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异丙酚对第三丁基过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的保护作用 被引量：2
1
作者 赵松 解丽君 +1 位作者 张建新 李兰芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1051-1055,共5页
目的观察异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨可能的机制。方法采用SD新生大鼠进行心肌细胞原代培养。实验分为5组:正常对照组、t-BHP组和异丙酚1、10、30μmol.L-1组。分光光度计法检测细胞内谷胱甘肽(GSH... 目的观察异丙酚对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的心肌细胞凋亡的影响并探讨可能的机制。方法采用SD新生大鼠进行心肌细胞原代培养。实验分为5组:正常对照组、t-BHP组和异丙酚1、10、30μmol.L-1组。分光光度计法检测细胞内谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物岐化酶(SOD)活性;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞线粒体活性,罗丹明123(Rhodamine123)荧光染色、流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Western blot法检测caspase-3的表达。结果与正常对照组相比,100μmol.L-1的t-BHP处理心肌细胞4 h后,细胞内GSH水平明显下降(P<0.05),MDA含量增加(P<0.01),抗氧化酶SOD活性降低(P<0.01),细胞线粒体活性降低(P<0.01),线粒体膜电位ΔΨm明显下降(P<0.01),细胞凋亡率和caspase-3的表达明显升高(P<0.01);异丙酚10、30μmol.L-1能减少过氧化氢所致的细胞中MDA含量升高;提高SOD活性和GSH水平;提高线粒体活性、膜电位;抑制心肌细胞凋亡和caspase-3的表达升高(P(0.05,P(0.01)。结论异丙酚能减弱过氧化氢所致的心肌细胞凋亡,其作用机制可能是通过减少活性氧自由基导致的细胞膜氧化损伤、提高线粒体活性、维持线粒体的膜电位,从而抑制心肌细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 异丙酚 大鼠 心肌细胞 凋亡 第三丁基过氧化氢 线粒体
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姜黄素对皮层神经元氧化损伤的保护作用 被引量：20
2
作者 朱元贵 陈晓春 +3 位作者 陈志哲 曾育琦 赵朝辉 彭旭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1153-1157,共5页
目的　观察姜黄素对第三丁基过氧化氢 (tert butylhy droperoxide,t BHP ,tBHP)诱导的大鼠皮层神经元氧化损伤的影响 ,探讨可能的机制。方法　培养胚胎鼠皮层神经元 ,MTT法测定细胞活力 ,DNA断裂评价细胞凋亡 ,流式细胞术测定线粒体膜... 目的　观察姜黄素对第三丁基过氧化氢 (tert butylhy droperoxide,t BHP ,tBHP)诱导的大鼠皮层神经元氧化损伤的影响 ,探讨可能的机制。方法　培养胚胎鼠皮层神经元 ,MTT法测定细胞活力 ,DNA断裂评价细胞凋亡 ,流式细胞术测定线粒体膜电位和细胞内活性氧水平 ,分光光度法测定细胞内谷胱甘肽 (GSH)水平 ,Westernblot法测定Bcl 2和Bax蛋白和胞浆细胞色素C以及活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 3(caspase 3)和多聚 (ADP 核糖 )聚合酶 [poly (ADP ribose)poly merase,PARP]水平。结果　姜黄素 (2 5～ 2 0 μmol·L-1)可有效减少tBHP对神经元的氧化损伤和tBHP引起的细胞内GSH水平降低 ,降低细胞内的活性氧水平 ,增加线粒体膜电位和细胞内GSH以及Bcl 2蛋白水平 ,减少线粒体内细胞色素C向胞浆释放和Bax蛋白表达水平 ,最终明显减少cas pase 3和PARP活化和tBHP引起的神经元凋亡。结论　姜黄素可减弱tBHP对原代皮层神经元的氧化损伤作用 ,其作用可能与降低细胞内的活性氧水平 。 展开更多
关键词 姜黄素 第三丁基过氧化氢(tBHP) 凋亡 氧化应激 神经元 线粒体 阿尔采末病
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氧化应激诱导内皮细胞凋亡与PI3k/Akt-Bcl-2通路的关系 被引量：8
3
作者 唐莉 刘小莺 +4 位作者 王林曦 王燕萍 吴莉 刘晓红 刘礼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期859-861,共3页
目的:探讨氧化应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡与细胞存活信号通路PI3k/Akt-Bcl-2的关系。方法:不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol/L)第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)1～4 h,MTT法检测内皮细胞生存率,Hoechst... 目的:探讨氧化应激诱导人脐静脉内皮细胞凋亡与细胞存活信号通路PI3k/Akt-Bcl-2的关系。方法:不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol/L)第三丁基过氧化氢(t-BHP)处理人脐静脉内皮细胞(HUVEC)1～4 h,MTT法检测内皮细胞生存率,Hoechst/PI双染色荧光显微镜观察细胞凋亡率。再选用最佳t-BHP浓度(100μmol/L)干预HUVEC不同时间(0、0.5、1、2、4、6 h),Western blot测Akt、p-Akt、Bcl-2以及caspase-3在各时间点的表达情况。结果:MTT显示随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,HUVEC生存率逐渐下降,并呈现一定的量效和时效关系;Hoechst/PI染色荧光显微镜观察证实t-BHP能够诱导HUVEC发生凋亡。t-BHP浓度在50～200μmol/L时,随着其作用浓度的增加细胞凋亡率明显增加(8.2%±0.3%、37.2%±0.3%、55.6%±0.2%,P<0.05),大于200μmol/L凋亡率反而下降(44.9%±0.2%、36.8%±0.4%,P<0.05);Western blot结果显示caspase-3的活化片段在4 h表达量最高。p-Akt在30 min时表达达高峰,随后降低。Bcl-2表达呈现递减的趋势。结论:t-BHP诱导caspase依赖的HUVEC凋亡,这一病理过程与p-Akt的迅速减少和Bcl-2的减少有关。 展开更多
关键词 第三丁基过氧化氢 人脐静脉内皮细胞 凋亡 AKT BCL-2
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氧化应激对内皮细胞NF-κB、iNOS和NO信号表达的影响 被引量：9
4
作者 何姜 陈闽 +2 位作者 刘小莺 王燕萍 刘礼斌 《福建医科大学学报》 2010年第3期186-189,共4页
目的观察氧化剂第三丁基过氧化氢(t-BHP)对体外培养的内皮细胞存活率及核转录因子κB(NF-κB)、iNOS和一氧化氮(NO)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的t-BHP处理,具体如下:(1)检测细胞存活率。t-BHP作用浓度分别... 目的观察氧化剂第三丁基过氧化氢(t-BHP)对体外培养的内皮细胞存活率及核转录因子κB(NF-κB)、iNOS和一氧化氮(NO)的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),用不同浓度的t-BHP处理,具体如下:(1)检测细胞存活率。t-BHP作用浓度分别为12.5,25,50,100μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用MTT法观察;(2)检测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量及细胞内NO水平。t-BHP的作用浓度为50μmol/L,作用时间分别为30,60,90,120 min,采用Western blot测NF-κB p65、iNOS蛋白表达量,Griess化学显色法测细胞内NO水平;(3)iNOS抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME,600μmol/L)预处理内皮细胞24 h,用Griess化学显色法检测细胞内NO水平。结果 t-BHP可降低内皮细胞的存活率,且呈时间及剂量依赖性,50μmol/Lt-BHP作用30 min细胞核NF-κB活化片段p65蛋白表达达高峰,作用60 min细胞质iNOS蛋白达高峰;iNOS抑制剂L-NAME可明显抑制内皮细胞NO升高。结论氧化应激可引起内皮细胞损伤,其效应可能通过NF-κB-iNOS-NO途径介导。 展开更多
关键词 第三丁基过氧化氢 脐静脉内皮细胞 氧化损伤 核因子ΚB 诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮
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氧化损伤对MIN6细胞内质网应激凋亡通路相关分子表达的影响 被引量：2
5
作者 陈闻佳 刘小莺 +3 位作者 王林曦 王燕萍 刘晓红 刘礼斌 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期249-252,256,共5页
目的：通过第三丁基过氧化氢（t-BHP）诱导小鼠胰岛β细胞凋亡,研究氧化损伤对内质网应激JNK凋亡通路相关分子表达的影响。方法：将不同浓度t-BHP（0-400μmol/L）分别加入胰岛β细胞株M IN6细胞中,于不同时间（0-8 h）收集细胞悬液进... 目的：通过第三丁基过氧化氢（t-BHP）诱导小鼠胰岛β细胞凋亡,研究氧化损伤对内质网应激JNK凋亡通路相关分子表达的影响。方法：将不同浓度t-BHP（0-400μmol/L）分别加入胰岛β细胞株M IN6细胞中,于不同时间（0-8 h）收集细胞悬液进行相关检测。CCK-8法检测细胞增殖活力;An-nexin-V-PI流式细胞技术（FCM）检测细胞凋亡率及坏死率;Caspase-3检测试剂盒测定caspase-3活性;W estern b lot检测内质网应激相关分子IRE1,αJNK,P-JNK,Caspase-3蛋白的表达。结果：随t-BHP浓度的增高,①M IN6细胞的存活率降低;②t-BHP以浓度≥25μmol/L作用≥1 h时,Caspase-3活性有明显变化（P〈0.05）;③随t-BHP浓度增大、作用时间延长,内质网应激跨膜蛋白IRE1α表达逐渐减少,P-JNK、活性caspase-3表达明显增多。结论：①t-BHP引发细胞凋亡坏死呈一定的时效和量效关系;②持续t-BHP氧化损伤可诱导M IN6细胞发生内质网应激并发生凋亡;③内质网应激凋亡通路相关分子表达在细胞凋亡过程中有浓度和时间依赖性。 展开更多
关键词 第三丁基过氧化氢 胰岛Β细胞 内质网应激
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氧化损伤对内皮细胞内质网应激相关蛋白表达的影响 被引量：6
6
作者 刘鲁豫 王燕萍 +4 位作者 王林曦 刘小莺 唐莉 刘晓红 刘礼斌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1540-1544,共5页
目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立体外氧化应激的细胞凋亡模型,观察氧化损伤对内皮细胞内质网应激(ER stress)相关蛋白表达的影响。方法:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-2... 目的:通过第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs),建立体外氧化应激的细胞凋亡模型,观察氧化损伤对内皮细胞内质网应激(ER stress)相关蛋白表达的影响。方法:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h,MTT法观察t-BHP作用后细胞的存活率;Hoechst/PI染色荧光显微镜观测细胞凋亡形态;Western blotting检测ER应激标志物肌醇需求激酶1α(IRE1α)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达情况。结果:不同浓度t-BHP(25、50、100、200、400μmol/L)诱导HUVECs 1-24 h后,发现随着t-BHP作用浓度的增加和时间的延长,细胞活力逐渐下降;不同浓度t-BHP处理8 h后,t-BHP大于25μmol/L时,细胞凋亡率明显增加(6.3%±0.6%、16.1%±0.9%、24.7%±1.5%、23.8%±1.3%,P<0.05);ER应激相关信号蛋白IRE1α、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)及凋亡蛋白caspase-3表达增加。结论:氧化应激可导致内皮细胞发生凋亡,可能与引起内质网应激相关信号蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 第三丁基过氧化氢 氧化性应激 内质网应激 细胞凋亡 人脐静脉内皮细胞
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脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨 被引量：1
7
作者 吴莉 刘鲁豫 +5 位作者 官滨斌 王林曦 刘小莺 陈闽 陈洲 刘礼斌 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期540-544,共5页
目的:探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:以HUVECs作为研究对象,给予t-BHP处理,模拟体外HUVECs氧化损伤细胞凋亡模型。在此基础上,用携带重组脂联素基因的腺... 目的:探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响及其相关的分子机制。方法:以HUVECs作为研究对象,给予t-BHP处理,模拟体外HUVECs氧化损伤细胞凋亡模型。在此基础上,用携带重组脂联素基因的腺病毒转染HUVECs,观察重组脂联素对t-BHP诱导的HUVECs凋亡的影响。用MTT法检测细胞增殖活力。Hochest/PI荧光染色检测细胞凋亡率。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白p-JNK、JNK和Caspase 3表达水平的变化。结果:100μmol/L的t-BHP作用8 h可诱导HUVECs发生凋亡。与对照组相比,t-BHP组p-JNK、active caspase 3表达增多(P<0.01)。HUVECs高表达重组脂联素基因后,可明显抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡(P<0.01),下调t-BHP诱导的p-JNK、active caspase 3表达。结论:持续t-BHP氧化损伤可诱导HUVECs发生凋亡。重组脂联素可有效抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡,其机制与p-JNK、active caspase3的表达下调有关。 展开更多
关键词 重组脂联素 第三丁基过氧化氢 氧化应激 细胞凋亡 人脐静脉内皮细胞
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胰高血糖素样肽-1对胰岛β细胞的作用 被引量：4
8
作者 黎黎 汤夏莲 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第19期3192-3193,共2页
目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对第三丁基过氧化氢(tBHP)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6凋亡作用的机制。方法:体外培养胰岛β细胞株MIN6,分为对照组、tBHP(25μmol/L)组、GLP-1(10nmol/L)组和GLP-1+tBHP组。AnnexinV-FITC/PI双染流式细... 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)对第三丁基过氧化氢(tBHP)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6凋亡作用的机制。方法:体外培养胰岛β细胞株MIN6,分为对照组、tBHP(25μmol/L)组、GLP-1(10nmol/L)组和GLP-1+tBHP组。AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡百分率;Griess法检测各实验组细胞内NO水平。结果:25μmol/LtBHP作用1h可诱导MIN6细胞凋亡,并使细胞内NO含量明显增加。预先经过10nmol/LGLP-1作用24h后,tBHP诱导的MIN6细胞凋亡明显减少,同时细胞内NO含量亦显著降低。结论:GLP-1可以抑制tBHP诱导的胰岛β细胞株MIN6凋亡,其机制可能与GLP-1减少tBHP诱导的NO合成有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 胰高血糖素样肽-1 MIN6细胞 第三丁基过氧化氢
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胰岛素样生长因子-1对小鼠胰岛细胞凋亡的保护作用 被引量：1
9
作者 刘晓红 陈洲 +1 位作者 王燕萍 刘礼斌 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期645-648,共4页
目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对第三丁基过氧化氢(tBHP)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6凋亡的保护作用。方法:体外培养小鼠胰岛β细胞株MIN6,分为:对照组、tBHP(25μmol/L)组、IGF-1(100ng/mL)组和IGF-1+tBHP组。丫啶橙-溴化乙锭(AO-... 目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对第三丁基过氧化氢(tBHP)诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6凋亡的保护作用。方法:体外培养小鼠胰岛β细胞株MIN6,分为:对照组、tBHP(25μmol/L)组、IGF-1(100ng/mL)组和IGF-1+tBHP组。丫啶橙-溴化乙锭(AO-EB)荧光染色法及原位末端标记法(TUNEL)镜下观测各实验组细胞凋亡情况,Griess法检测各实验组细胞内NO水平。结果:25μmol/LtB-HP作用1h可诱导MIN6细胞凋亡,并使细胞内NO含量明显增加。预先经过100ng/mLIGF-1作用24h后,tBHP诱导的MIN6细胞凋亡明显减少,同时细胞内NO含量亦显著降低。结论:IGF-1对tBHP诱导凋亡的小鼠胰岛β细胞株MIN6有一定的保护作用,其机制可能与IGF-1减少tBHP诱导的NO合成有关。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 胰岛Β细胞 第三丁基过氧化氢 凋亡 保护
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