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6种商品化PRRSV美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒性能比对
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作者 高晓龙 栗云鹏 +5 位作者 李志军 张启龙 傅彩霞 高敏 雷琪莉 王林 《中国动物检疫》 2025年第2期80-86,共7页
为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV... 为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV美洲经典毒株VR2332和高致病性毒株JXA1,A品牌试剂盒最低检测限均可达到1 copy/μL,D品牌试剂盒最低检测限分别为100和1000 copies/μL,其他品牌试剂盒最低检测限为1~10 copies/μL;6种试剂盒对猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪细小病毒(PPV)的检测均为阴性,特异性良好;对不同浓度模板进行检测,除1个变异系数为6.5%以外,其余均小于5.0%,重复性较好。临床样品检测结果显示,F品牌试剂盒阴性样品检测符合率为95%,其余试剂盒为100%;D品牌试剂盒阳性样品检测符合率为50%,其余试剂盒为100%。综上所述,6种试剂盒的特异性、重复性均较好,但其敏感性及临床检测性能存在一定差异。建议在使用荧光定量PCR试剂盒检测PRRSV前,对其性能进行科学评估,选用性能良好的试剂盒以满足检测需求。本研究为检测机构和养殖场选择PRRSV检测试剂盒提供了依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲经典毒株 高致病性毒株 pcr检测试剂 性能对比
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FD结核病诊断试剂盒检测结核杆菌杭体
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作者 刘远方 周小敏 夏晓云 《华南国防医学杂志》 CAS 1999年第2期60-61,共2页
目前用于结核病检验的常规方法,由于灵敏度差,如痰涂片(AFB)法,一次检查阳性率仅为30%~40%,结核杆菌培养,需6~8周才获得结果,结核菌素皮试法及ELISA法,其特异性尚不能令人满意,PCR法价格昂贵,操作复杂,需一定的设备条件方可开展,FD... 目前用于结核病检验的常规方法,由于灵敏度差,如痰涂片(AFB)法,一次检查阳性率仅为30%~40%,结核杆菌培养,需6~8周才获得结果,结核菌素皮试法及ELISA法,其特异性尚不能令人满意,PCR法价格昂贵,操作复杂,需一定的设备条件方可开展,FD结核病诊断盒将结核杆菌特异性抗原(LAM)固相在特制的载体上,当被检样品中含有一定量的结核杆菌的抗体(LAM抗体)时,使以载体上的特异性抗原(LAM)结合成抗原抗体复合物,复合物再与标记有相应“二抗”的胶体金试剂作用,而形成红色或紫红的圆形斑点,故呈现红色或紫红色斑点为阳性结果。结核杆菌抗体,结核病患者和大多数健康人的血液中都含有抗结核杆菌抗体、但其含量,前者显著高于后者。 展开更多
关键词 结核杆菌抗体 结核病诊断 试剂检测 特异性抗原 结核病检验 分离培养 结核病防治 结核菌素皮试 痰标本 结核病患者
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应用K88-K99 PCR试剂盒检测大肠杆菌研究 被引量:2
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作者 李鹏 王家乡 +2 位作者 戴鼎震 程太平 施秋艳 《湖北农学院学报》 2003年第2期103-104,145,共3页
用研制的K88-K99 PCR诊断试剂盒对湖北省和江苏省的5个猪场238个病猪粪便进行了检测。扩增结果是K88检出率92.0%(219/238);K99检出率89.1%(212/238);阳性对照检出率100%,阴性对照未扩增到目的DNA片段。结果表明,运用PCR试剂盒检测具... 用研制的K88-K99 PCR诊断试剂盒对湖北省和江苏省的5个猪场238个病猪粪便进行了检测。扩增结果是K88检出率92.0%(219/238);K99检出率89.1%(212/238);阳性对照检出率100%,阴性对照未扩增到目的DNA片段。结果表明,运用PCR试剂盒检测具有快速、特异的优点,可同时处理大量样品,且可直接对粪便样品进行检测,值得进一步推广。 展开更多
关键词 应用 K88-K99菌毛 pcr试剂 检测技术 大肠杆菌 仔猪 腹泻
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应用PCR试剂盒对奶牛结核病的检测
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作者 吴位珩 孙启跃 +4 位作者 徐景峨 杨莉 文才智 乐琼 杨茂生 《中国畜禽种业》 2012年第6期68-70,共3页
应用聚合酶链式反应技术制备的PCR式剂盒,对贵州省某奶牛场140份血样和奶样标本中的结核分枝杆菌进行检测,结果显示:在111份奶样中有8份为阳性,阳性检出率7.2%。在39份血样中12头牛为阳性,阳性检出率为30.76%。本试验对PPD检测与PCR检... 应用聚合酶链式反应技术制备的PCR式剂盒,对贵州省某奶牛场140份血样和奶样标本中的结核分枝杆菌进行检测,结果显示:在111份奶样中有8份为阳性,阳性检出率7.2%。在39份血样中12头牛为阳性,阳性检出率为30.76%。本试验对PPD检测与PCR检测法进行验证,将1200头牛中PPD检测阳性牛和可疑牛,再用PCR法进行检测,PCR法阳性牛共计20头份,阳性检出率为1.67%,PPD法阳性牛24头份,阳性检出率为3.67%。结果表明:PCR试剂盒在检测牛结核病不同标本中显示出快速、特异等优点。 展开更多
关键词 奶牛 结核 血液 样品 结核分枝杆菌 pcr试剂 检测:试验
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利用PCR技术检测537份新疆结核病人痰标本中的结核分枝杆菌 被引量:1
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作者 蔡宏 李君莲 +5 位作者 呼西旦 李淑霞 黄丽茜 陈银华 许苗 朱玉贤 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第4期65-67,共3页
目的 提高聚合酶链反应在检测人结核分枝杆菌中的特异性和敏感性。方法 在聚合酶链反应中对 4种DNA片段即结核杆菌特异插入序列IS6 110 ,IS10 81,和 16SrRNA ,6 5kDa摸板进行了比较 ;为获取较多的细菌DNA ,临床痰标本处理采用了国际... 目的 提高聚合酶链反应在检测人结核分枝杆菌中的特异性和敏感性。方法 在聚合酶链反应中对 4种DNA片段即结核杆菌特异插入序列IS6 110 ,IS10 81,和 16SrRNA ,6 5kDa摸板进行了比较 ;为获取较多的细菌DNA ,临床痰标本处理采用了国际标准化方法主要包括用一定量的N -乙酰 -L半胱胺酸和氢氧化钠处理痰标本 ;改进了RCR混和液的成份即添加了甘油 ,dUTP -尿嘧啶糖基化酶。结果 选择IS6 110作为结核杆菌特异性摸板用于检测细菌DNA ,制备出了 6批人结核杆菌PCR检测试剂盒 ,在对来自新疆结核病研究所的 5 37份痰标本的检测中发现 ,该试剂盒检测的特异性为 6 5 .97% ,敏感性为 93 .5 3 %。结论改良TB -PCR试剂盒显示有较高的敏感性 ,特异性还有待于进一步完善 ,该试剂盒在临床诊断中有一定的价值。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 痰标本 聚合酶链式反应 结核杆菌pcr检测试剂盒 结核
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大肠杆菌O157:H7实时荧光定量PCR快速检测试剂盒的组建及活菌检测 被引量:6
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作者 魏婉晴 孔梁宇 +4 位作者 胡瑞瑞 陆兆新 周立邦 孟凡强 别小妹 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第1期94-103,共10页
该研究组建了基于高分辨熔解曲线分析的大肠杆菌O157:H7实时荧光定量PCR快速检测试剂盒,对试剂盒的灵敏度、特异性、抗干扰能力和检测人工污染样品的情况进行了评估,并在组建试剂盒的基础上,利用叠氮溴化丙锭(PMAxx)对活/死细胞的选择性... 该研究组建了基于高分辨熔解曲线分析的大肠杆菌O157:H7实时荧光定量PCR快速检测试剂盒,对试剂盒的灵敏度、特异性、抗干扰能力和检测人工污染样品的情况进行了评估,并在组建试剂盒的基础上,利用叠氮溴化丙锭(PMAxx)对活/死细胞的选择性,构建了大肠杆菌O157:H7活菌定量检测技术。结果显示,试剂盒特异性强,仅大肠杆菌O157:H7血清型有阳性扩增;最低检测限为84CFU/m L;在四种常见食源性致病菌干扰下能准确检测出大肠杆菌O157:H7;在人工污染食品样品的实际检测中,可检测到初始污染量为7.97×10^(0)CFU/m L的样品;通过单因素变化试验对PMAxx处理的各项参数进行优化,确立了曝光时间11 min、暗孵育时间20min、PMAxx浓度30μmol/L的最优反应体系,并与本研究组建的实时荧光定量PCR试剂盒相结合,建立了在3.4×10^(7)-3.4×10^(2)CFU/m L浓度范围内Ct值与菌液浓度线性关系良好的大肠杆菌O157:H7活菌定量检测方法,为食源性致病菌快速定量检测提供技术支持。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 实时荧光定量pcr 高分辨熔解曲线 快速检测试剂 叠氮溴化丙锭 活菌检测
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核酸提取试剂盒对饲料中牛羊源性成分检测的影响
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作者 李泰 朱英才 +5 位作者 骆璐 彭强 凌洪权 廖星杰 王钦 张承双 《粮食与饲料工业》 CAS 2024年第1期70-71,共2页
实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实... 实时荧光聚合酶链反应法(荧光PCR法)是目前饲料中牛羊源性成分的定性检测中常用方法之一。为了熟练操作和掌握这个方法,使得实验室工作人员在做饲料中牛羊源性成分定性这类检测时能有一个清晰的认识,通过核酸提取试剂盒的选取及平行实验比对,对此进行了阐释。 展开更多
关键词 荧光pcr 牛羊源性成分 检测分析 核酸提取试剂
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沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用 被引量:12
8
作者 李小玲 刘斌 +3 位作者 但现龙 王大鹏 周敏 史贤明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期3395-3402,共8页
【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能... 【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。【结果】试剂盒对147株沙门氏菌和28株非沙门氏菌的检测结果显示,所有沙门氏菌均能扩增出362 bp的目标条带,非沙门氏菌仅扩增出520 bp的内标条带。试剂盒检测沙门氏菌基因组DNA的检测限为8.0 fg/PCR,检测染菌量为4—5 CFU/10 mL的牛奶样品,增菌8—10 h即得到阳性结果。反复冻融60次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果。对食品样品的检测结果显示,阳性检出率为2/30,与国标法的检测结果相符,比未添加扩增内标的PCR检测结果(阳性检出率为1/30)准确。【结论】采用添加扩增内标的PCR试剂盒检测沙门氏菌,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并能有效指示假阴性,提高检测的准确性,适用于食品中沙门氏菌的快速筛检。 展开更多
关键词 沙门氏菌 聚合酶链式反应(pcr) 扩增内标 检测试剂
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弓形虫PCR检测试剂盒的组装和初步应用 被引量:9
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作者 任科研 李琳 +3 位作者 苑淑贤 尹荣兰 杨金生 姚新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期92-94,共3页
研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能... 研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能扩增出弓形虫特异性基因MIC3片段,与猪球虫、贾第虫、猪旋毛虫和隐孢子虫无交叉反应;该检测方法最低能够检测到10个弓形虫速殖子的DNA,不同批次的试剂盒对同一样品检测和同一批次对不同样品检测,有较高的重复性和稳定性,且常温下可保存1年以上,临床应用效果显著。该检测试剂盒对弓形虫病早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。 展开更多
关键词 弓形虫 pcr检测试剂 组装 应用
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羊痘病毒PCR检测方法的建立和试剂盒的研制 被引量:8
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作者 张志成 陈丽华 +3 位作者 陆静静 张大淦 戴薇 陈钟鸣 《中国动物检疫》 CAS 2011年第2期44-46,共3页
根据GenBank上已发表的羊痘病毒(CPV)的全基因序列,设计并合成了一对能特异性扩增羊痘病毒的引物,扩增产物大小约为445bp。通过对PCR方法的优化,建立了检测羊痘病毒的PCR方法,并研制出检测试剂盒。同时对试剂盒的敏感性,特异性和稳定性... 根据GenBank上已发表的羊痘病毒(CPV)的全基因序列,设计并合成了一对能特异性扩增羊痘病毒的引物,扩增产物大小约为445bp。通过对PCR方法的优化,建立了检测羊痘病毒的PCR方法,并研制出检测试剂盒。同时对试剂盒的敏感性,特异性和稳定性进行了研究。实验结果表明,该试剂盒具有良好的敏感性和特异性,稳定性在-20℃至少可以保存一年。 展开更多
关键词 羊痘病毒 pcr检测试剂 敏感性 特异性
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禽流感病毒A型和H5亚型RT-PCR检测试剂盒研究 被引量:5
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作者 孙明 李纯铃 +4 位作者 赵铁柱 王传彬 陈西钊 田克恭 王宏伟 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第1期3-6,共4页
目的 检测和鉴定A型、H5亚型禽流感病毒 (AIV) ,研发一种高效实用的检测手段。方法 根据Ming ShiuhLee报道的文献设计、合成引物 ,采用反转录和PCR一步法对A型、H5亚型禽流感病毒cDNA进行扩增和电泳鉴定 ,组装成禽流感病毒RT PCR试剂... 目的 检测和鉴定A型、H5亚型禽流感病毒 (AIV) ,研发一种高效实用的检测手段。方法 根据Ming ShiuhLee报道的文献设计、合成引物 ,采用反转录和PCR一步法对A型、H5亚型禽流感病毒cDNA进行扩增和电泳鉴定 ,组装成禽流感病毒RT PCR试剂盒 ,对H1~ 15亚型AIV参考株、38份AIV国内分离株进行检测试验。结果 建立了A型、H5亚型禽流感病毒RT PCR检测方法 ,并在此基础上组装试剂盒 ,用A型试剂盒检测时 ,全部AIV毒株均为阳性 ,能检测 1 10 2 4血凝单位禽流感病毒 ;用H5亚型试剂盒检测时 ,仅有H5亚型AIV参考株和 19株H5亚型AIV分离株呈阳性 ,其余H1~H4、H6~H15参考株和H7、H9分离株以及 1株H5分株均为阴性 ,能检测1 6 4血凝单位禽流感病毒。 2种试剂盒对实验感染鸡病料检出率均为 10 0 %。结论 研制的AIVA型、H5亚型RT PCR试剂盒具有特异性强、敏感性高、稳定性和重复性好的特点。 展开更多
关键词 禽流感病毒 A型 H5亚型 RT—pcr检测 试剂 禽流感
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鸡毒支原体PCR检测试剂盒的研制与应用 被引量:6
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作者 谢芝勋 邓显文 +5 位作者 唐小飞 谢志勤 庞耀珊 廖敏 刘加波 何竞铭 《畜牧与兽医》 北大核心 2004年第1期3-5,共3页
根据基因库中鸡毒支原体 1 6SrRNA的序列研制PCR检测试剂盒 ,用于检测鸡毒支原体 (MG)。结果表明该MG PCR检测试剂盒对不同MG参考菌株和地方分离株均能特异性地扩增出 732bp条带 ,而对其他禽支原体和禽病病原体的扩增结果为阴性。该MG ... 根据基因库中鸡毒支原体 1 6SrRNA的序列研制PCR检测试剂盒 ,用于检测鸡毒支原体 (MG)。结果表明该MG PCR检测试剂盒对不同MG参考菌株和地方分离株均能特异性地扩增出 732bp条带 ,而对其他禽支原体和禽病病原体的扩增结果为阴性。该MG PCR试剂盒最低能检测出 1 0 0fg的MGDNA模板。保存期测定结果表明 ,该MG PCR试剂盒在 - 2 0℃条件下保存至 1 ,3 ,6和 9个月时 ,其敏感性无明显变化 ,仍能检测到 1 0 0fg至 1pg的MGDNA模板。保存至 1 2个月时其敏感度虽降低了 1个滴度 ,但仍能 1 0 0 展开更多
关键词 鸡毒支原体 pcr 检测试剂 研制 应用 保存期 敏感性 特异性
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一步法RT-PCR检测烟草环斑病毒试剂盒的研制与应用 被引量:5
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作者 张永江 李明福 +1 位作者 黄冲 相宁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第10期2072-2073,共2页
根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明... 根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明,该试剂盒在常温、4℃和-20℃下可分别保存2d、7d和60d;灵敏度是DAS-ELISA的100倍;质量控制试验结果一致,具有较高的重复性。 展开更多
关键词 一步法RT—pcr 烟草环斑病毒 检测 试剂
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3种致泻大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒的研制与效用评价 被引量:4
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作者 周杨 万强 +4 位作者 蔡芷荷 卢勉飞 杨绪伟 吴清平 李健顺 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第12期243-251,共9页
本研究为了研制一种多重PCR检测试剂盒,用于对肠道致病性大肠埃希氏菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shigatoxin-producing E. coli,STEC)和肠道出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic E. coli,EHE... 本研究为了研制一种多重PCR检测试剂盒,用于对肠道致病性大肠埃希氏菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)、产志贺毒素大肠埃希氏菌(Shigatoxin-producing E. coli,STEC)和肠道出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic E. coli,EHEC)3种DEC(Diarrheagenic E. coli,DEC)的快速检测。优化所涉及的多重PCR检测体系和构建相应的检测试剂盒,其中的主要检测试剂采用冻干工艺,评价该试剂盒的检测特异性、灵敏度、重复性以及保质期。结果表明,本研究成功建立了针对于3种DEC的检测体系EP和检测体系ST;3种DEC标准菌株和分离菌株均出现明显的目标基因条带,而其他种类DEC标准菌株和分离菌株均未出现目标基因条带;该试剂盒检测管EP和检测管ST的检出限分别可达到1.5×10^3 cfu/mL和2.1×10^3cfu/mL,且二者检测重复率均为100%;该试剂盒可在4℃条件下保存12个月,也可在42℃环境运输120h,期间其检测效力不受影响。本研究研制的试剂盒性能好,检测结果稳定、可靠,适用于食品中3种DEC的快速检测。 展开更多
关键词 致泻大肠埃希氏菌 多重pcr检测试剂 实效性评价
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产品介绍——食品沙门氏菌PCR快速检测试剂盒简介 被引量:15
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作者 马立农 刘华伟 +1 位作者 张春柳 梁顺兴 《深圳职业技术学院学报》 CAS 2005年第2期95-96,共2页
A self-developed PCR kit was introduced. It can detect rapidly Salmonella in food. And those actual effect pictures of the PCR kit show that it is sensitive and credible to rapid detection of Salmonella in food.
关键词 快速检测试剂 产品介绍 pcr 简介 沙门氏菌污染 中毒病例 食源性疾病 安全监控 食品质量 测定项目 卫生指标 检测方法 细菌性 畜产品 CMA 食物
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单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌的比较 被引量:22
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作者 杨爱萍 黄金林 《畜牧与兽医》 北大核心 2003年第12期21-22,共2页
本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,... 本文对单抗酶联试剂盒与PCR方法快速检测沙门氏菌进行了比较。将沙门氏菌与大肠杆菌以不同比例混合后 ,分别用ELISA和PCR法检测 ,在 1∶1 0 0的比例时 ,用这 2种方法均能检测出阳性样品 ;在 1∶1 0 0 0的比例时 ,用ELISA法检测为阴性 ,而用PCR法则能检测出。检测鲜牛奶、龙虾、虾仁、熟食制品等样品 ,2种方法的符合率达 97 6 %。对冻虾仁、人粪便样品的前增菌、选择性增菌、后增菌过程进行同步检测 ,在样品的前增菌液 ,直接ELISA法检测的OD值小于 0 5 ,而PCR法扩增能出现特异条带 ,经国标方法验证为阳性 ,证实PCR法的敏感性优于直接ELISA法 ,而在选择性增菌液和M 肉汤后增菌液中 ,2种方法均能检出阳性样品。 展开更多
关键词 单抗酶联试剂 pcr 沙门氏菌 快速检测 比较研究 敏感性
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套式PCR检测试剂盒用于普查疟疾带虫率的评价(英文) 被引量:2
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作者 李国铭 周耀芳 +7 位作者 邓常生 杨雪芹 罗晓莉 陈颖婷 杨瑞仪 曾庆平 李国桥 冯丽玲 《广州中医药大学学报》 CAS 北大核心 2013年第6期839-842,848,共5页
【目的】评价套式PCR检测试剂盒在疟疾现场监测中的效果。【方法】对疟疾从高度流行区转入低度流行区的非洲科摩罗Moheli岛居民,采集其指血2 098人份,同时制作厚血片和抗凝血样,用自制的套式PCR检测试剂盒检测所采集血样中的疟原虫,并... 【目的】评价套式PCR检测试剂盒在疟疾现场监测中的效果。【方法】对疟疾从高度流行区转入低度流行区的非洲科摩罗Moheli岛居民,采集其指血2 098人份,同时制作厚血片和抗凝血样,用自制的套式PCR检测试剂盒检测所采集血样中的疟原虫,并与镜检法进行比较。为了避免假阳性,试验中设置了阴性对照组和阳性对照组。【结果】2 098份血样中,套式PCR技术阳性数140人,阳性率为6.67%;镜检阳性数63人,阳性率为3.00%。【结论】套式PCR检测试剂盒检测疟疾感染具高度敏感性,在疟疾控制转入清除阶段,采用此法普查可发现低密度疟原虫携带者,对快速清除传染源将有重要价值。 展开更多
关键词 套式pcr检测试剂 科摩罗 监测 清除疟疾
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小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒组装和初步应用 被引量:2
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作者 任科研 姚新华 +2 位作者 苑淑贤 李琳 邵洪泽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期14-16,共3页
本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进... 本试验旨在研制小鹅瘟和雏鹅新型病毒性肠炎二联PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据小鹅瘟和鹅病毒性肠炎基因序列,设计合成一对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,并分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性和保存期进行研究,之后进行临床扩大试验。该二联PCR诊断试剂盒能扩增出预期的小鹅瘟375bp核酸片段和鹅病毒性肠炎223bp核酸片段,与鸭瘟病毒、鹅副黏病毒无交叉反应;最低能检测到小鹅瘟病毒104 ELD50/mL,雏鹅新型病毒性肠炎病毒2.5×10-1ELD50;不同批次的试剂盒对同一样品检测结果一致;常温下至少可保存5个月;临床应用效果显著。该二联PCR检测试剂盒能够对小鹅瘟和雏鹅病毒性肠炎早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。 展开更多
关键词 小鹅瘟 雏鹅新型病毒性肠炎 pcr检测试剂 研制 应用
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猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测试剂盒的研制及应用 被引量:2
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作者 任方方 胡瑞丽 +5 位作者 倪建平 许燕 李春华 赵笑 杜亚楠 赵凯 《上海农业学报》 CSCD 2017年第2期89-95,共7页
为了开发针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及其试剂盒,对PCV2的ORF2基因设计相应的特异性引物和探针,采用荧光定量PCR方法检测PCV2。试验表明:该方法循环阈值(Ct)与标准DNA模板在10~1—10~7拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相... 为了开发针对猪圆环病毒2型(PCV2)的诊断技术及其试剂盒,对PCV2的ORF2基因设计相应的特异性引物和探针,采用荧光定量PCR方法检测PCV2。试验表明:该方法循环阈值(Ct)与标准DNA模板在10~1—10~7拷贝/μL浓度范围内具有极好的线性关系,相关系数为0.9999;重复性好,批内试验中Ct值的变异系数在0.59%—1.05%,批间试验的Ct值变异系数为1.9%—4.2%;研制的检测试剂盒与猪瘟病毒(HCV)、猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)不发生交叉反应,检测极限和定量极限分别为10和100拷贝数。用此方法对1 000个临床样品进行检测,结果710个被检测为阳性。结果显示,所研制的PCV2诊断试剂盒灵敏度高,特异性强,稳定性好,为PCV2的检测和流行病学的调查提供了一种简便快速的诊断方法。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 荧光定量 pcr检测 诊断试剂
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快速检测猪肉中单核细胞增多症李氏菌PCR试剂盒的研制 被引量:3
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作者 杨百亮 丁伟 薛应照 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期160-163,共4页
快速检测猪肉中单核细胞增多症李氏菌的PCR试剂盒与分离培养法平行检测156份猪肉样品,结果PCR的阳性率为5.8%,分离培养法的阳性率为3.8%,两者符合率为97%。实验证明,该试剂盒具有良好的特异性和可重复性,可测... 快速检测猪肉中单核细胞增多症李氏菌的PCR试剂盒与分离培养法平行检测156份猪肉样品,结果PCR的阳性率为5.8%,分离培养法的阳性率为3.8%,两者符合率为97%。实验证明,该试剂盒具有良好的特异性和可重复性,可测出样品中至少32OCFU细菌,并在2d内取得结果,具有推广应用价值。 展开更多
关键词 pcr试剂 单核细胞增多症 李氏菌 猪肉 检测
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