度及MDA含量呈负相关,r值分别为-0.872、-0.880、-0.862(均P<0.01);PARK2 m RNA表达与SOD活性、DA含量以及Parkin蛋白表达呈正相关,r值分别为0.879、0.859、0.809(均P<0.01)。[结论]氯化锰暴露可引起SH-SY5Y细胞的线粒体损伤、氧化应激、DA分泌减少和PARK2表达下降。
