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表达NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体的构建 被引量：2
1
作者 苏春霞 张彦明 +2 位作者 张雪莲 徐学清 陈溥言 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第1期1-4,共4页
　将新城疫病毒(NDV)F48E9株融合蛋白(F)基因1700bp克隆到真核表达载体pIRES中,构建成表达F基因的载体pIRESF,然后将包含F基因及其上游的内含子和下游的polyA的2900bpDNA片段再克隆入包含gB启动子的SK载体中,并使其克隆到gB启动子600bp... 　将新城疫病毒(NDV)F48E9株融合蛋白(F)基因1700bp克隆到真核表达载体pIRES中,构建成表达F基因的载体pIRESF,然后将包含F基因及其上游的内含子和下游的polyA的2900bpDNA片段再克隆入包含gB启动子的SK载体中,并使其克隆到gB启动子600bp的下游,最后将包含gB启动子和F基因表达盒3500bp克隆到包含MDVCVI988非必须片段US10的载体SK中。该研究为进一步在细胞中转染并获得表达F基因的MDVCVI988重组病毒奠定了基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 马立克氏病病毒cvi988转移质粒载体
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含NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体的真核表达
2
作者 苏春霞 苏鑫铭 +3 位作者 张彦明 曹瑞兵 周斌 陈溥言 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期59-62,共4页
为进一步提高重组病毒的表达水平,用构建的含gB启动子和NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体pUS10F转染293T细胞,通过PCR和接免疫荧光(IFA)法研究了其在真核中的表达,并确定最佳的转染条件。结果表明,真核细胞中带有F基因,转移... 为进一步提高重组病毒的表达水平,用构建的含gB启动子和NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体pUS10F转染293T细胞,通过PCR和接免疫荧光(IFA)法研究了其在真核中的表达,并确定最佳的转染条件。结果表明,真核细胞中带有F基因,转移质粒载体已经进入细胞DNA;转染转移质粒载体 pUS10F后的293 T细胞所表达的NDV F基因产物抗原性较好,能够与抗NDV的标准血清反应。确定的最佳转染条件为:DNA 3μg／mL,转染后48 h外源基因在细胞中的表达量最高,在6孔板和96孔板中细胞数量分别以 2×105／孔和1×101／孔的转染效果最好。 展开更多
关键词 畜禽疫病 新城疫病毒 F基因 马立克氏病病毒cvi988转移质粒载体
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