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组织块贴壁法提取胎盘、脐带和胎膜间充质干细胞效果观察 被引量：6
1
作者 马海英 李丽 +5 位作者 马玲 魏文娟 金玉楠 卢晓梅 杜莉莉 于艳秋 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第15期39-41,共3页
目的为临床移植组织工程等提供足够数量的种子细胞。方法利用组织块种植贴壁培养法提取胎盘、脐带和胎膜原代间充质干细胞,观察细胞形态、最早爬出时间,计算提取成功率及鹅卵石样细胞集落比例;MTT法检测传代前和传代后细胞生长曲线。结... 目的为临床移植组织工程等提供足够数量的种子细胞。方法利用组织块种植贴壁培养法提取胎盘、脐带和胎膜原代间充质干细胞,观察细胞形态、最早爬出时间,计算提取成功率及鹅卵石样细胞集落比例;MTT法检测传代前和传代后细胞生长曲线。结果原代培养细胞形态呈长梭形和卵圆形,传代后为均一长梭形;胎膜来源细胞最早爬出,胎盘次之,脐带最晚,且脐带来源原代提取成功率较低、鹅卵石样细胞集落比例大。生长曲线表明传代初细胞处于缓慢增殖期,胎膜来源细胞生长较为迅速,P5代时三种来源细胞进入对数增长期,增殖均旺盛。结论组织块种植贴壁培养法可成功提取间充质干细胞;提取的干细胞传代培养后细胞形态单一,增殖旺盛,可为临床移植组织工程等提供足够数量的种子细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 胎盘 脐带 胎膜 细胞培养 组织块种植贴壁培养法
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牛乳腺上皮细胞的分离培养 被引量：31
2
作者 李震 王英 +1 位作者 刘惠莉 张德福 《上海农业学报》 CSCD 2000年第3期25-28,共4页
比较了几种乳腺细胞分离培养方法的特点。实验证明 :胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养牛原代乳腺细胞。其中 ,胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高 ;组织块培养法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,但上皮... 比较了几种乳腺细胞分离培养方法的特点。实验证明 :胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养牛原代乳腺细胞。其中 ,胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高 ;组织块培养法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,但上皮细胞长出较晚 ,且占比例较低 ,然而 ,用于培养小动物乳腺组织具有优势 ,并且可结合组织块转移、胰蛋白酶消化纯化上皮细胞 ,用此方法本实验获得了牛乳腺上皮细胞富集的细胞系 ;同时讨论了乳腺上皮细胞增殖与分化的关系 。 展开更多
关键词 牛乳腺上皮细胞 分离培养 胶原酶消化法 组织块种植法 细胞增殖 细胞分化
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荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养 被引量：4
3
作者 厉世伟 谷静娟 +3 位作者 赵璐 李龙 王雪涛 况玲 《中兽医医药杂志》 2013年第1期5-9,共5页
目的:建立荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养方法。方法:采用组织块种植法培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰蛋白酶差时消化法分离、纯化上皮细胞。结果:成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,显微镜下观察,纯化的乳腺上皮细胞呈典型上皮细胞形态,细... 目的:建立荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞的分离培养方法。方法:采用组织块种植法培养奶牛乳腺上皮细胞,利用胰蛋白酶差时消化法分离、纯化上皮细胞。结果:成功培养出奶牛乳腺上皮细胞,显微镜下观察,纯化的乳腺上皮细胞呈典型上皮细胞形态,细胞之间排列紧密,呈鹅卵石铺路样,形态均一,多角形的单层聚集。通过荧光免疫细胞染色方法对细胞骨架蛋白-角蛋白18进行鉴定,呈现阳性反应。乳腺上皮细胞增殖旺盛,经25次以上传代后长势仍然良好。结论:采用组织块种植法结合胰酶差时消化法成功获得纯化的奶牛乳腺上皮细胞。 展开更多
关键词 荷斯坦奶牛 乳腺上皮细胞 细胞培养 组织块种植法
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小白鼠乳腺上皮细胞的体外培养 被引量：1
4
作者 陶海静 王老七 《郑州牧业工程高等专科学校学报》 2003年第2期81-82,100,共3页
本试验对小白鼠乳腺上皮细胞的原代培养方法进行了探索。胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养小白鼠原代乳腺细胞。胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高。组织块种植法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,然而... 本试验对小白鼠乳腺上皮细胞的原代培养方法进行了探索。胶原酶消化法和组织块种植法均可用于培养小白鼠原代乳腺细胞。胶原酶消化法容易得到均匀的乳腺细胞 ,且上皮细胞所占比例也比较高。组织块种植法不容易丢失、损伤上皮细胞 ,然而上皮细胞长出较晚 ,且占比例较低。结果表明 ,可结合组织块转移。 展开更多
关键词 小白鼠 乳腺 上皮细胞 体外培养 原代培养 胶原酶消化法 组织块种植法 胰蛋白酶
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鸽胚胎嗉囊成纤维细胞的分离培养及鉴定 被引量：4
5
作者 葛平壮 倪爱心 +6 位作者 边世雄 王攀林 李云雷 袁经纬 孙研研 麻慧 陈继兰 《中国家禽》 北大核心 2021年第5期21-26,共6页
为探究鸽嗉囊成纤维细胞的体外分离及培养方法,研究选择17日胚龄的鸽嗉囊组织,采用胰酶消化法和组织块贴壁培养法进行原代细胞分离,通过差速贴壁法纯化成纤维细胞。通过细胞形态观察、生长曲线测定和免疫荧光反应对细胞类型进行鉴定。... 为探究鸽嗉囊成纤维细胞的体外分离及培养方法,研究选择17日胚龄的鸽嗉囊组织,采用胰酶消化法和组织块贴壁培养法进行原代细胞分离,通过差速贴壁法纯化成纤维细胞。通过细胞形态观察、生长曲线测定和免疫荧光反应对细胞类型进行鉴定。结果表明,采用胰酶消化法分离培养30 h后细胞开始生长,采用组织块贴壁培养法的细胞培养72 h后开始从组织块边缘贴壁延伸生长;通过显微镜观察贴壁细胞呈梭型,连接紧密。对组织贴壁培养法获得的细胞传代后状态良好呈纺锤形,细胞培养48~84 h后快速生长,84 h后生长变缓;免疫荧光染色结果显示,波性蛋白染色为阳性,细胞核经DAPI染色呈现椭圆形,鉴定为成纤维细胞。成纤维细胞微丝在细胞周边及内部均丰富分布。研究表明,利用组织块贴壁培养法及胰酶消化法均能成功分离成纤维细胞,为后期深入研究嗉囊成纤维细胞功能奠定基础。 展开更多
关键词 鸽 嗉囊 成纤维细胞 组织块贴壁培养法 胰酶消化法
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雪旺细胞体外培养和纯化的新方法 被引量：7
6
作者 翁惠兰 孙淑明 吴丽娥 《中国基层医药》 CAS 2005年第10期1299-1300,共2页
目的介绍雪旺细胞体外培养、纯化的新方法。方法用0.25%Ⅳ型胶原酶和0.03%胰蛋白酶消化出生3 d的SD鼠臂层神经和坐骨神经组织块40 min,再将组织块贴壁培养。然后采用组织块反复种植纯化法、低浓度胰酶快速消化和差速贴壁法对雪旺细胞进... 目的介绍雪旺细胞体外培养、纯化的新方法。方法用0.25%Ⅳ型胶原酶和0.03%胰蛋白酶消化出生3 d的SD鼠臂层神经和坐骨神经组织块40 min,再将组织块贴壁培养。然后采用组织块反复种植纯化法、低浓度胰酶快速消化和差速贴壁法对雪旺细胞进行纯化。结果雪旺细胞从组织块中“爬出”速度较直接组织贴壁培养方法快,且纯度可达98%以上,细胞所受到的外界因素影响也较少。结论先用酶消化后组织块贴壁培养雪旺细胞的方法和组织块反复种植纯化、低浓度胰酶快速消化和差速贴壁法综合运用是一种简便有效的细胞培养、纯化方法,值得进一步推广。 展开更多
关键词 雪旺细胞 体外培养 纯化 细胞体外培养 纯化法 新方 养和 贴壁培养 坐骨神经 组织块 酶消化
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人胎盘来源的间充质干细胞向血管内皮细胞分化潜能的研究
7
作者 李丽 马海英 +1 位作者 马玲 于艳秋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2002-2002,共1页
关键词 内皮细胞分化 间充质干细胞 人胎盘 种子细胞来源 诱导分化 再生医学 细胞接种 内皮细胞形态 PLACENTA 组织块种植法
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高糖下视网膜Müller细胞生长活性的变化 被引量：1
8
作者 胡淑鸾 过贵元 《哈尔滨医药》 2022年第1期7-8,共2页
目的测量Müller细胞不同程度的高糖培养条件下生长活性的变化,推测Müller细胞在糖尿病性视网膜病变进展中的活性变化。方法通过组织块贴壁培养法进行视网膜Müller细胞体外培养,MTT法测定其在不同程度的高糖及作用时间下... 目的测量Müller细胞不同程度的高糖培养条件下生长活性的变化,推测Müller细胞在糖尿病性视网膜病变进展中的活性变化。方法通过组织块贴壁培养法进行视网膜Müller细胞体外培养,MTT法测定其在不同程度的高糖及作用时间下的活性OD值。结果高糖组Müller细胞培养时间为1d时表现生长增强;培养时间延长到3d以上,高糖组内见Müller细胞折光增加,随培养时间及浓度不同程度加强,其OD值逐渐呈下降趋势。结论视网膜Müller细胞在高糖作用下其生长受到显著的抑制。 展开更多
关键词 MÜLLER细胞 葡萄糖 组织块贴壁培养法 MTT法
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