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工频电磁场对小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2和转化生长因子β_1 mRNA表达的刺激(英文) 被引量:2
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作者 陈继革 吴华 +1 位作者 葛保健 方真华 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1185-1188,共4页
背景:研究证实电磁场刺激能够促进多种骨生长因子的合成与分泌,而某些生长因子具有诱导骨髓间充质干细胞定向分化成骨的作用。目的:分析工频电磁场对体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2和转化生长因子β1mRNA表达的影响。设... 背景:研究证实电磁场刺激能够促进多种骨生长因子的合成与分泌,而某些生长因子具有诱导骨髓间充质干细胞定向分化成骨的作用。目的:分析工频电磁场对体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2和转化生长因子β1mRNA表达的影响。设计:单一样本、区组设计,观察对比动物实验。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院创伤外科。材料:实验于2005-02/12在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨外科实验室完成。①选取清洁级昆明种小鼠20只,作为实验用骨髓间充质干细胞的来源。②电磁场发生器由武汉市海军工程大学研制,能生成场强为0~100mT的连续可调的50Hz正弦波电磁场。③引物均由北京赛百胜生物工程公司合成。方法:①小鼠以颈椎脱臼法处死,取双侧股骨和胫骨,体外分离培养骨髓间充质干细胞,取第2代细胞用于实验。②不同强度电磁场刺激实验:设立阴性对照组、阳性对照组、电磁场0.4,0.8,1.6mT刺激组,每组均取5瓶第2代细胞。阴性对照组、阳性对照组均不给予电磁场刺激,但阳性对照组于传代时加入含成骨性诱导剂(含10-8mol/L地塞米松,10mmol/Lβ-甘油磷酸钠,50mg/LVitaminC)的培养基;电磁场0.4,0.8,1.6mT刺激组在细胞贴壁后分别于0.4,0.8,1.6mT场强中进行电磁场刺激,每天均连续刺激1h,5d后进行指标检测。③相同场强不同作用时间电磁场刺激实验:设立阴性对照组、电磁场1.6mT刺激15,30,60min组,每组均取5瓶第2代细胞。阴性对照组不进行电磁场刺激;电磁场1.6mT刺激15,30,60min组在1.6mT场强条件下每天分别给予15,30,60min的连续电磁场刺激,5d后进行指标检测。④RT-PCR技术检测各组细胞骨形态发生蛋白2与转化生长因子β1mRNA的表达。主要观察指标:①不同强度电磁场刺激对小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2与转化生长因子β1mRNA表达的影响。②相同场强不同作用时间电磁场刺激小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2与转化生长因子β1mRNA表达的影响。结果:①电磁场刺激5d后,与阴性对照组比较,阳性对照组及电磁场0.4,0.8,1.6mT刺激组骨形态发生蛋白2、转化生长因子β1mRNA的表达均明显增强(P均<0.01);且电磁场1.6mT刺激组骨形态发生蛋白2mRNA的表达达到最大值(57.74±0.23)%,电磁场0.4mT刺激组转化生长因子β1mRNA的表达达到最大值(126.20±0.21)%。②电磁场刺激5d后,与阴性对照组比较,电磁场1.6mT刺激15,30,60min组骨形态发生蛋白2与转化生长因子β1mRNA的表达均明显增强(P均<0.01);且电磁场1.6mT刺激60min组两种因子mRNA的表达分别达到最大值(28.06±0.11)%和(75.20±0.16)%。结论:适当强度及作用时间的工频电磁场刺激,能够明显促进体外培养的小鼠骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白2与转化生长因子β1mRNA的表达。 展开更多
关键词 质干细 骨髓细 信号肽和蛋白质 电磁场 逆转录聚合酶链反应
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脂肪间充质干细胞膜片移植促进创面愈合的可行性 被引量:8
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作者 陈梅红 党旖旎 +4 位作者 朱旭东 李璇 彭磊 杨佳佳 张国新 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期790-796,共7页
背景:脂肪间充质干细胞因其能旁分泌多种生长因子、获取方便、具有免疫调节等作用,常被用于组织修复和功能重建。食管内镜黏膜下剥离后狭窄的预防和治疗是困扰医生和患者的难题。脂肪间充质干细胞结合新型组织工程技术——细胞膜片,具... 背景:脂肪间充质干细胞因其能旁分泌多种生长因子、获取方便、具有免疫调节等作用,常被用于组织修复和功能重建。食管内镜黏膜下剥离后狭窄的预防和治疗是困扰医生和患者的难题。脂肪间充质干细胞结合新型组织工程技术——细胞膜片,具有促进创面修复、预防食管狭窄发生的潜能和应用价值。目的:探讨脂肪间充质干细胞膜片的生物学特征,分析其预防食管内镜黏膜下剥离后狭窄的可行性。方法:(1)将使用温度敏感培养皿制备的绿色荧光蛋白标记的脂肪间充质干细胞膜片设为实验组,常规贴壁脂肪间充质干细胞为对照组,通过ELISA、反转录实时PCR及Western blot比较2组血管内皮生长因子、转化生长因子β1、肝细胞生长因子含量;(2)取裸鼠制备皮肤人工溃疡,随机分为贴膜组与模型组,贴膜组立即在皮肤创面处贴附绿色荧光蛋白标记的脂肪间充质干细胞膜片。结果与结论:(1)脂肪间充质干细胞膜片中细胞含量较高,细胞外基质丰富,细胞与细胞之间连接存在;膜片组血管内皮生长因子、转化生长因子β1、肝细胞生长因子表达水平均高于对照组;(2)裸鼠背部脂肪间充质干细胞膜片移植成功,且贴膜组愈合速度快于模型组;(3)实验结果提示脂肪间充质干细胞结合细胞膜片技术预防食管内镜黏膜下剥离后狭窄具有可行性,但仍需大量的基础及临床研究进一步证实。 展开更多
关键词 内镜黏膜下剥离 食管狭窄 脂肪充质干细 膜片 血管内皮生长因子 转化生长因子β1 肝细生长因子 创面愈合 干细 信号肽和蛋白质 溃疡 组织工程
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辛伐他汀对糖尿病大鼠肾间质结缔组织生长因子和α-平滑肌肌动蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 林斐莉 沈汉超 +1 位作者 朱斌 林开清 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期511-516,共6页
目的:探讨非降脂剂量的辛伐他汀对糖尿病大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组),糖尿病组(D组),糖尿病辛伐他汀干预组(DS组)。模型建立后,第6周及第12... 目的:探讨非降脂剂量的辛伐他汀对糖尿病大鼠肾间质结缔组织生长因子(CTGF)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组),糖尿病组(D组),糖尿病辛伐他汀干预组(DS组)。模型建立后,第6周及第12周时各组处死大鼠10只,称取体重、肾重,测定血糖(Glu)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、甘油三酯(TG)、肌酐(SCr),留取尿液测定24 h尿白蛋白排泄量(UAE),并用免疫组化方法检测肾间质结缔组织CTGF、α-SMA。结果:6周及12周时各组间SCr、LDL、HDL及TG相比无显著性差异(P>0.05);6周时DS组的肾间质CTGF、α-SMA表达水平明显少于D组(P<0.05),但与C组相比无显著性差异(P>0.05)。12周时DS组的肾间质CTGF、α-SMA表达水平明显少于D组(P<0.05),但高于C组(P<0.05)。结论:非降脂剂量的辛伐他汀可能通过抑制CTGF的表达和减少肾间质肌成纤维细胞的数量延缓肾小管间质纤维化进展。 展开更多
关键词 糖尿病 实验性 斯伐他汀/药理学 肌动蛋白/代谢 信号肽和蛋白质类/生物合成 即早蛋白质类/生物合成 肾小球硬化症 病灶性/药物疗法
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慢性肾脏病患者血清成纤维细胞生长因子23与肾功能及钙磷代谢的关系 被引量:6
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作者 朱颖辉 李国刚 《临床荟萃》 CAS 2016年第3期299-302,共4页
目的了解慢性肾脏病(CKD)患者不同分期血中成纤维细胞生长因子23(FGF-23)的变化,探讨FGF-23与CKD患者肾功能及钙磷代谢的关系。方法选择CKD患者124例,健康对照组32例,测定患者的血清FGF-23、血钙、血磷、甲状旁腺激素(iPTH)、血... 目的了解慢性肾脏病(CKD)患者不同分期血中成纤维细胞生长因子23(FGF-23)的变化,探讨FGF-23与CKD患者肾功能及钙磷代谢的关系。方法选择CKD患者124例,健康对照组32例,测定患者的血清FGF-23、血钙、血磷、甲状旁腺激素(iPTH)、血清尿素氮(BUN)和肌酐(SCr),按照CKD-EPI公式计算肾小球滤过率(eGFR),分析FGF-23与肾功能及钙磷代谢的关系。结果CKD患者血FGF-23水平较对照组显著升高(P〈0.01)。随着肾功能减退,CKD患者血FGF-23和iPTH水平逐渐增高,在CKD3~4期与对照组比较差异有统计学意义(均P〈0.01),在CKD5期明显高于对照组、CKD1~2期、CKD3~4期。随着肾功能减退血钙水平逐渐降低、血磷水平逐渐增高,CKD患者在CKD5期与对照组、CKD1~2期、CKD3~4期比较差异有显著统计学意义(均P〈0.01)。相关分析显示,LogFGF-23与血磷、LogiPTH、BUN、SCr呈正相关,与eGFR呈负相关。多元线性回归表明,FGF-23与CKD患者BUN、SCr呈正相关。结论 CKD患者血清FGF-23在CKD3~4期就显著增高,变化早于血磷的增高。肾功能状态、血磷、iPTH与FGF-23相关。肾功能状态可能是CKD患者血FGF-23升高的主要影响因素。 展开更多
关键词 肾疾病 信号肽和蛋白质 甲状旁腺素
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放射线照射的肺成纤维细胞对人脐带间充质干细胞中经典Wnt/β-catenin通路的影响 被引量:1
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作者 张春阳 祝艳 +1 位作者 冯华松 陈旭昕 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期162-166,共5页
目的:体外研究放射线照射后的人肺成纤维细胞( HLFs )对人脐带间充质干细胞(HUMSCs)中经典Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:实验细胞分为共培养组和单纯 HUMSCs 组,共培养组为5 Gy X 射线照射后的 HLFs 通过Transwell系统与... 目的:体外研究放射线照射后的人肺成纤维细胞( HLFs )对人脐带间充质干细胞(HUMSCs)中经典Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:实验细胞分为共培养组和单纯 HUMSCs 组,共培养组为5 Gy X 射线照射后的 HLFs 通过Transwell系统与HUMSCs共培养。细胞培养3d后,蛋白质印迹法检测HUMSCs中GSK-3β、p-GSK-3β、FRAT1和胞核内β-catenin蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中WISP-1蛋白表达。结果:共培养组HUMSCs 中p-GSK-3β/GSK-3β相对比值(0.15±0.05)和FRAT1表达水平(0.48±0.07)较单纯HUMSCs组(0.55±0.05和1.16±0.13)明显下降,共培养组 HUMSCs 胞核内β-catenin (0.50±0.07)也较单纯HUMSCs组(2.39±0.15)明显下降;共培养组HUMSCs培养上清液中 WISP-1蛋白表达[(602.23±161.47) ng/mL ]较单纯 HUMSCs 组[(977.77±110.56)ng/mL]明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:放射线照射后的HLFs对HUMSCs中经典Wnt/β-catenin通路具有抑制作用。 展开更多
关键词 成纤维细 质干细/生理学 脐带 辐射性肺炎 Wnt蛋白质类/生物合成 β连环素/生物合成 信号肽和蛋白质 信号传导
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重组共表达质粒pIRES-hVEGF_(121)cDNA/hBMP-4在大鼠骨髓间充质干细胞中的共表达 被引量:2
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作者 周志林 汪春兰 +4 位作者 赵宇 韩雷 曹东升 丁浩 王帮河 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第4期371-374,共4页
目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后的共表达情况,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,... 目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后的共表达情况,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,在脂质体介导下将其转入大鼠MSCs,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测。结果重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4成功转染至大鼠MSCs中,并获得有效表达。结论hVEGF121和hBMP-4在大鼠MSCs中获有效表达,为骨缺损的联合基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白质类/生物合成 血管内皮生长因子类/生物合成 质干细/代谢 基因表达
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Destrin在氧化型低密度脂蛋白损伤人颈动脉内皮细胞过程中的作用和机制 被引量:2
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作者 汪琦瑛 张荣举 +1 位作者 赵灯法 王君 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2016年第4期416-418,共3页
目的探讨Destrin蛋白在氧化型低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein,oxLDL)损伤人颈动脉内皮细胞过程中的作用和机制。方法人颈动脉内皮细胞给予剂量梯度的oxLDL(0、5、25、100μg/ml)刺激24h,检测细胞中Destrin蛋白的表达... 目的探讨Destrin蛋白在氧化型低密度脂蛋白(oxygenized low density lipoprotein,oxLDL)损伤人颈动脉内皮细胞过程中的作用和机制。方法人颈动脉内皮细胞给予剂量梯度的oxLDL(0、5、25、100μg/ml)刺激24h,检测细胞中Destrin蛋白的表达变化;通过RNA干扰的方式下调颈动脉内皮细胞中Destrin的表达,观察其对oxLDL刺激诱导的颈动脉内皮细胞损伤的影响,同时检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达水平。结果与oxLDL刺激对照RNAi比较,oxLDL刺激RNAi MCP-1和ICAM-1蛋白表达明显增加[(734.2±113.4)pg/ml vs(502.1±96.7)pg/ml,(152.5±22.0)pg/ml vs(94.2±16.5)pg/ml,P<0.05];细胞活力明显减低[0.41±0.05 vs 0.62±0.06,P<0.05],细胞凋亡明显增高[(50±10)%vs(32±8)%,P<0.05]。结论oxLDL损伤颈动脉内皮细胞的过程中,Destrin蛋白表达下调是oxLDL的损伤机制之一。 展开更多
关键词 破解蛋白质 蛋白 LDL 内皮细 颈动脉狭窄 趋化因子CCL2 黏附分子1 凋亡
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基于脂肪干细胞的软骨组织工程的研究新进展
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作者 赖凌勇 徐房添 +2 位作者 张亚梁 缪圣旺 周波 《赣南医科大学学报》 2024年第10期1058-1063,共6页
软骨缺损的修复一直是临床上的难题。近年来,以脂肪干细胞(Adipose stem cells,ASCs)为种子细胞的软骨组织工程取得了重要进展,为软骨的修复提供了新方法,但尚不成熟。本文通过查阅国内外文献,就ASCs、相关的细胞因子以及各种新型的仿... 软骨缺损的修复一直是临床上的难题。近年来,以脂肪干细胞(Adipose stem cells,ASCs)为种子细胞的软骨组织工程取得了重要进展,为软骨的修复提供了新方法,但尚不成熟。本文通过查阅国内外文献,就ASCs、相关的细胞因子以及各种新型的仿生支架等在软骨组织工程中的最新研究进展及存在的问题进行综述。文献复习结果表明,ASCs具有来源丰富、免疫原性低等优势,尤其向软骨细胞分化的能力,使其有希望成为软骨组织工程理想的种子细胞。研究发现ASCs分泌的相关细胞因子,尤其是ASCs分泌的多种细胞外囊泡、外泌体(其内含有的多种非编码RNA)具有促进ASCs软骨分化、抑制软骨细胞凋亡等作用。另外,近年来软骨组织工程支架的研发也得到很大进展,如3D打印支架、氧化石墨烯的纳米材料支架、多种天然和人工合成材料构建的复合仿生支架等。目前存在的问题是:ASCs的成软骨诱导效率尚需进一步提高,以及开发出更适合体内微环境的3D仿生支架等,这将是软骨组织工程今后研究的重点。 展开更多
关键词 脂肪干细 软骨组织工程 支架材料 信号肽和蛋白质
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经典Wnt/β-catenin信号通路中的双向调控 被引量:27
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作者 刘洋 张晨光 周春燕 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期238-242,共5页
In recent years,Wnt/β-catenin signaling has been identified as a key player in embryogenesis and human diseases.Canonical Wnt signaling pathway is controlled by a variety of classic molecules like Wnt,β-catenin,Axin... In recent years,Wnt/β-catenin signaling has been identified as a key player in embryogenesis and human diseases.Canonical Wnt signaling pathway is controlled by a variety of classic molecules like Wnt,β-catenin,Axin,APC,GSK-3β and CK1,which interact and coordinate to regulate the expressions of cell signaling molecules.The latest evidences suggest that some components of the Wnt/β-catenin signaling,like APC,GSK-3β,CK1,Dkk2 and WISE,play dual roles different from what they have been thought previously.Here we reviewed some recent discoveries on the canonical Wnt/β-catenin signaling pathway to provide some new ideas and principles for signaling transduction studies. 展开更多
关键词 WNT蛋白质 信号传导 信号肽和蛋白质
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女性腹型肥胖患者低脂联素血症与胰岛β细胞功能关系探讨 被引量:6
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作者 刘军 查英 +5 位作者 盛励 丁和远 陈灶萍 廖晓寰 吴强 孟令平 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第3期260-264,共5页
目的:探讨女性腹型肥胖患者脂联素水平与胰岛β细胞功能之间的关系。方法:应用高葡萄糖钳夹技术检测了9例女性腹型肥胖、9例健康女性对照和7例女性2型糖尿病患者的胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性,用MR I测定局部体脂和酶联免疫法测定脂... 目的:探讨女性腹型肥胖患者脂联素水平与胰岛β细胞功能之间的关系。方法:应用高葡萄糖钳夹技术检测了9例女性腹型肥胖、9例健康女性对照和7例女性2型糖尿病患者的胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性,用MR I测定局部体脂和酶联免疫法测定脂联素水平。结果:对照组胰岛素分泌第一时相(FP IR)、葡萄糖代谢清除率(GDR)、胰岛素敏感性指数(ISI)和脂联素水平高于腹型肥胖组和2型糖尿病组;内脏脂肪面积(VA)低于腹型肥胖组和2型糖尿病组(P<0.05)。腹型肥胖组脂联素、FP IR、胰岛素分泌第二时相(SP IR)和胰岛素分泌最大量(IN Sm ax)高于2型糖尿病组(P<0.05)。多元逐步回归分析显示,年龄、FP IR和GDR与脂联素呈独立正相关(B分别为0.145、0.194、0.277,均P<0.05);腰臀比(WHR)与脂联素呈独立负相关(B为-7.424,P<0.05)。结论:腹型肥胖女性脂联素水平降低,可能与胰岛素分泌密切相关。 展开更多
关键词 肥胖症/病因 信号肽和蛋白质 胰岛/细 胰岛素/分泌 糖尿病 2型/血液 葡萄糖钳制技术
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醛固酮对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 王健 李晓东 +1 位作者 王金华 郭志军 《天津医药》 CAS 北大核心 2007年第10期736-738,共3页
目的:探讨醛固酮(ALD)在体外是否能够促进人近端肾小管上皮细胞株(HK2)结缔组织生长因子(CT-GF)的表达。方法:采用体外培养的HK2细胞,分别观察不同浓度(10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)ALD处理48h,或用10-9mol/LALD处理不同时间(... 目的:探讨醛固酮(ALD)在体外是否能够促进人近端肾小管上皮细胞株(HK2)结缔组织生长因子(CT-GF)的表达。方法:采用体外培养的HK2细胞,分别观察不同浓度(10-11、10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)ALD处理48h,或用10-9mol/LALD处理不同时间(24h、48h、72h)对HK2细胞CTGF表达的影响,应用RT-PCR法检测CTGFmRNA水平的表达。结果:HK2细胞培养48h后,空白对照组即有CTGF的基础表达,ALD不同浓度组CTGFmRNA的表达均有增加,与空白对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);以10-9mol/L浓度的ALD作用于HK2细胞,随着作用时间的延长,CTGFmRNA的表达量明显增加,与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:ALD能够促进HK2细胞CTGFmRNA水平的表达,并具有剂量依赖性和时间依赖性,ALD可能通过促进CTGF的分泌,发挥其促进肾间质纤维化的作用。 展开更多
关键词 醛固酮 肾小管 上皮细 信号肽和蛋白质 纤维化 RNA 信使 转化生长因子β
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地黄低聚糖对人脂肪组织来源干细胞旁分泌作用的影响 被引量:5
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作者 裴志勇 赵玉生 +1 位作者 高伟 尹巧香 《中国临床保健杂志》 CAS 2012年第4期388-391,F0003,共5页
目的探讨地黄低聚糖(RGOs)对分离、培养的人脂肪组织来源干细胞(hASCs)旁分泌作用的影响。方法酶消化法及贴壁法从人腹部脂肪组织中分离、培养hASCs。流式细胞仪检测hASCs表面抗原CD29、CD31、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达。h... 目的探讨地黄低聚糖(RGOs)对分离、培养的人脂肪组织来源干细胞(hASCs)旁分泌作用的影响。方法酶消化法及贴壁法从人腹部脂肪组织中分离、培养hASCs。流式细胞仪检测hASCs表面抗原CD29、CD31、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达。hASCs经RGOs(0.1 g/L)预处理12 h并继续干预,ELISA法观察不同时间点hASCs培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF),肝细胞生长因子(HGF),胰岛素样生长因子-1(IGF-1),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),基质细胞衍生因子-lα(SDF-lα)浓度的变化。结果hASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD105表达呈阳性,CD31、CD45、HLA-DR表达呈阴性。与对照组相比,RGOs可以促进体外培养的hASCs分泌VEGF、HGF、IGF-1、SDF-1α(P<0.05),而对于bFGF的分泌无明显影响。结论 RGOs可以增强体外培养的hASCs的旁分泌作用。 展开更多
关键词 地黄 质干细 脂肪组织 信号肽和蛋白质
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HB-EGF对HSC-T6细胞Ras/ERK通路的激活及对MMP-2、TIMP-1表达的影响 被引量:5
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作者 张莉娟 何彬彬 +2 位作者 黄月红 陈治新 王小众 《福建医科大学学报》 北大核心 2016年第2期69-73,共5页
目的观察肝素结合性表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)激活肝星状细胞(HSC)过程中Ras/ERK信号通路的变化和对金属基质蛋白酶(MMP)及其抑制物的影响。方法传代培养HSC-T6细胞,分空白对照组、HB-EGF处理组(20,40,80ng/mL),采用QRT-PCR法检测... 目的观察肝素结合性表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)激活肝星状细胞(HSC)过程中Ras/ERK信号通路的变化和对金属基质蛋白酶(MMP)及其抑制物的影响。方法传代培养HSC-T6细胞,分空白对照组、HB-EGF处理组(20,40,80ng/mL),采用QRT-PCR法检测MMP-2、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)及表皮生长因子受体(EGFR)mRNA的表达,并确定HB-EGF刺激HSC-T6Ras/ERK通路(ERK1、ERK2、P38MAPK)活化的最佳浓度及最佳时间,检测该通路活化情况。结果 QRT-PCR检测提示,MMP-2的表达随HB-EGF干预时间的延长增加,TIMP-1的表达随干预时间的延长递减;40ng/mL HB-EGF培养HSC-T6 48h后,EGFR mRNA的表达较空白对照组明显上调(P<0.05);选择40ng/mL HB-EGF培养48h为最佳刺激时间与浓度,该处理组ERK1mRNA的表达较空白对照组明显上调(P<0.05),但ERK2、P38MAPK的变化无统计学意义;Western-blot检测提示该处理组ERK1蛋白的表达较空白对照组上调(P<0.05)。结论HB-EGF可影响HSC-T6的MMP-2、TIMP-1的表达;HB-EGF通过促进HSC-T6表达EGFR、ERK1,有效激活细胞内Ras/ERK信号通路。 展开更多
关键词 表皮生长因子 肝素 肝细 星形细 大鼠 信号调节MAP激酶 RAS蛋白质 信号肽和蛋白质 基质金属蛋白 金属蛋白酶1组织抑制剂
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PDTC抑制TGF-β1对肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞的诱导作用 被引量:3
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作者 张丽萍 孙玉敏 +1 位作者 何雪娟 陈晓玲 《天津医药》 CAS 北大核心 2008年第9期695-697,共3页
目的:通过核因子-κB(NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC),观察NF-κB在转化生长因子(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及向肌成纤维细胞(MF)分化中的作用。方法:一次性气管内滴注博莱霉素-A5复制肺纤维化模型... 目的:通过核因子-κB(NF-κB)抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC),观察NF-κB在转化生长因子(TGF-β1)诱导肺成纤维细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及向肌成纤维细胞(MF)分化中的作用。方法:一次性气管内滴注博莱霉素-A5复制肺纤维化模型,取肺组织培养肺成纤维细胞,细胞分为Sham组、TGF-β1组、PDTC+TGF-β1组和PDTC组。采用免疫细胞化学技术、流式细胞术检测PDTC对TGF-β1诱导的成纤维细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGF的影响。结果:TGF-β1组和Sham组比较,肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA明显增加,PDTC+TGF-β1组肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA低于TGF-β1组,单独PDTC对肺成纤维细胞无影响。结论:NF-κB促进TGF-β1诱导肺纤维化模型大鼠肺成纤维细胞表达CTGF及肺成纤维细胞向MF分化。 展开更多
关键词 肺纤维化 转化生长因子Β 信号肽和蛋白质 成纤维细 NF-κB 大鼠 sprague-dawley
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富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白在糖尿病及其并发症的研究进展 被引量:3
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作者 杨筱瑶 宋海燕 +1 位作者 王爽 李婷婷 《临床荟萃》 CAS 2012年第21期1917-1920,共4页
糖尿病是由遗传因素、免疫功能紊乱、微生物感染及其毒素、自由基毒素、精神因素等各种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的糖、蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征。其发病机制至今仍未明确。
关键词 糖尿病 信号肽和蛋白质 血管调节
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PINCH-1蛋白的功能及与疾病的关系 被引量:2
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作者 徐葳 曾东风 孔佩艳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期485-487,共3页
关键词 LIMSl蛋白 整合素 信号肽和蛋白质 凋亡调节蛋白质
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PDT/GR-ΔLBD融合蛋白的表达、纯化及穿膜特性的鉴定 被引量:1
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作者 张方 施毅 +2 位作者 李子玲 胡波 宋勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期27-30,共4页
目的构建穿膜肽(PDT)和缺失结合配体结构域的小鼠糖皮质激素受体(GR-ΔLBD)融合基因表达载体,经原核表达、纯化后,进行穿膜特性的鉴定。方法质粒pEGFP-GR-ΔLBD经双酶切,获得目的基因片段GR-ΔLBD,将该基因片段亚克隆入原核表达载体pGEX... 目的构建穿膜肽(PDT)和缺失结合配体结构域的小鼠糖皮质激素受体(GR-ΔLBD)融合基因表达载体,经原核表达、纯化后,进行穿膜特性的鉴定。方法质粒pEGFP-GR-ΔLBD经双酶切,获得目的基因片段GR-ΔLBD,将该基因片段亚克隆入原核表达载体pGEX-PDT,获得pGEX-PDT/GR-ΔLBD融合基因表达载体。将表达载体转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、谷胱甘肽-琼脂糖树脂处理、谷胱甘肽洗脱液洗脱后,获得PDT/GR-ΔLBD融合蛋白,SDS-PAGE分析融合蛋白;采用荧光素FITC体外标记PDT/GR-ΔLBD融合蛋白(终浓度分别为0、500、1000nmol/L),与小鼠肺上皮细胞TC-1共培养2h,在荧光显微镜下观察其穿膜特性。结果成功构建了融合基因原核表达载体pPDT/GR-ΔLBD,并能表达蛋白产物,大小约78.6kD,与融合蛋白PDT/GR-ΔLBD的理论计算值(80kD)相符。随着PDT/GR-ΔLBD浓度的增加,进入TC-1上皮细胞的PDT/GR-ΔLBD明显增多,并可在胞核中浓聚。结论 PDT/GR-ΔLBD融合蛋白具有良好的可溶性和穿膜特性,为进一步研究PDT/GR-ΔLBD融合蛋白在抗炎过程中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 受体 糖皮质激素 配体结合结构域 信号肽和蛋白质 人工基因融合
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成纤维母细胞生长因子23的研究进展 被引量:4
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作者 庄兴 陈福祥 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第7期778-781,共4页
成纤维母细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)是近年来被证实的调节机体血磷稳定的因子.作为一种分泌性蛋白质,主要有骨细胞产生,作用于肾脏对磷的重吸收而有效地维持血磷的稳定,同时还参与骨的矿化和分化等.FGF23过... 成纤维母细胞生长因子23(fibroblast growth factor 23,FGF23)是近年来被证实的调节机体血磷稳定的因子.作为一种分泌性蛋白质,主要有骨细胞产生,作用于肾脏对磷的重吸收而有效地维持血磷的稳定,同时还参与骨的矿化和分化等.FGF23过多或过少都将破坏血磷的稳定性,从而引发多种疾病.现就FGF23相关研究进展作一综述. 展开更多
关键词 信号肽和蛋白质 成纤维细 研究
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NF-B、Wnt信号转导通路与乳腺癌的发生发展 被引量:2
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作者 邱霞 黄建 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2009年第4期413-417,共5页
乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,它的发生、发展机制至今并不明确。NF-κB和Wnt是近几年来发现与乳腺癌关系密切的二条信号通路,它们通过促细胞增殖、抑制凋亡等多种途径参与乳腺癌的形成,可能成为乳腺癌治疗的新靶点。
关键词 乳腺肿瘤 NF-ΚB 信号转导 信号肽和蛋白质
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基于缺氧诱导因子-1α/Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3通路探讨速效救心丸对冠心病大鼠的保护机制 被引量:7
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作者 郭坤 金辉 吴留广 《安徽医药》 CAS 2020年第6期1078-1083,I0001,共7页
目的探究速效救心丸对冠心病大鼠的保护作用,初步探究其可能作用机制。方法将40只SD大鼠分为健康组、单纯模型组、速效救心丸组、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)激活剂奥替普拉(Oltipraz)组、速效救心丸+奥替普拉组,每组10只大鼠。对大鼠心... 目的探究速效救心丸对冠心病大鼠的保护作用,初步探究其可能作用机制。方法将40只SD大鼠分为健康组、单纯模型组、速效救心丸组、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)激活剂奥替普拉(Oltipraz)组、速效救心丸+奥替普拉组,每组10只大鼠。对大鼠心电图ST段、T波变化进行检测,采用酶法测定一氧化氮及血脂指标总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、内皮素-1(ET-1)、前列环素I2(PGI2)水平,HE染色观察心肌组织病理形态学变化情况;DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)检测心肌组织细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测心肌组织中HIF-1α、Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氮酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)蛋白表达。结果与健康组相比,单纯模型组ST段(0.36±0.05)mV、T波(0.26±0.05)mV升高,三酰甘油(1.08±0.14)mmol/L、总胆固醇升高,HDL(0.59±0.05)mmol/L降低,TNF-α(38.27±1.36)pg/mL、ET-1(11.63±1.84)ng/L升高,一氧化氮(28.58±1.53)μmol/L降低,心肌组织细胞凋亡率(46.72±4.37)%升高,HIF-1α(1.12±0.15)、caspase-3(0.54±0.05)蛋白表达升高,Bcl-2(0.36±0.05)蛋白表达降低(P<0.05)。速效救心丸组ST段(0.23±0.04)mV、T波(0.15±0.04)mV、三酰甘油(0.85±0.07)mmol/L、TNF-α(24.69±1.53)pg/mL、ET-1(7.18±1.57)ng/L、细胞凋亡率(15.66±3.51)%、HIF-1α(0.49±0.06)、caspase-3(0.42±0.04)蛋白表达低于单纯模型组,一氧化氮(36.43±1.65)μmol/L、Bcl-2(0.67±0.07)高于单纯模型组(P<0.05)。奥替普拉组ST段(0.41±0.05)mV、T波(0.35±0.03)mV、三酰甘油(1.27±0.12)mmol/L、TNF-α(43.42±1.59)pg/mL、ET-1(12.76±1.45)ng/L、细胞凋亡率(62.88±8.35)%、HIF-1α(1.37±0.26)、caspase-3(0.91±0.09)蛋白表达高于单纯模型组,一氧化氮(23.52±1.84)μmol/L、Bcl-2(0.25±0.04)低于单纯模型组(P<0.05)。速效救心丸+奥替普拉组ST段(0.34±0.06)mV、T波(0.24±0.05)mV、三酰甘油(1.06±0.13)mmol/L、总胆固醇、TNF-α(35.23±1.65)pg/mL、ET-1(11.24±1.73)ng/L、细胞凋亡率(42.76±5.16)%、HIF-1α(1.06±0.17)、caspase-3(0.52±0.06)蛋白表达低于奥替普拉组,一氧化氮(27.24±1.32)μmol/L、Bcl-2(0.38±0.06)高于奥替普拉组(P<0.05)。结论速效救心丸可改善冠心病大鼠血脂、内皮功能,降低机体炎症反应,其可能是通过抑制HIF-1α/BNIP3通路、降低心肌细胞凋亡实现的。 展开更多
关键词 冠心病/药物疗法 缺氧诱导因子1 Α亚基 腺病毒E1B蛋白质 凋亡 黏附分子1 速效救心丸 大鼠 Sprague-Dawley
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