CTC法结合体外受精比较不同方法对绵羊精子体外获能的影响 被引量：5

1

作者 刘烈琴 刘丑生 +4 位作者 郭勇 倪和民 张宏 杨飞鸽 刘云海 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第8期31-34,共4页

为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧... 为比较不同获能方法对绵羊精子的获能效果,新鲜绵羊精液分别经肝素上游法(swim-up)、钙离子载体(IA,A23187)诱导法、Percoll离心法和Percoll离心后肝素孵育法进行精子获能的诱导后与体外成熟的绵羊卵母细胞进行体外受精,并利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合各自相应的体外受精结果对其获能效果进行检验。结果显示上游法处理后精子的获能比例和受精后的卵裂率均高于其它组,说明肝素上游法可以较好的诱导绵羊精子获能。 展开更多

关键词 绵羊精子 获能 CTC 体外受精

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低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响 被引量：5

2

作者 徐振军 刘黎明 +3 位作者 刘冰 赵冰 张红霞 黄亚斐 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期48-50,共3页

为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色... 为了探讨低温保存对绵羊精子质膜完整性的影响,研究采用低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)法检测低温保存前后绵羊精子头膜和尾膜的完整性。试验设计了5个HOS-EY低渗染液浓度梯度组合(110,130,150,170,190 mOsm),按精子尾部肿胀与否和头部着色与否分为4种类型进行统计。结果表明:低温保存后,绵羊精子头膜、尾膜均完整的Ⅳ型精子发生率和头膜、尾膜均损伤的Ⅰ型精子发生率与鲜精相比分别极显著减少和增多(P<0.01),说明低温保存过程对精子质膜完整性有极显著影响;在低温保存过程中头膜损伤-尾膜完整的Ⅱ型精子发生率极显著增多(P<0.01),而头膜完整-尾膜损伤的Ⅲ型精子发生率显著减少(P<0.05),说明精子头膜或尾膜的损伤是独立发生的,且头膜比尾膜更易损伤。5种低渗液中,150 mOsm染液检测效果最好。 展开更多

关键词 低温保存 绵羊精子 质膜完整性

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钙离子载体及咖啡因对绵羊精子获能的影响 被引量：2

3

作者 刘烈琴 郭勇 +4 位作者 刘云海 薛君忠 张宏 李晓燕 倪和民 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期112-116,共5页

通过添加不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L）的钙离子载体（A23187,IA）及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越... 通过添加不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.5、1、5、10μmol/L）的钙离子载体（A23187,IA）及2 mmol/L咖啡因,探讨不同作用时间其对绵羊精子体外获能的影响。结果发现,IA浓度越高,精子的体外获能率越高,顶体反应率越低,活力越低,死精子就越多;而延长作用时间对获能、顶体反应的影响不明显。IA和咖啡因共同作用后,咖啡因能够促进IA诱导顶体反应的发生。建议用IA诱导绵羊精子获能时,其浓度以0.050.2μmol/L为宜,作用时间1 min。 展开更多

关键词 绵羊精子 体外获能 钙离子载体 咖啡因

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冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响 被引量：1

4

作者 徐振军 李娜 +2 位作者 刘冰 赵冰 林言 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第2期49-51,共3页

为了检测冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响,试验采用改良的明胶膜片法对冷冻保存前后小尾寒羊精子顶体蛋白酶的活性进行研究。结果表明:冷冻保存后精子顶体蛋白酶阳性反应率[(47.00±2.55)%]和平均成环直径[(23.89±0.22... 为了检测冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性的影响,试验采用改良的明胶膜片法对冷冻保存前后小尾寒羊精子顶体蛋白酶的活性进行研究。结果表明:冷冻保存后精子顶体蛋白酶阳性反应率[(47.00±2.55)%]和平均成环直径[(23.89±0.22)μm]与冷冻前精子顶体蛋白酶阳性反应率[(77.00±2.00)%]和平均成环直径[(37.26±0.47)μm]相比差异极显著(P<0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子顶体蛋白酶活性造成显著性损伤。 展开更多

关键词 冷冻保存 绵羊精子 顶体蛋白酶 活性

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冻融过程对绵羊精子琥珀酸脱氢酶活性影响的研究 被引量：1

5

作者 徐振军 张萌 +4 位作者 刘冰 赵力新 赵冰 高星海 段超凡 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期62-64,共3页

为了检测冷冻对绵羊精子琥珀酸脱氢酶(SDH)的影响,探索其与精子活率的关系,试验采用试管法对冷冻前后小尾寒羊精子SDH的活性进行研究。结果表明:冷冻后精子活率[(38.80±4.15)%]及精子SDH阳性反应率[(32.80±4.32)%]与冷冻前精... 为了检测冷冻对绵羊精子琥珀酸脱氢酶(SDH)的影响,探索其与精子活率的关系,试验采用试管法对冷冻前后小尾寒羊精子SDH的活性进行研究。结果表明:冷冻后精子活率[(38.80±4.15)%]及精子SDH阳性反应率[(32.80±4.32)%]与冷冻前精子活率[(81.20±2.17)%]和精子SDH阳性反应率[(72.20±4.02)%]相比极显著降低(P<0.01),冷冻前后精子活率与精子SDH阳性反应率分别呈显著正相关和极显著正相关(P<0.05和P<0.01)。说明冷冻保存对绵羊精子SDH活性造成显著损伤;精子活率与SDH阳性反应率之间的显著相关性证实了精子SDH的活性与精子生命活动密切相关,其活性可以在一定程度上预测精子活率和受精能力,并可作为评价绵羊冻融精液品质的新指标。 展开更多

关键词 冷冻保存 绵羊精子 琥珀酸脱氢酶(SDH) 活性

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低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响 被引量：1

6

作者 徐振军 张红霞 +2 位作者 刘冰 刘黎明 王佳鹏 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第4期56-58,共3页

为了探讨低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法对小尾寒羊新鲜和低温保存精子的DNA链完整性进行检测。结果表明:经24 h、48 h、72 h、96 h处理的低温保存绵羊精液的DNA链断裂精子百分率分别为(0.017 2
... 为了探讨低温保存对绵羊精子DNA链完整性的影响,采用原位缺口末端标记(TUNEL)法对小尾寒羊新鲜和低温保存精子的DNA链完整性进行检测。结果表明:经24 h、48 h、72 h、96 h处理的低温保存绵羊精液的DNA链断裂精子百分率分别为(0.017 2±0.006 2),(0.028 0±0.0142),(0.037 3±0.017 0),(0.037 1±0.008 8)。与新鲜精液相比,低温保存的精液中DNA链断裂精子百分率虽然略有增加但无统计学差异,表明低温保存对绵羊精子DNA链的完整性没有显著性损伤。 展开更多

关键词 低温保存 绵羊精子 DNA链 原位缺口末端标记(TUNEL)法

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He-Ne激光对绵羊精子超弱发光效应的初探 被引量：4

7

作者 岳文斌 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 1989年第6期259-261,共3页

本文采用He-Ne激光辐射绵羊精液,提高了精子的超弱发光强度,并测定了精子的呼吸和^(32)Pi的摄入量,以及精清中锌的浓度,发现精子的超弱发光与精子的代谢存在着正相关,认为超弱发光的增强是由于激光促进了精细胞内的有机物氧化和能量转... 本文采用He-Ne激光辐射绵羊精液,提高了精子的超弱发光强度,并测定了精子的呼吸和^(32)Pi的摄入量,以及精清中锌的浓度,发现精子的超弱发光与精子的代谢存在着正相关,认为超弱发光的增强是由于激光促进了精细胞内的有机物氧化和能量转化过程。 展开更多

关键词 氦-氖激光 绵羊精子 超弱发光

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肝素浓度和作用时间对绵羊精子体外获能和体外受精的影响

8

作者 刘烈琴 罗桂河 +3 位作者 孟丹娜 薛君忠 郭勇 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第21期21-24,共4页

通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添... 通过研究添加不同的浓度肝素(0、5、10、20、50μg/mL)及不同作用时间(0、30、45、60、90、120min)对绵羊精子体外获能、活力、存活时间和相应体外受精的影响,为改善绵羊精子体外获能效果及研究获能的机理提供一定的参考。在获能液中添加10μg/mL肝素作用45min时,其获能率最高,顶体反应率最低(40.92%和16.59%)(P<0.05),存活时间18h,能够提高受精卵的囊胚发育;单独使用咖啡因或与10μg/mL肝素联合使用,其获能效果均不如单独使用10μg/mL肝素。说明绵羊精子获能时肝素的适宜浓度是10μg/mL,作用时间是45min,咖啡因无协同肝素促进获能的作用。 展开更多

关键词 绵羊精子 体外获能 肝素 咖啡因 体外受精

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透明带诱导绵羊精子顶体反应的研究

9

作者 刘烈琴 顾申 +5 位作者 周卫宾 杨飞鸽 张宏 郭勇 刘云海 倪和民 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第23期29-31,共3页

为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果... 为探讨绵羊透明带对其精子顶体反应的诱导作用,试验分为3组:①不经获能处理的精子与透明带共孵育,②精子经获能处理后与透明带共孵育,③不经获能处理的精子与透明带共孵育,然后添加IA23187,来观察透明带对精子顶体反应的诱导效果。结果显示获能与否并不影响透明带对精子顶体反应的诱导效果,添加IA23187后,顶体反应升高,但差异不显著(P>0.05)。说明透明带可诱导绵羊精子(无论获能与否)发生顶体反应,IA23187不能提高透明带对顶体反应的诱导作用。 展开更多

关键词 绵羊精子 获能 顶体反应 透明带 钙离子载体

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氦氖激光提高绵羊精子活力机制的研究

10

作者 岳文斌 《山西农业大学学报》 CAS 1991年第1期63-67,72+93,共7页

以不同剂量的氦氖激光辐射绵羊精液,发现低剂量的激光可以提高精子的活力、呼吸、果糖分解和钙的摄入;而高剂量的激光对精子的呼吸有显著影响。从而,探讨了激光提高精子活力的机制。

关键词 激光 精液 绵羊精子

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绵羊精子尾部颈段超微结构的研究

11

作者 黄振勇 《黑龙江动物繁殖》 1996年第3期7-8,共2页

绵羊精子尾部颈段主要由关节头、节柱、近端中心粒、内棒、远端中心粒、轴丝的中央微管、外周致密纤维、线粒体等组成，外包有质膜。经分析发现，绵羊精子尾部颈段结构不稳固，其中，关节头与细胞核连接处。

关键词 绵羊精子尾部颈段超微结构 精液品质

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渗透压对常温保存绵羊精子质量的影响 被引量：4

12

作者 张亚妮 《畜牧兽医科技信息》 2019年第8期49-50,共2页

本文研究了绵羊精液在高倍稀释(1:30),常温(13~15℃)条件下保存,稀释液渗透压对精子活率、精子活力、质膜完整性的影响。我们分别对照研究了两组不同渗透压稀释液,实验结果表明:在常温条件下,稀释液渗透压的pH调为6.5时,绵羊精液在较高... 本文研究了绵羊精液在高倍稀释(1:30),常温(13~15℃)条件下保存,稀释液渗透压对精子活率、精子活力、质膜完整性的影响。我们分别对照研究了两组不同渗透压稀释液,实验结果表明:在常温条件下,稀释液渗透压的pH调为6.5时,绵羊精液在较高渗透压的稀释液中保存效果较好。 展开更多

关键词 渗透压 绵羊精子 精子活率

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乙酰水杨酸对绵羊精子常温保存的影响

13

作者 陈洁梅 《中国畜禽种业》 2022年第1期50-52,共3页

为探究乙酰水杨酸对精子活力、质膜和顶体的保护作用。试验选取7只精子品质优良的绵羊作为采精对象。将精液稀释后分为空白对照组、 A1组(20 mm/L)、 A2组(50 mm/L)、 A3组(100 mm/L),重复5次。用SCA软件检测精子活力、低渗肿胀试验检... 为探究乙酰水杨酸对精子活力、质膜和顶体的保护作用。试验选取7只精子品质优良的绵羊作为采精对象。将精液稀释后分为空白对照组、 A1组(20 mm/L)、 A2组(50 mm/L)、 A3组(100 mm/L),重复5次。用SCA软件检测精子活力、低渗肿胀试验检测精子的质膜完整性(Membrane integrity,MI);吉姆萨染色检测精子的顶体完整性(Acrosome integrity,AI)。结论:50 mM的ASA有利于精子的常温保存。 展开更多

关键词 绵羊精子 常温保存 乙酰水杨酸 质膜完整性 顶体完整性

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绵羊成纤维细胞及精子Sox2基因启动子甲基化状态检测 被引量：1

14

作者 陈胜男 宋红卫 +2 位作者 李松美 朴善花 王春生 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第1期22-26,共5页

为了探明绵羊成纤维细胞及精子中Sox2基因启动子甲基化状态的差异,试验对绵羊Sox2基因启动子进行序列查询和甲基化岛分析,提取绵羊成纤维细胞和精子基因组,用重亚硫酸盐处理,进行甲基化特异性PCR、连接和酶切鉴定,最终分别随机选取10个... 为了探明绵羊成纤维细胞及精子中Sox2基因启动子甲基化状态的差异,试验对绵羊Sox2基因启动子进行序列查询和甲基化岛分析,提取绵羊成纤维细胞和精子基因组,用重亚硫酸盐处理,进行甲基化特异性PCR、连接和酶切鉴定,最终分别随机选取10个测序结果进行甲基化状态分析,比较二者的甲基化状态。结果表明:在精子的350个甲基化位点中,有194个位点处于非甲基化状态,156个位点处于甲基化状态,甲基化率为44.6%;在成纤维细胞的350个甲基化位点中,93个位点处于非甲基化状态,257个位点处于甲基化状态,甲基化率为73.4%;χ~2检验表明二者的甲基化状态差异极显著(P<0.01)。说明绵羊精子和成纤维细胞的Sox2基因启动子区域甲基化状态存在较大差异。 展开更多

关键词 绵羊精子 绵羊成纤维细胞 Sox2基因 启动子 DNA甲基化

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以精子作为外源DNA载体通过人工授精途径生产转基因绵羊的研究 被引量：1

15

作者 孙永新 孙拓 +2 位作者 陈永福 郭志勤 丁红 《草食家畜》 1992年第S1期127-132,共6页

本试验以绵羊精子作为外源基因载体,将获能处理的精子与未获能仅洗涤处理的精子分别同bGHDNA(牛生长激素基因)共同孵育30～50分钟,放射自显影结果表明:两种处理的精子都能携带外源DNA;携带外源DNA精子的比率分别为5％—6％(洗涤处理)和1... 本试验以绵羊精子作为外源基因载体,将获能处理的精子与未获能仅洗涤处理的精子分别同bGHDNA(牛生长激素基因)共同孵育30～50分钟,放射自显影结果表明:两种处理的精子都能携带外源DNA;携带外源DNA精子的比率分别为5％—6％(洗涤处理)和11％—12％(获能处理)。将处理的精液给自然发情的母羊输精,输精方法采用常规子宫颈法或手术——子宫角、输卵管法。207只母羊的输精效果;第一周期不返情138只(66.7％);产羔98只。斑点杂交证明,98只羔羊中有5只整合外源bGHDNA,在斑点杂交呈阳性反应的5只中有3只为Southern杂交阳性。本试验证明:以精子为外源DNA载体用人工授精方法可以生产整合外源基因的羔羊。 展开更多

关键词 绵羊精子 获能 转基因 人工授精

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一种评定绵羊冻精活力的新方法

16

作者 覃能斌 《黑龙江动物繁殖》 1996年第2期8-8,共1页

一种评定绵羊冻精活力的新方法ｋｋ刃天青还原试验刃天青还原试验可以评定精子活力，刃天青染料还原的颜色变化与在不同甘油浓度下冷冻保存的绵羊精子的品质有关。刃天青（蓝色）可被活动精子还原变为粉色，然后再进一步还原变为白色。... 一种评定绵羊冻精活力的新方法ｋｋ刃天青还原试验刃天青还原试验可以评定精子活力，刃天青染料还原的颜色变化与在不同甘油浓度下冷冻保存的绵羊精子的品质有关。刃天青（蓝色）可被活动精子还原变为粉色，然后再进一步还原变为白色。出现颜色变化的时间直接与精子的代谢... 展开更多

关键词 绵羊冻精 稀释液 甘油浓度 刃天青 颜色变化 绵羊精子 稀释精液 血球计算器 还原试验 还原时间

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延迟交配对山羊受精的影响

17

作者 谭景和 秦鹏春 +2 位作者 杨增明 孙德军 尹明福 《黑龙江动物繁殖》 1995年第2期16-20,共5页

本实验应用超数排卵,用乙烯雌酚(DES)延长发情期,并于发情后不同时间交配,光镜和电镜等方法研究了拖延交配对黑龙江地方山羊受精的影响。实验结果:(1)于排卵前6小时开始间隔12小时注射3(1+2)mg或5(2+2+1)mgDES可分别使山羊发情持续时间... 本实验应用超数排卵,用乙烯雌酚(DES)延长发情期,并于发情后不同时间交配,光镜和电镜等方法研究了拖延交配对黑龙江地方山羊受精的影响。实验结果:(1)于排卵前6小时开始间隔12小时注射3(1+2)mg或5(2+2+1)mgDES可分别使山羊发情持续时间延长14.4和24.8小时;(2)注射乙烯雌酚对山羊排卵时间、获卵率、卵子形态及受精卵的发育都没有明显影响;(3)发情30和36小时交配山羊的受精率和胚胎的发育进程与发情12小时交配山羊受精率和发育进程没有明显差异;(4)发情42小时交配山羊受精率明显下降,3只山羊中只有1只产出2枚受精卵;发情48小时交配山羊无一产出受精卵;(5)电镜和光镜下检查受精时间后48小时未卵裂卵子未见有受精迹象,也未见有精子附着在透明带上。实验结果(1)和(2)说明:应用DES可达到延长动物发情持续时间的目的;可考虑用DES这种人工合成品取代价格贵的雌二醇—17β来进行动物发悄同步和改善超排效果等方面的研究。实验结果3说明:山羊精子可在交配后6小时左右运行到输卵管受精部位并完成获能;山羊精子和绵羊精子一样也不是在输卵管峡部贮存期间获能的;于发情后期输精的精子无需在输卵管峡部贮存便可上行获能,表明于发情末期对山羊进行配种或输精是可行的,便于人们在某些情况下小范围地调整输精时间。 展开更多

关键词 乙烯雌酚 受精率 绵羊精子 受精卵 输卵管峡部 受精部位 山羊精子 交配后 精子获能 雌二醇

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肌醇类SIB对云南半细毛羊精液冷冻保护效果影响的研究 被引量：1

18

作者 权国波 李东江 +2 位作者 黄羽 李卫娟 洪琼花 《中国草食动物科学》 CAS 2013年第4期14-18,共5页

为了进一步降低冷冻过程中冰晶形成对云南半细毛羊精子的机械损伤,实验首次检验了肌醇类冰晶抑制剂(SIB)对绵羊精子的冷冻保护效果。采用的SIB是1,4-环己二醇(1,4-CHD)。电刺激采集精液后,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。... 为了进一步降低冷冻过程中冰晶形成对云南半细毛羊精子的机械损伤,实验首次检验了肌醇类冰晶抑制剂(SIB)对绵羊精子的冷冻保护效果。采用的SIB是1,4-环己二醇(1,4-CHD)。电刺激采集精液后,经4℃平衡、液氮气相预冻后直接投入液氮保存。结果表明:1,4-CHD不能提高云南半细毛羊冷冻精子的活力,而且随着1,4-CHD浓度的增加,精子活力呈逐步下降趋势。此外,1,4-CHD也不能改善解冻后云南半细毛羊精子的顶体状态和质膜完整性。解冻后,当用等渗缓冲液稀释精子时,1,4-CHD冷冻组精子的质膜破损率明显高于不含1,4-CHD的对照组(P<0.05)。然而,SIB的存在可能有利于冷冻精子磷脂酰丝氨酸(PS)正常分布的维持。解冻后,1,4-CHD冷冻组精子的PS标记率明显低于对照组(P<0.01)。当分别采用渗透压为404 mOsm,528 mOsm,648mOsm或853mOsm的缓冲液去稀释解冻后的精子时,就移动速度和质膜完整性指标而言,4个处理组之间差异不显著(P>0.05)。总之,肌醇类SIB并不能改善云南半细毛羊冷冻精子的活力、移动速度、顶体以及质膜完整性等指标。然而1,4-CHD可能抑制冷冻解冻过程引起的细胞早期凋亡。 展开更多

关键词 绵羊精子 冷冻 冰晶抑制剂 环己二醇

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羊

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《中国农业文摘（畜牧）》 1997年第4期26-29,共4页

关键词 绵羊生产性能 中国美利奴羊 畜牧兽医学院 青海细毛羊 无角美利奴羊 养羊 内蒙古 青海省 绵羊精子 日增重

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