connexin43基因体外转染大鼠L6骨骼肌成肌细胞的研究 被引量：3

1

作者 王多 张雷 +3 位作者 邵素霞 吕萍 张金平 崔轶 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1821-1823,共3页

目的将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检... 目的将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检测。结果两个阳性克隆组Cx43蛋白表达均明显高于对照组。结论获得的两个持续高表达connexin43蛋白的细胞株可用于进行移植细胞之间及移植细胞与宿主细胞之间能否形成良好的电偶联的研究。 展开更多

关键词 CONNEXIN43 骨骼肌成肌细胞 基因表达 转染 细胞克隆

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犬骨骼肌成肌细胞体外分离、纯化及培养方法改良探索 被引量：3

2

作者 苏冠华 刘启云 +4 位作者 卢永昕 米少华 孙雨霏 刘晓明 帅欣欣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期257-259,共3页

目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代... 目的:探讨犬骨骼肌成肌细胞(SkMs)体外分离、纯化及培养方法的改良并研究其生物学特性。方法:采用机械分离结合Ⅱ型胶原酶、中性蛋白酶双酶一步消化法分离犬骨骼肌成肌细胞,经差速贴壁法纯化后,在骨骼肌细胞生长培养基(SKGM)中进行原代和传代培养,免疫细胞化学染色鉴定。结果:改良后的培养方法适于获取犬骨骼肌成肌细胞,SKGM培养基适于犬骨骼肌成肌细胞的体外培养。SkMs在细胞密集或低血清分化培养基作用下可融合成肌管。结蛋白(desmin)单克隆抗体(mAb)细胞化学染色鉴定SkMs呈阳性,纯度在90%以上。结论:通过改良后的双酶一步消化法获得的SkMs在合适的培养条件下能够增殖、分化并保持其生物学特性,为其在基因治疗和组织工程中的应用奠定了基础。 展开更多

关键词 犬 骨骼肌成肌细胞 细胞培养 生物学特性

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经冠脉注射法移植成年犬自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效研究 被引量：4

3

作者 窦克非 杨跃进 +6 位作者 杨伟宪 王清峙 孟亮 阮英茆 陈纪林 高润霖 陈在嘉 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2005年第1期392-394,共3页

目的观察经冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效。方法以改良成年犬骨骼肌成肌细胞培养方法进行细胞分离及扩增;结扎冠状动脉前降支中段,建立急性心肌梗死模型;分为冠脉内注射对照及冠脉内成肌细胞注射组,每... 目的观察经冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞治疗急性心肌梗死的疗效。方法以改良成年犬骨骼肌成肌细胞培养方法进行细胞分离及扩增;结扎冠状动脉前降支中段,建立急性心肌梗死模型;分为冠脉内注射对照及冠脉内成肌细胞注射组,每组8只;冠状动脉结扎前、后及4周时测定左室功能指标、4周时行超声心动图检查。结果自体骨骼肌成肌细胞经冠脉注射移植组术后4周CO比对照组显著增加(P<0.05)且比冠脉结扎后显著升高(P<0.05);术后4周时LVEF和SV比对照组上升21.1%-31.4%(P均>0.05)。结论经冠脉内注射移植自体骨骼肌成肌细胞可能提高急性心肌梗死后收缩功能。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 移植 经冠脉注射 收缩功能

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外源性1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞DNA合成的影响 被引量：2

4

作者 于欢 熊建军 +2 位作者 陈培良 周师洁 李卫东 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期423-427,共5页

目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入... 目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3 H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成;进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响。结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成。100～1 000nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3%～50.7%(P<0.01),并与剂量呈正相关。该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断。S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P<0.01),500和1 000nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8%(P<0.05)和26.5%(P<0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体。该促进作用可被DMS和HACPT所阻断。结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多。 展开更多

关键词 1-磷酸神经鞘氨醇(S1P) 磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK) 骨骼肌成肌细胞 DNA合成 大鼠

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骨骼肌成肌细胞移植对慢性心衰犬血液动力学的影响 被引量：2

5

作者 李冬云 范利 +3 位作者 何昆仑 刘宏斌 范明 刘淑红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期475-477,共3页

目的观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬血液动力学的影响。方法19只慢性心衰犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):注射等量生理盐水。术前及术后5周行血液动力学检查,病... 目的观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬血液动力学的影响。方法19只慢性心衰犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):注射等量生理盐水。术前及术后5周行血液动力学检查,病理组织标本行Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色。结果(1)术后5周,实验组dP/dtmax、MAP、LVSP明显升高(P<0.05),LVEDP明显下降(P<0.05),而对照组上述指标无显著性差异(P>0.05);(2)实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的血液动力学有明显改善作用。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 动物模型 充血性心力衰竭 细胞移植 血液动力学

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黄芪多糖对骨骼肌成肌细胞增殖作用的研究 被引量：4

6

作者 邓聪 杨志敏 +4 位作者 徐福平 孙玉姣 陈玉状 赖艳娴 岑美婷 《中医药信息》 2019年第5期4-7,共4页

目的:观察黄芪多糖(APS)对C2C12骨骼肌成肌细胞(成肌细胞)的增殖作用。方法:将成肌细胞接种到96孔培养板,APS分为0.1、0.2、0.4、0.8和1 mg/mL 5组浓度;地塞米松(DEX)分为1、10、100和1 000μM 4组浓度,培养12 h、24 h,MTT法检测计算增... 目的:观察黄芪多糖(APS)对C2C12骨骼肌成肌细胞(成肌细胞)的增殖作用。方法:将成肌细胞接种到96孔培养板,APS分为0.1、0.2、0.4、0.8和1 mg/mL 5组浓度;地塞米松(DEX)分为1、10、100和1 000μM 4组浓度,培养12 h、24 h,MTT法检测计算增殖率和抑制率。根据上述实验确定APS、DEX浓度,再分对照组、DEX组、DEX+APS组,培养24 h,MTT法检测OD值、流式细胞仪检测凋亡率、光镜检测肌管横径。结果:APS在0.6 mg/mL浓度以下对成肌细胞有增殖作用(P<0.05),并在0.2 mg/mL达到峰值。100μM浓度以上DEX对成肌细胞有抑制作用(P<0.05)。用100μM DEX建立成肌细胞萎缩模型,给予0.2 mg/mL APS干预后,细胞OD值和肌管横径均升高(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05)。结论:APS对成肌细胞有良好的增殖作用,100μM DEX可作为成肌细胞萎缩模型造模有效浓度。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 黄芪多糖 地塞米松 肌肉减少症 衰老

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经冠状动脉注射法移植成年犬自体骨骼肌成肌细胞于急性心肌梗死区的病理研究 被引量：1

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作者 窦克非 杨跃进 +6 位作者 杨伟宪 邱洪 田毅 阮英茆 陈纪林 高润霖 陈在嘉 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第1期54-56,共3页

目曲观察冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞到无再灌注急性心肌梗死区后的生长分化特点。方法结扎犬冠状动脉前降支中段，建立急性心肌梗死模型；杂种成年犬10只，分为对照组和经冠状动脉注射移植组．各5只。经梗死相关冠状动脉... 目曲观察冠状动脉内注射法移植自体骨骼肌成肌细胞到无再灌注急性心肌梗死区后的生长分化特点。方法结扎犬冠状动脉前降支中段，建立急性心肌梗死模型；杂种成年犬10只，分为对照组和经冠状动脉注射移植组．各5只。经梗死相关冠状动脉内注射自体骨骼肌成肌细胞悬液10ml（1．0—1．4×10^8个）或等量生理盐水；4周后通过HE染色、唧染色、骨骼肌特异性慢肌球蛋白抗体免疫组织化学染色和透射电镜评价移植细胞病理转归。结幂经冠状动脉内注射移植自体骨骼肌成肌细胞4周后，透射电镜及HE染色下可在梗死区内找到新生幼稚肌源性细胞存在，唧染色证实有新生的横纹肌组织形成，骨骼肌特异性慢肌球蛋白抗体免疫组织化学染色发现有骨骼肌源性的成熟肌组织存在且新生肌组尘只排列较分散。结论通过经梗死相关冠状动脉注射将自体骨骼肌成肌细胞移植到急性心肌梗死区后能形成成熟的肌组织。 展开更多

关键词 心肌梗塞 骨骼肌成肌细胞 细胞移植 注射 动脉内 冠状血管

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骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬左心室功能的影响 被引量：1

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作者 李冬云 范利 +5 位作者 何昆仑 刘宏斌 张波 王亮 张今尧 刘涛 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2009年第6期468-471,共4页

目的:观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及左心室功能的影响。方法:19只慢性心力衰竭犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):开胸心肌内注射等量生理盐水。移... 目的:观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及左心室功能的影响。方法:19只慢性心力衰竭犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):开胸心肌内注射等量生理盐水。移植前及移植后5周行超声心动图检查,病理组织标本行Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色。结果:①移植后较移植前,实验组收缩末期心室腔面积(ESA)、舒张末期心室腔面积(EDA)均明显下降(P<0.05),射血分数显著升高(P<0.05),差异有统计学意义;而对照组ESA和EDA在移植前、移植后差异无统计学意义(P>0.05);②实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论:自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及功能有明显改善作用。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 充血性心力衰竭 细胞移植 左心室功能

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SD乳鼠离体骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的初步研究 被引量：2

9

作者 赖颢 徐德民 +2 位作者 虞勇 王春生 王克强 《中国临床医学》 2009年第2期180-183,共4页

目的:探寻共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学证据。方法:将鼠心肌细胞与骨骼肌成肌细胞体外共培养,于第2、4、7、14天免疫组化染色钙粘素(Cadherin)、细胞间隙连接蛋白73(Connexin43)、神经细胞粘附分子(NCAM)3种蛋白,... 目的:探寻共同培养的骨骼肌成肌细胞与心肌细胞间连接的形态学证据。方法:将鼠心肌细胞与骨骼肌成肌细胞体外共培养,于第2、4、7、14天免疫组化染色钙粘素(Cadherin)、细胞间隙连接蛋白73(Connexin43)、神经细胞粘附分子(NCAM)3种蛋白,并行定量RT-PCR检查分组比较分析;于第4、7、10、14天透射电镜观察。结果:共同培养物中的骨骼肌成肌细胞表达Connexin43,且随时间延长而增加;Cadherin表达增加不明显;NCAM含量维持在较低水平,至2周时才表达较多;透射电镜下观察到两者间存在类似于缝隙连接的连接。结论:与心肌细胞共培养后骨骼肌成肌细胞融合、成熟延迟,Connexin43表达增多;两者间确有形成类似于缝隙连接的物质基础并可形成连接。 展开更多

关键词 心肌细胞 骨骼肌成肌细胞 连接

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骨骼肌成肌细胞移植治疗顽固性心力衰竭 被引量：1

10

作者 赵迎新 张维君 周玉杰 《北京生物医学工程》 2004年第1期75-77,72,共4页

关键词 骨骼肌成肌细胞移植 治疗 顽固性心力衰竭 组织学表现 电生理学表现

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骨骼肌成肌细胞移植治疗急性心肌梗死的研究进展 被引量：1

11

作者 刘琦 孙晓薇 杜文娟 《国际心血管病杂志》 2015年第2期79-81,93,共4页

骨骼肌成肌细胞具有来源广泛、易于获得,自体移植不受供体来源限制,增殖能力及抗缺血、缺氧能力强大,易在梗死区内存活等多种优点,是干细胞治疗的重要来源。该文主要阐述骨骼肌成肌细胞移植治疗急性心肌梗死的研究进展。

关键词 骨骼肌成肌细胞 干细胞 移植 急性心肌梗死

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不同数量大鼠L6骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死疗效的影响

12

作者 赵静 张雷 +2 位作者 邵素霞 张金平 赵春芳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期990-991,共2页

关键词 细胞移植 大鼠 骨骼肌成肌细胞 心肌梗死 心功能

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Wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠骨骼肌成肌细胞的促分化作用

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作者 周小鸥 赵勇 +4 位作者 徐良贤 李兴暖 陈培良 邹恒 于欢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期717-720,共4页

目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通... 目的观察wortmannin和U0126抑制胰岛素对大鼠成肌细胞向成熟肌细胞分化作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,用含不同浓度胰岛素的DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法和Western blot法检测生肌素(myogenin)表达。用磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)特异性抑制剂wortmannin和MEK特异性抑制剂U0126干预后,观察胰岛素对骨骼肌成肌细胞分化的影响。结果胰岛素能明显促进骨骼肌成肌细胞形成肌小管,诱导2 d开始有肌管形成并逐渐增多到7 d达到高峰;胰岛素促进骨骼肌成肌细胞的生肌素阳性细胞核和生肌素蛋白表达增多,而wortmannin和U0126能下调胰岛素的这种作用。结论 Wortmannin和U0126可阻断胰岛素促进骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化,使肌管生成减少,生肌素表达下调。 展开更多

关键词 WORTMANNIN U0126 胰岛素 骨骼肌成肌细胞 分化

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大鼠骨骼肌成肌细胞与乳鼠心肌细胞共培养对缝隙连接蛋白43表达的影响

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作者 刘丽霞 邵素霞 +2 位作者 张雷 陈红霞 赵春芳 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期489-493,共5页

目的观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用。方法将乳鼠心... 目的观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用。方法将乳鼠心肌细胞与4',6-二脒基-2-苯基吲哚标记的大鼠骨骼肌成肌细胞进行共培养,用免疫荧光双标方法检测共培养后两种细胞中Cx43的表达定位;用Western blotting方法检测共培养对成肌细胞中Cx43蛋白表达量的影响及共培养时间对成肌细胞Cx43蛋白表达水平的影响。结果免疫荧光双标结果显示,共培养后两种细胞接触的细胞膜上均有Cx43的表达;Western blotting结果进一步证实,共培养后成肌细胞中Cx43蛋白的表达增多,L6-Cx43细胞中Cx43增多更明显。结论心肌环境能够促进成肌细胞Cx43蛋白的表达,且两种细胞接触是必需的,转染外源性Cx43可以提高这种作用。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 心肌细胞 共培养 缝隙连接蛋白43 缝隙连接 免疫印迹法 大鼠

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1-磷酸神经鞘氨醇对大鼠骨骼肌成肌细胞分化的影响

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作者 于欢 郑美蓉 +2 位作者 余敬谋 陈培良 李卫东 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期6-10,共5页

【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜... 【目的】观察1-磷酸神经鞘氨醇(S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞向成熟肌细胞分化、形成肌管的作用,探索定向诱导肌分化的途径及其分子机制。【方法】分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,含不同浓度S1P的高糖DMEM培养基培养,收集细胞,在相差显微镜和共焦显微镜下观察形态变化,并通过免疫细胞化学方法分别检测成肌细胞分化的早期特异性标志—肌球蛋白和生肌素表达的改变。使用磷酸神经鞘氨醇激酶(SphK)活性抑制剂DMS和HACPT后观察S1P对骨骼肌成肌细胞的生肌素表达的作用。【结果】S1P能明显促进骨骼肌成肌细胞细胞形成肌小管,诱导2～3 d开始有肌管形成,之后肌管越来越多,到6～7 d达高峰;同对照组相比随S1P浓度增高,细胞核生肌素阳性率逐渐增高(P<0.01);SphK活性抑制剂抑制S1P促进骨骼肌成肌细胞生肌素阳性率的增高(P<0.01)。【结论】体外S1P可能通过提高SphK活性调节成肌细胞向成熟肌细胞分化。 展开更多

关键词 1-磷酸神经鞘氨醇 磷酸神经鞘氨醇激酶 骨骼肌成肌细胞 分化 肌管

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microRNA-214对H_(2)O_(2)诱导的L6骨骼肌成肌细胞凋亡的影响

16

作者 陈炜 邵素霞 +3 位作者 张雷 张亚楠 郭浅妤 赵春芳 《解剖学杂志》 CAS 2021年第S01期220-220,共1页

探讨microRNA-214对H_(2)O_(2)诱导的L6骨骼肌成肌细胞凋亡的影响作用及其潜在机制。本实验首先检测了H_(2)O_(2)对microRNA-214在L6骨骼肌成肌细胞中表达的影响,qPCR结果显示H_(2)O_(2)以剂量和时间依赖性方式上调microRNA-214的表达... 探讨microRNA-214对H_(2)O_(2)诱导的L6骨骼肌成肌细胞凋亡的影响作用及其潜在机制。本实验首先检测了H_(2)O_(2)对microRNA-214在L6骨骼肌成肌细胞中表达的影响,qPCR结果显示H_(2)O_(2)以剂量和时间依赖性方式上调microRNA-214的表达。然后,通过上调或下调microRNA-214,采用Western bolt、qPCR和流式等技术检测microRNA-214对H_(2)O_(2)诱导的L6骨骼肌成肌细胞凋亡率及线粒体凋亡信号通路相关因子的影响。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 相关因子 时间依赖性 MICRORNA 凋亡 潜在机制 线粒体

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成年犬骨骼肌成肌细胞的培养纯化、鉴定及生长特性的研究

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作者 汪进益 范慧敏 +3 位作者 刘中民 马亮 丁一 李杨 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2006年第6期69-72,共4页

目的建立简便、有效的成年犬骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblast cells,SMCs)体外分离培养、纯化和鉴定的方法,并观察犬SMCs的生长特性。方法采用机械分解法与IA型胶原酶和胰蛋白酶的二步酶消化法相结合,分离消化法培养获取犬SMCs,用DME... 目的建立简便、有效的成年犬骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblast cells,SMCs)体外分离培养、纯化和鉴定的方法,并观察犬SMCs的生长特性。方法采用机械分解法与IA型胶原酶和胰蛋白酶的二步酶消化法相结合,分离消化法培养获取犬SMCs,用DMEM培养液培养,以Ficoll梯度液纯化,进行Desmin免疫组化鉴定,并观察细胞形态、生长特性。结果犬SMCs培养后经台盼蓝检查成活率达95％以上,在接种后4～5 d增殖达高峰,细胞生长旺盛;Ficoll分离纯化的SMCs纯度较高;Desmin免疫细胞化学染色有97％的SMCs胞浆呈阳性反应。结论改良方法获得的SMCs具有良好的增殖、分化能力;采用Ficoll纯化以血清培养,即可获得高产量高纯度的SMCs。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 细胞培养 纯化 免疫细胞化学 生长特性

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Wnt1增强骨骼肌成肌细胞治疗心肌梗死的功能

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作者 杜文娟 杨艳波 +2 位作者 张希玲 许友升 王世鹏 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2016年第2期103-108,共6页

目的探讨Wnt1基因对骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblasts,SkMs)治疗心肌梗死(myocardial infarction,MI)功能的影响及其机制。方法分离培养SkMs,构建p-EGFP-C3-Wnt1真核表达载体并转染SkMs。采用随机数字表法将40只大鼠分为假手术组、MI... 目的探讨Wnt1基因对骨骼肌成肌细胞(skeletal myoblasts,SkMs)治疗心肌梗死(myocardial infarction,MI)功能的影响及其机制。方法分离培养SkMs,构建p-EGFP-C3-Wnt1真核表达载体并转染SkMs。采用随机数字表法将40只大鼠分为假手术组、MI组、p-EGFP-C3转染SkMs心肌移植组、pEGFP-C3-Wnt1转染SkMs心肌移植组,每组10只。MI组大鼠结扎其左冠状动脉前降支建立MI模型;细胞移植组大鼠,建立MI模型后立即于梗死边缘区分4点进行细胞移植。术后4周,心脏超声检测各组鼠心功能;应用激光共聚焦显微镜检测移植细胞存活情况和缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)表达;应用免疫组化检测Sca-1+细胞表达。结果 p-EGFP-C3-Wnt1转染的SkMs心肌移植组移植细胞存活数量、Cx43表达、心脏功能均明显高于p-EGFP-C3转染的SkMs心肌移植组(P<0.01),并在p-EGFPC3-Wnt1转染的SkMs心肌移植大鼠心脏中发现了更多的Sca-1+心肌干细胞(cardiac stem cells,CSCs)。结论过表达Wnt1的SkMs通过促进移植细胞存活,增加心肌Cx43表达、促进Sca-1+CSCs归巢,改善MI大鼠的心脏功能。 展开更多

关键词 骨骼肌成肌细胞 心肌梗死 WNT1 细胞移植 Sca-1+心肌干细胞

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骨骼肌成肌细胞移植治疗心肌梗死的研究进展

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作者 周菲 《心血管病学进展》 CAS 2003年第3期170-172,共3页

通过骨骼肌成肌细胞的移植可修复心肌梗死后的疤痕组织 ,有效防止心力衰竭的发生、发展 。

关键词 骨骼肌成肌细胞移植 治疗 心肌梗死 研究进展 临床应用 生物学特性 心力衰竭

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骨骼肌成肌细胞移植治疗心衰的研究进展 被引量：1

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作者 刘惠 冯津萍 赵炳让 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2005年第1期443-446,共4页

心肌细胞移植技术作为一种全新的治疗心衰的方法已越来越引起人们的兴趣。其基础假设为:心衰的发生发展与心肌细胞不可逆的丢失有直接关系;可通过新的可收缩细胞来代替“死亡”的心肌细胞以提高心功能。出于试验的可行性,自体骨骼肌成... 心肌细胞移植技术作为一种全新的治疗心衰的方法已越来越引起人们的兴趣。其基础假设为:心衰的发生发展与心肌细胞不可逆的丢失有直接关系;可通过新的可收缩细胞来代替“死亡”的心肌细胞以提高心功能。出于试验的可行性,自体骨骼肌成肌细胞被首先应用于临床试验,但其他细胞也同样受到重视,尤其是骨髓间充质干细胞。虽然大量的动物试验证实心肌细胞移植技术可提高心功能,但仍存在一些关键问题有待解决:(1)合适的供体细胞类型;(2)移植细胞提高心功能的机制;(3)细胞存活的最佳条件;(4)细胞移植在治疗非缺血性心衰方面的潜在益处等。在不久的将来,会有更多的试验用以进一步研究和完善心肌细胞移植技术,以提高心衰患者的心功能,改善其预后。 展开更多

关键词 心肌细胞移植 心衰 骨骼肌成肌细胞

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