神经营养素4在面神经的转运研究 被引量：5

1

作者 李云春 杨晓川 +4 位作者 李林 王全林 何刚 高炳庆 林代诚 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期353-355,共3页

目的　探讨面神经再生微环境及神经营养素 4(NT- 4)对神经细胞的作用。方法　将新西兰兔一侧面神经干横断后置入硅胶再生室 ,再将 1 3 1 I- NT- 4(10μl/只 ,约 7.4MBq)注入其再生室。另取 1只家兔分别在注药后不同时刻行头部冠状位平... 目的　探讨面神经再生微环境及神经营养素 4(NT- 4)对神经细胞的作用。方法　将新西兰兔一侧面神经干横断后置入硅胶再生室 ,再将 1 3 1 I- NT- 4(10μl/只 ,约 7.4MBq)注入其再生室。另取 1只家兔分别在注药后不同时刻行头部冠状位平面显像 ,其余取面神经干、脑干和对侧面神经干 ,利用放射性核素示踪技术测定 NT- 4在面神经的转运情况。另取 1只置入再生室的兔 ,同时在再生室注入 1m g脑源性神经营养因子 (BDNF)和7.4MBq1 3 1 I- NT- 4后 ,不同时刻行头部冠状位平面显像。结果　注药后 4小时就有 5 .0 8%的 1 3 1 I- NT- 4转运到面神经干中 ,8、12小时达高峰 ,分别为 2 0 .5 8%和 2 2 .74% ;8小时有 34 .75 %转运至脑干 ,12小时转运至脑干的量达45 .5 7% ,且 1 3 1 I- NT- 4在面神经的转运受 BDNF的明显抑制。结论　 NT- 展开更多

关键词 神经营养素4 面神经 受体 转运 面神经再生

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人神经营养素4治疗大鼠坐骨神经损伤效果观察 被引量：3

2

作者 王卒平 刘啟蒙 +1 位作者 况勇 张冬青 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期20-23,共4页

目的观察人神经营养素4在受损坐骨神经恢复和再生过程中的作用,为临床治疗提供参考。方法Wistar大鼠38只,随机均分2组,常规麻醉处理建立坐骨神经损伤模型,实验组局部注射人神经营养素4,对照组注射等量生理盐水。术后第4周、第20周观察... 目的观察人神经营养素4在受损坐骨神经恢复和再生过程中的作用,为临床治疗提供参考。方法Wistar大鼠38只,随机均分2组,常规麻醉处理建立坐骨神经损伤模型,实验组局部注射人神经营养素4,对照组注射等量生理盐水。术后第4周、第20周观察两组肢体一般状况、神经功能指数、及腓肠肌中段组织学观察肌组织间质,胶原纤维,肌细胞,肌纤维密度、肌纤维直径。结果在20周后,对照组腓肠肌萎缩明显;实验组肢恢复一定行动能力,腓肠肌萎缩不明显;在第20周以后,实验组神经功能指数、肌纤维密度、肌纤维直径大于对照组;组织学观察在第20周以后,对照组肌组织间质水肿,胶原纤维排列稀疏、溶解,细胞萎缩较为明显,实验组肌纤维呈圆形或多边形,肌原纤维呈红色点状,核位于边缘,呈圆形。结论神经营养素-4对于大鼠坐骨神经损伤具有一定的修复作用,不仅能恢复由于坐骨神经损伤导致的运动功能障碍,还能修复坐骨神经对于骨骼肌的神经营养作用。 展开更多

关键词 人神经营养素4 坐骨神经 神经损伤 修复

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腺伴随病毒介导的神经营养素4基因对视网膜神经节细胞的转染 被引量：2

3

作者 李海燕 赵家良 张华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第7期533-536,共4页

目的应用重组腺伴随病毒载体介导的神经营养素4(rAAV-NT4)基因转染鼠视网膜神经节细胞(RGCs),探讨转染后对细胞生长活性和凋亡的影响。方法应用rAAV-NT4转染培养的RGCs,RT-PCR检测外源性NT4基因在RGCs中的表达,ELISA法检测细胞培养液中... 目的应用重组腺伴随病毒载体介导的神经营养素4(rAAV-NT4)基因转染鼠视网膜神经节细胞(RGCs),探讨转染后对细胞生长活性和凋亡的影响。方法应用rAAV-NT4转染培养的RGCs,RT-PCR检测外源性NT4基因在RGCs中的表达,ELISA法检测细胞培养液中NT4的质量浓度,MTT法分析转染细胞生物活性,流式细胞学法检测转染细胞的凋亡比率。结果RT-PCR显示转染细胞表达外源性NT4基因,转染14d后培养液中NT4的质量浓度与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。转染6d和9dOD值与对照组间差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。rAAV-NT4转染细胞与对照组的凋亡比率差异无统计学意义(P>0.05)。结论rAAV-NT4可有效转染鼠RGCs,转染细胞可表达外源性NT4基因,生长活性改善。 展开更多

关键词 重组腺伴随病毒载体 神经营养素4 视网膜神经节细胞

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牦牛小脑不同区域神经营养素-4及其受体的表达特征与定位研究

4

作者 刘珊珊 杜晓华 +2 位作者 刘霞 吴亚娟 郑丽平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期852-860,共9页

神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛(Bos grunniens)和平原黄牛(Bos taurus)小脑为研究对象,... 神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛(Bos grunniens)和平原黄牛(Bos taurus)小脑为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹技术(WB)、苏木精-伊红染色(HE)和免疫组织化学(IHC)对NT-4和NTRK2在牦牛与黄牛小脑不同区域中的表达分布进行分析。qRT-PCR和WB结果表明,NT-4基因和蛋白在牦牛小脑半球皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05);NTRK2基因和蛋白在牦牛小脑蚓部皮质中表达量最高,显著高于其他组织(P<0.05)。与黄牛相比,牦牛NT-4蛋白在小脑各区域中的表达均显著高于黄牛(P<0.05);牦牛NTRK2蛋白在蚓部髓质和小脑半球髓质中的表达量低于黄牛或无差异,其余区域均显著高于黄牛(P<0.05)。IHC结果显示,NT-4和NTRK2蛋白阳性表达特征基本一致,皮质区主要分布于分子层的篮状细胞、浦肯野细胞层以及颗粒细胞层,而髓质区则散在分布于神经胶质细胞以及神经纤维中。由上述结果可知,NT-4和NTRK2在小脑各区域的表达差异可能与其参与脑组织生理功能以及适应高原低氧环境有关。在低氧环境下,NT-4和NTRK2通过上调激活相关通路以发挥内源性神经保护作用,进而保护脑组织免受低氧损伤。本研究结果可为探究牦牛脑组织低氧适应机制提供基础。 展开更多

关键词 牦牛 神经营养素-4 神经营养性酪氨酸激酶受体2 小脑

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神经营养素-4在成年猴脑的分布 被引量：2

5

作者 李力燕 王廷华 +3 位作者 杨正伟 李朗 刘宗良 陈彦红 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期25-28,共4页

目的 :为探讨神经营养素 4(Neurotrophin 4,NT 4)在成年灵长类动物猴脑的分布及功能提供有用的形态学依据。方法 :免疫组织化学SP法。结果 :NT 4 IR(Neurotrophin 4immunoreactive)分布于大脑皮层Ⅲ Ⅴ层的部分神经元胞体及突起以及白... 目的 :为探讨神经营养素 4(Neurotrophin 4,NT 4)在成年灵长类动物猴脑的分布及功能提供有用的形态学依据。方法 :免疫组织化学SP法。结果 :NT 4 IR(Neurotrophin 4immunoreactive)分布于大脑皮层Ⅲ Ⅴ层的部分神经元胞体及突起以及白质内少量的神经胶质细胞 ;小脑皮质及白质内的部分神经元 ;海马CA1、CA2 、CA3区的部分神经元 ;此外豆状核、尾状核、脑桥核、前庭神经核、薄、契束核、副神经核等可见散在阳性反应细胞及交织成网的纤维。结论 :NT 4 IR广泛地分布于猴脑的多种组织和细胞 。 展开更多

关键词 神经营养素-4 猴 脑 大脑皮质 海马 小脑 胶质细胞

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神经营养素-4(NT-4)在昆虫杆状病毒表达系统中的克隆与表达 被引量：4

6

作者 马晓骊 黄秉仁 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期141-144,共4页

目的 通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法 通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生... 目的 通过昆虫杆状病毒表达系统的优势，表达出具有生物学活性的神经营养素-4（ hNT-4）蛋白。方法 通过 PCR方法获得 hNT-4成熟肽的基因，将其连接到昆虫表达载体 pAcGP67B上，在昆虫细胞 Sf9中进行表达。对表达产物进行免疫原性和生物学活性测定。结果 获得 hNT-4蛋白的表达产物， SDS-PAGE电泳显示表达产物相对分子质量为 15 000。 经 Western-blot验证，表达上清及细胞全蛋白均有一条能与抗人 NT-4抗体发生特异性免疫反应的条带。经 PC12细胞测定，表达上清中的 rNT-4蛋白具有明确的生物学活性。结论 hNT-4在昆虫杆状病毒表达系统中的表达为今后进一步深入研究 hNT-4的功能及其在临床中的应用提供了条件。 展开更多

关键词 神经营养素-4 载体PacGP67B Sf 细胞 昆虫杆状病毒 表达系统 克隆表达

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移植神经营养素-4基因工程细胞对脊髓前角神经元的保护作用 被引量：1

7

作者 侍坚 曲伸 +2 位作者 路长林 何小龙 王成海 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期128-132,共5页

用重组逆转录病毒介导的体外神经营养素４（ＮＴ４）基因转移方法，制备高表达ＮＴ４基因工程细胞并移植大鼠坐骨神经离断处。尼氏染色和ＣｈＥ染色的结果表明，移植ＮＴ４基因工程细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变... 用重组逆转录病毒介导的体外神经营养素４（ＮＴ４）基因转移方法，制备高表达ＮＴ４基因工程细胞并移植大鼠坐骨神经离断处。尼氏染色和ＣｈＥ染色的结果表明，移植ＮＴ４基因工程细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变有显著的改善作用，而且这种作用可以维持三个月。 展开更多

关键词 神经营养素4 运动神经元 外周神经损伤

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人神经营养素-4成熟蛋白基因克隆 被引量：1

8

作者 张华 胡海涛 +13 位作者 任惠民 刘勇 朱宏亮 杨广笑 王全颍 孙乃学 Zhang Hua Hu Haitao Ren Huimin Liu Yong Zhu Hongliang Yang Guangxiao Wang Quanying Sun Naixue 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期439-443,共5页

本研究的目的是克隆人神经营养素-4成熟蛋白基因(mhNT-4)并进行序列分析。应用PCR技术,以正常人血淋巴细胞染色体DNA为模板,扩增出人神经营养素-4(hNT-4)成熟蛋白编码基因。将所得基因片段重组于pGEM-T Easy质粒,筛选得到含人mhNT-4基... 本研究的目的是克隆人神经营养素-4成熟蛋白基因(mhNT-4)并进行序列分析。应用PCR技术,以正常人血淋巴细胞染色体DNA为模板,扩增出人神经营养素-4(hNT-4)成熟蛋白编码基因。将所得基因片段重组于pGEM-T Easy质粒,筛选得到含人mhNT-4基因的阳性克隆。采用Sanger单链末端终止法测出全部的核苷酸序列。所得到的序列与国外文献所报道的结果(GenBank,M86528)完全相同。mhNT-4成熟蛋白基因的成功克隆,为研究其在原核细胞中的表达提供了有利条件。本文结果也提示不同人种间及不同个体间hNT-4成熟蛋白基因是相对保守的。 展开更多

关键词 NT-4 神经营养素-4 蛋白基因 人血 正常人 阳性克隆 原核细胞 人种 蛋白编码基因 染色体DNA

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神经营养素—4基因工程细胞的构建 被引量：3

9

作者 侍坚 何小龙 《中国神经科学杂志》 CSCD 1998年第3期134-139,共6页

构建了含有大鼠ＮＴ－４基因的双拷贝逆转病毒载体，用电穿孔方法转染ＰＡ３１７包装细胞，获得重组逆转录病毒，再用该病毒感染肌母细胞（Ｌ－６ＴＧ）筛选出表达最高的作为ＮＴ－４基因工程细胞，表达的ＮＴ－４蛋白经ＰＣ１２细胞检... 构建了含有大鼠ＮＴ－４基因的双拷贝逆转病毒载体，用电穿孔方法转染ＰＡ３１７包装细胞，获得重组逆转录病毒，再用该病毒感染肌母细胞（Ｌ－６ＴＧ）筛选出表达最高的作为ＮＴ－４基因工程细胞，表达的ＮＴ－４蛋白经ＰＣ１２细胞检测具有神经营养活性，表达量为：５００Ｕ／（１０＾６ｃｅｌｌｓ／２４ｈ）。 展开更多

关键词 神经营养素-4 逆转录病毒 基因工程

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人神经营养素-4的克隆及其在原核细胞的表达 被引量：1

10

作者 王小标 陈昌杰 《蚌埠医学院学报》 CAS 2001年第1期7-8,I002,共3页

目的：体外扩增人神经营养素－4(NT-4)基因，经克隆后在原核细胞中表达并鉴定人重组NT-4，为研究其生物学特性及临床应用奠定基础。方法：以人类基因组DNA为模板，扩增NT-4成熟活性蛋白的DNA编码序列，将此DNA片段克隆到载体PBV220中，... 目的：体外扩增人神经营养素－4(NT-4)基因，经克隆后在原核细胞中表达并鉴定人重组NT-4，为研究其生物学特性及临床应用奠定基础。方法：以人类基因组DNA为模板，扩增NT-4成熟活性蛋白的DNA编码序列，将此DNA片段克隆到载体PBV220中，对重组质粒进行PCR筛选和限制性酶切分析，确定后将该重组质粒转化到大肠杆菌DH5α进行诱导表达。用抗NT-4抗体进行Western blot鉴定重组蛋白。结果：体外成功扩增NT-4基因，转染的大肠杆菌经诱导后表达出能被抗NT-4抗体识别的重组蛋白，其表达量为15%。结论：在原核细胞能成功表达NT-4。 展开更多

关键词 神经营养素-4 原核细胞 克隆 聚合酶链反应

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神经营养素-4在成年猴脑中的分布特征及其与成体中枢神经系统的功能关系(英文)

11

作者 李力燕 王廷华 +4 位作者 郭建辉 杨正伟 李朗 刘宗良 陈彦红 《中国临床康复》 CSCD 2004年第10期1954-1955,共2页

背景:神经营养素-4(NT-4,Neurotrophin-4)在神经系统的发育和成体中均起重要作用,不仅对某些特定亚群神经元的存活、增殖、分化及轴突可塑性有一定的调节作用,而且对某些神经元的生存也是必需的。但这些资料大多来源于体外实验,其在体... 背景:神经营养素-4(NT-4,Neurotrophin-4)在神经系统的发育和成体中均起重要作用,不仅对某些特定亚群神经元的存活、增殖、分化及轴突可塑性有一定的调节作用,而且对某些神经元的生存也是必需的。但这些资料大多来源于体外实验,其在体内的作用尚不十分清楚,NT-4在体内的分布也少见报道,在高等灵长类猴脑的研究尚未见报道。目的:为探讨NT-4在成年灵长类动物猴脑的分布及为进一步研究NT-4与成体中枢神经系统的功能关系提供了有用的形态学依据。设计:用PBS代替一抗的实验对照。地点和材料:实验在昆明医学院神经科学研究所实验室完成。动物来自中科院昆明动物研究所的成年雄性恒河猴(体质量平均6kg)7只。方法:采用氯氨酮肌肉注射麻醉,Zamboin’s液心脏灌注固定,取脑组织各部位行冷冻切片,厚25μm。免疫组织化学SP法,抗体为兔抗NT-4多克隆抗体。主要观察指标:光镜下于猴脑的不同部位观察NT-4-IR阳性物(呈棕色串珠状、丝状或颗粒状)。对照实验用0.05mol/LPBS代替一抗行免疫组化染色。结果:NT-4-IR(Neurotrophin-4immunoreactive)分布于大脑皮层Ⅲ～V层的部分神经元胞体及突起以及白质内少量的神经胶质细胞;小脑皮质及白质内的部分神经元;海马CA1、CA2、CA3区的部分神经元;此外豆状核、尾状核、脑桥核、前庭神? 展开更多

关键词 神经营养素-4 成年猴脑 分布特征 中枢神经系统 神经元

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人神经营养素-4基因的克隆及表达

12

作者 崔羽 常洪起 +4 位作者 路明霞 李景鹏 周文婷 阳燕 王立达 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第5期367-370,共4页

目的通过基因工程的方法扩增人神经营养素-4(hNT-4)cDNA,在大肠杆菌中表达hNT-4,为研究hNT-4的生物学作用提供材料。方法以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hNT-4 cDNA,将其插入的质粒pGEM-T中。将经过序列分析确定的hNT-4 cDNA插入... 目的通过基因工程的方法扩增人神经营养素-4(hNT-4)cDNA,在大肠杆菌中表达hNT-4,为研究hNT-4的生物学作用提供材料。方法以人胎脑RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增hNT-4 cDNA,将其插入的质粒pGEM-T中。将经过序列分析确定的hNT-4 cDNA插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组表达载体pGEX-6p-1-NT-4,用SDS-PAGE法测定融合蛋白在大肠杆菌中的表达。结果经序列测定分析,克隆的hNT-4 cDNA核苷酸序列与已发表序列(GenBank,M86528)完全一致,并获得了高效表达hNT-4的重组菌株。结论体外成功扩增hNT-4 cDNA,并在原核细胞中高效表达了hNT-4。 展开更多

关键词 人神经营养素-4 基因克隆 原核表达

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人神经营养素-4基因的扩增及序列分析 被引量：1

13

作者 陈昌杰 何蕴韶 《四川解剖学杂志》 2000年第3期133-135,共3页

从人基因组 DNA获取神经营养素 - 4(neurotrophin- 4 ,NT- 4 )基因 ,并对该目的基因进行序列测定 ,本实验直接从人脑组织中提取基因组DNA,根据人神经营养素 - 4的 c DNA序列 ,设计一对寡核苷酸引物 ,采用 PCR,获得人 NT- 4基因 ,用DNA... 从人基因组 DNA获取神经营养素 - 4(neurotrophin- 4 ,NT- 4 )基因 ,并对该目的基因进行序列测定 ,本实验直接从人脑组织中提取基因组DNA,根据人神经营养素 - 4的 c DNA序列 ,设计一对寡核苷酸引物 ,采用 PCR,获得人 NT- 4基因 ,用DNA序列分析 NT- 4基因。结果 ,我们获取的人NT- 4基因与文献报道有五个碱基不同。我们认为 :直接采用 PCR来获取目的基因 ,出现碱基错配的可能性较大 ;测序仪器和实验条件对结果有一定影响关系。 展开更多

关键词 神经营养素-4 PCR 序列分析

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人神经营养素-4基因的原核表达与纯化

14

作者 孙元田 肖冰 +3 位作者 徐洁杰 潘克俭 陈平 胡火珍 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期588-591,共4页

以人外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出神经营养素4基因(NT 4)成熟蛋白的DNA序列,并将其克隆到表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经异丙基βD 半乳糖苷(Isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后高效特... 以人外周血淋巴细胞基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出神经营养素4基因(NT 4)成熟蛋白的DNA序列,并将其克隆到表达载体pET32a中,在大肠杆菌BL21(DE3)中经异丙基βD 半乳糖苷(Isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后高效特异表达了分子量约为35kD的蛋白,诱导表达的蛋白主要存在于包涵体中,经Ni2+ NTA树脂亲和层析纯化,得到了纯度达94%的NT 4成熟蛋白的融合蛋白为进一步研究NT 展开更多

关键词 人神经营养素-4 原核表达 融合蛋白 分离纯化

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神经营养素-4及其受体的研究进展

15

作者 王京 黄秉仁 田竞生 《医学研究杂志》 1999年第7期22-25,共4页

神经营养素-4(NT-4)作为神经营养素家族的新成员,与其他家族成员-神经生长因子(NGF),脑源性神经生长因子(BDNF),神经营养素-3(NT-3),神经营养素-5(NT-5),神经营养素-6(NT-6)一起对神经元的生存及发育起重要作用。近来的研究结果显示,它... 神经营养素-4(NT-4)作为神经营养素家族的新成员,与其他家族成员-神经生长因子(NGF),脑源性神经生长因子(BDNF),神经营养素-3(NT-3),神经营养素-5(NT-5),神经营养素-6(NT-6)一起对神经元的生存及发育起重要作用。近来的研究结果显示,它在基因结构,氨基酸序列,生理功能等方面与其他家族成员相比有进化的保守性,又有自己进化的特殊性。它在哺乳动物体内有广泛表达,通过低亲和力NGF受体(P75^(LNCFR)),高亲和力trkA受体,高亲和力trkB受体发挥作用。NT-4在神经退行性疾病中的临床应用价值也在研究中。 展开更多

关键词 神经营养素-4 神经营养素家族 受体 神经退行性疾病

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移植NT-4基因修饰细胞对大鼠前角运动神经元损伤的保护作用 被引量：3

16

作者 侍坚 路长林 +2 位作者 曲伸 何小龙 王成海 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期158-160,共3页

目的：观察神经营养素４（ＮＴ－４）基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用。方法：应用逆转录病毒介导的体外ＮＴ－４基因转移方法，制备高表达ＮＴ－４的基因修饰细胞。离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型... 目的：观察神经营养素４（ＮＴ－４）基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用。方法：应用逆转录病毒介导的体外ＮＴ－４基因转移方法，制备高表达ＮＴ－４的基因修饰细胞。离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型，右侧作为对照，在离断处移植ＮＴ－４基因修饰细胞。观察大鼠脊髓前角运动神经元尼氏染色和胆碱酯酶染色的变化。结果：在移植ＮＴ－４基因修饰细胞组和对照组间，尼氏和胆碱酯酶染色有显著性差异。结论：移植ＮＴ－４基因修饰细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变有显著的改善作用。 展开更多

关键词 神经营养素4 运动神经元损伤 基因修饰 大鼠

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NT-3、NT-4和BDNF在面神经逆行转运的动力学比较 被引量：2

17

作者 李云春 陈泽莲 +5 位作者 王全林 梁正路 匡安仁 何刚 高炳庆 林代诚 《华西医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期535-537,共3页

目的　研究神经营养素 3(NT- 3)、神经营养素 4(NT- 4)和脑源性神经营养因子 (BDNF)在面神经中的逆行转运动力学特点。方法　将新西兰兔一侧面神经干横切断后置入硅胶再生室 ,再将 1 2 5I标记的 NT- 3或NT- 4或 BDNF或人血清白蛋白 (HSA... 目的　研究神经营养素 3(NT- 3)、神经营养素 4(NT- 4)和脑源性神经营养因子 (BDNF)在面神经中的逆行转运动力学特点。方法　将新西兰兔一侧面神经干横切断后置入硅胶再生室 ,再将 1 2 5I标记的 NT- 3或NT- 4或 BDNF或人血清白蛋白 (HSA) (10μl/只 ,约 3.7MBq)注入再生室 ,在注药后于不同时刻取兔面神经干和脑干面神经运动核 ,测定其摄取率。利用 3P87动力学处理程序分析计算各标记物在面神经的动力学参数。结果　面神经逆行转运神经营养素的转运量 :NT- 3>BDNF>NT- 4(P <0 .0 5 ) ,转运速率 :NT- 4>NT- 3>BDNF (P <0 .0 5 )。结论　研究结果提供了神经营养素在面神经逆行转运的动力学特点。 展开更多

关键词 神经营养素3 神经营养素4 脑源性神经营养素 逆行转运动学 面神经

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面神经损伤大鼠面神经核团中NT-4 mRNA蛋白质表达变化及意义

18

作者 王斐 尹浩军 +1 位作者 李英 周红星 《中国实用神经疾病杂志》 2016年第4期38-40,共3页

目的分析面神经损伤大鼠面神经核团中神经营养素-4(NT-4)mRNA及蛋白质表达变化及意义。方法选取50只Wistar大鼠,所有大鼠右侧制造面神经骨管内挤压伤模型,左侧作为自身对照。分别于处理后第1天、第7天、第14天、第21天、第28天采用原位... 目的分析面神经损伤大鼠面神经核团中神经营养素-4(NT-4)mRNA及蛋白质表达变化及意义。方法选取50只Wistar大鼠,所有大鼠右侧制造面神经骨管内挤压伤模型,左侧作为自身对照。分别于处理后第1天、第7天、第14天、第21天、第28天采用原位杂交及免疫组化检测大鼠面神经核团中NT-4mRNA表达细胞数情况,并采用计算机图像分析测定其灰度,NT-4蛋白表达样本进行γ计数。结果正常大鼠面神经核团有较少NT-4表达。面神经损伤大鼠面神经核团中的NT-4mRNA含量及NT-4蛋白表达均明显升高,高于正常大鼠。面神经损伤大鼠面神经核团中的NT-4mRNA含量及NT-4蛋白表达均于受损初期迅速增高,至损伤后14d达最高值,随后逐渐降低。结论面神经损伤可刺激大鼠面神经核团NT-4mRNA含量及NT-4蛋白的表达,其变化趋势为先迅速上升后逐渐下降,提示NT-4mRNA含量及NT-4蛋白表达对面神经损伤的恢复具有重要意义。 展开更多

关键词 面神经核团 损伤 WISTAR大鼠 神经营养素-4

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神经营养素-4研究进展 被引量：1

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作者 侍坚 路长林 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 1999年第1期25-27,共3页

神经营养素-4(NT-4)能够促进多种神经元的存活,在神经系统发育、分化和损伤修复过程中具有重要作用。NT-4是NGF家族成员之一,它的受体和BDNF相同为TrkB。NT-4的神经营养作用为运动神经元疾病的临床治疗带来了新的希望。

关键词 神经营养素-4 运动神经元 神经损伤 修复

原文传递

构建重组表达质粒pBV220/mhNT-4及mhNT-4在大肠杆菌中的表达

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作者 张华 赵家良 胡海涛 《中国科技论文》 CAS 2006年第4期263-268,共6页

利用基因重组技术将 mhNT-4亚克隆到表达载体 pBV220,构建重组表达质粒 pBV220/mhNT-4,诱导表达 mhNT-4成熟蛋白,鉴定 mhNT-4的生物活性。将经鉴定的 pGEM-TEasy/mhNT-4克隆用限制性内切酶EcoRI,BamHI 消化,琼脂糖凝胶电泳回收片断。酶... 利用基因重组技术将 mhNT-4亚克隆到表达载体 pBV220,构建重组表达质粒 pBV220/mhNT-4,诱导表达 mhNT-4成熟蛋白,鉴定 mhNT-4的生物活性。将经鉴定的 pGEM-TEasy/mhNT-4克隆用限制性内切酶EcoRI,BamHI 消化,琼脂糖凝胶电泳回收片断。酶切原核高表达载体 pBV220,用限制性内切酶 EcoRI,BamHI 消化,琼脂糖凝胶电泳回收线性化载体。用 T4DNA 连接酶连结两个回收片断,构建重组质粒 pBV220/mhNT-4。限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳鉴定重组质粒。经鉴定的重组质粒 pBV220/mhNT-4转染大肠杆菌 DH5α,温度诱导表达 mhNT-4蛋白。SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳技术分离表达的 mhNT-4蛋白。制备8～9d鸡胚,分离并培养背根神经节(DRG)细胞。分别加入回收的表达蛋白和牛血清白蛋白,培养鸡胚背根神经节 DRG细胞,检测 mhNT-4生物活性。重组表达质粒 pBV220/mhNT-4构建正确,表达框架未发生改变。成功诱导表达、分离了 mhNT-4成熟蛋白。表达蛋白组可见大量神经突起自神经节组织快周缘向四周呈放射状长出,对照组未见神经突起长出。mhNT-4成熟蛋白具有良好的生物活性。本研究为进一步开展 mhNT-4基因治疗青光眼提供了资料。 展开更多

关键词 人神经营养素-4成熟蛋白基因(mhNT-4) 基因重组 表达载体 生物活性

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