羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料修复大鼠子宫内膜损伤

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作者 孔小娟 马正娇 +1 位作者 谈珍瑜 刘鹏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第22期4731-4739,共9页

背景:大量研究已证实,羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料均可作为干细胞载体用于子宫内膜损伤的治疗,但是有关两种材料的比较研究相对少见。目的:对比羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料作为干细胞载体治疗子宫内膜损伤的差异。方法... 背景:大量研究已证实,羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料均可作为干细胞载体用于子宫内膜损伤的治疗,但是有关两种材料的比较研究相对少见。目的:对比羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料作为干细胞载体治疗子宫内膜损伤的差异。方法:采用全骨髓贴壁法分离纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞。分别制备SD大鼠羊膜细胞外基质与膀胱细胞外基质材料,然后将骨髓间充质干细胞分别接种于两种材料表面,检测细胞增殖与黏附情况。将40只SD大鼠随机分为4组(n=10),除假手术组外,子宫内膜损伤组、羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组均通过机械干预的方式建立子宫内膜损伤模型,分别将羊膜细胞外基质/骨髓间充质干细胞复合物、膀胱基质细胞外基质/骨髓间充质干细胞复合物移植至羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组大鼠损伤内膜部位,移植后14,28 d取材检测,苏木精-伊红染色观察大鼠子宫内膜组织形态,酶联免疫吸附法分析子宫内膜组织中碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平,免疫组化染色分析子宫内膜组织中波形蛋白与CD34表达。结果与结论:(1)两种细胞外基质材料均有利骨髓间充质干细胞的增殖,相较于膀胱细胞外基质材料,羊膜细胞外基质材料可促进骨髓间充质干细胞的黏附;(2)相较于假手术组,子宫内膜损伤组碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平降低(P <0.01),子宫内膜组织形态发育不良,内膜厚度与腺体数量减少,波形蛋白与CD34阳性表达减少(P <0.01);相较于子宫内膜损伤组,羊膜细胞外基质组、膀胱细胞外基质组碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子1与血管内皮生长因子水平均升高(P <0.05或P <0.01),子宫内膜组织形态明显改善,内膜厚度与腺体数量增加,波形蛋白与CD34阳性表达增加(P <0.05或P <0.01),并且羊膜细胞外基质组的改善作用优于膀胱细胞外基质组(P <0.05);(3)结果表明,相较于膀胱细胞外基质材料,羊膜细胞外基质材料作为骨髓间充质干细胞的载体可进一步促进损伤子宫内膜的修复。 展开更多

关键词 羊膜细胞外基质 膀胱细胞外基质 子宫内膜损伤 宫腔粘连 骨髓间充质干细胞

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兔结膜重建中羊膜细胞外基质、保存羊膜及自体结膜的比较 被引量：4

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作者 刘炳乾 廖洪斐 +2 位作者 丁亚梅 江毅 崔鹏 《国际眼科杂志》 CAS 2007年第4期983-986,共4页

目的:研究羊膜细胞外基质(amnion extracellular matrix,AECM)在兔结膜重建中的作用。方法:将36只新西兰白兔随机分为3组,均右眼实施手术,羊膜细胞外基质(AECM)组12眼,保存羊膜(frozen amnion membrane,FZAM)组12眼,自体结膜(autologous... 目的:研究羊膜细胞外基质(amnion extracellular matrix,AECM)在兔结膜重建中的作用。方法:将36只新西兰白兔随机分为3组,均右眼实施手术,羊膜细胞外基质(AECM)组12眼,保存羊膜(frozen amnion membrane,FZAM)组12眼,自体结膜(autologous conjunctiva,AC)组12眼。术后对各组进行密切的跟踪观察,分别在术后1,2,4,8wk对术眼行印迹细胞学及病理学检查。结果:所有术眼均愈合良好,无瘢痕化及睑球粘连等并发症。术后2wkFZAM、AC组炎症细胞浸润高于AECM组,AECM溶解时间长于FZAM。杯状细胞分化方面:术后2wk,AECM组与AC组比较无统计学差异(P>0.05);FZAM组与AECM、AC组比较统计学差异显著(FZAM组vsAECM组P<0.01,FZAM组vsAC组P<0.01)。术后4,8wk,3组比较均有统计学差异(FZAM组vsAECM组P<0.05,FZAM组vsAC组P<0.05,AC组vsAECM组P<0.05)。结论:羊膜细胞外基质和保存羊膜作为结膜替代物有效,而羊膜细胞外基质比保存羊膜有更长的存活周期,自体结膜是修复结膜缺损最理想的替代物。 展开更多

关键词 羊膜细胞外基质 保存羊膜 自体结膜 结膜替代物

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羊膜细胞外基质的制备与保存研究 被引量：3

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作者 李舒梅 文道源 +1 位作者 罗晓婷 熊跃玲 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第2期196-196,共1页

关键词 羊膜细胞外基质 制备 保存 研究

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人羊膜细胞外基质修复尿道下裂的实验研究

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作者 舒林飞 田源 +4 位作者 王雷 肖跃海 孙超 唐开发 孙发 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第3期263-268,共6页

目的:研究人羊膜细胞外基质(HAECM)修复新西兰兔阴茎型尿道下裂的效果。方法:选择新鲜健康剖宫产胎盘分离出羊膜,制备HAECM;将36只雄性新西兰白兔切除1 cm前尿道黏膜,建立尿道下裂动物模型,并随机分为对照组、HAECM单层修复组及多层修复... 目的:研究人羊膜细胞外基质(HAECM)修复新西兰兔阴茎型尿道下裂的效果。方法:选择新鲜健康剖宫产胎盘分离出羊膜,制备HAECM;将36只雄性新西兰白兔切除1 cm前尿道黏膜,建立尿道下裂动物模型,并随机分为对照组、HAECM单层修复组及多层修复组,每组12只;对照组采用传统的加盖岛状皮瓣(Onlay式)对兔尿道下裂进行手术修复,HAECM单层和多层修复组分别采用单层和多层HAECM作为修复材料对兔尿道下裂进行手术修复,于术后第20和40天时行尿道造影和尿道镜检查,并于术后第10、20和40天时对术后尿道标本进行病理学观察,了解术后尿道情况。结果:成功制备出优质的HAECM;尿道病理组织学检查结果示:术后第10天时,实验组尿道管腔面有少量尿道上皮细胞生长;术后第20天时,实验组可见尿道管腔被覆上皮已基本覆盖HAECM修复区;术后第40天时,单层修复组、多层修复组脱细胞羊膜修复处尿道管腔被覆尿路上皮细胞完整,黏膜下层可见平滑肌生长,纤维组织、小血管增生,少量炎细胞浸润;对照组可见尿道管腔完整,平滑肌层连续性完好,可见少量炎细胞;尿道造影检查示术后第40天时,单层、复层修复组和对照组尿道通畅,未见狭窄、造影剂外渗、憩室形成;尿道镜检查示术后第40天时,单层、多层修复组和对照组尿道通畅,未见明显狭窄。结论:单层和复层HAECM对兔尿道下裂修复效果良好,HAECM是一种前景良好的修复材料。 展开更多

关键词 尿道下裂 修复外科手术 组织工程 人羊膜细胞外基质 新西兰兔

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新鲜羊膜、冻干羊膜、羊膜细胞外基质的形态研究 被引量：19

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作者 文道源 李舒梅 +2 位作者 林卡莉 钟瑞冲 罗晓婷 《中国实用眼科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第10期734-738,共5页

目的 :从组织形态学角度观察、比较新鲜羊膜 (Freshamnioticmembrane ,FSAM )、冻干羊膜 (Frozenamnioticmembrane ,FZAM )、羊膜细胞外基质 (Amnioticextracellularmatrix ,AECM )的结构特点。方法 :采用目前国际公认的羊膜制备与保存... 目的 :从组织形态学角度观察、比较新鲜羊膜 (Freshamnioticmembrane ,FSAM )、冻干羊膜 (Frozenamnioticmembrane ,FZAM )、羊膜细胞外基质 (Amnioticextracellularmatrix ,AECM )的结构特点。方法 :采用目前国际公认的羊膜制备与保存方法 ,制备FSAM、FZAM、AECM ,分别经HE、PAS组织染色、透射电子显微镜、扫描电子显微镜检查 ,观察并比较它们的形态与结构特点。结果 :FSAM、FZAM在光镜和电镜下均与正常球结膜组织结构相近 ,两者形态上的主要差别表现在上皮细胞的结构变化上。而AECM结构较为独特 ,无细胞结构 ,其主要成分为胶原纤维、网状纤维和基质。结论 :从组织结构特点分析 ,FSAM、FZAM、AECM是目前较为理想的结膜替代材料并可有效地用于角、结膜表面重建 ;同时 ,AECM作为一种极为特殊的细胞外基质 ,有重要的研究与应用价值。 展开更多

关键词 新鲜羊膜 冻干羊膜 羊膜细胞外基质 形态学 研究 临床意义

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人羊膜细胞外基质与成纤维细胞体外培养的实验研究 被引量：7

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作者 何清义 陈秉礼 +1 位作者 王智彪 李起鸿 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期229-231,I004,共4页

目的　通过人羊膜细胞外基质 (HA ECM)与成纤维细胞体外培养 ,观察成纤维细胞在HA ECM上的生长特性 ,以及胶原原纤维产生情况 ,为使HA ECM成为皮肤组织工程化的载体打下基础。方法　将不同浓度的成纤维细胞种植于HA ECM上进行体外培养 ... 目的　通过人羊膜细胞外基质 (HA ECM)与成纤维细胞体外培养 ,观察成纤维细胞在HA ECM上的生长特性 ,以及胶原原纤维产生情况 ,为使HA ECM成为皮肤组织工程化的载体打下基础。方法　将不同浓度的成纤维细胞种植于HA ECM上进行体外培养 ,通过倒置显微镜、光镜及透射电镜 ,观察细胞在HA ECM的生长、排列 ,以及细胞的粘附和胶原原纤维产生情况。结果　梭形的成纤维细胞在HA ECM上生长良好 ,呈放射状或平行排列 ;组织切片发现HA ECM上有较多梭形细胞附着 ,细胞排列紧密 ;电镜下见成纤维细胞胞膜基底部向HA ECM内伸出数个突起 ,细胞与羊膜基质粘附相当牢固 ,胞外有较多胶原原纤维堆积。结论　种植于HA ECM的成纤维细胞有一个最适宜的细胞浓度 (3 5× 10 6 个 /ml) ;HA ECM具有良好的支架和渗透作用 ,成纤维细胞在其上生长、粘附良好 ,胶原合成、分泌旺盛 ,HA 展开更多

关键词 人羊膜细胞外基质 成纤维细胞 体外培养 实验研究

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自制细胞外基质胶泪道羊膜生物学特性及修复泪道损伤的实验研究 被引量：1

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作者 杨继玲 邵毅 +2 位作者 张颖 徐国芬 裴重刚 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第4期306-310,共5页

目的研究自制细胞外基质胶泪道羊膜的生物活性因子表达含量、生物力学特征以及在修复兔泪道损伤中的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对自制细胞外基质胶泪道羊膜中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(f... 目的研究自制细胞外基质胶泪道羊膜的生物活性因子表达含量、生物力学特征以及在修复兔泪道损伤中的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对自制细胞外基质胶泪道羊膜中表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)等10种生物活性因子的表达含量进行测定,并与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜进行对比。利用负荷传感器对比自制细胞外基质胶羊膜与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜的抗拉强度、断裂伸长率和弹性模力,且把保存12个月的自制细胞外基质胶泪道羊膜应用于修复兔泪道损伤模型,并于术后4周观察兔泪道黏膜修复及K16表达情况。结果自制细胞外基质胶泪道羊膜、干燥泪道羊膜中10种细胞因子含量均比新鲜泪道羊膜低(均为P<0.05),而ECM泪道羊膜中10种细胞因子含量均明显高于干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。自制细胞外基质胶泪道羊膜的抗拉强度和断裂伸长率与新鲜泪道羊膜、干燥泪道羊膜相比明显增加(均为P<0.05),而自制细胞外基质胶泪道羊膜的弹性模量明显小于新鲜泪道羊膜及干燥泪道羊膜(均为P<0.05)。术后4周发现ECM-LDAM组泪道管口通畅,无明显的排斥反应和炎症反应,其下睑泪道黏膜K16表达阴性,而对照组泪道黏膜K16表达阳性。结论自制细胞外基质胶泪道羊膜含有丰富的生物活性因子和优越的生物力学特性,是一种更加安全有效的泪道修复及重建材料。 展开更多

关键词 细胞外基质胶泪道羊膜 生物活性因子 生物力学特性 K16

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“去细胞”羊膜基质种植人脐静脉内皮细胞的实验研究 被引量：1

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作者 赵宏伟 王贵学 +1 位作者 危当恒 龙光 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2006年第4期286-290,297,共6页

目的 制备“去细胞”羊膜基质（HAAM），观察内皮细胞在HAAM上的种植效果及细胞种植后的一氧化氮（NO）分泌功能和粘附能力，为进一步研究以HAAM覆盖修饰血管内支架并种植内皮细胞治疗再狭窄提供理论和实验依据。方法 胰酶消化去除羊膜... 目的 制备“去细胞”羊膜基质（HAAM），观察内皮细胞在HAAM上的种植效果及细胞种植后的一氧化氮（NO）分泌功能和粘附能力，为进一步研究以HAAM覆盖修饰血管内支架并种植内皮细胞治疗再狭窄提供理论和实验依据。方法 胰酶消化去除羊膜上皮细胞，保留基底膜作为载体，种植人脐静脉内皮细胞（HUVEC），体外培养形成单层，并进行细胞形态观察、NO分泌功能及细胞粘附力测定。结果 HUVEC可在HAAM上粘附生长并增殖，体外培养6-7天融合形成单层，其形态、分泌NO功能及细胞粘附力均优于对照组培养的内皮细胞。结论 羊膜基质可作为内皮细胞生长粘附的载体并增强其功能。 展开更多

关键词 羊膜细胞外基质 人脐静脉内皮细胞 细胞形态 一氧化氮 细胞粘附力

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细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在雌兔干眼中的应用 被引量：2

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作者 黎乐平 康红花 +8 位作者 马明洋 叶蕾 李清海 兰东怡 刘佳祥 徐千惠 杨雁嫦 袁晴 邵毅 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第8期709-714,共6页

目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子... 目的研究细胞外基质胶羊膜棒的生物学特性及其在兔干眼的应用效果。方法使用放射免疫分析方法对细胞外基质胶羊膜棒中的表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)等10种生物活性因子的表达含量加以测定,同时和新鲜泪道纤维蛋白胶羊膜(fresh lacrimal duct amniotic membrane,F-LDAM)、单层泪道纤维蛋白胶羊膜(monolayer lacrimal duct amniotic membrane,M-LDAM)进行对比。此外,利用负荷传感器对比细胞外基质胶泪道纤维蛋白胶羊膜(extracellular matrix lacrimal duct amniotic membrane,ECM-LDAM)与F-LDAM、M-LDAM的弹性模量、抗拉强度、断裂伸长率,并把ECMLDAM应用于兔干眼症的治疗,术后8周观察实验兔干眼治疗前后荧光染色(fluorescein stain,FL)评分、各时段泪液分泌、FL情况和角膜共焦显微镜下角膜上皮下神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分。结果 ECM-LDAM、M-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量均比F-LDAM低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),而ECM-LDAM中EGF、NGF、HGF、TGF-β等10种因子含量明显高于M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。ECM-LDAM的弹性模量明显低于F-LDAM及M-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05);而ECM-LDAM的抗拉强度和断裂伸长率明显高于与M-LDAM和F-LDAM,差异有统计学意义(P<0.05)。术后8周发现B组与A组相比FL评分降低,泪液分泌时间延长,角膜共焦显微镜下观察发现神经纤维密度、神经纤维分支及曲率评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ECM-LDAM作为一种新型安全的泪道修复材料,其丰富的生物活性因子和优越的柔韧性,可以更有效地改善兔干眼,营养修复受损的角膜神经。 展开更多

关键词 细胞外基质胶羊膜 生物力学特性 生物活性因子 角膜神经

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自制染色干燥细胞外基质胶羊膜生物学特性及修补结膜缺损的实验研究 被引量：1

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作者 江威 邹晶 +4 位作者 邵毅 高桂平 李云燕 邓军萍 杨璐 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第8期704-707,共4页

目的研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果。方法使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫... 目的研究自制染色干燥细胞外基质胶羊膜(extracellular matrix amniotic membrane,ECM-AM)的生物活性因子表达情况、生物力学特征以及在兔结膜修补术中的应用效果。方法使用光镜和HE染色对自制染色干燥ECM-AM进行形态学观察,并通过免疫荧光染色对比其与单纯冻干羊膜中不同生物活性因子Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ的表达情况。利用负荷传感器对比自制染色干燥ECM-AM与单纯冻干羊膜的最大承受拉伸力、弹性模量和拉伸长度,且把保存12个月的自制染色干燥ECM-AM应用于兔羊膜-结膜修补术,并在术后2周观察兔结膜愈合情况。结果自制染色干燥ECMAM可以分辨羊膜的折叠处、皱褶及边缘,HE染色表明自制染色干燥ECMAM基底膜的完整度和厚度均优于保存相应天数(12个月)的冻干羊膜。保存12个月的自制染色干燥ECM-AM中Laminin 5、β-catenin和CollagenⅣ均比单纯冻干羊膜要高。自制染色干燥ECM-AM的最大承受拉伸力以及弹性模量均明显高于于单纯冻干羊膜(均为P<0.05),但二者平均拉伸长度上差异无统计学意义(P>0.05)。自制染色干燥ECM-AM常温保存12个月后应用于兔羊膜-结膜修补术,术后2周羊膜上有兔结膜上皮长入且K19分布于整个结膜上皮细胞,并无明显的排斥反应和炎症反应。结论自制染色干燥ECM-AM含有丰富的生物活性因子,具有优越的生物力学特性,为眼表重建提供了更加安全有效的材料。 展开更多

关键词 细胞外基质胶羊膜 单纯冻干羊膜 生物活性因子 结膜修补术

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已经出版的组织工程角膜生物材料相关文章

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《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第51期9516-9516,共1页

羊膜与羊膜细胞外基质在纽织工程中的应用高振，罗晓婷，邓炜等．2007．11f32）：6450—6453关键jF：组织工程．羊膜，综述文献．

关键词 组织工程角膜 生物材料 羊膜细胞外基质 出版 组织构建 综述文献

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