红细胞分化去核因子在诱导小鼠红白血病细胞分化以及恶性逆转中的作用 被引量：2

1

作者 赵青 葛晔华 +4 位作者 周建平 马静 陈克铨 薛社普 韩代书 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期32-35,F003,共5页

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细... 研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。 展开更多

关键词 小鼠 红细胞分化去核因子 红细胞分化 红白血病

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小鼠红细胞分化相关因子cDNA片段的克隆与分析 被引量：3

2

作者 刘世广 章正琰 +4 位作者 张世馥 马静 唐文 章静波 薛社普 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期94-98,共5页

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂... 目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂交与ＰＣＲ相结合的方法，用未经培养的ＦＶＡ诱导的原红细胞（０ｈＦＶＡ原红细胞）的ｃＤＮＡ对培养３６ｈ的ＦＶＡ诱导的成红细胞（３６ｈＦＶＡ成红细胞）的ｃＤＮＡ进行多次减除杂交和ＰＣＲ扩增，构建上述３６ｈｃＤＮＡ的质粒减除文库并进行差异筛选。对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析。结果获得１个４７２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，其中含有１个３０９ｂｐ的开放阅读框架，编码１０２个氨基酸。经ＧｅｎＢａｎｋ进行同源比较，未发现同源序列，已被ＧｅｎＢａｎｋ接受，（编号ＡＡ１１４３６９）。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析表明，该ｃＤＮＡ在培养３６ｈ的ＦＶＡ中、晚幼红细胞中呈差异表达，其ｍＲＮＡ全长约为５００～６００ｂｐ左右。将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子（ＭＥＤＲＦ）基因。结论ＭＥＤＲＦ基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达，表明ＭＥＤＲＦ是一个新的与红细胞终末分化相关的因子。 展开更多

关键词 红细胞分化 细胞分化 CDNA 克隆 相关因子

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红细胞分化去核因子:哺乳类红细胞终末分化/肿瘤抑制的调节因子家族及其相关基因的克隆 被引量：3

3

作者 薛社普 刘友华 +10 位作者 张世馥 马文丽 王鑫 费仁仁 杜权 章正琰 章静波 陈克铨 周建平 马静 韩代书 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期371-375,共5页

本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 ... 本文报道哺乳类红细胞终末分化去核因子 (EDDF)调控恶性骨髓瘤细胞的分化以及与 EDDF相关的基因克隆的系列研究结果。以不同分化期哺乳类红细胞为研究对象 ,观察红细胞自然排核前后的细胞形态变化和与之互为对应的物质代谢的改变 ,分析 EDDF与终末分化、核浓缩及自然排核的可能关系 ;用自建的红细胞胞质体杂交模型 ,分别对红白血病和非红系的骨髓瘤细胞进行同种和异种的细胞杂交实验以验证 EDDF的作用规律。结果表明 ,哺乳类红细胞在终末分化不同阶段存在时相相关的分化去核因子家族。这些因子可调控不同分化阶段相关基因的活动 ,且呈时序性出现 ,与血红蛋白表达、细胞核停止分裂转向分化、核偏位、核浓 (固 )缩和自然去核等终末分化特征呈现明显的因果关系。 EDDF活性蛋白可逆转体外培养的肿瘤细胞系 (MEL,K5 6 2 )的恶性生长及诱导终末分化。在上述基础上分别采用不同的分离、提纯及基因克隆路线 ,从人和小鼠红细胞中连续克隆到 5种分化相关基因家族 (MEDDF,HEDDF- 1,HEDRF- 1,HEDRF- 2 ,HCNBP- 1)及其全长序列 ,并经 Gen Bank证实 ,它们均为无同源的新基因序列。 展开更多

关键词 终末分化 红细胞分化去核因子 调控 基因克隆

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红细胞分化相关因子EDRF1的反义RNA下调蛋白激酶C-α mRNA的表达 被引量：2

4

作者 王敦成 张晓东 +3 位作者 王建安 赖春宁 黎燕 沈倍奋 《生物技术通讯》 CAS 2001年第3期171-174,共4页

为了研究通过功能筛选得到的一个新的红细胞分化相关的全长cDNA(命名为EDRF1)的功能 ,选择K5 6 2细胞作为模型细胞来观察反义EDRF1表达对细胞功能的影响。通过快速构建 ,同时得到了正向和反向插入片段的真核表达载体pcDNA3 EDRF1 S(sen... 为了研究通过功能筛选得到的一个新的红细胞分化相关的全长cDNA(命名为EDRF1)的功能 ,选择K5 6 2细胞作为模型细胞来观察反义EDRF1表达对细胞功能的影响。通过快速构建 ,同时得到了正向和反向插入片段的真核表达载体pcDNA3 EDRF1 S(sense)及pcDNA3 AS(antisense) ,并通过改进的LipofectAMINE细胞转染和G418筛选 ,得到了稳定表达的细胞株 ,进行基因组PCR鉴定 ,证明了转染的高效性。NorthemBlot试验的结果表明 ,反义载体转染的K5 6 2细胞中 ,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调 ,提示EDRF1反义DNA的表达可能抑制了EDRF1mRNA的正常转录。进一步 ,γ 珠蛋白和PKC α的表达在反义构建质粒转染K5 6 2细胞中的表达均受到下调 ,这可能传递了红细胞分化的负反馈信号 。 展开更多

关键词 反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-Α 信号转导 γ- 珠蛋白 表达

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珠蛋白基因的转录调控与红细胞分化发育研究进展 被引量：7

5

作者 李艳明 熊倩 方向东 《发育医学电子杂志》 2013年第4期223-229,共7页

红细胞是具有重要生理功能的血液细胞。成年人的红细胞主要来源于分布在胸骨、椎骨、肋骨等扁骨内的红骨髓。红骨髓中的髓系多能干细胞分化成红系定向祖细胞，红系定向祖细胞在促红细胞生成素（EPO）的作用下，能增殖分化为原红细胞。... 红细胞是具有重要生理功能的血液细胞。成年人的红细胞主要来源于分布在胸骨、椎骨、肋骨等扁骨内的红骨髓。红骨髓中的髓系多能干细胞分化成红系定向祖细胞，红系定向祖细胞在促红细胞生成素（EPO）的作用下，能增殖分化为原红细胞。原红细胞经过有丝分裂、增殖成为网织红细胞，进而发育成为成熟红细胞。红细胞成熟时没有细胞核和细胞器，胞质内充满血红蛋白，具有携带氧气和二氧化碳的功能。 展开更多

关键词 珠蛋白基因 染色体 红细胞分化 转录调控 GATA 异染色质 染色质构象 核基质结合区 研究进展

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利用K562红细胞分化模型和cDNA芯片技术筛选参与红细胞分化的新基因(英文)

6

作者 王敦成 马淑华 +1 位作者 王升启 沈倍奋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期681-686,共6页

以氯高铁血红素 (hemin)诱导K5 6 2分化作为体外红细胞分化模型 ,结合cDNA大规模测序、生物信息学分析、基因芯片杂交和NorthernBlot分析等技术 ,筛选红细胞分化相关的新基因 .首先利用大规模测序技术从人胚肾cDNA文库中随机挑选克隆测... 以氯高铁血红素 (hemin)诱导K5 6 2分化作为体外红细胞分化模型 ,结合cDNA大规模测序、生物信息学分析、基因芯片杂交和NorthernBlot分析等技术 ,筛选红细胞分化相关的新基因 .首先利用大规模测序技术从人胚肾cDNA文库中随机挑选克隆测得 192个EST(expressedsequencetags)片段 ,经在线生物信息学分析 ,得到 79个代表新基因的未知EST片段 ,并在NCBI(NationalCenterofBiotechnologyInformation)dbEST库中登录 .利用 79个ESTcDNA片段制备了基因芯片 .提取分化前后的K5 6 2细胞的mRNA作为荧光标记反转录的模板 ,反转录后的探针用于DNA芯片杂交 .分析杂交后的结果 ,得到了 2个差异表达较明显的基因 ,GenBank登录号分别为AF147772 (187bp)和AF4 776 2(6 30bp) ,并分别命名为EDRG1和EDRG2 (erythroiddifferentiationrelatedgene 1and 2 ) ,相似性检索表明它们属全新基因 ,基因组草图测序数据库检索表明了两个基因的染色体定位 .随后的Northern印迹用于验证了在分化前后的K5 6 2细胞中差异表达 .提示这两个基因参与了红细胞分化过程 .RT PCR检测了EDRG1和EDRG2在人胚胎多组织中的表达 .结果提示 ,EDRG1可能与多种胚组织的正常发育相关 ,尤其在胚脑中高丰度表达 ,而EDRG2则可能参与了胚心和胚肾的组织生成 .生物? 展开更多

关键词 CDNA芯片 红细胞分化 EST 相关基因 模型

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红细胞分化相关蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：3

7

作者 王鑫 陈实平 薛社普 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期187-192,共6页

应用杂交瘤技术和电泳迁移超滞留技术筛选和制备红细胞分化相关蛋白单克隆抗体，以阐明此类蛋白的生物学功能。用杂交瘤技术制备了５８０株针对终末分化期红细胞，包括人胚肝中、晚幼红细胞和氯高铁血红素（ｈｅｍｉｎ）诱导分化的人红... 应用杂交瘤技术和电泳迁移超滞留技术筛选和制备红细胞分化相关蛋白单克隆抗体，以阐明此类蛋白的生物学功能。用杂交瘤技术制备了５８０株针对终末分化期红细胞，包括人胚肝中、晚幼红细胞和氯高铁血红素（ｈｅｍｉｎ）诱导分化的人红白血病（Ｋ５６２）细胞核蛋白的单克隆抗体。根据单抗以及核蛋白与ＨＳ２ＤＮＡ序列结合形成单抗－蛋白－ＨＳ２复合物的电泳迁移超滞留实验（ｓｕｐｅｒｓｈｉｆｔｅｘｐｅｒｉ－ｍｅｎｔ），从上述单抗中筛选出４种针对ＨＳ２结合蛋白的单抗，并用它们分别与ｈｅｍｉｎ诱导前、后的Ｋ５６２细胞核蛋白、ＨＳ２作同样的超滞留实验。发现这４种单抗对应的蛋白组分在分化前后的细胞中存在差异，利用差异筛选原理从诱导的ＨＳ２－蛋白复合物中筛选出特异于两种分化相关蛋白的单抗ａ和ｂ。Ｗｅｓｔ－ｅｒｎ印迹分析进一步证明，与单抗ａ和ｂ对应的ＨＳ２结合蛋白为红细胞分化相关蛋白，其分子量分别为７５ｋＤ和２２ｋＤ。 展开更多

关键词 HS2结合蛋白 红细胞分化 单克隆抗体 制备 鉴定

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红细胞分化因子诱导HL-60细胞排核过程中酪氨酸蛋白质磷酸化的改变 被引量：3

8

作者 郭双立 白龙川 +2 位作者 颜卉君 费仁仁 吴国利 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第2期210-215,共6页

红细胞分化因子是从兔子网织红细胞中提出的一个蛋白因子，它可以使多种癌细胞株的生长受到抑制[1]．以早幼粒白血病细胞（HL-60）为材料，研究其被EDDF诱导过程中细胞内PTK，PTPP及它们底物磷酸化水平的变化．实验发现：部分纯化的EDDF... 红细胞分化因子是从兔子网织红细胞中提出的一个蛋白因子，它可以使多种癌细胞株的生长受到抑制[1]．以早幼粒白血病细胞（HL-60）为材料，研究其被EDDF诱导过程中细胞内PTK，PTPP及它们底物磷酸化水平的变化．实验发现：部分纯化的EDDF对HL-60细胞生长有明显的抑制作用，经NBT还原和Giemsa染色，可见HL-60细胞被诱导出现排核．同时，细胞的PTK，PTPP酶活性有明显的变化，PTPP和PTK的底物蛋白在胞浆中酪氨酸蛋白磷酸化水平亦出现改变（但颗粒部分变化不明显）． 展开更多

关键词 红细胞分化因子 酪氨酸蛋白 磷酸化 白血病

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Axl和Mer受体调控小鼠红细胞分化 被引量：2

9

作者 唐红梅 贾长虹 +1 位作者 李巍伟 李明 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第12期1628-1632,共5页

目的研究Axl和Mer受体是否参与红细胞分化的调控。方法单基因(AXL-/-和MER-/-)和双基因(AXL-/-MER-/-)敲除小鼠,利用组织切片观察小鼠骨髓、肝脏和脾脏的组织结构;计数小鼠单根股骨内骨髓细胞的数量;用实时定量PCR检测与红细胞分化相关... 目的研究Axl和Mer受体是否参与红细胞分化的调控。方法单基因(AXL-/-和MER-/-)和双基因(AXL-/-MER-/-)敲除小鼠,利用组织切片观察小鼠骨髓、肝脏和脾脏的组织结构;计数小鼠单根股骨内骨髓细胞的数量;用实时定量PCR检测与红细胞分化相关基因mRNA的表达。结果双基因敲除的小鼠单根股骨骨髓内总细胞、单个核细胞和成熟红细胞的数量分别下降了40%、34%和53%(P<0.01);骨髓细胞排列稀疏,血窦内、外成熟红细胞数量明显减少;虽然外周血中红细胞数量和血红蛋白的含量没有改变,但存在着明显的髓外造血,肝脏里出现了造血岛,脾脏中红髓明显地增生。而单基因敲除小鼠骨髓中红细胞数量以及组织结构未见改变。且双基因敲除小鼠中红系细胞内GATA-1和EpoR的mRNA表达分别降低了65%和75%(P<0.01)。结论 Axl和Mer受体通过GATA-1和EpoR来调节红细胞的分化,并且功能上存在重叠、过剩和代偿。 展开更多

关键词 AXL MER 基因敲除 红细胞分化

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红细胞分化调节因子1对小鼠玫瑰痤疮模型Th1/Th2细胞分化的作用及影响 被引量：3

10

作者 毛辉 石年 《中国中西医结合皮肤性病学杂志》 CAS 2023年第1期23-26,共4页

目的探讨红细胞分化调节因子1(Erdr1)对小鼠玫瑰痤疮模型中辅助性T细胞1(Th1)/Th2分化的作用。方法建立玫瑰痤疮模型,随机分为模型组、重组Erdr1(rErdr1)低、高剂量组,另设对照组。评估各组小鼠皮损红斑评分,比较血清免疫球蛋白、外周血... 目的探讨红细胞分化调节因子1(Erdr1)对小鼠玫瑰痤疮模型中辅助性T细胞1(Th1)/Th2分化的作用。方法建立玫瑰痤疮模型,随机分为模型组、重组Erdr1(rErdr1)低、高剂量组,另设对照组。评估各组小鼠皮损红斑评分,比较血清免疫球蛋白、外周血T细胞亚群水平,比较各组皮损组织中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、IFN-γ/IL-10水平,比较各组皮损组织中Erdr1蛋白表达。结果与模型组比较,rErdr1低剂量组、rErdr1高剂量组皮损红斑评分,血清IgM、IgA、IgG,CD4^(+)T细胞百分率,皮损组织中IFN-γ、IFN-γ/IL-10水平均降低,CD8^(+)T细胞百分率、皮损组织中IL-10水平及Erdr1蛋白相对表达量均升高(P<0.05);rErdr1高剂量组上述指标改变较低剂量组更明显(P<0.05)。结论rErdr1可有效改善玫瑰痤疮小鼠皮损红斑症状,减轻炎性反应,其可能通过抑制获得性免疫应答能力及调节Th1/Th2细胞分化平衡发挥作用。 展开更多

关键词 红细胞分化调节因子1 玫瑰痤疮 获得性免疫 Th1/Th2细胞分化

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碳酸酐酶在红细胞分化发育过程中的功能研究 被引量：2

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作者 吴静 张英楠 +2 位作者 徐长禄 刘金花 石莉红 《生物技术进展》 2022年第4期584-590,共7页

目前红系分化调控相关的研究主要集中在细胞因子、转录因子、lncRNA及表观遗传方面,为了对红系分化调控机制进行更加深入的解析,研究了碳酸酐酶在红系分化中的功能。碳酸酐酶可以高效催化二氧化碳的水合,但它在红细胞发育过程中的功能... 目前红系分化调控相关的研究主要集中在细胞因子、转录因子、lncRNA及表观遗传方面,为了对红系分化调控机制进行更加深入的解析,研究了碳酸酐酶在红系分化中的功能。碳酸酐酶可以高效催化二氧化碳的水合,但它在红细胞发育过程中的功能尚不清楚。利用脐带血来源的CD34^(+)细胞在体外进行红细胞诱导分化,在分化过程中通过慢病毒介导的基因敲降的方法能够降低碳酸酐酶1和碳酸酐酶2的表达,并使用流式细胞仪检测红细胞的生成和分化效率。研究结果表明,与对照组相比,碳酸酐酶1的表达缺陷使红细胞的晚期分化明显受阻,而碳酸酐酶2的表达缺陷则将红细胞的分化阻滞在早期阶段。研究结果表明,虽然作用窗口不同,但碳酸酐酶1和碳酸酐酶2在红系分化的过程中均发挥着重要的调控作用,这一发现对将来在体外红细胞生成具有指导意义。 展开更多

关键词 红细胞分化发育 碳酸酐酶 体外红细胞生成

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miR-330-3p调控ALAS2在红细胞分化中的作用

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作者 鹿军 王丽娟 +3 位作者 李传翠 门丽杰 孙玲 李弹弹 《解剖学研究》 CAS 2021年第1期49-53,共5页

目的探讨miR-330-3p在红细胞分化中的作用和机制。方法胚胎干细胞诱导分化为红系细胞,分别测定0 d、7 d、14 d、21 d miR-330-3p和ALAS2表达水平。比较红系细胞(K562细胞)和非红系细胞(HELA细胞)miR-330-3p和ALAS2表达差异。K562分转染m... 目的探讨miR-330-3p在红细胞分化中的作用和机制。方法胚胎干细胞诱导分化为红系细胞,分别测定0 d、7 d、14 d、21 d miR-330-3p和ALAS2表达水平。比较红系细胞(K562细胞)和非红系细胞(HELA细胞)miR-330-3p和ALAS2表达差异。K562分转染miR-330-3p抑制物组、miR-330-3p模拟物组,考察miR-330-3p对ALAS2表达的影响。K562分别进行ALAS2过表达和ALAS2过表达+miR-330-3p模拟物共转染,考察对Ferritin蛋白和HO-1蛋白表达的影响。结果随分化时间增加,ALAS-2蛋白表达逐步增高(F=29.124,P=0.000),miR-330-3p表达逐步下降(F=21.323,P=0.000);K562细胞ALAS-2蛋白水平显著高于HELA细胞(t=6.977,P=0.002),K562细胞miR-330-3p水平显著低于HELA细胞(t=4.538,P=0.011);转染miR-330-3p inhibitor后,ALAS2蛋白表达上调(t=6.977,P=0.002),miR-330-3p表达下调(t=4.397,P=0.012);转染miR-330-3p模拟物后,ALAS2蛋白表达下调(t=18.971,P=0.000),miR-330-3p表达上调(t=3.910,P=0.017)。过表达ALAS2,Ferritin蛋白表达下调(t=2.170,P=0.032),HO-1蛋白表达上调(t=3.755,P=0.020);ALAS2过表达和miR-330-3p模拟物共转染,Ferritin蛋白表达上调(t=3.791,P=0.019),HO-1蛋白表达下调(t=3.618,P=0.022)。结论 miR-330-3p可能通过调控ALAS2转录,进而影响Ferritin和HO-1的表达,发挥促进红系细胞分化的作用。 展开更多

关键词 红细胞分化 miR-330-3p 氨基酮戊酸合成酶2 血红素加氧酶-1 铁蛋白

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β-谷甾醇通过诱导ROS累积造成氧化应激抑制K562/ADR细胞增殖并促进凋亡和分化 被引量：4

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作者 赵冰洁 车虹 +2 位作者 胡琏 易文静 侯著法 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第4期641-645,共5页

目的:探讨β-谷甾醇抑制耐阿霉素人类髓性白血病细胞K562/ADR增殖、促进细胞凋亡与分化的效果及其可能机制。方法:使用细胞毒性试验计算β-谷甾醇对K562/ADR细胞的半数抑制率(IC50),采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用流式细胞术检测细胞... 目的:探讨β-谷甾醇抑制耐阿霉素人类髓性白血病细胞K562/ADR增殖、促进细胞凋亡与分化的效果及其可能机制。方法:使用细胞毒性试验计算β-谷甾醇对K562/ADR细胞的半数抑制率(IC50),采用CCK-8法检测细胞增殖率,采用流式细胞术检测细胞凋亡率与线粒体膜电位下降率,使用分光光度法检测细胞上清中SOD活力与MDA含量,使用荧光试剂盒检测细胞ROS强度,使用联苯胺染色检测红细胞分化程度,使用蛋白质印迹(Western blot)检测珠蛋白转录因子1(GATA-1)、β-珠蛋白(β-globin)和核因子e2相关因子2(NF-E2)蛋白表达水平。结果:β-谷甾醇对K562/ADR细胞的半数抑制浓度的IC50为163.64μmol/L。与空白组相比,3个浓度的β-谷甾醇均能抑制细胞增殖、促进细胞凋亡与红细胞分化,降低SOD活力、线粒体膜电位,增加MDA与ROS含量,升高GATA-1、β-globin和NF-E2蛋白表达水平(P<0.01)。结论:β-谷甾醇能抑制K562/ADR细胞增殖,促进细胞凋亡,并且诱导红细胞分化,其机制可能是通过促进ROS积累引起氧化应激失衡。 展开更多

关键词 慢性粒细胞白血病 Β-谷甾醇 红细胞分化 氧化应激 体外

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EDDF诱导产生与红细胞终末分化相关的HS_2特异结合蛋白 被引量：3

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作者 刘丕旭 王鑫 +2 位作者 雷薇 章静波 薛社普 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期371-374,共4页

以珠蛋白基因增强子为探针，研究从ＦＶＡ病毒诱导的小鼠脾脏中提取的ＥＤＤＦ诱导小鼠红白血病细胞（ＭＥＬ）及人红白血病细胞（Ｋ５６２）后的表达产物与ＨＳ_２特异结合的可能性。结果表明，经ＥＤＤＦ诱导后的ＭＥＬ及Ｋ５８２细... 以珠蛋白基因增强子为探针，研究从ＦＶＡ病毒诱导的小鼠脾脏中提取的ＥＤＤＦ诱导小鼠红白血病细胞（ＭＥＬ）及人红白血病细胞（Ｋ５６２）后的表达产物与ＨＳ_２特异结合的可能性。结果表明，经ＥＤＤＦ诱导后的ＭＥＬ及Ｋ５８２细胞核中均可检测到两个与ＨＳ２结合的蛋白，其分子量约为１２ｋＤ和１４ｋＤ。提示ＥＤＤＦ有可能通过诱导产生与ＨＳ２特异结合的反式调节因子而导致红系细胞分化。 展开更多

关键词 红细胞分化 脱核困子 HS2 结合蛋白 珠蛋白

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新的红细胞分化相关基因EDRF1功能的初步研究 被引量：3

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作者 王敦成 沈倍奋 +2 位作者 赖春宁 黎燕 王建安 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2001年第5期439-444,共6页

曾报道过通过功能筛选得到一个新的红细胞分化相关基因, 并命名为EDRF1(erythroid differentiation related factor 1, GenBank登录号为AF040247). 鉴于功能线索明确, 选择K562细胞作为模型细胞, 通过基因转染技术观察了EDRF1反义RNA表... 曾报道过通过功能筛选得到一个新的红细胞分化相关基因, 并命名为EDRF1(erythroid differentiation related factor 1, GenBank登录号为AF040247). 鉴于功能线索明确, 选择K562细胞作为模型细胞, 通过基因转染技术观察了EDRF1反义RNA表达和EDRF1过表达对细胞增殖和分化的影响, [3H]TdR掺入和半固体集落培养实验的结果显示EDRF1过表达时, 细胞增殖代谢能力有所下降. Northern印迹和RT-PCR的结果表明, 反义EDRF1表达载体转染后的K562细胞a-globin, g-globin mRNA表达水平下降, STAT3, c-myc, GATA-1表达下调, 红细胞生成素受体(EpoR)在反义表达载体转染后表达有一定程度的上调. 说明EpoR和珠蛋白的表达调节没有内在的正协同关系, EDRF1对K562细胞增殖和分化的调节有可能是通过影响GATA-1等诸多红系特异的转录因子与顺式序列相互作用的转录活性实现的. 展开更多

关键词 EDRF1 红细胞分化 细胞增殖 基因功能 GATA-1 红细胞生成素受体 基因转染技术 球蛋白

原文传递

两个新的红细胞分化相关因子的cDNA克隆及功能探讨 被引量：4

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作者 王鑫 陈兴 +5 位作者 王敦成 胡美茹 王建安 黎燕 沈倍奋 薛社普 《中国科学（C辑）》 CSCD 2000年第6期647-652,共6页

曾报道在终末分化阶段的红细胞中可表达一些与珠蛋白基因增强子HS2序列特异结合的蛋白因子, 并利用杂交瘤技术制备了两株针对上述蛋白的单克隆抗体. 为获得编码这些因子的基因, 实验利用这两株单抗筛选构建于(gt11的人胚肝cDNA表达文库,... 曾报道在终末分化阶段的红细胞中可表达一些与珠蛋白基因增强子HS2序列特异结合的蛋白因子, 并利用杂交瘤技术制备了两株针对上述蛋白的单克隆抗体. 为获得编码这些因子的基因, 实验利用这两株单抗筛选构建于(gt11的人胚肝cDNA表达文库, 并获得阳性克隆. 经分析, 其中一株 cDNA克隆具有全长编码序列(EDRF1), 另一株为具有可读框的cDNA片段(EDRF2), 由它编码的氨基酸序列含有反式调节因子特有的亮氨酸拉链结构域. 与GenBank作同源比较后确定上述两株cDNA序列均未见报道. Northern印迹结果表明, 它们编码的蛋白质为红细胞分化相关蛋白. RT-PCR系统地观察了EDRF1, EDRF2在多种细胞株和组织中的表达, 提供了重要的功能线索. EDRF1和EDRF2主要在造血系统和早期的胚胎多种组织表达, 说明它与血细胞成熟和早期的组织发育相关, 也可能是传递早期造血与胚胎发育的分子语言. 展开更多

关键词 红细胞分化 反式调节因子 CDNA克隆 CDNA文库

原文传递

红细胞分化相关基因EDRF2抑制K562细胞中α-珠蛋白基因的表达 被引量：1

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作者 王敦成 沈倍奋 +1 位作者 黎燕 杨晓明 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第21期1799-1804,共6页

EDRF2是一个红细胞分化相关因子,它在分化后的K562细胞中被诱导表达.Northern blot结果显示,EDRF2全长mRNA约500bp.利用RACE技术,成功扩增了EDRF2 mRNA完整的5＇-和 3＇-末端.EDRF2正义和反义cDNA在K562细胞中稳定表达.Northern blot分... EDRF2是一个红细胞分化相关因子,它在分化后的K562细胞中被诱导表达.Northern blot结果显示,EDRF2全长mRNA约500bp.利用RACE技术,成功扩增了EDRF2 mRNA完整的5＇-和 3＇-末端.EDRF2正义和反义cDNA在K562细胞中稳定表达.Northern blot分析表明,EDRF2能抑制α-珠蛋白基因的表达,而对γ-珠蛋白基因的表达没有明显的调节作用.凝胶阻滞电泳的结果显示,EDRF2对GATA-1,NF-E2和AP1（c-Jun/c-Fos）等转录因子的DNA结合活性没有明显的调控作用.GATA-1的负调控因子PU.1表达被EDRF2上调,提示EDRF2很可能是红细胞分化的负调控转录因子,与PU.1协同作用,下调α-珠蛋白基因在K562细胞中的表达. 展开更多

关键词 珠蛋白基因 红系转录因子 亮氨酸拉链 RACE 红细胞分化 红系特异基因 K256细胞 基因表达 EDRF2

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新的红细胞分化相关因子反义RNA特异抑制K562细胞中的GATA-1转录因子活性

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作者 王敦成 沈倍备 +1 位作者 马淑华 王升启 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2002年第1期46-53,共8页

以往报道了通过基因转染技术观察新的红细胞分化相关因子（EDRF1）反义RNA表达和EDRF1过表达对细胞增殖和分化的影响,结果表明,反义EDRF1表达载体转染后的K562细胞α-globin,γ-globin mRNA表达水平下降.本文利用基因芯片和真核基因转... 以往报道了通过基因转染技术观察新的红细胞分化相关因子（EDRF1）反义RNA表达和EDRF1过表达对细胞增殖和分化的影响,结果表明,反义EDRF1表达载体转染后的K562细胞α-globin,γ-globin mRNA表达水平下降.本文利用基因芯片和真核基因转染技术观察了EDRF1对60种细胞因子及其受体表达水平的影响,发现EDRF1明显调节IL-6受体,GM-CSF受体,c-Jun/c-Fos,c-myc及c-kit（SCF受体）等基因的表达水平,并通过RNA点杂交进行验证,EDRF1对几个重要的细胞因子受体表达的调节可能是其执行功能的一个重要途径.Northern blot实验结果表明,GATA-1mRNA在转染EDRF1反义表达载体后表达水平有所下调,随后的凝胶阻滞电泳实验（gel shiftassay,EMSA）证明,与对照相比,EDRF1反义表达载体转染的K562细胞中,红系特异的转录因子GATA-1的活性受到明显的抑制,而另一个红系特异的转录因子NF-E2则没有明显的活性改变,对照NF-κB的转录活性也基本保持恒定.因此推测,K562细胞增殖和分化的调节很可能是通过直接影响红系特异的转录因子GATA-1与顺式序列相互作用的转录活性来实现的. 展开更多

关键词 红细胞分化相关因子 反义表达载体 红系特异转录因子 细胞因子受体 基因芯片 真核基因转染技术 K562细胞

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红细胞分化相关基因敲除小鼠对低剂量辐射损伤敏感性的研究 被引量：2

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作者 潘婷婷 尹荣华 +4 位作者 董小明 赵珂 詹轶群 杨晓明 李长燕 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期423-426,467,共5页

目的构建红细胞分化相关基因(EDAG)敲除小鼠并研究其对低剂量辐射损伤的敏感性。方法利用锌指核酸酶技术(ZFNs)建立EDAG敲除小鼠模型;通过外周血细胞计数、骨髓细胞的DNA损伤和集落形成能力评价低剂量辐射损伤。对野生型及EDAG敲除小鼠... 目的构建红细胞分化相关基因(EDAG)敲除小鼠并研究其对低剂量辐射损伤的敏感性。方法利用锌指核酸酶技术(ZFNs)建立EDAG敲除小鼠模型;通过外周血细胞计数、骨髓细胞的DNA损伤和集落形成能力评价低剂量辐射损伤。对野生型及EDAG敲除小鼠进行剂量率为0.31 Gy/min的X线照射,1 min/d,连续照射7 d,小鼠累计照射剂量为2.17 Gy。在X线照射后第1、3、5、7天称重并进行血常规检测(n=7);照射后第3天分离小鼠骨髓细胞,利用免疫荧光实验检测DNA损伤标志物p-H2A.x的表达水平(n=3);照射后第5天分离小鼠骨髓细胞,接种集落并于7 d后进行集落计数(n=3)。结果成功建立了EDAG敲除小鼠模型并在蛋白水平进行了敲除效果的鉴定;X线照射后第3天,与野生型相比,EDAG敲除小鼠白细胞明显减少,敲除小鼠骨髓细胞DNA损伤标志物p-H2A.x表达水平增加;X线照射7 d后骨髓细胞的集落形成能力降低。结论研究发现EDAG敲除小鼠对低剂量辐射诱导的损伤更加敏感,表现为血细胞数量减少,骨髓细胞成集落能力下降,DNA损伤增加。表明EDAG敲除小鼠作为一种对辐射高度敏感的动物模型,可作为低剂量辐射损伤生物学效应评价的有力工具。 展开更多

关键词 小鼠 基因敲除 红细胞分化相关基因 低剂量辐射损伤 血细胞计数 骨髓细胞 集落形成 DNA损伤

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红细胞生成相关MiRNA和LncRNA研究进展 被引量：3

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作者 何云燕 贾思远 于善娟 《实用临床医学（江西）》 CAS 2017年第9期91-97,共7页

红细胞生成是受多因素调节的个体分化发育的重要生理过程。红细胞生成异常会引起白血病、淋巴瘤、地中海贫血等多种严重的遗传性、获得性血液系统疾病。迄今,微小RNA(microRNA,miRNA)和长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)的发现... 红细胞生成是受多因素调节的个体分化发育的重要生理过程。红细胞生成异常会引起白血病、淋巴瘤、地中海贫血等多种严重的遗传性、获得性血液系统疾病。迄今,微小RNA(microRNA,miRNA)和长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)的发现和功能研究证实二者可通过多种形式调控基因表达,在红细胞生成过程中扮演重要角色,与红系生成分化相关疾病的发生发展,临床诊疗及预后关系密切。本文综述了近年来红细胞生成相关的miRNA和lncRNA的研究进展。 展开更多

关键词 红细胞分化 微小RNA 长链非编码RNA 非编码RNA

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