凝胶排阻色谱-多角度激光散射法测定破伤风类毒素相对分子质量分布 被引量：1

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作者 马庆华 朱向国 +2 位作者 郑佳 刘刚 杜琳 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期739-742,共4页

为更好地表征精制破伤风类毒素(精制TT)相对分子质量分布的情况,利用凝胶排阻色谱与多角度激光散射仪联用法(SEC-MALS法)对精制破伤风类毒素分子质量及其分布进行了初步探索。通过优化实验参数,确定了最佳实验条件:流动相为0.2 mol/L磷... 为更好地表征精制破伤风类毒素(精制TT)相对分子质量分布的情况,利用凝胶排阻色谱与多角度激光散射仪联用法(SEC-MALS法)对精制破伤风类毒素分子质量及其分布进行了初步探索。通过优化实验参数,确定了最佳实验条件:流动相为0.2 mol/L磷酸盐缓冲液-1%异丙醇(pH=7.0)(PBS),样品浓度为2.0 mg/mL,柱温为25℃,流速为0.5mL/min。与聚丙烯酰胺凝胶电泳法相比,SEC-MALS法能够提供准确的精制TT单体分子质量测量值。此外,SEC-MALS法能够得到质均相对分子质量Mw、数均相对分子质量Mn以及二者的比值——多分散性Mw/Mn等重要物理参数,可以更加准确地反映精制TT溶液中单聚体、二聚体、多聚体分布状态,可以量化分子大小批间差异情况,有利于评价精制TT生产过程中的工艺调整或变化对蛋白单体收率的影响,当作为多糖蛋白结合疫苗常用的载体蛋白时,有利于以准确可量化的质量参数参与结合物的关键工艺控制。 展开更多

关键词 破伤风类毒素 相对分子质量分布 凝胶排阻色谱与多角度激光散射仪联用法

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脑膜炎球菌疫苗多糖及多糖蛋白结合物分子量尺寸排阻色谱-多角度激光光散射联用检测方法的建立及验证

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作者 邹剑 杨蕾 +7 位作者 李茂光 叶强 焦旭雯 梁蔚阳 郭中平 马晶 姚宇峰 李炎 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第10期1230-1238,共9页

目的建立尺寸排阻色谱-多角度激光光散射(size exclusion chromatography-multiangle laser-light scattering,SEC-MALLS)联用测定脑膜炎球菌多糖及多糖蛋白结合物分子量的方法,并进行验证及初步应用,以期进一步提高该品种质量控制水平... 目的建立尺寸排阻色谱-多角度激光光散射(size exclusion chromatography-multiangle laser-light scattering,SEC-MALLS)联用测定脑膜炎球菌多糖及多糖蛋白结合物分子量的方法,并进行验证及初步应用,以期进一步提高该品种质量控制水平。方法建立SEC-MALLS联用方法检测脑膜炎球菌多糖及多糖蛋白结合物分子量,色谱条件:流动相为0.9%氯化钠溶液,色谱分离柱为Shodex OHpak LB-806 HQ(300 mm×8.0 mm,13μm),流速为0.5 mL/min,柱温为35℃。对方法的系统适用性、准确性、精密性、耐用性进行验证,并用该方法检测不同厂家来源的样品,同时与现行药典质量标准方法进行相关性分析。结果普鲁兰糖标准品除STD P-100以外,STD P-50 STD P-800重均分子量(Mw)实测值与标示值相对误差和精密度小于5.0%,可作为系统适应性样品;重复性、中间精密度RSD均不大于5.0%。多糖及多糖蛋白结合物在配制完成48 h内稳定性良好。A、C、Y、W135群多糖平均Mw分别为257.5、377.3、399.7、305.5 kDa;A、C群多糖蛋白结合物分别为6438、23360 kDa。71批多糖样品中有5批次A、C群结果超趋势,其余批次批内和批间差异均在均值±3 SD的范围以内。SEC-MALLS法与现行药典质量标准方法测定结果除Y群多糖分配系数(KD)与Mw呈一定的负相关性外,两种方法在其余多糖及多糖蛋白结合物中相关性并不显著。结论SEC-MALLS方法能直接测定脑膜炎球菌疫苗多糖及多糖蛋白结合物分子量,具有操作简单、快速、准确、能一定程度反映分子结构信息等优点,有利于提升该关键质量参数的质量控制水平。 展开更多

关键词 多角度激光光散射 尺寸排阻色谱 凝胶渗透色谱 脑膜炎球菌多糖 多糖蛋白结合物 重均分子量 分子构象和粒径

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应用高效体积排阻色谱偶联多角度激光散射鉴定猪圆环病毒2型灭活疫苗及病毒样颗粒疫苗抗原 被引量：5

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作者 徐嫄 杨延丽 +10 位作者 邹兴启 李翠 朱元源 秦义娴 李琰 盛亚男 刘业兵 彭国瑞 徐小艾 张松平 赵启祖 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2948-2958,共11页

本文旨在建立基于高效体积排阻色谱(high-performance size-exclusion chromatography,HPSEC)偶联多角度激光散射仪(multi-angle laser light scattering,MALLS)的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗抗原检测方法。以... 本文旨在建立基于高效体积排阻色谱(high-performance size-exclusion chromatography,HPSEC)偶联多角度激光散射仪(multi-angle laser light scattering,MALLS)的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)疫苗抗原检测方法。以纯化的PCV2灭活病毒及病毒样颗粒(virus-like particles,VLP)为参照,对4家生产企业的2种PCV2灭活病毒疫苗(a、b)及VLP疫苗(c、d)破乳后进行HPSEC-MALLS检测及分子量分析;结合PCV2抗原检测卡、Western blotting和透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM),鉴定了特征色谱峰;考察了方法的重复性和检测线性。结果表明,两家企业生产的PCV2灭活病毒疫苗破乳液水相经HPSEC分离,在保留时间约13.3 min处出现抗原特征峰;MALLS计算该色谱峰分子量分别为2.61×10^(6)(±4.34%)Da和2.40×10^(6)(±2.51%)Da。两种VLP疫苗也在13.3 min处出现抗原特征峰,分子量分别为2.09×10^(6)(±2.94%)Da和2.88×10^(6)(±11.85%)Da,接近PCV2的理论分子量;同时在保留时间约11.4 min处也出现色谱峰,经检测分子量为4.37×10^(6)(±0.42%)Da,TEM表征显示为VLP二聚体。取疫苗d和PCV2 VLP纯品进行重复检测,抗原色谱峰面积的RSD(n=3)均小于1.5%,重复性好;将PCV2 VLP纯品梯度稀释检测,VLP及其多聚体的色谱峰面积与浓度均呈良好的线性关系,R2分别为0.999及0.997,能够满足定量及多聚体含量分析。该方法有望成为一种准确、高效的PCV2疫苗的体外评价方法,用于质量评价与提升。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 病毒样颗粒 疫苗 高效体积排阻色谱 多角度激光散射

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高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射仪联用测定右旋糖酐70原料药的分子质量 被引量：4

4

作者 阚微娜 滕艳坤 杨宏伟 《中国药房》 CAS CSCD 2014年第9期843-845,共3页

目的:建立测定右旋糖酐70原料药的分子质量的方法。方法:采用不需要对照品的高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射仪(HPSEC-RID-MALLS)联用法,另与《中国药典》方法即HPSEC-RID法(采用3种来源对照品)测定3批样品重均分子质量... 目的:建立测定右旋糖酐70原料药的分子质量的方法。方法:采用不需要对照品的高效体积排阻色谱-示差折光检测器-多角激光光散射仪(HPSEC-RID-MALLS)联用法,另与《中国药典》方法即HPSEC-RID法(采用3种来源对照品)测定3批样品重均分子质量(Mw)的结果进行比较。两种方法色谱柱均为TSK-GEL G4000SWXL凝胶色谱柱,流动相分别为0.2 mol/L氯化钠水溶液和0.71%硫酸钠水溶液(均含0.02%叠氮化钠)。结果:采用HPSEC-RID-MALLS法与采用其中2种来源对照品的HPSEC-RID方法测得的样品Mw结果相近。结论:HPSEC-RID-MALLS法不需要对照品,可直接测定样品的分子质量,方法更简便、快速,且结果准确。 展开更多

关键词 高效体积排阻色谱 示差折光检测器 多角激光光散射仪 右旋糖酐70 分子质量

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SEC-RI-MALLS和SEC-RID测定丙交酯乙交酯共聚物相对分子质量及相对分子质量分布的方法比较

5

作者 王保成 张晓艳 +6 位作者 周小华 赵恂 马聪玉 高正松 施海蔚 袁耀佐 杭太俊 《中国药品标准》 2025年第1期110-116,共7页

目的:建立体积排阻色谱-示差折光-多角度激光光散射检测器联用(SEC-RI-MALLS)法与体积排阻色谱-示差折光检测器(SEC-RID)法测定丙交酯乙交酯共聚物(Poly(Lactide-co-Glycolide Acid),PLGA)相对分子质量及相对分子质量分布,并对两种方法... 目的:建立体积排阻色谱-示差折光-多角度激光光散射检测器联用(SEC-RI-MALLS)法与体积排阻色谱-示差折光检测器(SEC-RID)法测定丙交酯乙交酯共聚物(Poly(Lactide-co-Glycolide Acid),PLGA)相对分子质量及相对分子质量分布,并对两种方法的测定结果进行比较。方法:采用SEC-RI-MALLS法时,以四氢呋喃为流动相,以Shodex GPC KF-803L为色谱分离柱,以四氢呋喃为流动相,流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃,进样体积为100μL。采用SEC-RID法时,以四氢呋喃为流动相,以Agilent PLgel 5μm MIXD-D为色谱柱,以四氢呋喃为流动相,流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃,示差折光检测器温度为35℃,进样体积为20μL,使用Agilent公司GPC软件计算相对分子质量及相对分子质量的分布。对新建立的方法进行方法学验证,并采用新建方法对13批样品的相对分子质量和相对分子质量分布进行测定。结果:SEC-RI-MALLS法的精密度、准确性、稳定性、重复性试验RSD分别为1.35%、1.58%、1.53%、1.26%;SEC-RID法线性良好(r^(2)=0.9999),精密度、准确性、稳定性、重复性试验(n=6)RSD分别为2.05%、1.62%、1.30%、2.97%。SEC-RI-MALLS法的测定值比SEC-RID法的小;将SEC-RI-MALLS法测定值乘以转换系数1.5后,与SEC-RID法的测定值进行配对t检验,结果显示两种方法无显著性差异。结论:建立的两种方法均可用于PLGA相对分子质量及相对分子质量分布的测定,在实际应用过程中,可根据不同的应用场景选择适宜的方法。 展开更多

关键词 多角度激光光散射 体积排阻色谱 示差折光检测器 丙交酯乙交酯共聚物 相对分子质量及相对分子质量分布

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HPSEC-ELSD法同时测定白及多糖的分子量和含量 被引量：12

6

作者 王川 张燕 +4 位作者 李楠 李雅丽 刘江云 蔡培烈 郝丽莉 《中国药房》 CAS 北大核心 2018年第9期1198-1201,共4页

目的:建立同时测定白及多糖的分子量及其含量的方法。方法:采用高效分子排阻色谱-蒸发光散射检测(HPSEC-ELSD)法。色谱柱为TSK-GEL G4000 PWXL,流动相为纯水,流速为0.6 m L/min,柱温为30℃,进样量为20μL,采用蒸发光散射检测器。采用建... 目的:建立同时测定白及多糖的分子量及其含量的方法。方法:采用高效分子排阻色谱-蒸发光散射检测(HPSEC-ELSD)法。色谱柱为TSK-GEL G4000 PWXL,流动相为纯水,流速为0.6 m L/min,柱温为30℃,进样量为20μL,采用蒸发光散射检测器。采用建立的方法测定3批白及多糖的分子量及其含量。结果:白及多糖的重均分子量测定线性范围为24.17~178.00 k D(R^2=0.985 5),BT07含量测定线性范围为0.508 0~5.080 mg/m L(R^2=0.998 4),检测限、定量限分别为0.116 5、0.274 0 mg/m L,精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<2%(n=6或n=7);白及多糖样品含量测定平均加样回收率为99.16%~100.20%(RSD=0.39%~0.64%,n=9)。3批样品的平均保留时间为14.28 min(RSD=4.35%,n=3),平均重均分子量为23.54 k D(RSD=3.78%,n=3),多分散系数(D,MW/Mn)范围为1.463~1.578,样品平均含量为93.4%(RSD=4.22%,n=3)。结论:建立的HPSEC-ELSD法操作简便、快速,结果准确可靠,可同时测定白及多糖的分子量和含量。 展开更多

关键词 白及 多糖 高效分子排阻色谱-蒸发光散射检测法 分子量 含量

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SEC-MALLS法测定羟乙基淀粉130/0.4重均分子量及分子量分布 被引量：6

7

作者 宋彦会 杜中海 +2 位作者 于鹏 任传杰 袁洪雨 《齐鲁药事》 2012年第3期155-157,共3页

目的分子排阻色谱与多角度激光光散射联用技术(SEC-MALLS)测定羟乙基淀粉130/0.4重均分子量(Mw)及分子量分布。方法以醋酸盐缓冲液(醋酸钠18.7 g,叠氮钠1.72 g,冰乙酸34.5 mL,加水至5 000 mL)为流动相,流速0.5 mL.min-1,色谱柱:预柱TSKg... 目的分子排阻色谱与多角度激光光散射联用技术(SEC-MALLS)测定羟乙基淀粉130/0.4重均分子量(Mw)及分子量分布。方法以醋酸盐缓冲液(醋酸钠18.7 g,叠氮钠1.72 g,冰乙酸34.5 mL,加水至5 000 mL)为流动相,流速0.5 mL.min-1,色谱柱:预柱TSKgel Guard column pwxl(4 cm×6 mm),分离柱TSKgel G4000 pwxl(30 cm×7.8mm)2根串联,检测器:十八角度激光光散射检测器和示差折光检测器联用。结果三批供试品重均分子量均在110000～150 000,10%大分子部分重均分子量均小于380 000,10%小分子部分重均分子量均大于15 000。结论该方法检测结果准确,重现性好。 展开更多

关键词 羟乙基淀粉 重均分子量 多角度激光光散射 尺寸排阻色谱

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碱性蛋白酶酶解蛋白制备活性肽的质控研究

8

作者 李娟 樊丽 +3 位作者 郭玉杰 周娇娇 张明晶 李春红 《现代农业科技》 2024年第18期141-146,共6页

以胶原蛋白和大豆分离蛋白为主要研究对象,应用体积排阻色谱(SEC)结合多角度激光光散射(MALLS)及示差折光(RI)联用技术对碱性蛋白酶酶解蛋白制备肽段的过程进行了详细分析。在酶解过程中,不同来源的胶原蛋白(牛、鸡)和大豆分离蛋白在分... 以胶原蛋白和大豆分离蛋白为主要研究对象,应用体积排阻色谱(SEC)结合多角度激光光散射(MALLS)及示差折光(RI)联用技术对碱性蛋白酶酶解蛋白制备肽段的过程进行了详细分析。在酶解过程中,不同来源的胶原蛋白(牛、鸡)和大豆分离蛋白在分子量分布、体系的分散度及粒径变化规律上表现出了典型的差异。结果表明,牛胶原蛋白在酶解开始时就迅速被降解产生了大量小分子肽段,鸡胶原蛋白相对于牛胶原蛋白在相同的酶解条件下更难产生小分子肽段,大豆分离蛋白随着酶的加入则是表现出了先聚集再降解的特性。SEC-MALLS技术可以有效把控蛋白酶解的过程以及体系中肽段分子量分布,该技术可以为活性肽产品的开发及品质检测提供依据。 展开更多

关键词 胶原蛋白 大豆分离蛋白 酶解 碱性蛋白酶 体积排阻色谱 多角度激光光散射 肽段 分子量分布

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A群脑膜炎球菌多糖疫苗的分子量分布测定方法的建立

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作者 杨海艳 李世兴 +3 位作者 陈龙 倪叩 焦青贞 王智 《中国处方药》 2024年第11期30-32,共3页

目的 建立高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法(HPSEC-MALLS)测定A群脑膜炎球菌多糖疫苗分子量分布的方法,并对不同批次样品的测定结果进行比较。方法 采用TSK gel G5000PWXL(7.8 mm×300 mm,5μm)凝胶色谱柱,柱温35℃,以0.2 mol/... 目的 建立高效分子排阻色谱-多角度激光光散射法(HPSEC-MALLS)测定A群脑膜炎球菌多糖疫苗分子量分布的方法,并对不同批次样品的测定结果进行比较。方法 采用TSK gel G5000PWXL(7.8 mm×300 mm,5μm)凝胶色谱柱,柱温35℃,以0.2 mol/L氯化钠溶液为流动相,流速0.6 ml/min,多角度激光光散射检测器测定多糖分子量分布。结果 建立的方法精密度、准确度、重复性均良好,5批次样品重均分子量为480 560~512 780 Da。结论 HPSEC-MALLS可以用于A群脑膜炎球菌多糖疫苗的分子量测定,该方法准确度高,操作简便、快捷。 展开更多

关键词 A群脑膜炎球菌多糖疫苗 分子量分布 高效分子排阻色谱 多角度激光光散射

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定向采收‘沪农灵芝1号’高三萜和水溶性多糖原料研究 被引量：2

10

作者 马延梅 周帅 +5 位作者 冯娜 刘艳芳 王金艳 唐庆九 韩伟 张劲松 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期113-122,共10页

采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌... 采用超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS/MS)法和高效排阻色谱-多角度激光散射(HPSEC-MALLS)法检测灵芝(Ganoderma lucidum)‘沪农灵芝1号’不同生长期(接种后2~7个月,分别命名为P1~P6)子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量,并结合子实体和菌基的产量计算三萜和水溶性多糖的产量。结果表明:子实体中灵芝酸C2、G含量在P1、P2期较高,灵芝烯酸B和灵芝酸D、F、DM含量在P2期最高,灵芝酸B、A、S、T和总三萜含量在P1期最高;菌基中灵芝酸C2、A、D、DM和灵芝烯酸B含量在P1期最高,灵芝酸G含量在P 5期最高,灵芝酸B、S含量在P 6期最高,灵芝酸F含量在P 1、P 6期较高,灵芝酸T、总三萜含量在P 5、P 6期较高。子实体中灵芝酸C2、G、B、D、F、DM,灵芝烯酸B,总三萜产量在P2期最高;灵芝酸A产量在P3期最高;灵芝酸S、T产量在P1期最高。菌基中灵芝酸C2、G、B、A、D、F、DM,灵芝烯酸B产量在P1期最高;灵芝酸S、T产量在P2期最高;总三萜产量在P1、P2期较高。子实体和菌基中的水溶性多糖含量和产量均在P1期最高。研究结果将为‘沪农灵芝1号’子实体的定向采收提供科学数据和指导。 展开更多

关键词 灵芝 三萜 多糖 栽培 超高效液相色谱-质谱 高效排阻色谱-多角度激光散射

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大米直链淀粉分子量分布及分子旋转半径的研究 被引量：10

11

作者 李玥 钟芳 麻建国 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期36-41,共6页

为了从大米淀粉中有效的分离出直链淀粉,建立直链淀粉分子量的分析方法,从而得出确切的大米直链淀粉分子结构方面的信息,通过使用流变仪控制大米淀粉的升温糊化过程,用浸出法在不同温度下分离出大米直链淀粉,利用高效液相分子排阻色谱（... 为了从大米淀粉中有效的分离出直链淀粉,建立直链淀粉分子量的分析方法,从而得出确切的大米直链淀粉分子结构方面的信息,通过使用流变仪控制大米淀粉的升温糊化过程,用浸出法在不同温度下分离出大米直链淀粉,利用高效液相分子排阻色谱（HPSEC）与多角度光散射仪（MALLS）及折光检测器（RI）连用系统,分析了大米直链淀粉的分子量分布和分子旋转半径。得到不同品种的大米淀粉中分离出的直链淀粉的重均分子量范围为3.29×10^5～2.75×10^6。研究表明,90℃以上高温不利于用浸出法从直链淀粉含量低的大米淀粉中分离直链淀粉,当温度低于90℃而高于糊化温度时,各个温度下均可用浸出法分离出直链淀粉,得到的直链淀粉具有十分相似的分子量分布、重均分子量和分子旋转半径。该方法是一种简便、快速的分离大米直链淀粉,并测定其分子量的方法,具有较高的准确性。 展开更多

关键词 大米直链淀粉 分子量分布 分子旋转半径 高效液相排阻色谱 多角度光散射仪 折光检测器

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分级醇沉宣木瓜多糖含量、分子量测定和活性初步研究 被引量：22

12

作者 田冰梅 谢晓梅 +3 位作者 沈盼盼 杨沫 张圣龙 唐庆九 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1331-1334,共4页

采用水提取分级醇沉制得宣木瓜多糖,利用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光联用技术(HPSEC-MALLS-RI)分析多糖分子量和分子量分布,用多糖体外刺激巨噬细胞,Griess法检测NO释放量。系列研究旨在... 采用水提取分级醇沉制得宣木瓜多糖,利用苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用高效尺寸排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光联用技术(HPSEC-MALLS-RI)分析多糖分子量和分子量分布,用多糖体外刺激巨噬细胞,Griess法检测NO释放量。系列研究旨在考察宣木瓜多糖含量、分子量和分子量分布以及免疫活性,为宣木瓜多糖研究积累实验资料和科学依据;并为中药多糖研究提供较为简单、系统的方法与思路。结果表明,不同乙醇浓度(φ)沉淀宣木瓜多糖含量的高低顺序是:95%>80%>40%≥60%>20%,95%乙醇可较完全地沉淀多糖;当乙醇浓度从20%上升到95%时,粗多糖纯度由35.1%上升至45.0%。宣木瓜多糖主要有3个色谱峰,不同浓度醇沉的多糖经HPSCE分离后出峰位置和数量没有明显差别,表明它们含有的多糖种类相似;重均分子量(Mw)分别为6.570×104 g·moL-1和1.393×104 g·moL-1以及小于1万未能获得准确值;前两种多糖的分子量分布指数(Mw/Mn)分别是1.336和1.639;本试验中宣木瓜多糖对巨噬细胞Raw264.7产生NO没有明显的促进作用。 展开更多

关键词 宣木瓜多糖 含量 分子量 高效尺寸排阻色谱-多角度激光散射-示差折光 巨噬细胞 NO

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SEC-RI-MALLS测定甘露聚糖肽分子量与分子量分布 被引量：2

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作者 邹剑 杨蕾 +4 位作者 林涛 王觉晓 马晶 陈婕 李炎 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期256-263,共8页

目的:建立尺寸排阻色谱-示差折光-多角度激光光散射检测器联用(size exclusion chromatography-refractive index-multiangle laser light scattering, SEC-RI-MALLS)测定甘露聚糖肽原料药和制剂分子量及分子量分布的方法。方法:采用SEC... 目的:建立尺寸排阻色谱-示差折光-多角度激光光散射检测器联用(size exclusion chromatography-refractive index-multiangle laser light scattering, SEC-RI-MALLS)测定甘露聚糖肽原料药和制剂分子量及分子量分布的方法。方法:采用SEC-RI-MALLS联用技术,以0.05 mol·L^(-1)硫酸钠溶液为流动相,Shodex OHpak SB-804 HQ为色谱分离柱,在流速0.5 mL·min^(-1),柱温35℃的条件下对甘露聚糖肽分子量及其分布进行专属性、准确度、精密度、耐用性方法学验证,并与现行质量标准方法进行比较。结果:片剂辅料淀粉对测定无干扰,右旋糖酐标准品实测值同标示值的准确度相对误差<3.0%;当样品配制浓度为2 mg·mL^(-1)时精密度最好,RSD为0.40%;重现性、耐用性RSD均不大于5.0%。79批次样品采用Shodex OHpak SB-804 HQ色谱柱和TSK-GEL G4000 PWXL色谱柱进行测定,结果无显著性差异。SEC-RI-MALLS法比甘露聚糖肽国家标准方法 (GPC法)的结果平均高19 509 Da,且分子量分布更为集中。结论:SEC-RI-MALLS法无需标准品就能够测定甘露聚糖肽分子量及其分布,结果准确,耐用性好,与现行方法相比,更有利于该品种的安全性、有效性控制。 展开更多

关键词 多角度激光光散射 尺寸排阻色谱 凝胶渗透色谱 甘露聚糖肽 分子量与分子量分布

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玻璃酸钠dn/dc值测定方法研究

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作者 张丽容 宋玉娟 +3 位作者 李京 范慧红 王悦 刘博 《中国药学杂志》 北大核心 2025年第4期407-411,共5页

目的 建立玻璃酸钠(sodium hyaluronate, SH)折光指数增量(dn/dc值)的通用测定方法,为实现SH相对分子质量与相对分子质量分布的准确测定奠定基础。方法 采用不同仪器、流动相和样品对SH的dn/dc值进行研究。结果 SH在0.1 mol·L^(-1... 目的 建立玻璃酸钠(sodium hyaluronate, SH)折光指数增量(dn/dc值)的通用测定方法,为实现SH相对分子质量与相对分子质量分布的准确测定奠定基础。方法 采用不同仪器、流动相和样品对SH的dn/dc值进行研究。结果 SH在0.1 mol·L^(-1)硝酸钠溶液中更稳定,dn/dc值的相对标准偏差(RSD)均小于1.0%(n=3),建立了dn/dc值的准确测定方法。结论 新建测定方法简便、快速、准确,解决了SH的dn/dc值测定困难的问题,也为其他高分子物质相对分子质量与相对分子质量分布的精准测定提供了新的方法。 展开更多

关键词 玻璃酸钠 相对分子质量 分子排阻色谱-多角度激光光散射联用法 折光指数增量 CalypsoⅡ梯度混合仪

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SEC-MALLS法测定普鲁兰糖相对分子质量及分子质量分布 被引量：5

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作者 张卫东 胡川梅 +2 位作者 郑璐侠 邵泓 陈钢 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1213-1217,共5页

目的:建立分子排阻色谱-多角度激光散射(size exclusion chromatography-multiangle laser light scattering,SEC-MALLS)系统测定普鲁兰糖的相对分子质量及分子质量分布的方法。方法:采用2根Shodex SB-806HQ色谱柱(300 mm×7.8 mm,1... 目的:建立分子排阻色谱-多角度激光散射(size exclusion chromatography-multiangle laser light scattering,SEC-MALLS)系统测定普鲁兰糖的相对分子质量及分子质量分布的方法。方法:采用2根Shodex SB-806HQ色谱柱(300 mm×7.8 mm,10μm)串联,以水为流动相,流速0.5 m L·min-1,柱温35℃,检测器为多角度激光散射器(MALLS)和示差折光检测器(refractive intex detector,RID)联用,对普鲁兰糖的相对分子质量及分子质量分布进行测定,并对均方根旋转半径(rg)与样品在溶液中的聚集态进行分析;同时还以传统凝胶渗透色谱(GPC)法对普鲁兰糖的相对分子质量及分子质量分布进行测定,并对2种方法测定的结果进行分析比较。结果:SEC-MALLS法测定普鲁兰糖样品的结果与GPC法测定的结果比较,2种系统测定的重均相对分子质量及分子质量分布结果基本一致,同时测得普鲁兰糖在水溶液中为无规线团构象的线性聚合物。结论:SECMALLS法测定相对分子质量无需分子量标样,可以同时获得样品在溶液中的聚集态和构象信息,可用于普鲁兰糖的质量控制。 展开更多

关键词 普鲁兰糖 分子排阻色谱 凝胶渗透色谱 多角度激光散射 示差折光检测 构象

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应用SEC-UV-MALS-RI技术分析重组腺相关病毒(rAAV)的颗粒滴度和实心率

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作者 李响 史新昌 +3 位作者 王恒 韩春梅 秦玺 周勇 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1840-1846,共7页

目的:建立分子排阻色谱(SEC)串联紫外检测器(UV)、多角度激光散射检测器(MALS)和示差检测器(RI)的方法分析重组腺相关病毒(rAAV)的颗粒滴度和实心率。方法:对rAAV、rAAV空壳对照品和二者混合样品进行SEC-UV-MALS-RI串联分析,流动相为50 ... 目的:建立分子排阻色谱(SEC)串联紫外检测器(UV)、多角度激光散射检测器(MALS)和示差检测器(RI)的方法分析重组腺相关病毒(rAAV)的颗粒滴度和实心率。方法:对rAAV、rAAV空壳对照品和二者混合样品进行SEC-UV-MALS-RI串联分析,流动相为50 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲液,流速为0.3 mL·min^(-1),进样量为50μL,温度为室温,采集时间为30 min;紫外检测器选择260 nm和280 nm双通道;18角度激光散射检测和示差检测采用系统默认设置;用WYATT软件分析结果。结果:样品颗粒滴度为4.816×10^(12)vp·mL^(-1),RSD为0.37%;空壳对照品颗粒滴度为3.199×10^(12)vp·mL^(-1),RSD为0.75%。按不同预设比例混合的5份样品颗粒滴度的RSD均在3%以内,实心率RSD均在4%以内。混合样品的颗粒滴度和实心率测定结果与预期值基本一致。结论:采用SEC-UV-MALS-RI方法可以分析rAAV制品的颗粒滴度、实心率等项目,适用于rAAV制品颗粒滴度和实心率的质量控制。 展开更多

关键词 分子排阻色谱 多角度激光散射 重组腺相关病毒 滴度 实心率 聚体含量

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SEC-MALLS法测定多糖相对分子量的不确定度分析 被引量：4

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作者 胡川梅 陆明 +1 位作者 邵泓 陈钢 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期514-518,共5页

分别采用分子排阻色谱(SEC)法及其与多角度激光光散射法(SEC-MALLS)联用测定普鲁兰糖的相对分子量(Mw)。SEC法采用示差检测器(RI),SEC-MALLS法为MALLS与RI联用。采用t检验比较2种方法的分析结果,结果显示SEC-MALLS与SEC法测定结果一致... 分别采用分子排阻色谱(SEC)法及其与多角度激光光散射法(SEC-MALLS)联用测定普鲁兰糖的相对分子量(Mw)。SEC法采用示差检测器(RI),SEC-MALLS法为MALLS与RI联用。采用t检验比较2种方法的分析结果,结果显示SEC-MALLS与SEC法测定结果一致。分别分析和评定这2种方法的不确定度,计算测定过程中的不确定度分量、合成不确定度和扩展不确定度。结果表明SEC-MALLS法稳定可靠,可替代SEC法。 展开更多

关键词 分子排阻色谱 分子排阻色谱-多角度激光光散射联用 相对分子量 不确定度 测定 普鲁兰糖

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HPMEC-ELSD法检测注射用丹参多酚酸中大分子物质 被引量：1

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作者 李莉 李春 +6 位作者 王江辉 孙伟 苏小琴 尚献召 李兵 张磊 鞠爱春 《药物评价研究》 CAS 2023年第10期2186-2192,共7页

目的建立注射用丹参多酚酸(SAFI)中大分子物质(相对分子质量≥1.0×10^(4))的高效分子排阻色谱-蒸发光散射(HPMEC-ELSD)检测方法。方法采用超滤离心方法(截留相对分子质量为3000,转速为4000 r·min^(−1))对供试品溶液中的大分... 目的建立注射用丹参多酚酸(SAFI)中大分子物质(相对分子质量≥1.0×10^(4))的高效分子排阻色谱-蒸发光散射(HPMEC-ELSD)检测方法。方法采用超滤离心方法(截留相对分子质量为3000,转速为4000 r·min^(−1))对供试品溶液中的大分子物质进行分离富集。色谱条件为:检测器ELSD,Ultrahydrogel 500与Ultrahydrogel 250色谱柱串联,流动相0.02%甲酸水溶液,流动相体积流量0.6 mL·min^(−1),柱温35℃,进样量10μL,压缩空气体积流量2.5 L·min^(−1),漂移管温度105℃,不分离模式,增益1。结果该方法空白无干扰,专属性良好;精密度、重复性、加样回收率均良好;右旋糖酐在相对分子质量2700~36800线性良好,回归方程为Y=-0.2205 X+10.2470(R^(2)=0.9945);对照品溶液和供试品溶液50 h稳定性良好;不同流动相、流动相体积流量、柱温、压缩空气体积流量、漂移管温度等的耐用性良好。17批SAFI均未检出大分子物质。结论建立的HPMEC-ELSD方法简便、快捷,可用于SAFI中大分子物质的检测。 展开更多

关键词 高效分子排阻色谱-蒸发光散射(HPMEC-ELSD)检测法 注射用丹参多酚酸(SAFI) 大分子物质 右旋糖酐 相对分子质量 超滤

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SEC-RI-MALLS联用技术测定甲基纤维素的分子量及分子量分布 被引量：9

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作者 刘菁 吴燕 +1 位作者 李华龙 王恒 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1058-1062,共5页

目的:建立利用分子排阻色谱(SEC)与示差检测器(RI)和多角度激光光散射仪(MALLS)联用技术对甲基纤维素分子量及分子量分布进行测定的方法。方法:采用串接有TSKgelguard PWXL(6 mm×40mm)保护柱的TSKgel GMPWXL凝胶色谱柱(7.8 mm×... 目的:建立利用分子排阻色谱(SEC)与示差检测器(RI)和多角度激光光散射仪(MALLS)联用技术对甲基纤维素分子量及分子量分布进行测定的方法。方法:采用串接有TSKgelguard PWXL(6 mm×40mm)保护柱的TSKgel GMPWXL凝胶色谱柱(7.8 mm×300 mm,13μm),以0.1 mol·L-1硝酸钠溶液为流动相,流速为0.5 mL·min-1,柱温及示差检测温度为34℃,对来自国内外3个厂家的10批甲基纤维素样品进行了分子量及其分布的测定。结果:该方法测定各批次样品的重均分子量、数均分子量及分散度结果的误差均未超过5%,对同批次样品多次测定结果的RSD均未超过1.0%。结论:该方法操作简便,准确度及重复性良好,适用于甲基纤维素的分子量及分子量分布的测定,为甲基纤维素的质量控制提供了依据。 展开更多

关键词 甲基纤维素 分子量 分子量分布 分子排阻色谱与示差检测器和多角度激光光散射仪联用

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醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯(Shin-Etsu AQOAT■)(二)

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作者 无 《中国制药信息》 2020年第9期17-24,共8页

1.Shin-Etsu AQOAT■(HPMCAS)的分子量描述了Shin-Etsu AQOAT■分子量的分析方法。得到的值为HPMCAS的基本结构-羟丙甲纤维素的分子量。方法SEC-MALLS(多角度激光散射仪与尺寸排阻色谱联用)。

关键词 羟丙甲纤维素 尺寸排阻色谱 琥珀酸酯 多角度激光散射 OAT

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