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非神经元型胆碱能系统在(前)脂肪细胞的表达及nAChRα7功能状态对前脂肪细胞Visfatin基因表达的影响(英文)
1
作者 吴静 卢慧玲 +5 位作者 胡秀芬 梁晓燕 林汉华 王宏伟 杨杨 夏治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期803-809,共7页
原核生物、真核生物、植物体的非神经细胞和组织中，尤其是多种免疫活性细胞中，均证实乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）、胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase，ChAT）和乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor，ACh... 原核生物、真核生物、植物体的非神经细胞和组织中，尤其是多种免疫活性细胞中，均证实乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AChE）、胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase，ChAT）和乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor，AChR）各亚型在内的胆碱能系统组分的存在，其中烟碱样乙酰胆碱受体α7（nicotinic acetylcholine receptor α7，nAChRα7）是烟碱样胆碱能抗炎通路（nicotinic anti-inflammatory pathway）中重要的分子核心机制，同时也是机体限制宿主防御反应扩大的内源性抗炎机制之一.本文旨在探讨（前）脂肪细胞上非神经元型胆碱能系统是否存在及初步揭示烟碱样胆碱能受体α7对前脂肪细胞功能的影响.以体外培养的3T3-L1前脂肪细胞为研究对象，采用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术，分别检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中乙酰胆碱酯酶、胆碱乙酰转移酶和烟碱样乙酰胆碱受体α7的3种胆碱能系统主要组分的蛋白表达.另将前脂肪细胞分为给予广谱烟碱样乙酰胆碱受体激动剂尼古丁、特异性烟碱样乙酰胆碱受体α7激动剂氯化胆碱及特异性烟碱样乙酰胆碱受体α7拮抗剂甲基牛扁亭碱干预12 h、24 h、36 h，并设立相应处理时间的空白对照组，逆转录聚合酶链反应检测前脂肪细胞visfatin mRNA表达情况.免疫组化染色可见前脂肪细胞中AChE、ChAT及AChRα7均有阳性表达；蛋白免疫印迹检测进一步半定量证实了前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AChE、ChAT及AChRα7的蛋白表达；拮抗剂甲基牛扁亭碱（10^-6-10^-4mol/L）时间、剂量依赖性上调前脂肪细胞visfatin mRNA表达（1.3-1.55-fold，P〈0.01），与对应空白对照组相比，存在显著性统计学差异；加入不同剂量的尼古丁和氯化胆碱，则前脂肪细胞中visfatin mRNA表达水平与对应空白对照组相比，均不同程度地下降，其中以氯化胆碱的抑制效应更为显著.前脂肪细胞与成熟脂肪细胞中均存在有独立的胆碱能体系，其中AChRα7很可能在调节脂肪细胞因子分泌及肥胖相关的病理生理过程中发挥重要作用. 展开更多
关键词 非神经元型胆碱能系统 胆碱能抗炎通路 内脂素 炎症 肥胖
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免疫活性细胞中的非神经元型胆碱能系统 被引量：3
2
作者 李娟 陈红专 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-198,共6页
本文对淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞及胶质细胞等免疫活性细胞中非神经元型胆碱能系统的特点、药理学和病理生理学意义进行了综述。免疫活性细胞,尤其是淋巴细胞中存在完整、独立的胆碱能系统。与神经元型胆碱能系统相比,该系... 本文对淋巴细胞、巨噬细胞、粒细胞、肥大细胞及胶质细胞等免疫活性细胞中非神经元型胆碱能系统的特点、药理学和病理生理学意义进行了综述。免疫活性细胞,尤其是淋巴细胞中存在完整、独立的胆碱能系统。与神经元型胆碱能系统相比,该系统具有不同特点,如乙酰胆碱(ACh)的合成存在于整个细胞内;ACh可能储存于细胞中某种储存结构,也可能不需储存,而是按需合成并直接释放。免疫活性细胞中的非神经元型胆碱能系统对机体免疫功能及炎症过程可能发挥重要的调控作用。对该系统的深入研究将有助于进一步阐明免疫性疾病、炎症/感染性疾病和神经退行性疾病等的病理生理和发现药物治疗的新靶标。 展开更多
关键词 免疫活性细胞 非神经元型胆碱能系统 免疫功能 炎症反应
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非神经元型胆碱能系统在重症肌无力患者胸腺组织中的表达 被引量：3
3
作者 陆增辉 崔新征 +5 位作者 刘玉凤 刘凡昭 刘萍萍 胡桂明 张清勇 杜英 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1366-1369,共4页
目的 观察非神经元型胆碱能系统（NNAS）在重症肌无力（MG）患者胸腺组织中的表达.方法 取MG患者及对照组胸腺组织,提取总RNA,通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测烟碱型乙酰胆碱受体（nAchR）亚型（α1、α2、α3、α4、α... 目的 观察非神经元型胆碱能系统（NNAS）在重症肌无力（MG）患者胸腺组织中的表达.方法 取MG患者及对照组胸腺组织,提取总RNA,通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测烟碱型乙酰胆碱受体（nAchR）亚型（α1、α2、α3、α4、α5、α6、α7、α9、α10、β1、β2、β3、β4、γ）、乙酰胆碱转移酶（ChAT）以及毒荨碱型乙酰胆碱受体（mAchR）亚型（m1、m2、m3、m4、m5）的表达;制作胸腺组织石蜡切片,通过免疫组织化学法了解nAChR、mAChR在胸腺组织中的分布与表达情况.结果 Real-time PCR结果显示MG患者胸腺组织α1、α9、m3的mRNA的表达水平分别为10.52±1.38、13.39 ±0.69、14.40±1.51,与对照组比较显著增高（P ＜0.05）;α2、β2的mRNA表达水平分别为15.45±1.32、13.99±3.32,与对照组比较显著降低（P＜0.05）,α3、α5、α6、α7、α10、β1、β3、β4、、ChAT、m1、m2、m4、m5的mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.免疫组织化学显示α1、α9、m3、α2、β2在MG患者及对照组胸腺组织均有表达,主要分布在胸腺组织的胞质与胞膜,偶尔也在胞核中表达.MG患者胸腺组织α1的表达显著高于对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05）;MG患者胸腺组织α2、β2的表达显著低于对照组,差异有统计学意义（P ＜0.05）;α9、m3在MG胸腺组织与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 MG患者胸腺组织NNAS发生改变,为探讨MG的发病机制提供重要的理论基础. 展开更多
关键词 重症肌无力 胸腺 非神经元型胆碱能系统 荧光定量聚合酶链反应
原文传递
非神经元型胆碱能系统在重症肌无力患者外周血单个核细胞中的表达
4
作者 刘凡昭 崔新征 +5 位作者 朱利伟 张清勇 陆增辉 张迎娜 高峰 陈嘉捷 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1492-1495,共4页
目的观察非神经元型胆碱能系统（NNCS）在重症肌无力（MG）患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达。 方法取MG患者及对照组受检者肘正中静脉血，分离出单个核细胞，提取总RNA，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测毒蕈碱型乙酰胆碱受体... 目的观察非神经元型胆碱能系统（NNCS）在重症肌无力（MG）患者外周血单个核细胞（PBMC）中的表达。 方法取MG患者及对照组受检者肘正中静脉血，分离出单个核细胞，提取总RNA，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测毒蕈碱型乙酰胆碱受体（mAChR：M1R～5R）、烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR：α2～10、β2～4）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）和胆碱酯酶（AChE）的表达。通过实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）定量分析mAChR（M1R、M3R、M5R）、nAChR（α5、α7）以及AChE在对照组和MG组中的差异。结果RT-PCR结果显示MG组和对照组PBMC中均表达M1R、M3R、M5R、α5、α7和AChE，但nAChR（α3、α9、β2）只在对照组中检测出，其余各亚型和ChAT在两组均未见表达。Real-time PCR结果显示MG患者PBMC中M1 mAChR表达量为对照组的0.80倍（P＝0.418），M3 mAChR为对照组的0.40倍（P＝0.004），M5 mAChR为对照组的1.23倍（P＝0.488），α5 nAChR为对照组的0.63倍（P＝0.177），α7 nAChR为对照组的0.81倍（P＝0.668），AChE为对照组的3.24倍（P＝0.002）。结论 MG患者PBMC中nAChR（α3、α9、β2）、M3 mAChR以及AChE表达存在差异。 展开更多
关键词 重症肌无力 外周血单个核细胞 非神经元型胆碱能系统
原文传递
免疫活性细胞非神经乙酰胆碱系统的研究进展 被引量：2
5
作者 刘志刚 韩波 李培杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1221-1223,共3页
免疫活性细胞表达胆碱乙酰转移酶（ChAT）、乙酰胆碱合成酶（AChE）、毒蕈碱和烟碱型乙酰胆碱受体（mAChR/nAChR）,刺激免疫活性细胞上mAChR和nAChR,免疫细胞可以产生各种生化和功能的变化。活化免疫细胞,可以通过上调ChAT的表达,增加AC... 免疫活性细胞表达胆碱乙酰转移酶（ChAT）、乙酰胆碱合成酶（AChE）、毒蕈碱和烟碱型乙酰胆碱受体（mAChR/nAChR）,刺激免疫活性细胞上mAChR和nAChR,免疫细胞可以产生各种生化和功能的变化。活化免疫细胞,可以通过上调ChAT的表达,增加ACh的合成,而上调ChAT的表达。免疫细胞的免疫功能和淋巴细胞胆碱能活性密切相关。免疫细胞（如T细胞、B细胞、单核细胞）表达所有5种亚型的毒蕈碱型乙酰胆碱受体（mAChR M1-M5）,同时表达不同亚型的烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）,如α3、α5、α7、α9和α10。用卵白蛋白（OVA）免疫敲除M1和M5基因小鼠,上调脾脏单核细胞的TNF-α、IFN-γ和IL-6产生。导致血清抗OVA特异性IgG1增加。而敲除α7基因小鼠,α7烟碱受体下调促炎因子,减少抗OVA特异性IgG1的产生。免疫活性细胞,通过mAChR和nAChR调节细胞因子及抗体的产生。非神经胆碱能系统（NNCS）参与调节免疫细胞功能,二者相互影响。 展开更多
关键词 免疫细胞 非神经胆碱能系统 毒蕈碱型乙酰胆碱受体 烟碱型乙酰胆碱受体 综述
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尼古丁对胆碱乙酰转移酶在人牙周膜成纤维细胞中表达的影响 被引量：1
6
作者 葛鑫 王勇 +1 位作者 刘颍凤 王小竞 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2010年第4期200-203,195,共5页
目的:检测人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLF)中胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)的表达,并观察尼古丁对其表达的影响,以探讨ChAT在吸烟与牙周炎发生发展过程中的可能作用。方法:体外培... 目的:检测人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLF)中胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)的表达,并观察尼古丁对其表达的影响,以探讨ChAT在吸烟与牙周炎发生发展过程中的可能作用。方法:体外培养hPDLF,免疫组化和RT-PCR方法检测hPDLF中ChAT表达,并观察尼古丁(10～12mol/L)作用于hPDLF24h后ChAT表达的变化。结果:免疫组化染色hPDLF胞浆中ChAT表达阳性;RT-PCR检测hPDLF中ChATmRNA阳性表达。尼古丁作用后ChAT蛋白和mRNA表达均明显上调与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:hPDLF中存在非神经元型胆碱能系统物质ChAT的表达,尼古丁可上调其表达。 展开更多
关键词 非神经元型胆碱能系统 胆碱乙酰转移酶 人牙周膜细胞 牙周炎 尼古丁
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3T3-L1前脂肪细胞中烟碱样乙酰胆碱受体α7对脂肪因子肾上腺髓质素mRNA表达的影响 被引量：1
7
作者 梁晓燕 胡秀芬 +3 位作者 卢慧玲 吴静 王宏伟 杨杨 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1484-1487,共4页
目的研究3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有胆碱能系统物质mRNA的表达,及烟碱样乙酰胆碱受体(nAChR)α7功能状态对脂肪因子肾上腺髓质素(AM)mRNA表达的影响,初步阐明脂肪细胞中非神经胆碱能系统与肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢性... 目的研究3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有胆碱能系统物质mRNA的表达,及烟碱样乙酰胆碱受体(nAChR)α7功能状态对脂肪因子肾上腺髓质素(AM)mRNA表达的影响,初步阐明脂肪细胞中非神经胆碱能系统与肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢性疾病的关系。方法以3T3-L1前脂肪细胞和诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有乙酰胆碱酯酶(AChE)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)和nAChR α7三种胆碱能系统主要组分的mRNA表达;对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞分别予不同水平的广谱nAChR激动剂尼古丁、特异性nAChR α7激动剂氯化胆碱及特异性nAChRα7拮抗剂甲基牛扁亭碱处理12、24、36h,并设立相应处理时间的空白对照组,应用RT-PCR方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA的表达。结果1.RT-PCR方法证实在3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中均有AChE、ChAT、AChR α7的mRNA表达。2.给予不同剂量的尼古丁和氯化胆碱,干预作用不同时间,3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达水平与相应的空白对照组比较均呈剂量依赖性升高(P<0.05或P<0.01),但随干预作用时间延长,这种剂量依赖性上调效应减弱。二种激动剂以氯化胆碱的剂量依赖性上调效应更明显。而相同剂量下不同作用时间的处理组间无统计学差异(Pa>0.05)。3.拮抗剂甲基牛扁亭碱对3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达则呈明显的剂量依赖性抑制作用(P<0.05或P<0.01)。结论3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中存在非神经元型胆碱能系统,其中nAChR α7调节脂肪因子AM mRNA的表达,脂肪组织中非神经元型胆碱能系统的重要组分nAChR α7可能在肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢相关疾病的病理生理过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 非神经元型胆碱能系统 烟碱样乙酰胆碱受体α7 肾上腺髓质素 3T3-L1脂肪细胞 肥胖 胰岛素抵抗
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煤炭标准物质GBW11104对人肺腺癌A549细胞的毒性作用 被引量：1
8
作者 史新琛 徐海明 +3 位作者 郝艳星 张映驰 张鹏举 田大年 《宁夏医科大学学报》 2021年第6期639-643,共5页
目的以体外培养的人肺腺癌A549细胞为靶细胞,探讨煤炭标准物质GBW11104对氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱受体的影响。方法将A549细胞暴露于不同浓度的GBW11104,染毒时长为24 h... 目的以体外培养的人肺腺癌A549细胞为靶细胞,探讨煤炭标准物质GBW11104对氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱受体的影响。方法将A549细胞暴露于不同浓度的GBW11104,染毒时长为24 h,通过CCK-8实验测定细胞存活率。随后选择对细胞活力无影响的剂量进行暴露实验,暴露结束后(24 h)通过比色法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的表达水平,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)方法测定白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,使用改良Ellman方法测定细胞中的AChE活性,通过Real-time PCR法测定乙酰胆碱受体CHRNA9 mRNA的表达水平。结果50、100、200μg·mL^(-1) GBW11104刺激细胞24 h后,对细胞存活率无影响(P均>0.05)。与对照组相比,100μg·mL^(-1)暴露组SOD活性降低了15.4%(P<0.05)。暴露后各剂量组MDA水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。与对照组相比,100、200μg·mL^(-1)暴露剂量下IL-6水平分别升高了74.5%和77.9%(P均<0.05)。与对照组相比,100μg·mL^(-1)暴露组AChE活性降低了12.2%(P<0.05)。50、100、200μg·mL^(-1)暴露剂量下细胞内CHRNA9 mRNA表达水平分别相当于对照组的231%、167%和71%(P均<0.05)。结论煤炭标准物质GBW11104暴露对人肺腺癌A549细胞有一定的毒性作用,具体表现为导致氧化应激及炎性反应,同时影响非神经元型胆碱能系统关键分子AChE及乙酰胆碱受体的水平。 展开更多
关键词 煤炭标准物质 氧化应激 炎症细胞因子 非神经元型胆碱能系统 A549细胞
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二氧化硅对人肺腺癌A549细胞的毒性作用 被引量：1
9
作者 张映驰 吴梦宇 +3 位作者 李洁 单婧 史新琛 徐海明 《宁夏医科大学学报》 2022年第4期413-416,共4页
目的探讨二氧化硅对人肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌A549细胞的毒性作用。方法将A549细胞暴露于二氧化硅中24 h,观察二氧化硅对A549细胞内氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子的影响,采用化学比色法测定超氧化物... 目的探讨二氧化硅对人肺泡Ⅱ型上皮细胞来源的肺腺癌A549细胞的毒性作用。方法将A549细胞暴露于二氧化硅中24 h,观察二氧化硅对A549细胞内氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子的影响,采用化学比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平,采用酶联免疫吸附方法(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平,使用改良Ellman法测定AChE酶活性,使用Real-time PCR法测定乙酰胆碱受体mRNA表达水平。结果CCK-8检测结果表明,1、2、4、8μg·cm^(-2)的二氧化硅刺激A549细胞24 h后,对细胞存活率均无影响(P均>0.05)。生化检测结果表明,与对照组相比,4、8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组SOD活性下降、IL-6水平升高,8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组TNF-α水平升高(P均<0.05);与对照组相比,8μg·cm^(-2)二氧化硅暴露组AChE酶活性、CHRM5及CHRNA7 mRNA表达水平均降低,CHRNA9 mRNA表达水平升高(P均<0.05)。结论二氧化硅暴露对A549细胞的毒性作用主要表现为氧化-抗氧化失衡、引发炎性反应和改变AChE酶活性及乙酰胆碱受体mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 二氧化硅 氧化应激 炎性细胞因子 非神经元型胆碱能系统 A549细胞
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α7 nAChR在上皮组织的表达及其功能的研究进展 被引量：1
10
作者 安静 邬礼政 +1 位作者 周志斐 王小竞 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第6期1174-1176,共3页
α7 nAChR是配体门控离子通道蛋白超家族的典型代表,烟碱型乙酰胆碱受体的一个重要亚型,是复杂的五聚体跨膜蛋白,介导Na+、Ca2+流入,K+流出,尤以对Ca2+通透性高。α7 nAChR分布广泛且功能多样,不仅分布于中枢和外周神经系统,介导神经元... α7 nAChR是配体门控离子通道蛋白超家族的典型代表,烟碱型乙酰胆碱受体的一个重要亚型,是复杂的五聚体跨膜蛋白,介导Na+、Ca2+流入,K+流出,尤以对Ca2+通透性高。α7 nAChR分布广泛且功能多样,不仅分布于中枢和外周神经系统,介导神经元的快速突触传递,其在许多非神经元细胞和组织中亦有表达,包括内皮细胞,支气管上皮细胞,皮肤角蛋白细胞,膀胱上皮细胞,血管平滑肌等,并参与其功能调节及功能障碍相关疾病的病理生理过程,如可调节细胞质运动和细胞间黏附,细胞增殖,血管生成以及肿瘤的侵袭和迁移。本文主要介绍烟碱型乙酰胆碱受体α7亚型在不同胚层来源的上皮组织细胞中的表达及其功能特征,以期通过激活或抑制α7 nAChR的表达来降低与其密切相关疾病的发生率。 展开更多
关键词 非神经性胆碱能系统 烟碱型乙酰胆碱受体 α7 NACHR 上皮细胞 功能特征
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