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题名精子介导法建立sFat-1转基因小鼠模型
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作者
李小平
曾博
邹方东
岳碧松
尹海林
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机构
生物资源与生态环境教育部重点实验室
四川大学实验动物中心
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出处
《四川动物》
CSCD
北大核心
2008年第6期1003-1006,共4页
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文摘
利用精子介导的基因转移(Sperm-mediated gene transfer,SMGT)方法,将sFat-1 DNA片段直接和小鼠精子孵育,再通过体外受精、胚胎移植等技术建立sFat-1转基因小鼠模型。经PCR检测,16只后代中发现2只阳性个体,Southern blot进一步鉴定的结果显示有2只后代整合了sFat-1基因,成功建立sFat-1转基因小鼠模型,转基因率为12.5%。本研究运用精子介导的转基因方法将sFat-1基因整合到小鼠基因组中,为进一步研究sFat-1的生物学功能提供了实验动物模型。
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关键词
sFat-1基因
精子介导的基因转移
多不饱和脂肪酸
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Keywords
sFat-1 gene
sperm-mediated gene transfer
polyunsaturated fatty acids
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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题名磁小体介导制备转基因猪模型
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作者
陈克研
陈振文
董婉维
郑志红
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机构
中国医科大学实验动物部
首都医科大学基础医学院实验动物学系
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出处
《实验动物与比较医学》
CAS
2015年第4期288-293,共6页
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基金
国家自然青年科学基金项目（31201758）,中国博士后基金（2012M521919）
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文摘
目的以磁小体（BMP）和聚乙烯亚胺（PEI）为载体，通过睾丸注射精子介导法建立转基因猪模型。方法将实验室保存的脂蛋白磷脂酶A2（Lp．PLA2）绿色荧光蛋白（GFP）质粒与BMP和PEI混匀，制备BMP—PEI-PLA2-GFP混合物，采用睾丸多点注射法接种巴马小型猪，于接种后第2周、4周、6周至第20周采集精液，分别用RT—PCR和免疫荧光鉴定外源基因的表达情况；取阳性精液，对母猪实施人工授精；PCR及RT—PCR对所产仔猪进行鉴定。结果精液中GFP基因于接种后第4周首现并持续至第16周；荧光显微镜检查可观察到GFP蛋白主要表达于精子项体后区及精子尾颈部；经人工授精所产21头仔猪中，9头猪用PCR可检测GFP片段，用RT—PCR检测PLA2表达，该9头猪的表达量明显高于其它猪，总阳性率达42．86％。结论BMP和PEI结合可作为良好的携带外源基因的非病毒性载体，用该载体通过精子介导法可以达到迅速制备转基因猪的目的，其成本低、方法简单、便捷。
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关键词
猪
转基因
磁小体(BMP)
聚乙烯亚胺(PEI)
精子介导的基因转移
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Keywords
Pig
Transgenic
Bacteria magnetic particles （BMP）
Polyethylenimine （PEI）
Sperm-mediated gene transfer
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分类号
Q95-33
[生物学—动物学]
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