目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合...目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。展开更多
目的通过观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌缺血模型大鼠心肌组织病理变化的影响,探讨其对心肌细胞外基质(ECM)重构的干预作用。方法70只SD大鼠随机选取10只为对照组,余下大鼠造模成功后随机分为模型组,瓜蒌薤白半夏汤低、中、高剂量组及美托洛...目的通过观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌缺血模型大鼠心肌组织病理变化的影响,探讨其对心肌细胞外基质(ECM)重构的干预作用。方法70只SD大鼠随机选取10只为对照组,余下大鼠造模成功后随机分为模型组,瓜蒌薤白半夏汤低、中、高剂量组及美托洛尔组,持续给药28 d。干预结束后取材,HE和Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化及纤维化程度;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的阳性表达水平;比色法测定血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA检测血清N-末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)及转化生长因子(TGF)-β1的含量;Western blot法检测心肌组织TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白相对表达水平;RT-qPCR检测COL1A1和FN m RNA表达水平。结果与模型组比较,瓜蒌薤白半夏汤高剂量组心肌组织病理显示出现不同程度改善,心肌纤维排列有序,细胞界限清晰,仍有轻微间隙增宽,并伴有少量炎性细胞浸润,胶原容积分数(CVF)显著降低(P<0.01);α-SMA阳性表达平均光密度值(MOD)显著降低(P<0.01);血清CK、CK-MB、LDH、NT-proBNP以及TGF-β1水平显著降低(P<0.01);TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达水平显著降低(P<0.01);COL1A1和FN m RNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论瓜蒌薤白半夏汤显著减轻心肌缺血模型大鼠的心肌病理形态变化和纤维化程度,改善心脏功能,其机制可能与通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制心肌ECM重构相关。展开更多
文摘目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。
文摘目的通过观察瓜蒌薤白半夏汤对心肌缺血模型大鼠心肌组织病理变化的影响,探讨其对心肌细胞外基质(ECM)重构的干预作用。方法70只SD大鼠随机选取10只为对照组,余下大鼠造模成功后随机分为模型组,瓜蒌薤白半夏汤低、中、高剂量组及美托洛尔组,持续给药28 d。干预结束后取材,HE和Masson染色观察大鼠心肌组织病理学变化及纤维化程度;免疫组化检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的阳性表达水平;比色法测定血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA检测血清N-末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)及转化生长因子(TGF)-β1的含量;Western blot法检测心肌组织TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白相对表达水平;RT-qPCR检测COL1A1和FN m RNA表达水平。结果与模型组比较,瓜蒌薤白半夏汤高剂量组心肌组织病理显示出现不同程度改善,心肌纤维排列有序,细胞界限清晰,仍有轻微间隙增宽,并伴有少量炎性细胞浸润,胶原容积分数(CVF)显著降低(P<0.01);α-SMA阳性表达平均光密度值(MOD)显著降低(P<0.01);血清CK、CK-MB、LDH、NT-proBNP以及TGF-β1水平显著降低(P<0.01);TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白表达水平显著降低(P<0.01);COL1A1和FN m RNA表达水平显著降低(P<0.01)。结论瓜蒌薤白半夏汤显著减轻心肌缺血模型大鼠的心肌病理形态变化和纤维化程度,改善心脏功能,其机制可能与通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制心肌ECM重构相关。
