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含抗凋亡基因bcl-2重组逆转录病毒重组体的构建及鉴定 被引量：1
1
作者 李素芳 魏锐利 金玲 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第4期781-782,共2页
目的:构建并鉴定含鼠bcl-2基因重组逆转录病毒。方法:将抗凋亡基因bcl-2片段从载体pcDNA3.1中切下,定向插入逆转录病毒载体PLNCX2中,酶切鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定表达bcl-2的细胞株。结果:双... 目的:构建并鉴定含鼠bcl-2基因重组逆转录病毒。方法:将抗凋亡基因bcl-2片段从载体pcDNA3.1中切下,定向插入逆转录病毒载体PLNCX2中,酶切鉴定;脂质体法将重组逆转录病毒转入包装细胞系PT67,G418筛选建立稳定表达bcl-2的细胞株。结果:双酶切鉴定,成功构建重组逆转录病毒载体;重组逆转录病毒转入包装细胞PT67,经G418筛选,形成了抗性克隆,并测得病毒滴度为3×1011cfu/L,提示构建的含鼠bcl-2基因重组逆转录病毒载体及稳定的包装细胞系成功。结论:含抗凋亡基因bcl-2重组逆转录病毒载体构建成功。 展开更多
关键词 抗凋亡基因BCL-2 逆转录病毒重组体 酶切鉴定 基因重组逆转录病毒 重组逆转录病毒载体 PCDNA3.1 包装细胞系 bcl-2基因 脂质体法 稳定表达
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hR24L基因的克隆及逆转录病毒重组体的构建
2
作者 李平法 张文 朱应葆 《新乡医学院学报》 CAS 2002年第5期350-351,354,共3页
目的　克隆人类DNA损伤修复基因hR2 4L ,并构建逆转录病毒表达载体重组体 ,为进一步研究该基因的功能及作用机制奠定基础。方法　用PCR法扩增hR2 4L基因的开放阅读框 (ORF) ,然后连接到 pEGM -T载体中 ,经测序验证无突变后 ,再重组到逆... 目的　克隆人类DNA损伤修复基因hR2 4L ,并构建逆转录病毒表达载体重组体 ,为进一步研究该基因的功能及作用机制奠定基础。方法　用PCR法扩增hR2 4L基因的开放阅读框 (ORF) ,然后连接到 pEGM -T载体中 ,经测序验证无突变后 ,再重组到逆转录病毒表达载体 (pDor -neo)中 ,得到正义和反义重组体。 结果　建立了一种有效的基因克隆方法 ,成功地克隆了hR2 4L基因 ,获得了含有重组体的稳定遗传的细胞株。结论　PCR法是克隆hR2 4L基因的有效方法 。 展开更多
关键词 逆转录病毒重组体 DNA修复 基因克隆 hR24L基因
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人TIMP-2基因逆转录病毒重组体的构建及表达
3
作者 李楠 徐采朴 刘为纹 《天津医药》 CAS 2000年第8期480-482,共3页
目的:构建含人TIMP-2基因可调控逆转录病毒重组体。方法:通过四步亚克隆将编码人组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的基因片段从表达载体Blueseript中切下,定向插入经改良的逆转录病毒载体pL-MT上,以限制性内切酶鉴定插入方向是否正确。结... 目的:构建含人TIMP-2基因可调控逆转录病毒重组体。方法:通过四步亚克隆将编码人组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的基因片段从表达载体Blueseript中切下,定向插入经改良的逆转录病毒载体pL-MT上,以限制性内切酶鉴定插入方向是否正确。结果:限制性内切酶谱分析与理论计算相等。结论:含人组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-2基因可调控逆转录病毒重组体构建成功,为体外胶原代谢的基因调控研究提供了新的途径。 展开更多
关键词 TIMP-2基因 逆转录病毒重组体 构建 表达 肿瘤
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