应用随机引物法鉴定伪劣羊肉卷中的肉种成分 被引量：2

1

作者 王昱 叶自霞 +6 位作者 聂福平 肖进文 杨俊 袁增壮 王国民 李应国 李正国 《中国动物检疫》 CAS 2014年第10期74-78,83,共6页

为鉴定市场抽检的来源不明的伪劣"羊肉卷"中的肉种成分,采用随机引物法,PCR扩增肉制品DNA,将阳性产物回收、克隆并测序,然后根据序列信息设计特异性的荧光定量引物进行再次鉴定。结果表明,获得了针对伪劣"羊肉卷"... 为鉴定市场抽检的来源不明的伪劣"羊肉卷"中的肉种成分,采用随机引物法,PCR扩增肉制品DNA,将阳性产物回收、克隆并测序,然后根据序列信息设计特异性的荧光定量引物进行再次鉴定。结果表明,获得了针对伪劣"羊肉卷"的阳性克隆,序列比对表明样品中含有北极狐或火狐肉成分,经特异性的荧光定量PCR确认样品为火狐肉。结果表明,可以应用随机引物PCR鉴定伪劣"羊肉卷"中的肉种成分。 展开更多

关键词 随机引物法 肉制品 物种成分 鉴定

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随机引物法探针标记试剂盒的配制

2

作者 周建中 王申五 《南京铁道医学院学报》 1997年第1期68-70,共3页

随机引物法探针标记试剂盒的配制周建中王申五（南京市第一医院内科南京２１０００６）随机引物法标记探针具有标记核苷酸掺入率高，模板ＤＮＡ用量少，所标记探针具高比活性且未经纯化而可直接加入杂交液中变性后使用等优点，有取代缺... 随机引物法探针标记试剂盒的配制周建中王申五（南京市第一医院内科南京２１０００６）随机引物法标记探针具有标记核苷酸掺入率高，模板ＤＮＡ用量少，所标记探针具高比活性且未经纯化而可直接加入杂交液中变性后使用等优点，有取代缺口平移法的趋势，故其探针标记试剂盒... 展开更多

关键词 随机引物法 配制 探针标记试剂盒

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随机引物PCR法在变形链球菌基因分型中的初步应用 被引量：5

3

作者 刘加荣 边专 +1 位作者 樊明文 聂敏 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第2期92-94,共3页

目的 :研究利用随机引物PCR法来对口腔变形链球菌进行基因分型。方法 :采用两组针对变形链球菌的随机引物 ,于不同的反应体系中 ,对变形链球菌群 (血清型c、e、f、d、g)及 3个临床分离株进行PCR扩增 ,并对变形链球菌的电泳图谱进行分析 ... 目的 :研究利用随机引物PCR法来对口腔变形链球菌进行基因分型。方法 :采用两组针对变形链球菌的随机引物 ,于不同的反应体系中 ,对变形链球菌群 (血清型c、e、f、d、g)及 3个临床分离株进行PCR扩增 ,并对变形链球菌的电泳图谱进行分析 ,鉴定其基因型的多态性。结果 :运用两组随机引物均可鉴别不同血清型的变形链球菌 ,对同一血清型的链球菌还可鉴别其不同的基因型。结论 :两组随机引物均能对变形链球菌进行基因分型。随机引物PCR法简便、快速、分辨率较高 ,是鉴定变形链球菌基因型的有效方法。 展开更多

关键词 口腔变形链球菌 基因分型 随机引物PCR法 电泳图谱

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猖獗龋儿童c血清型变异链球菌的基因组AP-PCR法分析

4

作者 廖义东 林焕彩 涂家珍 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第B04期17-19,共3页

[目的]比较猖獗龋儿童和无龋儿童口腔中c血清型变形链球菌的基因型分布。[方法]从8例猖獗龋儿童和16例无龋儿童口腔中分离出变形链球菌,采用酚-氯仿法抽提细菌染色体DNA,选用一对特异性的引物,通过PCR法鉴定出c血清型变形链球菌,再通过... [目的]比较猖獗龋儿童和无龋儿童口腔中c血清型变形链球菌的基因型分布。[方法]从8例猖獗龋儿童和16例无龋儿童口腔中分离出变形链球菌,采用酚-氯仿法抽提细菌染色体DNA,选用一对特异性的引物,通过PCR法鉴定出c血清型变形链球菌,再通过随机引物PCR法对临床分离株的基因组进行指纹分析。[结果]同一个体可携带不同基因型的c血清型变形链球菌,7例罹患猖獗龋的儿童中有5例携带了多种基因型,而7例无龋儿童中只有1例携带了多种基因型。[结论]罹患猖獗龋的儿童口腔中容易定植多种基因型的c血清型变形链球菌。 展开更多

关键词 变形链球菌 随机引物聚合酶链法 基因型 猖獗龋

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人小细胞肺癌多药耐药细胞H446/CDDP基因组DNA甲基化状态的变化 被引量：4

5

作者 郭芮伶 吴国明 +4 位作者 李海东 潘峰 李文碧 戢福云 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期2533-2535,共3页

目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检... 目的探讨基因组DNA甲基化状态与人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)H446/CDDP细胞获得性多药耐药的关系。方法分别提取人SCLC多药耐药细胞H446/CDDP及其亲代细胞H446的基因组DNA,应用甲基化敏感性随机引物PCR(MS-AP-PCR)方法检测其甲基化状态。结果 H446/CDDP细胞经酶解后的扩增谱带较H446细胞明显增多,且荧光强度较强,表明其基因组DNA甲基化水平较亲代细胞明显增高。结论 H446/CDDP细胞多药耐药性的获得可能与其基因组DNA甲基化水平增高有关。 展开更多

关键词 人小细胞肺癌 多药耐药 DNA甲基化 甲基化敏感性随机引物PCR法

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高龋者口腔中c血清型变形链球菌的基因组指纹分析 被引量：5

6

作者 郭丽宏 史俊南 +2 位作者 肖晓蓉 朱硃 张静仪 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2003年第11期609-613,共5页

目的 :确定高龋者口腔中c血清型变形链球菌的基因型分布。方法 :从 2 0例高龋者口腔中分离出c血清型变形链球菌 ,采用chelex法提取细菌染色体DNA ,通过AP -PCR进行临床分离株的基因组指纹分析。结果 :共分离获得了 87株c血清型变形链球... 目的 :确定高龋者口腔中c血清型变形链球菌的基因型分布。方法 :从 2 0例高龋者口腔中分离出c血清型变形链球菌 ,采用chelex法提取细菌染色体DNA ,通过AP -PCR进行临床分离株的基因组指纹分析。结果 :共分离获得了 87株c血清型变形链球菌 ,不同个体所携带的变形链球菌临床分离株的基因型不同 ,同一个体可携带不同基因型的c血清型变形链球菌 ,2 6.7%的高龋者携带 1种基因型 ,60 .0 %携带 2种基因型 ,13 .3 %携带 3种基因型。结论 :大多数高龋者口腔中定植有 2种或 2种以上基因型c血清型变形链球菌。 展开更多

关键词 变形链球菌 随机引物聚合酶链法 基因型

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用PCR技术从cDNA文库中获取目的基因长片段 被引量：2

7

作者 汪思应 郑红 +3 位作者 程洁 余科科 许望翔 李俊 《安徽医药》 CAS 2003年第1期58-60,共3页

目的　建立一种简便有效的获取cDNA大片段的实验技术。方法　应用PCR原理 ,设计特异引物结合文库载体引物对大鼠胎肝cDNA文库进行PCR扩增 ;用随机引物标记法标记已知小片段“目的基因”(30 0bp± )作为探针 ,对PCR产物进行Sorthern... 目的　建立一种简便有效的获取cDNA大片段的实验技术。方法　应用PCR原理 ,设计特异引物结合文库载体引物对大鼠胎肝cDNA文库进行PCR扩增 ;用随机引物标记法标记已知小片段“目的基因”(30 0bp± )作为探针 ,对PCR产物进行Sorthern杂交以检验“目的基因”片段的正确性及长度 ;回收“目的基因”片段并连接入PGEM T载体 ,转染JM 10 9并扩增后 ,提取“目的基因”测序。结果　琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增产物有多条不同长度的段 ,Sorthern杂交发现一段长度为 1 5kb的cDNA片段为“目的基因” ;测序结果与GeneBank进行Blaste分析 ,该基因为一株新的序列 ,已在GeneBank中登录注册 (RatLiverRegeneration relatedPro tein 1,RLRP 1AF2 36 0 5 4 )。 展开更多

关键词 PCR技术 CDNA文库 获取 目的基因长片段 实验方法 分子生物学 随机引物标记法

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全托儿童口腔变形链球菌水平传播的初步研究 被引量：4

8

作者 邹静 尚冉 +1 位作者 凌均棨 周学东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期388-390,共3页

目的通过对幼儿园全托儿童之间口腔变形链球菌水平传播的研究,为儿童龋病预防提供新的思路.方法选择24名3～4岁全托儿童为研究对象,其中无龋组和有龋组各12名.采用无菌牙签采集牙面菌斑,厌氧培养48 h,根据变形链球菌的典型形态挑取单个... 目的通过对幼儿园全托儿童之间口腔变形链球菌水平传播的研究,为儿童龋病预防提供新的思路.方法选择24名3～4岁全托儿童为研究对象,其中无龋组和有龋组各12名.采用无菌牙签采集牙面菌斑,厌氧培养48 h,根据变形链球菌的典型形态挑取单个菌落进行次代纯培养,经形态学和微量生化鉴定后将分离的菌株行AP-PCR扩增,对来自不同个体基因型相似的菌株再进行DNA指纹分析.结果 24名受检儿童中,变形链球菌检出率为66.7%,无龋组和有龋组检出率分别为58.3%和75.0%.经AP-PCR扩增,24名儿童口腔中检测出29个不同基因型的变形链球菌,其中携带2个以上基因型儿童占45.8%.经DNA指纹分析,有2种基因型在11名全托儿童口腔中有重复检出.结论变形链球菌在全托儿童口腔中可能存在水平传播. 展开更多

关键词 变形链球菌 基因型 随机引物聚合酶链反应法 DNA指纹分析

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中国若干考古遗址古DNA样本的初步探索 被引量：5

9

作者 张帆 李辉 +6 位作者 黄颖 谭婧泽 张丽苹 徐智 金建中 卢大儒 金力 《中央民族大学学报（自然科学版）》 2003年第1期40-44,共5页

　古代DNA的研究方兴未艾,作为地域和人口大国,中国在这方面有着得天独厚的优势.我们利用遗传学手段对中国若干考古遗址进行了初步研究,并对两类古代DNA的提取方法进行了比较,同时,也尝试了模拟古代DNA条件的全基因组的随机引物预扩增... 　古代DNA的研究方兴未艾,作为地域和人口大国,中国在这方面有着得天独厚的优势.我们利用遗传学手段对中国若干考古遗址进行了初步研究,并对两类古代DNA的提取方法进行了比较,同时,也尝试了模拟古代DNA条件的全基因组的随机引物预扩增的实验方法.对中国古代DNA研究提出了自己的思路及展望. 展开更多

关键词 古代DNA 硅胶吸附 PCR 限制性酶切 随机引物预扩增法

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不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性之间的关系 被引量：1

10

作者 李伟 贺新兰 +5 位作者 胡红梅 张铮辉 王蔚 周鹏 汤洪 刘兴容 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第6期500-503,共4页

目的：研究不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性的关系．方法：①随机选取50例24—32岁的高龋、中龋及无龋者，取牙面菌斑样本接种于MS培养基上，每人随机挑取2—5株临床分离株，提取细菌染色体DNA，采用AP—PCR法对不同龋敏感者... 目的：研究不同龋敏感者口腔变形链球菌基因型与产酸性的关系．方法：①随机选取50例24—32岁的高龋、中龋及无龋者，取牙面菌斑样本接种于MS培养基上，每人随机挑取2—5株临床分离株，提取细菌染色体DNA，采用AP—PCR法对不同龋敏感者口腔变形链球菌临床分离株进行基因分型．②以pH0．5为间隔配制pH4．0～7．0系列的，含50mg／L葡萄糖的MS液体培养基，对不同基因型口腔变形链球菌临床分离株进行厌氧培养48h，用精密pH计检测培养基上清液的pH值．结果：①14例高龋个体中有3例为1种基因型，5例有2种基因型，6例有3种基因型；9例中龋个体中有4例为一种基因型，3例有2种基因型，2例有3种基因型；13例无龋个体中有12例为1种基因型，1例有2种基因型．②不同基因型的变形链球菌培养基上清液的pH值进行统计学分析，发现基因型越多的细菌其产酸能力越强．结论：①龋敏感越高的个体其口腔变形链球菌临床分离株基因型越多；②不同基因型的变形链球菌pH值的检测，基因型越多的细菌其产酸能力越强． 展开更多

关键词 龋敏感者 随机引物聚合酶链法 基因型 链球菌 变异

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变黑普里沃菌基因多态性及其在成人牙周炎患者龈下菌斑中的分布

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作者 吴波 章锦才 +2 位作者 黄萍 张蕴惠 王航 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期202-204,共3页

目的　了解变黑普里沃菌 (P .n)的基因多态性及其在成人牙周炎 (AP)病变部位与正常部位是否存在基因型的差异。方法　采用随机引物多聚酶链扩增法 (APPCR)用引物OPA - 0 3和OPA - 13对来自 2 1例AP的 4 7株P .n作基因型分析。结果　同... 目的　了解变黑普里沃菌 (P .n)的基因多态性及其在成人牙周炎 (AP)病变部位与正常部位是否存在基因型的差异。方法　采用随机引物多聚酶链扩增法 (APPCR)用引物OPA - 0 3和OPA - 13对来自 2 1例AP的 4 7株P .n作基因型分析。结果　同一患者口内有 1～ 3种基因型 ,以 1种和 2种为主 ;同一患者病变部位 (P)与正常部位 (H)有 1～ 2种基因型 ,以 1种为主 ;未发现与牙周正常状态相关的特定基因型P .n。结论　变黑普里沃菌是口腔的正常菌群。 展开更多

关键词 变黑普里沃菌 基因多态性 成人 牙周炎 龈下菌斑 分布 随机引物多聚酶链扩增法

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PCR在变形链球菌基因分型中的初步应用

12

作者 毛友珍 李虹泽 《临床肺科杂志》 2012年第1期170-171,共2页

目的探索利用PCR法来对变形链球菌进行基因分型。方法:采用两组针对变形链球菌的随机引物,于不同的反应体系中,研究不同条件下进行聚合酶链反应的结果,寻找满意的聚合酶链反应条件。并对变形链球菌群(血清型c、e、f、d、g)及3个临床分... 目的探索利用PCR法来对变形链球菌进行基因分型。方法:采用两组针对变形链球菌的随机引物,于不同的反应体系中,研究不同条件下进行聚合酶链反应的结果,寻找满意的聚合酶链反应条件。并对变形链球菌群(血清型c、e、f、d、g)及3个临床分离株进行PCR扩增,对变形链球菌的电泳图谱进行分析,鉴定其基因型的多态性。结果运用两组随机引物均可鉴别不同血清型的变形链球菌,对同一血清型的链球菌还可鉴别其不同的基因型。结论两组随机引物均能对变形链球菌进行基因分型。随机引物PCR法简便、快速、分辨率较高,是鉴定变形链球菌基因型的有效方法。 展开更多

关键词 随机引物PCR法 变形链球菌群 基因分型 聚合酶链反应 应用 PCR扩增 临床分离株 血清型

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一种高比放 DNA 探针的制备方法及其应用 被引量：1

13

作者 关雪妮 李秀珍 +1 位作者 唐红娣 方继明 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1990年第2期151-153,共3页

随机引物法标记 DNA 探针是一种高比放、高灵敏度的 DNA 探针标记法。DNA 标记比放可达9.0×10~8cpm/μg DNA,比缺口平移法标记的比放高约9倍。因此法标记的 DNA 探针在分子杂交试验中均获得良好的结果。

关键词 比放射性 DNA探针 随机引物法

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