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钙调神经磷酸酶Aβ小干扰RNA筛选及对心肌细胞肥大的抑制
1
作者 齐迎春 谢晓华 +1 位作者 陈雯 李朝晖 《中华保健医学杂志》 2012年第2期94-97,共4页
目的在细胞水平上筛选钙调神经磷酸酶(CaN)Aβ基因(mRNA)的小干扰RNA(siRNA)的干扰序列,为研究抑制在体心肌肥大的方法提供理论基础。方法针对CaNAβmRNA,参照siRNA设计原则,应用软件设计候选干扰序列,构建相应的小发夹RNA表达载体(si10... 目的在细胞水平上筛选钙调神经磷酸酶(CaN)Aβ基因(mRNA)的小干扰RNA(siRNA)的干扰序列,为研究抑制在体心肌肥大的方法提供理论基础。方法针对CaNAβmRNA,参照siRNA设计原则,应用软件设计候选干扰序列,构建相应的小发夹RNA表达载体(si1053,si1280,si1539)。培养乳鼠心肌细胞,分为6组:空白对照组,肥大模型组(醛固酮诱导),肥大+si1280组,肥大+si1539组,肥大+si1053组,肥大+siGFP阴性对照组(转染针对GFP特定序列的shRNA质粒)。48h后显微镜下测量心肌细胞直径、CaNAβ及心房利钠因子(ANF)、β-重链肌球蛋白(β-MHC)mRNA水平。结果肥大模型组心肌细胞直径以及心肌组织CaNAβ、ANF、β-MHCmRNA表达水平较空白对照组明显增加(P<0.05)。肥大+si1053、肥大+si1280、肥大+si1539组细胞直径以及CaNAβ、ANFmRNA水平均较肥大模型组及肥大+siGFP阴性对照组降低(P<0.05),3组之间的CaNAβmRNA水平无明显差异(P>0.05),其中肥大+si1280组的细胞直径、ANF及β-MHCmRNA水平较肥大+si1053组、肥大+si1539组有明显减低(P<0.05)。结论成功构建CaNAβmRNA的小发夹RNA表达质粒,siRNA抑制CaNAβmRNA的表达,可抑制细胞水平醛固酮诱导的心肌细胞肥大;其中1280(21bp)为RNA干扰的相对更有效片段。 展开更多
关键词 RNA干扰 钙调神经磷酸酶aβ 转染 心肌细胞
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钙调神经磷酸酶Aβ在缺氧性右心室心肌肥厚中的表达及作用 被引量：5
2
作者 王优 刘郴州 +2 位作者 黄宇戈 黄秀兰 谭建新 《心脏杂志》 CAS 2004年第6期509-512,共4页
目的 :探讨钙调神经磷酸酶Aβ(CalcineurinAbeta ,CnAβ)在大鼠慢性缺氧所致右心室心肌肥厚中的作用及抑制CnAβ活性对心肌肥厚的影响。方法 :SD大鼠 18只 ,采用随机分组设计 ,分为缺氧组、环孢菌素A(CsA)处理组及正常对照组。缺氧组、... 目的 :探讨钙调神经磷酸酶Aβ(CalcineurinAbeta ,CnAβ)在大鼠慢性缺氧所致右心室心肌肥厚中的作用及抑制CnAβ活性对心肌肥厚的影响。方法 :SD大鼠 18只 ,采用随机分组设计 ,分为缺氧组、环孢菌素A(CsA)处理组及正常对照组。缺氧组、CsA处理组大鼠均置于缺氧仓内连续缺氧 14d ,缺氧第 1天始分别用CsA和生理盐水腹腔注射 ,每天 1次 ,共 14d ,同时与正常组作比较 ,观察缺氧及CsA对大鼠心肌肥厚程度的影响 ,用RT PCR半定量方法分析CnAβmRNA、ANPmRNA、β MHCmRNA、MLC 2mRNA表达的变化。结果 :①缺氧组大鼠右室与左室加室间隔的质量比 [R/(L +S) ]、右室质量 /体质量 (R/BW )高于正常组大鼠 (P <0 .0 1) ,CsA处理后R/(L +S)和R/BW值均低于缺氧组 (P <0 .0 1) ,与正常组大鼠比较差异无显著性意义 ;②缺氧组大鼠CnAβmRNA、ANPmR NA、β MHCmRNA、MLC 2mRNA表达均高于正常组大鼠 (P <0 .0 1) ,CsA处理后CnAβmRNA、ANPmRNA、β MHCmRNA、MLC 2mRNA表达水平均明显低于缺氧组 (P <0 .0 1) ,与正常组比较差异均无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :CnAβ参与慢性缺氧性大鼠右心室心肌肥厚 ,抑制CnAβ活性可预防其心肌肥厚 ,本研究为利用CnAβ受体抑制剂治疗心肌肥厚提供了实验依据。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 缺氧 心肌肥厚 右心室 环孢菌素A
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应用siRNA抑制由醛固酮诱导的大鼠肥大心肌细胞中钙调神经磷酸酶AβmRNA的表达
3
作者 刘莉 谢晓华 常连庆 《心脏杂志》 CAS 2005年第4期313-316,共4页
目的:本研究通过应用RNA干扰的方法,观察了钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(A ld)诱导的大鼠心肌细胞肥大时其AβmRNA表达水平。方法:在A ld诱导心肌细胞肥大模型上同时转染CaN AβmRNA靶标siRNA及其阴性对照进行转染。通过免疫荧光染色及R... 目的:本研究通过应用RNA干扰的方法,观察了钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(A ld)诱导的大鼠心肌细胞肥大时其AβmRNA表达水平。方法:在A ld诱导心肌细胞肥大模型上同时转染CaN AβmRNA靶标siRNA及其阴性对照进行转染。通过免疫荧光染色及RT-PCR方法检测CaN Aβ蛋白及mRNA的表达,同时测定心肌细胞面积变化。结果:A ld组CaN AβmRNA表达较对照组显著升高,细胞表面积显著增加;CaN AβmRNA靶标siRNA组细胞浆中绿色荧光表达比siRNA阴性对照组少,即CaN蛋白表达量siRNA组较siRNA阴性对照组减少,RT-PCR检测结果显示siRNA组CaN AβmRNA表达较siRNA阴性对照组受到明显抑制,细胞面积siRNA阴性对照组较siR-NA组增加。结论:siRNA可抑制钙调神经磷酸酶AβmRNA的表达,对于心肌细胞中基因功能的研究,RNA干涉可以作为应用工具。 展开更多
关键词 心肌细胞 钙调神经磷酸酶 SIRNA RNAI 醛固酮
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钙调神经磷酸酶Aβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流和动作电位的变化 被引量：1
4
作者 扶泽南 杨龙 +3 位作者 夏桂玲 何炯红 黄勇淇 田野 《山东医药》 CAS 2018年第43期31-34,共4页
目的观察钙调神经磷酸酶Aβ亚基(Cn Aβ)基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流(Ik1)和动作电位的变化。方法 1天龄SD乳鼠,分离心室肌细胞,培养48 h后换为无血清培养基,将细胞分为A、B、C、D组。A组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染... 目的观察钙调神经磷酸酶Aβ亚基(Cn Aβ)基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞内向整流钾电流(Ik1)和动作电位的变化。方法 1天龄SD乳鼠,分离心室肌细胞,培养48 h后换为无血清培养基,将细胞分为A、B、C、D组。A组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h时更换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h。B组加入MOI=50的腺病毒空载体,感染6 h换为2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h。C组加入MOI=50的A1,感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,感染24 h时加入终浓度为100μmol/L的PE,培养48 h。D组加入MOI=50的重组腺病毒sh RNA干扰载体介导沉默编码Cn Aβ的基因(AdCn Aβsh RNA1,A1),感染6 h时换成2倍体积新鲜无血清DMEM,培养48 h。采用Western blotting法检测各组心室肌细胞Cn Aβ蛋白,采用全细胞膜片钳实验检测Ik1,观察并记录动作电位复极20%、50%和90%(APD20、APD50、APD90)时的动作电位。结果 A、B、C、D组心室肌细胞Cn Aβ蛋白相对表达量分别为1. 0±0. 01、2. 59±0. 30、1. 00±0. 16、0. 82±0. 16; B组与A组比较,P <0. 05; C组与B组比较,P <0. 05。与A组比较,B组-140 m V～-90m V时心室肌细胞Ik1电流密度降低(P均<0. 05);与B组比较,C组心室肌细胞Ik1电流密度升高(P均<0. 05)。与A组比较,B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均延长(P均<0. 05);与B组比较,C组B组心室肌细胞APD20、APD50、APD90均缩短(P均<0. 05)。结论 Cn Aβ基因沉默的乳鼠肥大心室肌细胞Ik1电流密度升高,心室肌细胞APD20、APD50、APD90均降低。Cn Aβ可能通过调节Ik1电流密度减小、APD延长参与心室肥大的发生发展。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 心肌动作电位 内向整流钾电流 心室肥大
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血清钙调神经磷酸酶对急性心肌梗死病人PCI术后支架内再狭窄的预测价值
5
作者 赵永 刘明 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第1期100-104,共5页
目的:探讨血清钙调神经磷酸酶(CaN)对急性心肌梗死(AMI)病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法:选取2020年9月—2022年3月济宁市第一人民医院收治的130例AMI病人作为研究对象,所有病人均行直接PCI术,出... 目的:探讨血清钙调神经磷酸酶(CaN)对急性心肌梗死(AMI)病人经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄(ISR)的预测价值。方法:选取2020年9月—2022年3月济宁市第一人民医院收治的130例AMI病人作为研究对象,所有病人均行直接PCI术,出院后随访1年,根据随访期间ISR发生情况分为ISR组及非ISR组;比较两组一般资料、出院时血清CaN水平及其他实验室指标;采用多因素Logistic回归分析AMI病人PCI术后ISR的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析出院时血清CaN水平对AMI病人PCI术后ISR的预测价值。结果:130例AMI病人PCI术后随访1年,其中25例出现ISR,发生率为19.23%;ISR组体质指数高于非ISR组,主支架直径小于非ISR组,出院时血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、C反应蛋白(CRP)、CaN水平高于非ISR组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,主支架直径、出院时血清CRP、CaN水平是AMI病人PCI术后发生ISR的影响因素(P<0.05);ROC曲线显示,出院时血清CaN水平预测AMI病人PCI术后发生ISR的曲线下面积为0.709,具有一定预测价值。结论:血清CaN水平升高是AMI病人PCI术后发生ISR的独立危险因素,可用于早期预测AMI病人PCI术后ISR的发生风险。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 经皮冠状动脉介入治疗 支架内再狭窄 钙调神经磷酸酶
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克立硼罗软膏与外用钙调神经磷酸酶抑制剂治疗轻中度特应性皮炎疗效和安全性比较网状Meta分析
6
作者 沈伟杰 林克胜 吴黎明 《浙江中西医结合杂志》 2025年第2期165-170,共6页
特应性皮炎(atopic dermati tis,AD)是一种常见的慢性、复发性、伴剧烈瘙痒的炎症性皮肤病,因此AD的治疗旨在改善症状并建立对疾病的长期控制[1]。外用非甾体类药通常用于AD患者的长期巩固及主动维持治疗。目前在中国获批用于治疗轻中... 特应性皮炎(atopic dermati tis,AD)是一种常见的慢性、复发性、伴剧烈瘙痒的炎症性皮肤病,因此AD的治疗旨在改善症状并建立对疾病的长期控制[1]。外用非甾体类药通常用于AD患者的长期巩固及主动维持治疗。目前在中国获批用于治疗轻中度AD的外用非甾体类药物仅有新型的克立硼罗软膏及传统的外用钙调神经磷酸酶抑制剂(topical calcineurin inhibitors,TCI)。 展开更多
关键词 特应性皮炎 克立硼罗软膏 外用钙调神经磷酸酶抑制剂 META分析
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新型钙调神经磷酸酶抑制药伏环孢素临床研究进展
7
作者 邓伟萍 胡长平 罗平 《中南药学》 CAS 2024年第7期1831-1837,共7页
伏环孢素是一种口服新型钙调神经磷酸酶抑制药,是环孢素A的衍生物,主要用于治疗自身免疫性疾病,如银屑病、非感染性葡萄膜炎和器官移植后排斥反应。2021年1月,基于两个Ⅱ期和Ⅲ期临床试验的积极结果,FDA批准伏环孢素与标准治疗方案联合... 伏环孢素是一种口服新型钙调神经磷酸酶抑制药,是环孢素A的衍生物,主要用于治疗自身免疫性疾病,如银屑病、非感染性葡萄膜炎和器官移植后排斥反应。2021年1月,基于两个Ⅱ期和Ⅲ期临床试验的积极结果,FDA批准伏环孢素与标准治疗方案联合用于治疗成人活动性狼疮肾炎。目前,也有研究在探索伏环孢素用于新型冠状病毒感染的肾移植患者。本文对伏环孢素的作用机制、药动学和药效学、用法用量、联合用药和疾病中应用进行归纳总结,为其临床用药提供参考。 展开更多
关键词 伏环孢素 狼疮肾炎 钙调神经磷酸酶抑制药 新型冠状病毒感染
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钙调神经磷酸酶依赖的信号通路参与血管紧张素Ⅱ刺激的心肌细胞肥大 被引量：21
8
作者 符民桂 王晓红 +3 位作者 姜志胜 庞永政 刘乃奎 唐朝枢 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期597-601,共5页
本研究观察了钙调神经磷酸酶（CaN）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠心肌细胞肥大中的作用。在AngⅡ刺激的大鼠心肌细胞肥大模型上，应用环孢素A（CsA）阻断CaN通路，观察心肌细胞3H-亮氨酸掺入、CaN、MAPK及PKC活性... 本研究观察了钙调神经磷酸酶（CaN）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠心肌细胞肥大中的作用。在AngⅡ刺激的大鼠心肌细胞肥大模型上，应用环孢素A（CsA）阻断CaN通路，观察心肌细胞3H-亮氨酸掺入、CaN、MAPK及PKC活性的变化。结果表明，AngⅡ（10－7mol/L）刺激大鼠心肌细胞3H-亮氨酸掺入校对照组增高46％（P＜0．01），CsA（0．5－5μg/ml）可以浓度依赖性方式抑制AngⅡ刺激的心肌细胞3H-亮氨酸掺入；同时观察到AngⅡ刺激的大鼠心肌细胞CaN及PKC活性分别较对照组增高39％和280％（P＜0．001），CsA可明显抑制AngⅡ刺激的心肌细胞CaN活性增加，但对PKC活性没有明显影响。实验还观察到MAPK特异性抑制剂PD098059亦可显著抑制AngⅡ刺激的心肌细胞3H-亮氨酸掺入。结果提示，CaN依赖的信号通路可能在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大中起重要作用。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 血管紧张素Ⅱ 心肌肥大
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钙调神经磷酸酶在大鼠不同组织中的分布及活性 被引量：9
9
作者 符民桂 陈亚红 +2 位作者 刘秀华 庞永政 唐朝枢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期889-891,I002,共4页
目的 :观察钙调神经磷酸酶 (CaN)在大鼠不同器官组织中的活性和蛋白分布。方法 :取正常大鼠不同器官组织 ,应用Westernblot及免疫组织化学方法测定CaN催化亚单位α亚型 (CnAα)在各组织中的蛋白含量及分布 ,并用 [32 P]标记的底物肽测... 目的 :观察钙调神经磷酸酶 (CaN)在大鼠不同器官组织中的活性和蛋白分布。方法 :取正常大鼠不同器官组织 ,应用Westernblot及免疫组织化学方法测定CaN催化亚单位α亚型 (CnAα)在各组织中的蛋白含量及分布 ,并用 [32 P]标记的底物肽测定各组织的CaN活性。结果 :①Westernblot结果显示 ,CnAα在大鼠脑组织中有丰富表达 ,心脏、骨骼肌和肺中亦有表达 ,但肾脏及主动脉未检测出有CnAα表达。②免疫组织化学显示 ,大鼠脑组织、心肌细胞胞浆内、肺内巨噬细胞及细支气管周围的结缔组织、主动脉外膜、肾小血管周围结缔组织及肾远曲小管及集合管的外壁中存在免疫反应阳性产物。③CaN活性在脑组织最高 ,其次为骨骼肌、心肌和肺组织 ,主动脉和肾脏最低。结论 :钙调神经磷酸酶在体内具有广泛分布 。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 蛋白印迹法 免疫组织化学 脑 心脏 肺 肾 血管 骨骼
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钙调神经磷酸酶信号通路在AngⅡ刺激的大鼠VSMCs增殖中的作用 被引量：14
10
作者 李映红 魏劲波 +3 位作者 欧阳静萍 李柯 王保华 武军驻 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2002年第4期326-329,351,共4页
目的:探讨钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）刺激的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖中的作用。方法:采用组织贴块法,体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞;Ang Ⅱ刺激培养的大鼠 VSMCs增殖;CaN... 目的:探讨钙调神经磷酸酶（calcineurin,CaN）依赖的信号通路在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）刺激的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖中的作用。方法:采用组织贴块法,体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞;Ang Ⅱ刺激培养的大鼠 VSMCs增殖;CaN特异性抑制剂环孢素 A（CsA）阻断Ang Ⅱ刺激的大鼠VSMCs中CaN依赖的信号转导通路;观察各因素对CaN活性、细胞增殖活度、增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平的影响。结果:在一定范围内,Ang Ⅱ（10-8～10-6mol/L）以浓度依赖性方式增加VSMCs的CaN活性,同时细胞增殖活度（AMTT值）增高,与对照组相比,差异有统计学意义（P<0.01或P<0.001）。CsA（1 μmol/L）抑制CaN活性后,明显降低Ang Ⅱ（10-7mol/L）刺激的VSMCs增殖活度及核内PCNA的表达水平（OD值）,与Ang Ⅱ组比较,差异显著（P<0.001）。结论:CaN依赖的信号通路在Ang Ⅱ刺激的血管平滑肌细胞增殖中发挥重要作用。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 血管平滑肌细胞 增殖 血管紧张素Ⅱ
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钙调神经磷酸酶在耐力运动大鼠骨骼肌纤维类型和大小转变中的作用 被引量：16
11
作者 廖八根 徐勇 薛耀明 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期551-555,613,共6页
目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在耐力运动时骨骼肌纤维类型和大小转变中的作用。方法:雄性SD大鼠(150~200g)随机分成对照组和运动组。运动组大鼠进行6周无坡度跑台训练(20m/min^28m/min),并在第3周末进一步随机分成2组:运动+环孢素组,... 目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在耐力运动时骨骼肌纤维类型和大小转变中的作用。方法:雄性SD大鼠(150~200g)随机分成对照组和运动组。运动组大鼠进行6周无坡度跑台训练(20m/min^28m/min),并在第3周末进一步随机分成2组:运动+环孢素组,皮下注射环孢素(CSA,15mg/kg体重/day)3周;单纯运动组,注射等量生理盐水。各组大鼠第6周末取比目鱼肌和趾长伸肌,分别用SDS-PAGE电泳法和肌纤维ATP酶染色法测定肌球蛋白重链(MHC)组成比例和肌纤维横断面积,同时用比色法测CaN活性,并用Westernblotting法测CaN和活化T细胞核因子2(NFAT2)蛋白含量。结果:单纯运动组大鼠比目鱼肌MHCⅠ比例(93.4±6.0%)显著高于对照组(82.7±6.6%),而运动+环孢素组大鼠MHCⅠ比例(79.3±8.4%)无增加,但其Ⅰ型肌纤维横断面积显著小于对照组和单纯运动组(P<0.05)。单纯运动组大鼠趾长伸肌胞浆CaN活性及胞核NFAT2蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),但纤维比例无显著改变(P>0.05);运动+环孢素组大鼠趾长伸肌肌原纤维蛋白浓度显著高于单纯运动组(P<0.05),且该组各型肌纤维横断面积均显著小于对照组和单纯运动组(P<0.05)。结论:CaN参与了耐力运动骨骼肌纤维类型和大小的调控,且具有肌肉特异性。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 环孢素 骨骼肌 耐力运动
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钙调神经磷酸酶信号通路参与前列腺素F_(2α)诱导的心肌肥厚(英文) 被引量：8
12
作者 蒋青松 黄燮南 +4 位作者 杨贵忠 戴支凯 周岐新 石京山 吴芹 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期742-748,共7页
利用野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠右心室肥厚模型和培养乳鼠心肌细胞,研究前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)在心肌肥厚中的作用及钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路在其中的作用。在雄性Sprague-Dawley大鼠中,用... 利用野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠右心室肥厚模型和培养乳鼠心肌细胞,研究前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)在心肌肥厚中的作用及钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路在其中的作用。在雄性Sprague-Dawley大鼠中,用MCT(60 mg／kg)单次i．p．诱导右心室肥厚,同时用塞来昔布(20 mg／kg)预防／治疗给药2周。用病理检测、电镜观察等方法观察心肌肥厚时组织病理改变;EIA试剂盒检测心肌组织PGF2α含量;RT-PCR检测心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide, ANP)和CaN mRNA的表达;用蛋白免疫印迹法检测CaN及其下游因子NFAT3和GATA4蛋白质的表达。以心肌细胞直径、蛋白含量和ANP mRNA表达的变化为0．1μmol／L PGF2α诱导心肌细胞肥大的指标。以CaN mRNA表达作为该信号通路的主要指标,并观察CaN抑制剂环孢素A对PGF2α所致心肌细胞肥大和CaN mRNA表达的影响。结果显示:MCT注射2周(M2W 组),右心室肥厚指数(RVHI)、右心室／体重比及肺重／体重比分别增加了47％、53％和118％;注射后4周(M4W组)增加了 64％、94％及156％。电镜观察发现右心室组织损伤。同时,右心室组织PGF2α含量在M2W和M4W组分别增加了44％和 51％,与RVHI、ANP和CaN的mRNA表达,及CaN／NFAT3／GATA4的蛋白质表达均呈正相关。环氧酶抑制剂塞来昔布预防和治疗给药均明显改善MCT诱导的组织病理学改变。在离体细胞培养中,PGF2α(0．1μmol／L)明显使心肌细胞增大,蛋白质含量增加,ANP和CaN mRNA表达增强;同时,CaN抑制剂环孢素A明显抑制PGF2α诱导的心肌细胞肥大和CaN mRNA 表达。上述结果提示:心肌组织局部PGF2α参与了MCT诱导的心肌肥厚过程,CaN信号通路是其细胞内信号转导通路之一。 展开更多
关键词 前列腺素F2Α 心肌肥厚 钙调神经磷酸酶 野百合碱
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钙调神经磷酸酶在L-精氨酸抗心肌肥厚中的作用 被引量：9
13
作者 蒋青松 黄燮南 周岐新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1218-1223,共6页
目的研究L-精氨酸抗右心室心肌肥厚作用及其与钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路的关系。方法利用野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠右心室心肌肥厚模型和前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)诱导心肌细胞肥大模型,分别... 目的研究L-精氨酸抗右心室心肌肥厚作用及其与钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路的关系。方法利用野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导大鼠右心室心肌肥厚模型和前列腺素F2α(prostaglandin F2α,PGF2α)诱导心肌细胞肥大模型,分别以右心室肥厚指数(right ventricle hypertro-phy index,RVHI,即右心室/左心室+室间隔)、心肌细胞直径、蛋白含量和心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)mRNA表达为心肌肥厚指标。用RT-PCR法检测mRNA的表达;Western blot法检测蛋白表达;荧光法检测细胞内钙[Ca2+]i的变化情况。结果L-精氨酸200mg.kg-1.d-1预防和治疗给药均明显抑制MCT诱导的大鼠心肌肥厚,降低MCT所致心肌CaN mRNA和蛋白及其下游因子NFAT3及GATA4蛋白表达的增加。L-精氨酸1mmol.L-1也明显抑制PGF2α100nmol.L-1诱导的大鼠心肌细胞肥大和[Ca2+]i升高,阻遏其诱导的CaN mRNA及CaN-,NFAT3-,GATA4-蛋白表达升高。在体和离体实验中一氧化氮合成酶抑制剂NG-硝基-L-精氨酸-甲酯均可完全阻断L-精氨酸的作用。结论L-精氨酸可能通过降低[Ca2+]i,从而抑制CaN信号转导通路而产生抗右心室心肌肥厚作用。 展开更多
关键词 野百合碱 心肌肥厚 L-精氨酸 前列腺素F_(2α) 钙调神经磷酸酶
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钙调神经磷酸酶介导碱性成纤维细胞生长因子诱导的大鼠心肌细胞肥大 被引量：8
14
作者 符民桂 许松 +2 位作者 庞永正 刘乃奎 唐朝枢 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期38-41,共4页
目的 :观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :在原代培养的大鼠心肌细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测心肌细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对... 目的 :观察钙调神经磷酸酶 (calcineurin ,CaN)在碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)诱导心肌细胞肥大中的作用。方法 :在原代培养的大鼠心肌细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测心肌细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对硝基苯磷酸 (p nitrophenylphosphate,PNPP)作底物测定CaN活性 ;根据3H 亮氨酸参入水平评估各种信号通路阻断剂对bFGF刺激的心肌细胞蛋白质合成速率的影响。结果 :bFGF刺激心肌细胞 2 4h后 ,胞内游离Ca2 +浓度较对照组增高 2 72 % (P <0 .0 1) ;同时 ,bFGF刺激的心肌细胞CaN活性较对照组增高 173 %(P <0 .0 1)。bFGF( 6 0 μg·L-1)刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入较对照组增高 10 6 % (P <0 .0 1) ;CsA( 0 .1～ 10 μmol·L-1)可以浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。此外H7(PKC抑制剂 )和 5 0 μmol·L-1PD980 59(MAPK抑制剂 )亦可完全阻断bFGF刺激的心肌细胞3H 亮氨酸参入。结论 :Ca2 +/CaN信号通路参与bFGF诱导心肌细胞肥大的信息传递。另外 。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 心肌细胞肥大 信号传递 钙调神经磷酸酶
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大鼠局灶脑缺血后钙调神经磷酸酶活性和含量变化 被引量：7
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作者 汤颖 苏志强 +3 位作者 赵艳 王德生 潘欣荣 曹绪正 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期44-46,共3页
目的　研究大脑中动脉闭塞后钙调神经磷酸酶 (Calcineurin,Ca N)的活性和含量变化规律 ,探讨Ca N在脑缺血中的作用。方法　制备大鼠大脑中动脉永久性闭塞模型 ,分别测定缺血后不同时间点病灶侧大脑皮质和海马 CA1 区 Ca N的活性和含量... 目的　研究大脑中动脉闭塞后钙调神经磷酸酶 (Calcineurin,Ca N)的活性和含量变化规律 ,探讨Ca N在脑缺血中的作用。方法　制备大鼠大脑中动脉永久性闭塞模型 ,分别测定缺血后不同时间点病灶侧大脑皮质和海马 CA1 区 Ca N的活性和含量。结果　皮质组织在缺血 6h及其后各时间点 Ca N的含量下降 ,其活性于缺血后 4h、6h和 12 h短暂性增强。海马 CA1 区 Ca N的含量于缺血后 2 4h开始降低且不恢复 ;Ca N的活性在缺血后 2 h、4h和 6h减弱 ,12 h始恢复至正常水平。可见 ,Ca N的活性与含量分离。结论　局灶脑缺血后 Ca N独特的时间变化规律显示其参与介导缺血性神经元损伤 。 展开更多
关键词 大鼠 局灶脑缺血 钙调神经磷酸酶 活性 含量
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钙调神经磷酸酶在血管紧张素Ⅱ刺激的心脏成纤维细胞增殖中的作用 被引量：10
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作者 许松 符民桂 +2 位作者 许玉凤 庞永政 唐朝枢 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期305-307,共3页
本研究观察了钙调神经磷酸酶 (CaN)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的大鼠心脏成纤维细胞增殖中的作用。在培养的大鼠心脏成纤维细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测Fura 2标记的细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对硝基苯磷酸 (PNPP)作底物测定钙调... 本研究观察了钙调神经磷酸酶 (CaN)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激的大鼠心脏成纤维细胞增殖中的作用。在培养的大鼠心脏成纤维细胞上 ,应用双波长荧光光度计检测Fura 2标记的细胞游离Ca2 +浓度 ;应用对硝基苯磷酸 (PNPP)作底物测定钙调神经磷酸酶 (CaN)活性 ;根据 3H 胸腺嘧啶掺入法评估CaN特异性抑制剂环胞素A(CsA)对AngⅡ刺激的心脏成纤维细胞DNA合成的影响。结果表明 ,AngⅡ (10 -7mol/L)刺激培养的大鼠心脏成纤维细胞 3H 胸腺嘧啶掺入较对照组增高 72 % (P <0 0 1) ,CsA可以抑制AngⅡ刺激的细胞 3H 胸腺嘧啶掺入。AngⅡ刺激的大鼠心脏成纤维细胞胞内Ca2 +浓度及CaN活性较对照组分别增高 112 % (P <0 0 1)和 17% (P <0 0 5 )。结果提示 ,CaN在一定程度上参与AngⅡ诱导的心脏成纤维细胞增殖的信号传递。 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 血管紧张素Ⅱ 成纤维细胞增殖
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日本血吸虫钙调神经磷酸酶B基因的获得和分析 被引量：4
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作者 张愉快 肖建华 +5 位作者 王可耕 刘传爱 曾桥 万志刚 杨胜 杨秋林 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期410-412,共3页
目的　从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中获得并分析日本血吸虫新的蛋白基因 ,为日本血吸虫病的防治提供侯选疫苗和药物靶点。方法　构建日本血吸虫成虫cDNA文库 ,挑取重组阳性克隆进行测序 ,对部分序列进行步移... 目的　从日本血吸虫 (Schistosomajaponicum ,Sj)成虫cDNA文库中获得并分析日本血吸虫新的蛋白基因 ,为日本血吸虫病的防治提供侯选疫苗和药物靶点。方法　构建日本血吸虫成虫cDNA文库 ,挑取重组阳性克隆进行测序 ,对部分序列进行步移法测序获取全长cDNA ,并进行生物信息学分析和登录。结果　获得了 1个日本血吸虫新基因 -钙调神经磷酸酶 (Calcineurin ,CaN)基因B(AY2 2 0 75 1) ,长 12 6 6bp ,编码 16 9个氨基酸 ,含有 2个“EF -hand”Ca+2 结合区域 ,与曼氏血吸虫CalcineurinB有 84 %的同源性。 展开更多
关键词 日本血吸虫 CDNA文库 步移法 生物信息学 钙调神经磷酸酶B 基因
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替米沙坦对大鼠动脉血清钙调神经磷酸酶的影响 被引量：4
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作者 叶家欣 卢新政 +5 位作者 杨晓慧 宗文纳 王俊宏 雍永宏 曹克将 黄峻 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期312-316,共5页
目的研究替米沙坦对动脉血清钙调神经磷酸酶(CaN)影响。方法92只同龄SD大鼠随机分为对照组(N)、假手术组(S)、2K1C+蒸馏水组(K)、2K1C+替米沙坦组(T)。N组不加任何干预,S组分离左肾动脉不缩窄,K组和T组缩窄左肾动脉,建立肾血管性高血压... 目的研究替米沙坦对动脉血清钙调神经磷酸酶(CaN)影响。方法92只同龄SD大鼠随机分为对照组(N)、假手术组(S)、2K1C+蒸馏水组(K)、2K1C+替米沙坦组(T)。N组不加任何干预,S组分离左肾动脉不缩窄,K组和T组缩窄左肾动脉,建立肾血管性高血压模型。术后第3周始,T组灌胃给替米沙坦10mg.(kg.d)-1,K组灌胃给蒸馏水10mg.(kg.d)-1。在术后第4、6、10周末,超声心动图观察心脏结构及功能,每组至少取6只开腹,经腹主动脉插管测血压,收集腹主动脉血后处死,分离血清,酶联免疫吸附技术(ELISA)检测CaN水平,比色法测CaN活性。结果①与N组、S组比较,K组血压(收缩压、舒张压)明显升高(P<0.01),经替米沙坦治疗后,血压明显降低(P<0.01);②K组舒张末期室间隔厚度、收缩末期室间隔厚度、舒张末期左室后壁厚度、收缩末期左室后壁厚度明显增加(P均<0.01),替米沙坦治疗后,左室壁厚度均明显下降(P均<0.01);③K组动脉血清CaN水平明显升高(P<0.01),替米沙坦治疗后,动脉血清CaN水平明显降低(P<0.01)。结论外周动脉血CaN水平在左室肥厚中也发生改变;替米沙坦抑制左心室重构作用,其机制可能与其降低循环中CaN水平有关。 展开更多
关键词 替米沙坦 钙调神经磷酸酶 血清 左室重构 高血压 双肾一夹模型 大鼠
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钙调神经磷酸酶调节因子RCANs的研究进展 被引量：10
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作者 涂玲辉 刘海朋 骆静 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第1期22-28,共7页
钙调神经磷酸酶(calcineurin,CN)作为机体中的一种丝/苏氨酸磷酸酶,在关键的生物学过程中发挥着重要作用.RCANs(regulators of calcineurin)是CN的一类内源调节因子,其家族成员在细胞中能够通过与CN在结构上的相互结合,起到调节CN活性... 钙调神经磷酸酶(calcineurin,CN)作为机体中的一种丝/苏氨酸磷酸酶,在关键的生物学过程中发挥着重要作用.RCANs(regulators of calcineurin)是CN的一类内源调节因子,其家族成员在细胞中能够通过与CN在结构上的相互结合,起到调节CN活性的作用.而近来研究发现,该调节因子还可参与到CN-NFAT信号通路中发挥功能,从而与CN依赖的生理和病理过程的调控密切相关.因此,有必要对RCAN基因、RCANs蛋白与CN的相互作用以及该家族成员在病理条件下的重要功能作一个较为全面的综述,这些基础研究工作的进展将有助于为寻找新的疾病治疗方法和药物开辟新的途径. 展开更多
关键词 钙调神经磷酸酶 RCAN基因 RCANs TAU蛋白 阿尔茨海默氏病
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钙调神经磷酸酶信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制 被引量：6
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作者 杨永健 张鑫 +1 位作者 朱文玲 孙梅芹 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2006年第4期291-293,共3页
目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制。方法:选择慢性风湿性二尖瓣病变接受二尖瓣置换术的充血性心力衰竭患者39例,分为心功能Ⅱ级组12例,心功能Ⅲ级组15例,心功能Ⅳ级组12例;正常对照组38例(其... 目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)信号通路参与充血性心力衰竭患者心肌重塑的机制。方法:选择慢性风湿性二尖瓣病变接受二尖瓣置换术的充血性心力衰竭患者39例,分为心功能Ⅱ级组12例,心功能Ⅲ级组15例,心功能Ⅳ级组12例;正常对照组38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者,30例为健康体检者)。苏木素-依红染色检查心肌组织病理变化,免疫沉淀法测心肌组织CaN、活化T细胞核因子(NFAL)、锌指转录因子(GATA4)磷酸化及蛋白表达以及α-骨骼肌蛋白(α-skeletal-actin)表达,RT-PCR检测肌球蛋白重链信使核糖核酸(β-MHC mRNA)表达。结果:充血性心力衰竭患者心肌呈典型的重塑心肌的病理改变。充血性心力衰竭患者心肌组织CaN磷酸化、GATA4磷酸化、α-skeletal-actin蛋白表达及β-MHC tuRNA表达明显高于正常对照组,随心功能恶化,其表达逐渐增加(P <0．05或0．01);NFAT3磷酸化随心功能恶化而减弱(P<0．05或0．01)。结论:CaN信号通路在充血性心力衰竭患者心肌重塑机制中可能起着重要的作用。 展开更多
关键词 心力衰竭 充血性 心肌重塑 钙调神经磷酸酶 信号转导
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