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中华倒刺鲃β-淀粉样前体蛋白的克隆及表达分析
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作者 雷昊明 赵月桐 +2 位作者 周婵娟 蔡志宏 李俊 《黑龙江科学》 2024年第24期98-101,105,共5页
β-淀粉样前体蛋白(amyloid beta precursor protein, APP)作为淀粉样β肽形成的关键蛋白,在阿尔茨海默病的形成过程中发挥了重要作用,但其在鱼类免疫系统中的功能还未被探究。利用聚合酶链式反应技术克隆出中华倒刺鲃(SpinibarbusSinen... β-淀粉样前体蛋白(amyloid beta precursor protein, APP)作为淀粉样β肽形成的关键蛋白,在阿尔茨海默病的形成过程中发挥了重要作用,但其在鱼类免疫系统中的功能还未被探究。利用聚合酶链式反应技术克隆出中华倒刺鲃(SpinibarbusSinensis)APP基因的cDNA编码序列(GenBank编号PP716090),生物信息学分析表明该序列全长2220 bp,共编码739个氨基酸,APP蛋白存在A4_EXTRA、KU、Coiled coil和Transmembrane结构域,邻接法构建的系统进化树显示中华倒刺鲃的APP与露斯塔野鲮的APP聚类在一起。将APP构建到pcDNA3.1-MCS-3xflag载体中进行双酶切检测及测序检测,结果表明表达载体构建成功。利用RT-qPCR技术分析APP的表达模式,结果表明APP基因在中华倒刺鲃的脑、心脏、肌肉、肾脏、眼睛、尾鳍和脾脏中均有表达,且在脾脏中的相对表达量最高。此研究为进一步探讨中华倒刺鲃APP基因功能提供了基础。 展开更多
关键词 Β-淀粉样前体蛋白 鱼类免疫系统 中华倒刺鲃 分子生物学技术
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