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小鼠巨噬细胞的体外培养
1
作者 仓辉 季育华 《中华医学研究与实践》 2004年第6期25-27,共3页
目的巨噬细胞在体外培养需要有巨噬细胞克隆刺激因子的刺激方可增殖，故被认之谓“惰性细胞”。本文通过添加L929细胞培养上清液刺激巨噬细胞增殖拟建立体外巨噬细胞培养法。方法在原代巨噬细胞培养液中添加不同浓度的L929细胞培养上清... 目的巨噬细胞在体外培养需要有巨噬细胞克隆刺激因子的刺激方可增殖，故被认之谓“惰性细胞”。本文通过添加L929细胞培养上清液刺激巨噬细胞增殖拟建立体外巨噬细胞培养法。方法在原代巨噬细胞培养液中添加不同浓度的L929细胞培养上清液，用细胞生长动态线图来反映巨噬细胞的增殖改变。结果当添加L929细胞培养上清液浓度≥12．5％时，较对照管呈明显地刺激巨噬细胞生长并伴随添加浓度的增加呈正相关作用。结论用L929细胞培养上清液可刺激原代巨噬细胞增殖，将为有关巨噬细胞功能等研究提供一项有效工具。 展开更多
关键词 巨噬细胞 体外培养 L929细胞培养上清液 细胞活力测定法 增殖动态
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新生山羊睾丸支持细胞分离培养方法研究 被引量：5
2
作者 杨璐 黄忍 +2 位作者 张焕容 陈明 向华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第3期1-4,10,155,156,共7页
为了比较不同培养方式获得新生山羊睾丸支持细胞的效果,试验分别采用0.125%胰蛋白酶、1.3 mg/mL胶原酶Ⅰ消化法及组织块法分离培养细胞,并对分离纯化的细胞分别进行吖啶橙(AO)染色,观察细胞形态,利用Feulgen染色试剂盒对其进行鉴定,绘... 为了比较不同培养方式获得新生山羊睾丸支持细胞的效果,试验分别采用0.125%胰蛋白酶、1.3 mg/mL胶原酶Ⅰ消化法及组织块法分离培养细胞,并对分离纯化的细胞分别进行吖啶橙(AO)染色,观察细胞形态,利用Feulgen染色试剂盒对其进行鉴定,绘制细胞生长曲线,通过脂质体介导法将绿色荧光蛋白(EGFP)转入睾丸支持细胞并在荧光倒置显微镜下检测该蛋白的表达情况。结果表明:相较于胶原酶Ⅰ消化法和组织块法,0.125%胰蛋白酶消化法获得的睾丸支持细胞数量较多,细胞生长快,成本较低,可连续传至第35代;分离纯化的细胞经吖啶橙染色,细胞呈不规则的多边形,细胞核为绿色;Feulgen染色试剂盒鉴定可见细胞核淡染,细胞质不着色,细胞界限清晰,细胞核内有大小不一的颗粒状物质,为细胞核仁周围的卫星核小体;加入MTT培养至第5天时睾丸支持细胞的活力最强,可用于后续试验;质粒pEGFP-N1成功导入睾丸支持细胞内,荧光倒置显微镜下可见部分细胞发绿色荧光。说明低浓度胰蛋白酶消化法是一种培养时间短、成本低、操作可行性好的分离山羊睾丸支持细胞的方法。 展开更多
关键词 山羊睾丸支持细胞 原代培养 细胞染色 分离鉴定 细胞活力测定 脂质体转染
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低功率微波对人正常及脂多糖诱导的牙周膜细胞增殖的影响 被引量：1
3
作者 谢文泵 庄文捷 黄璇叶 《中外医学研究》 2019年第8期165-167,共3页
目的:探讨微波辐照对人牙周膜细胞增殖的影响。方法:运用微波理疗仪(输出功率调节为14 W)以连续波、垂直极化照射方式对人牙周膜细胞行微波辐射(频率2 450 MHz),24、48 h后MTS法检测人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖效应。结果:微波辐照对健康... 目的:探讨微波辐照对人牙周膜细胞增殖的影响。方法:运用微波理疗仪(输出功率调节为14 W)以连续波、垂直极化照射方式对人牙周膜细胞行微波辐射(频率2 450 MHz),24、48 h后MTS法检测人牙周膜细胞(h PDLCs)增殖效应。结果:微波辐照对健康h PDLCs增殖效应影响,微波照射24、48 h后,照射40 s组,实验组中吸光度值(OD值)低于对照组(P<0.01);微波辐照对炎症h PDLCs增殖效应影响,微波照射24、48 h后,照射10、20、40 s组,实验组中吸光度值(OD值)都低于对照组(P<0.01)。结论:长时间(40 s)低功率微波辐照健康人牙周膜细胞能明显抑制正常牙周膜增殖,促进细胞凋亡。低功率微波照射10、20、40 s对炎性的人牙周膜细胞的增殖均具有明显抑制作用,随着微波辐射强度的增高对其增殖抑制率也愈大,呈现明显的剂量依赖性。低功率微波照射时间为10～20 s时能抑制炎症人牙周膜细胞过度增殖,又不影响人健康牙周膜细胞的增殖。 展开更多
关键词 低功率微波 牙周膜细胞 内毒素脂多糖 细胞活力测定 增殖效应
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C57BL/6J乳鼠心肌细胞的提取及鉴定
4
作者 张新会 罗文龙 裴汉军 《包头医学院学报》 CAS 2020年第5期90-93,共4页
目的:改良C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取方法,使C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取规范化、细胞产量、细胞纯度有所提高。方法:在消化时加入自制搅拌子,采用0.06%胰蛋白酶预处理,后以0.04%Ⅱ型胶原蛋白酶给予消化,采用差速贴壁90 min,同时给予0.1 mm... 目的:改良C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取方法,使C57BL/6J乳鼠心肌细胞提取规范化、细胞产量、细胞纯度有所提高。方法:在消化时加入自制搅拌子,采用0.06%胰蛋白酶预处理,后以0.04%Ⅱ型胶原蛋白酶给予消化,采用差速贴壁90 min,同时给予0.1 mmol/L 5-溴-2-脱氧尿核苷(Brdu)抑制成纤维细胞生长,同时进行心肌细胞鉴定,及细胞活力鉴定。结果:心肌细胞成活率95.5%,心肌细胞纯度94%。24 h心肌细胞基本贴壁,部分已经出现搏动,72 h可出现同步性搏动。细胞活力在培养至4~7 d逐渐升高,第7 d活力最好,超过7d细胞活力降低。结论:通过此种方法对C57BL/6J乳鼠心肌细胞进行提取,并进行改良,C57BL/6J乳鼠心肌细胞成活率和纯度均能够保持较高水平。心肌细胞在4~7d活力逐渐升高,推荐再此时间段进行实验。 展开更多
关键词 C57BL/6J乳鼠 原代心肌细胞提取 心肌细胞鉴定 心肌细胞活力测定
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不同保存期库血辐照前后的淋巴细胞代谢活性研究 被引量：1
5
作者 袁晓华 刘新华 +2 位作者 左宏莉 顾晓东 王淑梅 《临床血液学杂志（输血与检验）》 CAS 2013年第4期518-520,共3页
目的:了解不同保存期内库血辐照前后的淋巴细胞活性变化。方法:采用经典的MTT实验法,检测4℃保存1、5、10、15d内的库血在辐照前后淋巴细胞的增殖代谢活性,以未辐照血为对照组,根据公式计算辐照的抑制率并绘制曲线。结果:辐照对在4℃保... 目的:了解不同保存期内库血辐照前后的淋巴细胞活性变化。方法:采用经典的MTT实验法,检测4℃保存1、5、10、15d内的库血在辐照前后淋巴细胞的增殖代谢活性,以未辐照血为对照组,根据公式计算辐照的抑制率并绘制曲线。结果:辐照对在4℃保存5d以内的库血表现出增殖抑制效应,但淋巴细胞在辐照后仍保持一定的活性,代谢抑制率为45.26%;保存10d以上的库血,辐照的抑制效应不明显,仅为10%左右。结论:随着库血在4℃保存时间的延长,辐照对淋巴细胞增殖的抑制效应递减。 展开更多
关键词 血液辐照 淋巴细胞 MTT细胞活力测定
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