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重组人角质细胞生长因子-2基因克隆、表达、纯化与活性分析 被引量:13
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作者 马雁冰 李擎 +4 位作者 谢天宏 李鸿钧 冮宏映 戴长柏 孙茂盛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期761-765,共5页
从人胚肺二倍体细胞KMB17中抽提总RNA ,经RT PCR扩增获得编码人角质细胞生长因子 2 (keratinocytegrowthfactor 2 ,KGF 2 )的cDNA .克隆于硫氧环蛋白表达载体pThioHisA ,序列分析表明与文献报道一致 .经IPTG诱导 ,在大肠杆菌BL2 1中实... 从人胚肺二倍体细胞KMB17中抽提总RNA ,经RT PCR扩增获得编码人角质细胞生长因子 2 (keratinocytegrowthfactor 2 ,KGF 2 )的cDNA .克隆于硫氧环蛋白表达载体pThioHisA ,序列分析表明与文献报道一致 .经IPTG诱导 ,在大肠杆菌BL2 1中实现高效表达 ,表达量可达菌体总蛋白 10 %~15 % .菌体超声破碎 ,上清经CM SepharoseFF阳离子交换 ,Heparin Sepharose亲和层析 ,Superdex 75凝胶过滤层析纯化得到重组人KGF 2 ,纯度高于 95 % .生物活性分析表明 ,它能够促进成纤维细胞NIH 3T3的增殖 ,诱导鸡胚背根神经结神经轴突的生长 ,促进鸡胚尿囊膜血管生成 .研究结果表明 ,获得了 95 %纯度的具有生物学活性的重组人KGF 2 。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 基因克隆 表达 纯化 活性分析
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重组人角质细胞生长因子-2对实验秃毛大鼠的毛发再生作用 被引量:9
2
作者 王泽 黄鹏煌 +3 位作者 赵海洋 李海燕 田海山 李校堃 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1741-1746,共6页
目的建立实验秃毛大鼠模型,研究重组人角质细胞生长因子-2(recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验秃毛大鼠的毛发再生作用。方法对大鼠背部以脱毛膏拔毛,随机分为7个组,即正常对照组、5%米诺地尔组、aFGF组、r... 目的建立实验秃毛大鼠模型,研究重组人角质细胞生长因子-2(recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对实验秃毛大鼠的毛发再生作用。方法对大鼠背部以脱毛膏拔毛,随机分为7个组,即正常对照组、5%米诺地尔组、aFGF组、rhKGF2高、中、低剂量组、0.9%生理盐水组。造模次日皮肤涂抹给药,以给药第1、5、9、14天为观察时间点,记录实验大鼠的体重、实验区毛长、实验区毛发生长状况。于第14天处死实验大鼠,取实验区皮肤进行组织病理学检查。结果体重方面:在第1、5、9、14天,与正常对照组相比,各组差异无显著性(P>0.05);毛长方面:与0.9%生理盐水组相比,在第5、9天,rhKGF2高、中剂量组存在显著性差异(P<0.05,P<0.01)。在第14天,高、中、低剂量组差异有显著性(P<0.05,P<0.01,P<0.05);毛重方面:在第14天,与0.9%生理盐水组相比,各组(正常对照组除外)差异有显著性(P<0.01);病理检查结果显示:rhKGF2具有促进实验秃毛大鼠毛囊新生与成熟的作用。结论 rh-KGF2具有促进实验秃毛大鼠毛发再生的作用。rhKGF2具有很好的临床应用前景。 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 秃毛大鼠 毛发再生作用 毛囊 临床应用
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重组人角质细胞生长因子-2对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用 被引量:7
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作者 王晓杰 周鑫 +6 位作者 田海山 马吉胜 焦悦 张睿 蔡敏倩 钱焕文 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期625-628,F0002,共5页
目的:研究外用旋滴重组人角质细胞生长因子-2(KGF-2)对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用,为角膜上皮损伤的早期治疗探索新方法。方法:制备兔角膜碱烧伤模型,60只日本大耳白兔随机分为碱烧伤对照组和KGF-2组(25mg·mL-1)(n=30);... 目的:研究外用旋滴重组人角质细胞生长因子-2(KGF-2)对兔碱烧伤模型角膜上皮损伤的治疗作用,为角膜上皮损伤的早期治疗探索新方法。方法:制备兔角膜碱烧伤模型,60只日本大耳白兔随机分为碱烧伤对照组和KGF-2组(25mg·mL-1)(n=30);各组日本大耳白兔于造模后以50μL药物滴眼,每日3次。7和14d裂隙灯观察角膜烧伤面积以及角膜新生血管的形成,MTT法检测角膜上皮细胞活性,免疫组化方法进行病理组织学检查。结果:碱烧伤后7和14d,KGF-2组角膜烧伤面积小于碱烧伤对照组,差异有显著性(P<0.01)。碱烧伤对照组7d角膜新生血管发生率为17.50%,KGF-2组为7.32%;碱烧伤对照组14d角膜新生血管发生率为41.67%,KGF-2组为32.50%。MTT检测结果显示:碱烧伤后7和14d,KGF-2组492nm吸光度与碱烧伤对照组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。碱烧伤后7和14d,病理切片HE染色显示:对照组角膜基质水肿,板层纤维排列松散、紊乱,炎症反应反复出现,角膜上皮层变薄,部分脱落,角膜内皮层内侧有大量成纤维细胞增生;KGF-2组碱烧伤后7d,角膜上皮细胞生长良好,基质轻度增厚,无明显的炎症反应;碱烧伤后14d,未出现炎症复发,角膜上皮细胞生长良好,排列整齐,角膜基质仅有轻度增厚。结论:外用旋滴25mg·mL-1KGF-2可加速角膜上皮损伤的恢复,减轻角膜烧伤的各种炎症反应症状;减轻角膜基质水肿和纤维化,同时KGF-2亦表现出显著的抑制角膜新生血管形成的作用;KGF-2有可能成为另一个对角膜上皮损伤具有重要调控作用的生长因子。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 角膜 上皮 损伤修复
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ERK1/2信号通路在角质细胞生长因子-2诱导角膜基质细胞增殖中的作用 被引量:5
4
作者 高丽昌 李婷婷 +4 位作者 李富勇 唐禄 李海燕 王晓杰 李校堃 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1405-1408,共4页
目的观察角质细胞生长因子(keratinocyte growthfactor-2,KGF-2)对角膜基质细胞的增殖作用及ERK1/2信号在角膜基质细胞增殖中的调控作用,探讨KGF-2对角膜基质细胞增殖的可能机制。方法体外培养角膜基质细胞,MTT法检测细胞增殖,Western b... 目的观察角质细胞生长因子(keratinocyte growthfactor-2,KGF-2)对角膜基质细胞的增殖作用及ERK1/2信号在角膜基质细胞增殖中的调控作用,探讨KGF-2对角膜基质细胞增殖的可能机制。方法体外培养角膜基质细胞,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测磷酸化ERK1/2表达水平。结果 KGF-2在1~100 mg·L-1对角膜基质细胞有明显的促进增殖作用且呈现剂量-效应关系;100 mg·L-1 KGF-2处理角膜基质细胞,5、15、30 min后ERK1/2磷酸化表达水平明显升高,60、90、120、180 min后ERK1/2磷酸化表达水平逐渐减弱;20μmol.L-1 ERK1/2抑制剂PD98059可抑制KGF-2对角膜基质细胞的促增殖作用。结论 KGF-2激活ERK1/2信号通路,提高细胞增殖率,可被抑制剂PD98059阻断;ERK1/2信号通路调控角膜基质细胞的增殖,在角膜基质细胞损伤中发挥作用。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 ERK1/2 PERK1/2 信号通路 角膜基质细胞 细胞增殖
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角质细胞生长因子-2对角膜激光烧伤的治疗作用及机制研究 被引量:5
5
作者 高荣莲 马萍 +7 位作者 陈鹏 梁洁 王丽峰 肖瑞 康宏向 杨艳峰 钱焕文 王玉芝 《中国激光医学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期205-209,267-269,共8页
目的探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)对角膜激光烧伤的治疗作用及其作用机制。方法采用日本大耳白兔构建激光角膜烧伤模型,实验分烧伤对照组、bFGF治疗对照组、KGF-2 12.5μg/ml组、KGF-225μg/ml组、KGF-2 50μg/ml组。通过裂隙灯显微... 目的探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)对角膜激光烧伤的治疗作用及其作用机制。方法采用日本大耳白兔构建激光角膜烧伤模型,实验分烧伤对照组、bFGF治疗对照组、KGF-2 12.5μg/ml组、KGF-225μg/ml组、KGF-2 50μg/ml组。通过裂隙灯显微镜与组织病理学观察、烧伤斑图像分析、角膜OD值测定和MTT法检测损伤后角膜的恢复情况,比较治疗后7、14 d各组的差异。结果 KGF-2治疗后兔角膜上皮细胞修复良好,基质中纤维板层排列整齐,无明显的炎症反应,新生血管形成较少,角膜透光率增加,损伤斑面积明显缩小,且KGF-2浓度为25μg/ml时达到最大修复。KGF-2对角膜上皮细胞无明显的促增殖活性。结论 KGF-2可通过减轻角膜激光烧伤后的各种炎症反应、加速角膜上皮细胞的再生和迁移以及促进角膜基质纤维修复等机制,促进激光烧伤后受损角膜的修复。 展开更多
关键词 激光 角膜 角质细胞生长因子-2
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乳糖诱导角质细胞生长因子-2在大肠杆菌中的表达 被引量:3
6
作者 田海山 唐禄 +5 位作者 王晓杰 王会岩 刘笑菊 冯秀萍 王一 李校堃 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期262-266,共5页
目的:研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行角质细胞生长因子-2(KGF-2)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法:分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的... 目的:研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行角质细胞生长因子-2(KGF-2)基因重组蛋白的表达,探讨工程化生产的可能性。方法:分别比较乳糖诱导浓度、诱导时机、诱导时间及诱导温度对重组表达产物的影响,并以IPTG诱导作为对照,确定较为优化的乳糖诱导条件。结果:对于重组目的产物,乳糖作为诱导剂也可以起到良好效果,以乳糖为诱导剂的A600值较IPTG高,诱导产物的表达量与IPTG诱导产物相当。以终浓度为10g.L-1乳糖在33℃下诱导6h,可以达到良好的诱导效果,并且具有较好的可溶性和促细胞生长活性。结论:乳糖可替代IPTG诱导角质细胞生长因子基因表达,并取得良好效果,为工程化生产提供了良好的实验依据。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 乳糖诱导 IPTG
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角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究 被引量:3
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作者 林来兴妹 胡志明 +2 位作者 孟晓静 黄树琪 王小宁 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2002年第5期220-222,共3页
目的研究重组人角质细胞生长因子 2 (rhKGF 2 )工程菌的高密度发酵和提纯工艺。方法通过增加培养基营养成分 ,发酵过程补加葡萄糖 ,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化 ,电泳... 目的研究重组人角质细胞生长因子 2 (rhKGF 2 )工程菌的高密度发酵和提纯工艺。方法通过增加培养基营养成分 ,发酵过程补加葡萄糖 ,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化 ,电泳分析结果。结果每 1L发酵液可获得菌体 12 .2g ,表达率达 2 8.7%。纯化后rhKGF 2纯度达 97%。结论rhKGF 2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 发酵 纯化 化学诱导 可溶性表达
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重组人角质细胞生长因子-2基因的克隆、表达及活性 被引量:2
8
作者 田海山 唐禄 +3 位作者 王晓杰 王艳芳 官丽莉 李校堃 《吉林大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1150-1156,共7页
从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过I... 从人胚肺成纤维细胞中提取总RNA,利用RT-PCR法获得人角质细胞生长因子-2(hKGF-2)cDNA,并通过PCR方法扩增,再与原核表达载体pET3c连接后转化至BL21(DE3)宿主细胞中获得表达菌株.通过流加补料方式和发酵条件的控制,进行高密度培养,并通过IPTG诱导获得可溶性表达的目的产物.结果表明:目的蛋白占菌体总蛋白的30.0%以上;经阳离子交换层析、肝素亲和层析两步柱层析方法获得的rhKGF-2纯度高于99.0%.建立了利用转受体FGFR2-Ⅲb的BaF3细胞株进行rhKGF-2促增殖作用的活性测定方法,活性测定结果呈典型的S型曲线,并在一定范围内具有剂量依赖性. 展开更多
关键词 重组角质细胞生长因子-2(rhKGF.2) 高密度培养 柱层析 转受体FGFR2-Ⅲb BaF3细胞 生物活性
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重组人角质细胞生长因子-2对大鼠皮肤烫伤的治疗作用及其可能机制探讨 被引量:2
9
作者 袁海虹 周薇 +4 位作者 荣征星 廖镇江 张勤 乔亮 陈红专 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期639-644,共6页
目的:研究重组人角质细胞生长因子-2(rh-KGF-2)对大鼠皮肤烫伤愈合的影响及其可能的作用机制。方法:建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,d16观察新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。体... 目的:研究重组人角质细胞生长因子-2(rh-KGF-2)对大鼠皮肤烫伤愈合的影响及其可能的作用机制。方法:建立大鼠深Ⅱ度烫伤模型,每天局部给药1次,连续15d,每4d测量伤口面积并计算愈合率,d16观察新生上皮面积、厚度和上皮细胞迁移距离。体外培养HaCaT细胞,MTT法检测不同浓度的rhKGF-2对HaCaT细胞增殖率的影响;划痕实验检测rhKGF-2对HaCaT细胞移行的影响。结果:rh-KGF-2对大鼠皮肤深Ⅱ度烫伤的愈合有明显的促进作用,使新生上皮面积、平均厚度和上皮细胞移行距离等明显增加。rhKGF-2可刺激HaCaT细胞增殖,集落形成率增加(P<0.05),且细胞呈明显的增殖形态,形成的集落较大,集落内细胞多呈星状,胞内染色质丰富;rhKGF-2能显著促进创伤周围细胞向创面中央移行(P<0.01)。结论:rhKGF-2能明显加快大鼠烫伤创面愈合,可能作用机理为通过促进表皮细胞增殖和移行,加速创面皮肤再上皮化。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 烫伤 HACAT细胞 增殖 移行
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角质细胞生长因子-2对脂多糖所致大鼠急性肺损伤的保护作用 被引量:6
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作者 童琳 朱晓丹 +4 位作者 刘洁 毕晶 戎琳怡 宋元林 白春学 《中国临床医学》 2013年第6期747-750,共4页
目的:观察静脉注射不同剂量角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法:采用气道内滴注LPS(5 mg/kg)的方法建立大鼠急性肺损伤模型,以相同体积磷酸... 目的:观察静脉注射不同剂量角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor-2,KGF-2)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致大鼠急性肺损伤的保护作用。方法:采用气道内滴注LPS(5 mg/kg)的方法建立大鼠急性肺损伤模型,以相同体积磷酸盐缓冲液(PBS)气道内滴注作为对照。LPS滴注完毕1 h后,经尾静脉注射KGF-2(5、10及20 mg/kg);LPS气道内滴注24 h后,进行动脉血气分析,检测肺组织湿/干质量比、肺泡灌洗液总蛋白浓度、肺泡灌洗液炎性因子水平,并行肺泡灌洗液白细胞计数、白细胞分类计数以及肺组织病理检查。结果:LPS致伤组动脉血氧分压较对照组显著降低,而其肺泡灌洗液总蛋白浓度、肺泡灌洗液白细胞数及中性粒细胞数、肺组织湿/干质量比均较对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。肺组织病理检查结果提示,LPS致伤组炎性细胞浸润、肺组织实变、间质水肿等损伤表现显著。不同剂量KGF-2静脉注射对LPS所致急性肺损伤均有不同程度的保护作用,但剂量为10 mg/kg时保护作用最明显。LPS致伤组肺泡灌洗液中巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)水平均较对照组显著升高(P<0.05),而KGF-2给药组MIP-2、IL-6水平均较LPS致伤组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:KGF-2对LPS所致急性肺损伤有明显的保护作用,KGF-2在急性肺损伤的治疗中可能有应用前景。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 脂多糖 急性肺损伤
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MTT实验检测重组人角质细胞生长因子-2诱导不同细胞系增殖的差异 被引量:3
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作者 孙卫国 王芳 +4 位作者 刘农乐 丁红梅 李邦印 李少华 邵宁生 《生物技术通讯》 CAS 2011年第2期225-228,共4页
目的:用MTT法检测重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)诱导不同细胞系增殖的差异,建立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型。方法:利用载体pBV220-KGF-2原核表达和纯化rhKGF-2,然后用MTT法分别检测rhKGF-2诱导大鼠气管上皮细胞RTE、大鼠小肠... 目的:用MTT法检测重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)诱导不同细胞系增殖的差异,建立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型。方法:利用载体pBV220-KGF-2原核表达和纯化rhKGF-2,然后用MTT法分别检测rhKGF-2诱导大鼠气管上皮细胞RTE、大鼠小肠上皮细胞IEC-6、小鼠成纤维细胞NIH/3T3和人喉癌细胞Hep-2增殖的能力。结果:rhKGF-2具有强促Hep-2细胞增殖的生物活性,而对RTE细胞、IEC-6细胞、NIH/3T3细胞的诱导增殖作用不明显。结论:在体外,rhKGF-2具有较强的诱导Hep-2细胞增殖的作用。本研究为确立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型的选择提供了实验依据。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 基因表达 细胞增殖MTT实验
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转角质细胞生长因子-2基因红花研究 被引量:1
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作者 杨晶 王兰 +8 位作者 黄建 陈玉斌 郭咏昕 易善勇 官丽莉 杜林娜 李海燕 李校堃 姜潮 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第2期210-216,共7页
【目的】构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础。【方法】利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL-KGF2,采用... 【目的】构建转角质细胞生长因子-2基因(KGF2)红花,为KGF2药用蛋白的生产奠定了基础。【方法】利用融合PCR方法扩增人源KGF2基因与拟南芥油体蛋白Oleosin基因的融合基因,将融合基因克隆至表达载体pOP上,构建了重组质粒pOP-OL-KGF2,采用冻融法将质粒pOP-OL-KGF2转入根癌农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,采用PCR检测筛选转基因红花阳性植株,SDS-PAGE检测Oleosin-KGF2融合蛋白的表达情况。【结果】成功构建了植物特异表达载体pOP-OL-KGF2,转染后共获得了12株转基因红花植株,其中2株鉴定为阳性,阳性率为17%,对转化植株进行DNA水平检测和蛋白水平检测,可知KGF2基因已经整合进红花基因组中,且有所表达。【结论】成功获得转KGF2基因的红花株系。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 红花 遗传转化
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角质细胞生长因子-2与核糖体蛋白L22相互作用的发现及在哺乳动物细胞中的验证
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作者 白秉学 徐东刚 +3 位作者 王金凤 彭善云 邹民吉 范明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期936-940,共5页
通过聚合酶链式反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF 2cDNA ,构建诱饵蛋白载体 pAS2 1 KGF 2并对其自身转录激活活性进行鉴定 ,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库 ,挑选双阳性克隆 .DNA序列分析和同源检索显示 ,所获侯选蛋白为人核糖体... 通过聚合酶链式反应从人胎肝cDNA文库中钓取KGF 2cDNA ,构建诱饵蛋白载体 pAS2 1 KGF 2并对其自身转录激活活性进行鉴定 ,利用酵母双杂交系统筛选人胎肝cDNA文库 ,挑选双阳性克隆 .DNA序列分析和同源检索显示 ,所获侯选蛋白为人核糖体蛋白L2 2 (RPL2 2 ) .将KGF 2和侯选蛋白分别克隆至哺乳动物细胞双杂交的BD、AD质粒中 ,共同转染COS 7细胞 ,通过CAT分析验证了KGF 2和侯选蛋白之间的相互作用 .为阐明KGF 2作用的分子机制提供有益线索 . 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 相互作用蛋白 酵母双杂交 哺乳动物细胞双杂交 核糖体蛋白122
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流体膜中重组人角质细胞生长因子-2含量测定
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作者 王虎根 徐晓燕 +3 位作者 郭莹 张翊 饶春明 王军志 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2006年第4期43-45,共3页
目的 以甲壳素为主要基质制成以重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)为主要活性成分的新型制剂流体膜用于治疗烧烫伤促愈合.为该新制剂的质量标准制定可行的活性成分定量测定方法。方法 利用rhKGF-2的特异性抗体性质.采用酶联免疫法... 目的 以甲壳素为主要基质制成以重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)为主要活性成分的新型制剂流体膜用于治疗烧烫伤促愈合.为该新制剂的质量标准制定可行的活性成分定量测定方法。方法 利用rhKGF-2的特异性抗体性质.采用酶联免疫法(间接ELISA法)测定其在该制剂中的含量.并进行了方法学验证。结果 制剂中其它成分不干扰rhKGF-2的测定;线性范围为0~9μg·mL^-1,回归系数为0.97.检测限度为0.56μg·mL^-1;批内和批间精密度均较高.CV%分别为2.0%,1.01%;回收率为99.1%。测定了3批试制品.平均含量为1.62μg·mL^-1。结论 本方法简便.准确.可用于该制剂中rhKGF-2的含量测定。 展开更多
关键词 酶联免疫法 重组人角质细胞生长因子-2 含量测定
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重组人角质细胞生长因子-2对兔眼的长期毒性作用 被引量:2
15
作者 胡浩 项琪 +2 位作者 曲红艳 贾旭 黄亚东 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期379-384,390,共7页
目的观察重组人角质细胞生长因子-2(recombination human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对兔眼的长期毒性。方法 32只新西兰白兔,随机分为对照组及高(2 000 mg·L-1)、中(500 mg·L-1)、低(125 mg·L-1)剂量组,每... 目的观察重组人角质细胞生长因子-2(recombination human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)对兔眼的长期毒性。方法 32只新西兰白兔,随机分为对照组及高(2 000 mg·L-1)、中(500 mg·L-1)、低(125 mg·L-1)剂量组,每组8只,连续滴眼给药重组人角质细胞生长因子-2,每天6次,每2 h给药1次,单眼给药0.1 m L,给药4周,停药后恢复2周。观察一般药物反应及眼部症状,检测动物血液学、血液生化学和组织病理学等指标。结果除了中高剂量组分别有7例和8例眼部有少量类似眼屎的黏性分泌物及高剂量组有3例出现睑结膜充血呈鲜红色外,其他动物眼部未见与给药相关的明显异常变化;体质量、进食量、体温、心电图、尿液、血液学、凝血、血液生化学、骨髓细胞、脏器质量、脏器系数和病理学检查均未见明显与给药相关的异常变化。结论本试验选用3个剂量分别为有效剂量浓度的5、20和80倍,并未对新西兰白兔产生明显毒性,说明该剂量对新西兰白兔眼部用药是安全的。 展开更多
关键词 重组人角质细胞生长因子-2 长期毒性 血液生化学 组织病理学
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角质细胞生长因子-2对急性肺损伤大鼠Nod样受体蛋白3的调节作用 被引量:2
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作者 邵腾皓 白吉佳 +1 位作者 马希刚 周文杰 《宁夏医科大学学报》 2019年第3期244-248,共5页
目的探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)对油酸致急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及对Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法以雄性SD大鼠为研究对象,分为对照组、ALI组、KGF-2预处理组,KGF-2预处理组通过气道滴入KGF-2,ALI组及对照组经气... 目的探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)对油酸致急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用及对Nod样受体蛋白3(NLRP3)表达的影响。方法以雄性SD大鼠为研究对象,分为对照组、ALI组、KGF-2预处理组,KGF-2预处理组通过气道滴入KGF-2,ALI组及对照组经气道滴入等量生理盐水(NS)。ALI组及KGF-2预处理组通过尾静脉注射油酸建立大鼠ALI的模型,以正常SD大鼠作为对照,尾静脉注射等量NS。术后通过病理检测肺湿干比及肺通透性指数检测肺组织变化;免疫组化技术、Western blot方法检测肺脏中NLRP3表达的变化。结果与对照组相比,ALI模型组肺组织损伤严重,出现明显的病理学改变,肺泡隔增厚,炎性细胞浸润;肺湿干比及肺通透性指数均较对照组升高(P均<0.01);免疫组化、Western blot检测发现ALI组大鼠肺组织NLRP3表达亦较对照组升高(P均<0.01)。给予KGF-2预处理后,大鼠肺组织损伤程度较ALI模型组明显减轻,肺泡隔增厚改善,炎性细胞浸润减少;肺湿干比及肺通透性指数均较ALI模型组降低(P均<0.05)。免疫组化、Western blot检测的肺NLRP3表达均较ALI组降低(P均<0.01)。结论 KGF-2对油酸致ALI大鼠具有保护作用,其机制可能与降低肺脏中NLRP3的表达有关。 展开更多
关键词 急性肺损伤 Nod样受体蛋白3 角质细胞生长因子-2
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角质细胞生长因子-2对右旋葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用 被引量:6
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作者 黄盈瑜 刘红春 +1 位作者 宋元林 冯娜娜 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,21,共9页
目的探究角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor 2,KGF-2)对右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用及其作用机制。方法 36只C57BL/c雄性小鼠随机分为正常对照组、DSS模型组... 目的探究角质细胞生长因子-2(keratinocyte growth factor 2,KGF-2)对右旋葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的小鼠结肠炎和肠道黏膜屏障的保护作用及其作用机制。方法 36只C57BL/c雄性小鼠随机分为正常对照组、DSS模型组、中剂量KGF-2(5mg/kg)组和高剂量KGF-2(10mg/kg)组。除正常对照组外小鼠饮用水中均添加3.5%DSS,KGF-2组同时腹腔注射相应剂量的KGF-2。检测小鼠体重、疾病活动指数(disease activity index,DAI)、结肠长度缩短、结肠组织病理评分评价KGF-2对结肠炎的保护作用,多功能酶标仪检测血清异硫氰酸荧光素葡聚糖(fluorescein isothiocyanate-dextran,FITC-D)肠道渗透率,免疫组化和Western blot检测结肠组织ZO-1和occludin蛋白的表达,ELISA分析结肠组织匀浆的TNF-α、IL-6、IL-10、TGF-1β、IFN-γ、IL-1β浓度,以探讨KGF-2对肠道屏障功能保护作用机制。结果与DSS模型组相比,高剂量KGF-2组结肠DAI显著下降(P=0.021 1),体重减轻明显改善(P=0.017 6),HE评分显著降低(12.17±1.222vs.7.000±0.632 5,P=0.001 1),FITC-D渗透率显著降低(168.5±27.01 vs.14.62±1.812,P=0.004 7),结肠较长(4.956±0.2583 vs.6.289±0.2157,P=0.001 1);ZO-1(0.158 6±0.010 51 vs.0.387 9±0.028 64,P<0.000 1)和occludin(0.300 5±0.026 56 vs.0.445 0±0.056 62,P=0.043 4)蛋白表达水平显著升高;肠道组织TNF-α表达显著降低(68.93±3.379 vs.40.41±1.576,P<0.000 1),而IL-10(304.0±21.47 vs.521.2±49.40,P=0.002 4)和IL-6(3755±309.8 vs.5 640±418.0,P=0.004 7)的表达显著升高,疗效呈剂量依赖性。结论 KGF-2能够减轻DSS导致的肠道黏膜损伤,修复肠道黏膜屏障。KGF-2对肠道黏膜屏障的保护作用可能与增加ZO-1和occludin等紧密连接蛋白的表达、抑制TNF-α及促进IL-6和IL-10分泌有关。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 炎症性肠病 黏膜屏障 紧密连接蛋白 细胞因子
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角质细胞生长因子-2在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制研究 被引量:5
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作者 樊宇 张轶博 《陕西医学杂志》 CAS 2021年第12期1482-1486,共5页
目的:探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制。方法:使用经鼻滴入金黄色葡萄球菌(2×10^(8) CFU/ml)构建肺部感染小鼠模型,以经鼻滴入等体积磷酸缓冲液作为对照组。滴入金黄色葡萄菌群1 h后,将... 目的:探讨角质细胞生长因子-2(KGF-2)在金黄色葡萄球菌所致肺部感染中的作用及机制。方法:使用经鼻滴入金黄色葡萄球菌(2×10^(8) CFU/ml)构建肺部感染小鼠模型,以经鼻滴入等体积磷酸缓冲液作为对照组。滴入金黄色葡萄菌群1 h后,将肺部感染小鼠分别经尾静脉注射KGF-2(2.5、5、10 mg/kg)。滴入金黄色葡萄球菌24 h后麻醉处死小鼠,HE染色观察肺组织病理情况;检测小鼠肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞和白细胞水平;采用酶联免疫法检测肺泡灌洗液炎性因子水平[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β]、氧化应激因子水平[髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和总抗氧化能力(T-AOC)]以及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平;使用半体内法检测各组小鼠肺泡巨噬细胞的吞噬功能。结果:对照组小鼠肺泡排列完整且无组织损伤,细菌组小鼠肺泡有炎性浸润和水肿,KGF-2不同剂量组小鼠肺组织炎性浸润和水肿情况得到明显改善。细菌组肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞、白细胞、TNF-α、IL-6、IL-1β、MPO、MDA、MIP-2水平高于对照组,而T-AOC水平、肺泡巨噬细胞吞噬百分比和吞噬指数低于对照组(均P<0.05)。KGF-2不同剂量组肺湿/干质量比和肺泡灌洗液中性粒细胞、白细胞、TNF-α、IL-6、IL-1β、MPO、MDA水平均低于细菌组,而T-AOC水平、肺泡巨噬细胞吞噬百分比和吞噬指数高于细菌组(均P<0.05)。结论:KGF-2可以改善金黄色葡萄球菌所致肺部感染损伤和肺炎症反应,其机制可能与影响肺泡巨噬细胞功能有关。 展开更多
关键词 肺部感染 金黄色葡萄球菌 角质细胞生长因子-2 肺损伤 巨噬细胞 炎症反应
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角质细胞生长因子-2(KGF-2)研究进展 被引量:4
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作者 杨志伟 《海峡药学》 2016年第7期7-10,共4页
角质细胞生长因子-2(KGF-2)能够特异性促进上皮细胞的增殖、分化和迁移,增强细胞合成的能力,因而在治疗皮肤损伤及溃疡、美容等方面有多重应用,为当前国际细胞因子药物开发的热点。本文对KGF-2的分子结构和性质、生物学功能、受体、表... 角质细胞生长因子-2(KGF-2)能够特异性促进上皮细胞的增殖、分化和迁移,增强细胞合成的能力,因而在治疗皮肤损伤及溃疡、美容等方面有多重应用,为当前国际细胞因子药物开发的热点。本文对KGF-2的分子结构和性质、生物学功能、受体、表达及纯化条件优化、稳定性等方面进行综述。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2(KeY-E) 生物学功能 表达 纯化 稳定性
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角质细胞生长因子-2与新生儿相关肺部疾病的研究进展
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作者 侯琳(综述) 舒桂华(审校) 《检验医学与临床》 CAS 2023年第9期1302-1306,共5页
角质细胞生长因子-2(KGF-2)是一类来源于间充质细胞的生长因子,具有多功能生物学作用,特别其作为一种肺组织保护因子,可调控肺泡上皮细胞增殖、分化及迁移,促进受损肺组织修复和抑制肺泡纤维化。KGF-2缺失或基因突变与新生儿相关肺部疾... 角质细胞生长因子-2(KGF-2)是一类来源于间充质细胞的生长因子,具有多功能生物学作用,特别其作为一种肺组织保护因子,可调控肺泡上皮细胞增殖、分化及迁移,促进受损肺组织修复和抑制肺泡纤维化。KGF-2缺失或基因突变与新生儿相关肺部疾病的发生、发展密切相关,且有增加儿童期甚至成年后发生慢性肺部疾病的风险。本文就KGF-2结构、生物学功能,以及其与新生儿相关肺部疾病的关系做一综述,旨在为开拓新生儿呼吸系统疾病新的诊治策略提供理论参考依据。 展开更多
关键词 角质细胞生长因子-2 新生儿 肺部疾病
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