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LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型的建立 被引量:4
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作者 田梦悦 刘宝京 +3 位作者 代飞 侯海婷 秦建华 马玉忠 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期90-94,共5页
为建立LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型,通过分离、培养奶牛蹄真皮细胞,用不同浓度的LPS处理蹄真皮细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测CYP3A4、CYP1A1mRNA的表达,Western blot法检测CYP450蛋白的表达,并通过EL... 为建立LPS致奶牛蹄真皮细胞炎症模型,通过分离、培养奶牛蹄真皮细胞,用不同浓度的LPS处理蹄真皮细胞,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测CYP3A4、CYP1A1mRNA的表达,Western blot法检测CYP450蛋白的表达,并通过ELISA法检测细胞上清液中TNF-ɑ、IL-1β的含量,来确定LPS是否对细胞造成损伤。结果表明,随着LPS浓度的升高,对蹄真皮细胞的损伤也随之升高,CYP450蛋白的表达呈升高的趋势,在10μg/mL时表达最明显,10μg/mL LPS处理48h,对CYP3A4、CYP1A1mRNA表达的抑制作用较明显,模型组TNF-ɑ和IL-1β的含量极显著高于对照组(P<0.01)。本试验表明,10μg/mL LPS作用48h可建立可靠的蹄真皮细胞炎症模型。 展开更多
关键词 LPS 奶牛 蹄真皮细胞 炎症模型
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奶牛蹄真皮细胞卡拉胶炎症模型的建立 被引量:1
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作者 侯海婷 王承玉 +1 位作者 秦建华 马玉忠 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期96-98,130,共4页
为了建立卡拉胶诱导的奶牛蹄真皮细胞炎症模型,以组织块培养法分离培养到的奶牛蹄真皮细胞为研究对象,用不同浓度的卡拉胶作用于奶牛蹄真皮细胞。采用MTT法检测卡拉胶作用后细胞的存活率,West-ern blot法检测NF-κB蛋白的表达,ELISA法... 为了建立卡拉胶诱导的奶牛蹄真皮细胞炎症模型,以组织块培养法分离培养到的奶牛蹄真皮细胞为研究对象,用不同浓度的卡拉胶作用于奶牛蹄真皮细胞。采用MTT法检测卡拉胶作用后细胞的存活率,West-ern blot法检测NF-κB蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中TNF-α的浓度。结果表明:随着卡拉胶浓度的升高,对细胞的抑制作用加强,200μg/mL的卡拉胶对细胞的抑制率最接近10%。200μg/mL卡拉胶作用蹄细胞48h,NF-κB的蛋白表达升高,且细胞上清液中TNF-α的含量显著高于对照组(P<0.05)。即200μg/mL卡拉胶作用48h,可成功建立奶牛蹄真皮细胞的炎症模型。 展开更多
关键词 卡拉胶 奶牛 蹄真皮细胞 炎症模型
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LPS诱导的奶牛蹄真皮细胞基因表达谱变化分析 被引量:1
3
作者 田梦悦 李可 +3 位作者 贾丽 梁艳艳 侯铭源 马玉忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期100-106,共7页
通过转录组学测序技术,分析LPS诱导的奶牛蹄真皮细胞基因表达谱变化,筛选差异基因并进行生物信息学分析,为从细胞和分子水平上研究奶牛蹄叶炎提供必要的依据。结果显示,10 mg/L LPS作用24 h是诱导细胞模型的最佳条件。转录组测序结果显... 通过转录组学测序技术,分析LPS诱导的奶牛蹄真皮细胞基因表达谱变化,筛选差异基因并进行生物信息学分析,为从细胞和分子水平上研究奶牛蹄叶炎提供必要的依据。结果显示,10 mg/L LPS作用24 h是诱导细胞模型的最佳条件。转录组测序结果显示,LPS作用前后,共有2194个基因的表达水平发生变化,其中上调基因1138个,下调基因1056个。经过GO功能富集分析和KEGG代谢通路富集分析,发现差异基因主要富集于TNF、PI3K-Akt和MAPK信号通路等与免疫反应、炎症反应相关的通路中,推测LPS主要通过激活蹄真皮细胞相关炎性通路,诱导炎症介质的产生,从而导致奶牛蹄真皮细胞炎性损伤。 展开更多
关键词 LPS 奶牛 蹄真皮细胞 转录组学
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甘草查尔酮A对LPS诱导的奶牛蹄真皮细胞炎性反应的抑制作用 被引量:1
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作者 田梦悦 贾丽 +3 位作者 梁艳艳 李可 侯铭源 马玉忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期344-348,共5页
采用10,50,100 mg/L甘草查尔酮A处理蹄真皮炎性细胞24 h后,测定细胞上清液中TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平及SOD、MDA含量,Western blot法检测ERK、JNK、p38、IκBα及p65蛋白表达水平。结果显示,甘草查尔酮A可显著降低TNF-ɑ、IL-1β、IL-... 采用10,50,100 mg/L甘草查尔酮A处理蹄真皮炎性细胞24 h后,测定细胞上清液中TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平及SOD、MDA含量,Western blot法检测ERK、JNK、p38、IκBα及p65蛋白表达水平。结果显示,甘草查尔酮A可显著降低TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平,提高SOD活性并降低MDA含量,抑制ERK、JNK、p38、IκBα及p65蛋白磷酸化程度。这表明甘草查尔酮A对于LPS诱导的奶牛蹄真皮细胞炎性反应具有一定的抑制作用,且其抗炎作用可能与MAPK及NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 甘草查尔酮A LPS 奶牛 蹄真皮细胞
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