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基于胚珠诱导培育的非洲菊双单倍体花序遗传表现
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作者 单芹丽 杨春梅 +3 位作者 吴丽芳 吴旻 卢珍红 李绅崇 《北方园艺》 北大核心 2025年第1期1-7,共7页
以非洲菊品种及其胚珠诱导培育的双单倍体为试验材料,采用田间完全随机排列方法,对开花植株的花色、花序类型和花心颜色进行观测,解析非洲菊的花序遗传表现,以期为非洲菊定向育种的亲本选择提供参考依据。结果表明:非洲菊的花色和花心... 以非洲菊品种及其胚珠诱导培育的双单倍体为试验材料,采用田间完全随机排列方法,对开花植株的花色、花序类型和花心颜色进行观测,解析非洲菊的花序遗传表现,以期为非洲菊定向育种的亲本选择提供参考依据。结果表明:非洲菊的花色和花心表现为偏母性遗传趋势,其中红色品种的后代双单倍体植株花色和母本植株一致的概率达95%以上,花心颜色与母本植株一致的概率达55%以上;单瓣品种后代双单倍体植株的花序类型偏母性遗传倾向明显,和母本植株一致的概率达90%以上;重瓣和半重瓣品种后代双单倍体植株的花序类型未表现出明显的偏母性遗传倾向,和母本植株一致的概率不到35%。 展开更多
关键词 非洲 双单倍体 育种 遗传
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21世纪以来非洲大陆勘查新发现40个金矿床地质特征
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作者 陈喜峰 元春华 +9 位作者 陈秀法 张潮 王秋舒 宋崇宇 李仰春 韩九曦 孙仁斌 赵东杰 李玉龙 郝丽荣 《中国地质》 北大核心 2025年第1期380-388,共9页
1勘查新发现金矿床地理分布特征据不完全统计(S&P Global Market Intelligence,2024),21世纪以来,全球勘查新发现了167个大型金矿床,其中,有40个分布在非洲(图1),占全球勘查新发现大型金矿床总数量的23.95%,是全球勘查新发现大型金... 1勘查新发现金矿床地理分布特征据不完全统计(S&P Global Market Intelligence,2024),21世纪以来,全球勘查新发现了167个大型金矿床,其中,有40个分布在非洲(图1),占全球勘查新发现大型金矿床总数量的23.95%,是全球勘查新发现大型金矿床数量第二多的大洲,仅次于南美洲。从国家分布看,21世纪以来,非洲勘查新发现的40个大型金矿床主要分布在布基纳法索、加纳、科特迪瓦、马里、塞内加尔、几内亚、利比里亚、刚果(金)、纳米比亚、坦桑尼亚、南非、埃塞俄比亚、埃及、苏丹等14国家;其中,布基纳法索是新发现大型金矿床数量最多的国家,有9个;其次为科特迪瓦,有5个;再次为加纳和刚果(金),均有4个;其余10个国家新发现的大型金矿床数量均在3个及以下(表1)。 展开更多
关键词 非洲大陆 刚果(金) 埃塞俄比亚 纳米比亚 坦桑尼亚 科特迪瓦 利比里亚 塞内加尔
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非洲猪瘟弱毒疫苗效力评价研究进展
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作者 戈胜强 沙洲 +10 位作者 崔进 房琳琳 王潇葳 于家荣 胡永新 张永强 李瑞红 左媛媛 郑辉 魏荣 王志亮 《中国动物检疫》 2025年第2期51-56,共6页
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的烈性传染病。目前在研的ASF疫苗仍难以兼顾安全绝对保证及效力确实可靠。本文对已报道的ASF弱毒疫苗相关研究数据进行总结分析,分别从攻... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染引起的烈性传染病。目前在研的ASF疫苗仍难以兼顾安全绝对保证及效力确实可靠。本文对已报道的ASF弱毒疫苗相关研究数据进行总结分析,分别从攻毒剂量及途径、攻毒后评价指标等方面进行综述。总结分析发现:ASF弱毒疫苗研究主要以免疫攻毒方式探究其效力;肌内注射剂量多为102~104 HAD50/TCID50,而与自然感染相似的口鼻接种途径不同感染方式采用的剂量差异较大;疫苗免疫后攻毒常以体温反应、临床表现、死亡情况、病毒血症、排毒水平等作为评价指标,并结合临床评分标准科学展示临床指标。未来在技术层面,ASF弱毒疫苗效力评价还应进一步探索模拟自然感染途径的疫苗攻毒保护试验。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 弱毒疫苗 评价指标 效力评价
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建构主义视域下多边教育合作推动非洲教育数字化转型的动因、机制与困境
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作者 刘宝存 李紫璠 《河北师范大学学报(教育科学版)》 北大核心 2025年第1期107-115,共9页
教育数字化转型是数字化时代背景下促进教育发展的重要条件,多边教育合作是推动非洲教育数字化转型的重要途径。国际组织促进全民教育发展的使命和责任与援助国的利益诉求交织,为旨在推动非洲教育数字化转型的多边教育合作提供了原生动... 教育数字化转型是数字化时代背景下促进教育发展的重要条件,多边教育合作是推动非洲教育数字化转型的重要途径。国际组织促进全民教育发展的使命和责任与援助国的利益诉求交织,为旨在推动非洲教育数字化转型的多边教育合作提供了原生动力。援助方基于政策制定、能力建设、数字化办学水平等维度为非洲受援国提供教育援助。其中,协调机制、交流机制、退出机制是推动合作顺利进行的重要保障。然而,利益相关方在合作过程中也面临着缺少健全稳定的经费保障机制、受援国教育数字化治理水平不高、跨国借鉴与分享受限、非洲地区存在根深蒂固的社会问题等现实挑战。推动非洲教育数字化转型的多边教育合作具有一定的典型性和示范性,对其他类型的多边教育合作有借鉴意义。 展开更多
关键词 建构主义 多边教育合作 教育数字化转型 非洲
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非洲跨区域合作与中国的角色:探寻新的多边合作范式
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作者 周玉渊 《国际展望》 北大核心 2025年第1期131-151,180,181,共23页
非洲跨国跨区域基础设施合作是非洲发展和地区一体化的优先议程。受到大国竞争、地区安全挑战增加、能源转型和供应链安全问题凸显等因素的驱动,不仅非洲国家加快推进跨区域合作,而且域外国家也更加重视对非洲跨区域合作的参与。美欧对... 非洲跨国跨区域基础设施合作是非洲发展和地区一体化的优先议程。受到大国竞争、地区安全挑战增加、能源转型和供应链安全问题凸显等因素的驱动,不仅非洲国家加快推进跨区域合作,而且域外国家也更加重视对非洲跨区域合作的参与。美欧对非合作正经历从传统的发展援助转向战略性经贸投资的范式转变,使围绕非洲关键发展走廊的竞争成为地缘政治经济竞争的重要形态。中国是非洲跨区域合作和发展的重要参与者及突出贡献者。随着中非合作从双边向多边和区域扩大、从项目合作到战略对接、从工程建设到全链条参与的演变过程,中国参与非洲跨区域合作对构建新的中非多边合作范式提出了更高要求。2024年中非合作论坛北京峰会提出支持非洲跨区域发展、打造陆海联动、协同发展的中非互联互通网络正是对这一现实要求的回应。为深化中非关系和高质量共建“一带一路”,中非应挖掘中国参与非洲跨区域合作的潜力,加强多边协调合作,持续提升中非合作的层次、结构和水平。 展开更多
关键词 非洲跨区域合作 中非合作 一带一路 基础设施 多边合作
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非洲中文教育发展现状、现实问题及应对策略
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作者 陈宏 刘慧佳 《国际汉学》 2025年第1期116-130,160,共16页
本文基于翔实数据对2022年底前非洲中文教育的发展状况进行整体梳理,主要包括非洲中文教育发展现状、特点、影响因素、存在的问题及对策。本文提出非洲中文教育发展的问题包括顶层设计理念不成熟、中文教育师资严重匮乏、本土教学资源... 本文基于翔实数据对2022年底前非洲中文教育的发展状况进行整体梳理,主要包括非洲中文教育发展现状、特点、影响因素、存在的问题及对策。本文提出非洲中文教育发展的问题包括顶层设计理念不成熟、中文教育师资严重匮乏、本土教学资源开发不足、教学设施不能满足教学需要、孔子学院(课堂)数量有限等。解决策略主要为中非合力营造中文教育发展新格局,推动非洲中文教育本土化发展,借助驻地企业改善中文办学条件等。 展开更多
关键词 非洲中文教育 发展现状 现实问题 应对策略
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古尔纳《最后的礼物》中的非洲性研究
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作者 周和军 张珈豪 《天津外国语大学学报》 2025年第2期80-88,112,F0003,共11页
阿卜杜勒拉扎克·古尔纳的小说《最后的礼物》讲述了移民家庭的两代人在英国面临的非洲文化失根、记忆创伤、种族歧视和身份问题,反映了古尔纳对多元文化影响下的非洲性的独特思考。文章从历史维度、现实维度、理想维度对《最后的... 阿卜杜勒拉扎克·古尔纳的小说《最后的礼物》讲述了移民家庭的两代人在英国面临的非洲文化失根、记忆创伤、种族歧视和身份问题,反映了古尔纳对多元文化影响下的非洲性的独特思考。文章从历史维度、现实维度、理想维度对《最后的礼物》中的非洲性进行探讨。在历史维度上,文章挖掘文本蕴含的东非历史文化、农业发展现状与伊斯兰文化,还原东非生活图景;在现实维度上,文章聚焦东非自身的问题、殖民主义的危害和移民身份认同,揭了非洲性面临的复杂现实语境;在理想维度上,古尔纳提出了多元文化的融合与世界主义精神,试图为解决非洲现实问题提出建设性的方案。 展开更多
关键词 古尔纳 《最后的礼物》 非洲
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生态批评理论视角下海明威《非洲的青山》中人与自然关系的解读
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作者 许艳婷 《红河学院学报》 2025年第1期62-65,共4页
《非洲的青山》是一部颇具争议性的作品,它体现出人本主义与自然保护之间的矛盾。在这部作品中,海明威细腻生动地描写了非洲的壮美景致,流露出他的生态主义情怀,但同时他又写到了残忍血腥的狩猎场景,体现出其人类中心的自然观。作为“... 《非洲的青山》是一部颇具争议性的作品,它体现出人本主义与自然保护之间的矛盾。在这部作品中,海明威细腻生动地描写了非洲的壮美景致,流露出他的生态主义情怀,但同时他又写到了残忍血腥的狩猎场景,体现出其人类中心的自然观。作为“迷惘的一代”的代表作家,他在享受自然和征服自然间充满了矛盾纠结。文章在概述了海明威《非洲的青山》内容及创作背景的基础之上,着重研究了《非洲的青山》中海明威的生态主义情怀及人类中心主义自然观,并提出《非洲的青山》带给人们的自然及生态启示。 展开更多
关键词 生态批评理论 海明威 非洲的青山》 人与自然
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辩析非洲哲学、构建内源性知识和培育政治文化——论贝宁哲学家洪通吉的贡献
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作者 邓皓琛 《法语国家与地区研究(中法文)》 2025年第1期25-38,共14页
洪通吉是非洲少有的横跨学界和政界的哲学家,毕生致力于非洲思想和政治的独立自主。在批判比利时传教士及其非洲追随者开启的人种哲学的基础上,洪通吉提出,非洲哲学应是个体对哲学问题的理性思考,而非从人种学素材提炼出恒定不变的集体... 洪通吉是非洲少有的横跨学界和政界的哲学家,毕生致力于非洲思想和政治的独立自主。在批判比利时传教士及其非洲追随者开启的人种哲学的基础上,洪通吉提出,非洲哲学应是个体对哲学问题的理性思考,而非从人种学素材提炼出恒定不变的集体思维。他指出非洲学术界存在过度依赖西方的外向性问题,希望非洲人能创造性结合自身传统,产生内源性知识。在分析非洲不同时期政治发展的短板的同时,他肯定了贝宁20世纪90年代政治转型的内因,并在21世纪新全球格局下提出非洲人的宽容伦理基础。虽然其思想仍有一定局限性,但洪通吉对哲学和政治的贡献可以丰富我国学界对当代非洲思想版图和政治史的认识,并带来新的启示。 展开更多
关键词 洪通吉 非洲哲学 非洲政治发展
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非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能研究进展
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作者 罗梦 郭子强 +8 位作者 李佳乐 帅文娜 李丽薇 周艳君 姜一峰 童武 童光志 韦祖樟 高飞 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期125-134,共10页
非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种在家猪和野猪之间传播的高度传染性和致死性的病毒性疾病,该病的病原体是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),致死率高达100%。近年来,ASF疫情严重威胁着我国生猪产业的健康发展... 非洲猪瘟(African swine fever, ASF)是一种在家猪和野猪之间传播的高度传染性和致死性的病毒性疾病,该病的病原体是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV),致死率高达100%。近年来,ASF疫情严重威胁着我国生猪产业的健康发展。与之前相比,我国的ASFV流行毒株逐渐由ASFVⅡ型强毒株转变为ASFVⅡ型和Ⅰ型的重组毒株。因此,迫切需要开发具有交叉保护效力的有效疫苗来预防ASFV的感染。ASFV的结构复杂,其基因组是一种大型双链DNA分子,大小在170~193 kb,包含150~167个开放阅读框,编码近200种蛋白。这些蛋白具有复杂的结构、功能以及免疫逃逸机制,使ASF疫苗研发困难重重。截止目前,尚未有针对ASF的有效疫苗或治疗药物问世,仍需要全面解析非洲猪瘟病毒蛋白的结构和功能,深入了解病毒感染机制以及病毒蛋白和宿主蛋白的相互作用。本文旨在综述当前关于ASFV相关蛋白的结构和功能的研究进展,以期为有效预防和控制ASF提供科学依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 结构蛋白 非结构蛋白 免疫逃避
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非洲猪瘟病毒蛋白pS183L的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 余群 邹艳丽 +9 位作者 陈欢 刘珊 苗雨润 任炜杰 王振忠 何佳依 高晓宇 钱莺娟 吴晓东 郑龙三 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第2期112-117,共6页
旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pS183L的多克隆抗体。根据公布的毒株ASFV China/2018/Anhui XCGQ基因序列设计引物,酶切连接法构建重组质粒pET-28a-S183L;经鉴定成功的质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导表达后经镍柱亲和层析纯化后... 旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pS183L的多克隆抗体。根据公布的毒株ASFV China/2018/Anhui XCGQ基因序列设计引物,酶切连接法构建重组质粒pET-28a-S183L;经鉴定成功的质粒转化大肠杆菌Rosetta,诱导表达后经镍柱亲和层析纯化后获得重组蛋白pS183L,免疫小鼠并制备抗pS183L的多克隆抗体。通过ELISA鉴定多克隆抗体效价大于1∶128000;Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)表明,该多克隆抗体能识别293T和PK15细胞外源表达蛋白及ASFV感染猪肺泡巨噬细胞(PAMs)内源表达蛋白。综上,本研究成功制备抗pS183L多克隆抗体,为深入研究ASFV pS183L的功能提供了关键生物材料。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 pS183L 多克隆抗体
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非洲猪瘟病毒CP312R蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 司安琪 王淑娟 +5 位作者 张永强 王筱真 任炜杰 郑龙三 包静月 王志亮 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第4期101-106,共6页
为了深入研究非洲猪瘟病毒(ASFV)CP312R蛋白的生物学特性,为血清学诊断技术研究和疫苗研发提供材料,制备了CP312R蛋白的单克隆抗体。将原核表达质粒pGEX-6p-CP312R转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)细胞中,用IPTG诱导CP312R蛋白表达并纯化... 为了深入研究非洲猪瘟病毒(ASFV)CP312R蛋白的生物学特性,为血清学诊断技术研究和疫苗研发提供材料,制备了CP312R蛋白的单克隆抗体。将原核表达质粒pGEX-6p-CP312R转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)细胞中,用IPTG诱导CP312R蛋白表达并纯化,利用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定重组蛋白表达产物的抗原性,用纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,在进行4次免疫后,取加强免疫后的小鼠脾脏进行细胞融合,经阳性克隆筛选后,获得了2株能够稳定分泌抗CP312R蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞。通过Western blot和间接免疫荧光(IFA)等试验对所获得的单克隆抗体的特异性进行鉴定,Western blot结果显示,制备的2株单克隆抗体均能与CP312R蛋白发生特异性反应;IFA结果显示,2株单克隆抗体均能与ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞(PAM)产生特异性绿色荧光。综上,本研究制备的2株单克隆抗体,为非洲猪瘟血清学诊断方法及疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 CP312R蛋白 单克隆抗体 原核表达
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非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 王燕 邹艳丽 +11 位作者 何佳依 刘珊 苗雨润 任炜杰 王振忠 白昀 陈欢 钱莺娟 贾红 吴晓东 冯志新 郑龙三 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第2期105-111,共7页
旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、... 旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、重复性,并对临床血清样品进行检测。结果显示:pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应,ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔,4℃过夜包被,封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释,37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5000,37℃孵育0.5 h,37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性,<0.186为阴性),且具有良好的特异性、灵敏性、可重复性,与商品化试剂盒符合率为79.92%。本研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法,为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 pK205R蛋白 间接ELISA 杆状病毒表达
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非洲马瘟病毒和西尼罗病毒多酶恒温核酸快速扩增检测方法的建立
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作者 钱佳豪 刘丹 +7 位作者 周师众 张博源 高建帅 许霄峰 李慧彤 丁家波 王春凤 沈青春 《动物医学进展》 北大核心 2025年第3期12-16,共5页
为了建立一种方便快捷的非洲马瘟病毒(AHSV)和西尼罗病毒(WNV)的检测方法,将GenBank中非洲马瘟病毒VP7序列以及近3年世界范围内流行的西尼罗病毒序列进行比对,选择保守区域,并按照需求设计引物与探针。通过反应条件的优化,以及特异性与... 为了建立一种方便快捷的非洲马瘟病毒(AHSV)和西尼罗病毒(WNV)的检测方法,将GenBank中非洲马瘟病毒VP7序列以及近3年世界范围内流行的西尼罗病毒序列进行比对,选择保守区域,并按照需求设计引物与探针。通过反应条件的优化,以及特异性与敏感性试验,建立了一种能够同时检测非洲马瘟病毒和西尼罗病毒的多酶恒温核酸快速扩增(MIRA)方法。结果表明该方法操作简便、灵敏度高、特异性强,反应时间仅需20 min。该检测方法可应用于非洲马瘟和西尼罗热的快速诊断和现场监测,为疫情控制和流行病学研究提供技术支持。 展开更多
关键词 非洲马瘟病毒 西尼罗热病毒 多酶恒温快速扩增技术
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Ghrelin对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响
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作者 蒋金凤 李白涛 +2 位作者 周峰 王家乡 李鹏 《中国家禽》 北大核心 2025年第1期89-96,共8页
为探明注射外源性生长素释放肽(Ghrelin)对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响,试验将16只7日龄非洲雏鸵鸟随机分为4组,每组4个重复,饲养33 d后采用趾静脉内注射不同剂量(0、10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg)Ghrelin,取胸腺组织进行石蜡包埋... 为探明注射外源性生长素释放肽(Ghrelin)对非洲雏鸵鸟胸腺生长发育的影响,试验将16只7日龄非洲雏鸵鸟随机分为4组,每组4个重复,饲养33 d后采用趾静脉内注射不同剂量(0、10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg)Ghrelin,取胸腺组织进行石蜡包埋、切片,采用HE染色、TUNEL技术、免疫组织化学染色、qPCR技术,对雏鸵鸟胸腺形态学、胸腺细胞凋亡及胸腺中Foxn1基因进行研究。结果显示:①与对照组相比,注射10μg/kg、50μg/kg、100μg/kg Ghrelin后,非洲雏鸵鸟胸腺指数和胸腺重量都会降低(P<0.05),其中100μg/kg剂量组的胸腺指数显著低于50μg/kg剂量组(P<0.05);②注射不同剂量Ghrelin后,随着剂量的增加,胸腺形态结构变化显著,其中50μg/kg剂量组胸腺皮质厚度和皮髓面积比明显降低(P<0.05),皮髓质交界模糊,皮质和髓质淋巴细胞减少,排列疏松,并且有少量淋巴细胞体积减小,胞浆减小,胞核固缩深染;③在胸腺的髓质部,皮质和皮髓交界处均有凋亡细胞,其中10μg/kg剂量组TUNEL染色阳性率极显著高于对照组(P<0.01);④Foxn1阳性细胞主要分布在髓质中,皮质部和皮髓交界处也有少量分布;各剂量组胸腺内Foxn1阳性细胞MD值均低于对照组,以100μg/kg剂量组显著降低(P<0.05);⑤qPCR结果显示,注射不同剂量Ghrelin的胸腺内Foxn1 mRNA表达水平均低于对照组(P<0.01),这与免疫组化得到的结果相似。综合以上结果,注射不同剂量Ghrelin会抑制雏鸵鸟胸腺的生长,诱导胸腺细胞凋亡,抑制胸腺内Foxn1基因表达,从而抑制胸腺的正常发育,影响雏鸵鸟的免疫调节能力。 展开更多
关键词 非洲鸵鸟 GHRELIN 胸腺 Foxn1基因 细胞凋亡
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非洲猪瘟病毒p22蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定
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作者 王小格 司煊瑛 +8 位作者 闫志伟 王飞 尤龙琪 刘梗 蔡茂 梁珺珹 梁玉秀 杜永坤 张改平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期781-791,共11页
[目的]采用原核表达系统表达并获得非洲猪瘟病毒(ASFV)p22重组蛋白,并进一步制备、鉴定p22重组蛋白的单克隆抗体。[方法]采用PCR方法扩增ASFV p22蛋白编码基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-p22,并通过IPTG诱导表达p22蛋白。将纯化后重... [目的]采用原核表达系统表达并获得非洲猪瘟病毒(ASFV)p22重组蛋白,并进一步制备、鉴定p22重组蛋白的单克隆抗体。[方法]采用PCR方法扩增ASFV p22蛋白编码基因,构建重组表达质粒pET-28a(+)-p22,并通过IPTG诱导表达p22蛋白。将纯化后重组蛋白免疫小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合制备单克隆抗体。通过Western blotting鉴定单克隆抗体特异性,通过ELISA方法测定腹水效价;利用在线软件预测p22蛋白抗原表位分布情况并合成重叠多肽,通过Dot blotting鉴定抗体识别的抗原表位。[结果]本研究成功构建了p22重组蛋白的原核表达质粒,获得原核系统表达的p22重组蛋白,分子质量约为22 ku。用纯化后p22蛋白作为免疫原免疫小鼠,成功筛选到4株阳性单克隆杂交瘤细胞株,分别为1G3D7G11、2G5H6H8、6D10G7D6和8F6F8B9,其腹水效价均达到1∶500 000。Western blotting结果显示,4株单克隆抗体均能与p22蛋白发生特异性反应。单克隆亚型鉴定结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8和6D10G7D6株单克隆抗体的重链均为IgG1类,8F6F8B9株单克隆抗体的重链为IgG2a类,4株单克隆抗体轻链均为Kappa型。Dot blotting检测结果显示,1G3D7G11、2G5H6H8株单克隆抗体识别抗原表位位于第58—89位氨基酸处;8F6F8B9株单克隆抗体识别抗原表位位于第126—150位氨基酸处。[结论]本研究成功制备了4株ASFV p22蛋白的单克隆抗体,并初步鉴定了单克隆抗体所识别的B细胞表位区间。研究结果为p22蛋白的生物学功能研究和ASFV血清学检测提供了参考依据。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p22蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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非洲猪瘟病毒H108R蛋白的制备及其免疫原性评价
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作者 张越 茹毅 +7 位作者 郝荣增 杨锐 赵陇和 李亚军 杨洋 张荣 蒋成辉 郑海学 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1344-1354,共11页
本研究旨在制备ASFV H108R蛋白,通过免疫小鼠评价该蛋白的免疫原性,为该蛋白作为疫苗候选抗原的研究提供理论依据。利用生物信息学工具分析H108R蛋白的结构及基本理化性质,选择编码蛋白33~108 AA的基因序列串联融合到原核表达载体,转化... 本研究旨在制备ASFV H108R蛋白,通过免疫小鼠评价该蛋白的免疫原性,为该蛋白作为疫苗候选抗原的研究提供理论依据。利用生物信息学工具分析H108R蛋白的结构及基本理化性质,选择编码蛋白33~108 AA的基因序列串联融合到原核表达载体,转化后经IPTG诱导表达,用镍亲和层析纯化目标蛋白质。免疫小鼠利用流式细胞术检测脾脏活化的CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞,分离小鼠血清测定特异性抗体滴度,利用Western blot和IFA鉴定多克隆抗体的特异性。并用试剂盒检测血清中细胞因子含量,将血清与ASFV-GFP病毒孵育评估抗体是否能抑制病毒的复制。生物信息学分析表明H108R蛋白为亲水性蛋白质,有跨膜区,无信号肽,蛋白二三级结构中存在较多α-螺旋。SDS-PAGE、Western blot显示IPTG诱导后,成功表达纯化H108R蛋白。蛋白免疫小鼠后能够诱导小鼠脾脏T细胞的活化,刺激机体产生更高水平的细胞因子。免疫制备的多克隆抗体效价为1∶128000,能与ASFV-GFP病毒特异性结合,与病毒孵育后能明显抑制病毒的复制。本研究成功表达制备了ASFV H108R蛋白,免疫能够诱导脾脏T淋巴细胞活化,引起细胞因子水平升高,制备的多克隆抗体能够明显抑制病毒的复制,具有较好的免疫原性,为深入研究H108R蛋白的生物学功能及疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒(ASFV) H108R蛋白 多克隆抗体 免疫原性
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非洲狗尾草青干草生产关键技术
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作者 臧庆吉 张美艳 +1 位作者 薛世明 匡崇义 《草学》 2025年第1期59-61,共3页
根据云南省草地动物科学研究院、云南农业职业技术学院种畜繁育推广中心、腾冲恒益农业开发有限公司等单位开展多年的非洲狗尾草青干草生产经验,对非洲狗尾草青干草生产技术进行总结介绍,旨在为相关单位开展非洲狗尾草青干草生产提供技... 根据云南省草地动物科学研究院、云南农业职业技术学院种畜繁育推广中心、腾冲恒益农业开发有限公司等单位开展多年的非洲狗尾草青干草生产经验,对非洲狗尾草青干草生产技术进行总结介绍,旨在为相关单位开展非洲狗尾草青干草生产提供技术支撑。 展开更多
关键词 非洲狗尾草 青干草 生产技术
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非洲猪瘟病毒p72蛋白抗体全自动化学发光酶免疫检测方法的建立
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作者 马晓莉 李段 +6 位作者 曾道平 刘燕玲 王晓敏 彭国良 宋长绪 王磊 徐铮 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1355-1365,共11页
抗体检测对于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染诊断和疫苗研究至关重要,因此建立一种基于ASFV p72蛋白抗体的全自动化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)具有重要意义。本研究以重组p7... 抗体检测对于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染诊断和疫苗研究至关重要,因此建立一种基于ASFV p72蛋白抗体的全自动化学发光酶免疫分析方法(chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA)具有重要意义。本研究以重组p72蛋白偶联的磁微粒(magnetic particles,MPs)捕获p72蛋白抗体,再结合碱性磷酸酶(alkaline phosphates,AP)标记的p72蛋白,借助全自动化学发光分析仪,分析猪血清中p72蛋白特异性抗体水平。经反应条件优化,建立了一种ASFV p72蛋白抗体全自动化学发光酶免疫检测方法。结果显示,建立的CLEIA阴性、阳性临界值为9.505 U·mL^(-1),诊断特异性和灵敏性分别为98.33%和100%,与其他猪病原阳性血清无交叉反应,批内和批间变异系数分别小于5%和10%,各种试剂组分可以保存6个月以上,对ASFV阳性标准血清,分析敏感性为1∶12800,与国产商品化试剂盒的总符合率达95.90%。综上,本研究建立的化学发光方法具有高灵敏性和可重复性,有自动化检测、操作步骤简单的优势,可为ASFV的检测提供新的技术支持。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p72 化学发光酶免疫 抗体检测
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南宁地区14个非洲菊品种综合评价
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作者 毛纯 韦思宇 +2 位作者 庞伟灿 杨梅 徐圆圆 《广西林业科学》 2025年第1期28-34,共7页
为给南宁地区非洲菊(Gerbera jamesonii)鲜切花品种选择提供参考,促进南宁地区和广西鲜切花产业发展,以14个非洲菊品种为研究对象,分析各品种花序、花梗、花色和瓶插寿命的差异,并采用隶属函数法对各品种进行综合评价。结果表明,‘粉蝶... 为给南宁地区非洲菊(Gerbera jamesonii)鲜切花品种选择提供参考,促进南宁地区和广西鲜切花产业发展,以14个非洲菊品种为研究对象,分析各品种花序、花梗、花色和瓶插寿命的差异,并采用隶属函数法对各品种进行综合评价。结果表明,‘粉蝶’‘玲珑’和‘云南红’花序直径较大,‘蜜糖’‘紫苏’‘玲珑’‘大雪桔’和‘艾玛’花梗直径较大,‘紫苏’花梗最长。14个品种大致可分为6个色系,‘玲珑’和‘蜜糖’花冠色泽较亮丽。‘迷你红’瓶插寿命最长,‘华丽’瓶插寿命最短。花序直径与瓶插寿命呈显著负相关,花梗直径与花梗长度呈显著正相关,花冠(心)L*值与花冠(心)a*值均呈极显著负相关,花心a*值与花心b*值呈极显著负相关。‘紫苏’隶属值最高,综合评价最好。不同非洲菊品种的植物学性状和瓶插寿命有一定差异,粉色系‘蜜糖’和‘玲珑’,紫色系‘紫苏’,橙色系‘大雪桔’及红色系‘荣耀’和‘云南红’6个品种综合评价较优,可推广种植。 展开更多
关键词 鲜切花品种 植物学性状 瓶插寿命 非洲
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