河南省鸡志贺氏菌病和鸡白痢的血清流行病学调查 被引量：9

1

作者 张玉红 张光辉 +4 位作者 许兰菊 蒋大伟 李凯 李炜 韩月光 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第12期105-108,共4页

为了解腹泻病鸡群中鸡志贺氏菌病和鸡白痢的发生情况，利用鸡鲍氏型、鸡痢疾型志贺氏菌凝集抗原和鸡白痢鸡伤寒多价抗原对河南省6个县市52家鸡场的鸡血清进行血清抗体检测。结果显示：鸡鲍氏型、痢疾型志贺氏菌血清抗体阳性率分别为31．... 为了解腹泻病鸡群中鸡志贺氏菌病和鸡白痢的发生情况，利用鸡鲍氏型、鸡痢疾型志贺氏菌凝集抗原和鸡白痢鸡伤寒多价抗原对河南省6个县市52家鸡场的鸡血清进行血清抗体检测。结果显示：鸡鲍氏型、痢疾型志贺氏菌血清抗体阳性率分别为31．5％和14．6％，鸡白痢为3．2％。所有县市的鸡鲍氏型志贺氏菌血清抗体阳性，4／5的县市鸡痢疾型和鸡白痢血清抗体阳性；78．8％的鸡场为鲍氏型血清抗体阳性，61．2％的鸡场为痢疾型血清抗体阳性，24．4％鸡场为鸡白痢血清抗体阳性。不同鸡群中，鸡鲍氏型血清抗体阳性率为4．4％～85．7％，鸡痢疾型为0．0～60．0％，鸡白痢为0．0～30．0％。不同品种鸡中，罗曼鸡鲍氏型、痢疾型血清抗体阳性率都较高，其次为固始鸡。不同日龄中，22～28日龄鸡的血清抗体阳性率最高，鸡鲍氏型为68．8％，鸡痢疾型为27．1％，而鸡白痢仅为6．5％。混合感染中，鸡鲍氏型和痢疾型混合感染占待检血清总数的10．1％。 展开更多

关键词 河南省 鸡志贺氏菌病 鸡白痢 平板凝集试验 血清抗体阳性 流行病学调查

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鸡志贺氏菌凝集抗原及其标准血清的研制 被引量：6

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作者 蒋大伟 李凯 +2 位作者 许兰菊 王川庆 张玉红 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期729-732,共4页

利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌，分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原，并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清。结果显示，制备细菌抗原的最佳培养基是1％葡萄糖营养琼脂... 利用分离鉴定的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌，分别经细菌培养、灭活、浓度调整等方法研制诊断用鸡志贺氏菌凝集抗原，并用鸡志贺氏菌疫苗免疫清洁级小白鼠研制鸡志贺氏菌标准血清。结果显示，制备细菌抗原的最佳培养基是1％葡萄糖营养琼脂，抗原最佳灭活温度和时间为121℃和120min，凝集抗原合适浓度为40亿／mL，最佳稀释液为pH7．2的0．5％石炭酸生理盐水。制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌阳性血清经效价测定分别可达8log2和10log2，阴性血清与鸡志贺氏菌凝集抗原作用无凝集反应发生。通过研究同时确定了平板凝集试验反应的合适温度为20～35℃，结果判定时间为3～5min。研制的凝集抗原及其标准血清具有特异性强、稳定性好、使用方法简便、便于保存和检测结果准确可靠等优点，便于在基层生产单位推广应用。 展开更多

关键词 鸡志贺氏菌 凝集抗原 标准血清 研制 平板凝集试验

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河南省部分地区鸡志贺氏菌病病原分离鉴定及药敏试验 被引量：9

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作者 杨永珍 许兰菊 +3 位作者 张丹鹤 邓久虎 苗银萍 蒋大伟 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第3期134-139,共6页

为了对河南省部分地区鸡志贺氏菌病的病原进行分离鉴定和药物敏感性调查,对河南省6个地区的鸡腹泻病病料进行了细菌学检查,经细菌分离培养、形态染色镜检、生化试验和动物试验,共分离鉴定出12株鸡源志贺氏菌。血清学试验结果显示,分离... 为了对河南省部分地区鸡志贺氏菌病的病原进行分离鉴定和药物敏感性调查,对河南省6个地区的鸡腹泻病病料进行了细菌学检查,经细菌分离培养、形态染色镜检、生化试验和动物试验,共分离鉴定出12株鸡源志贺氏菌。血清学试验结果显示,分离菌株存在种和型的差异,其中8株为福氏志贺氏菌,3株为鲍氏多价志贺氏菌,1株为痢疾Ⅱ型志贺氏菌。动物试验结果表明,分离的12株鸡志贺氏菌均具有致病性,且毒力不同,其中,从三门峡分离的菌株有很强的毒力,发病率和死亡率均为100%。药敏试验结果显示,大多数鸡志贺氏菌对氨苄/舒巴坦和阿米卡星较为敏感,对其他药物具有严重的耐药性,且不同地区分离的鸡志贺氏菌对药物的敏感性不同。 展开更多

关键词 鸡志贺氏菌 分离鉴定 药敏试验 河南省

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鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的研制 被引量：2

4

作者 李炜 蒋大伟 +4 位作者 程琨 宋海霞 许兰菊 张玉红 张瑞 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期526-530,共5页

利用鸡鲍氏志贺氏菌和鸡痢疾志贺氏菌制备多价凝集抗原,确定其最佳反应浓度及比例.选择合适的试验鸡只,用2种鸡志贺氏菌灭活疫苗定期肌肉注射免疫和抗体效价测定,适时采血分离血清.结果显示,鸡鲍氏抗原与痢疾抗原的最佳混合浓度为6×... 利用鸡鲍氏志贺氏菌和鸡痢疾志贺氏菌制备多价凝集抗原,确定其最佳反应浓度及比例.选择合适的试验鸡只,用2种鸡志贺氏菌灭活疫苗定期肌肉注射免疫和抗体效价测定,适时采血分离血清.结果显示,鸡鲍氏抗原与痢疾抗原的最佳混合浓度为6×109mL-1,最佳比例为1∶1.制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌多价阳性血清,经抗体效价测定均达6 log2,阴性血清与鸡志贺氏菌多价凝集抗原作用无凝集现象出现.研制的多价凝集抗原及其标准血清经特异性试验、重复性试验和保存方法试验,具有特异性强、敏感性高、重复性好、易保存等特点,且可省去单价凝集抗原繁琐的检测程序和时间. 展开更多

关键词 鸡志贺氏菌 多价凝集抗原 标准血清

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鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的应用 被引量：2

5

作者 宋海霞 李炜 +4 位作者 蒋大伟 许兰菊 李凯 潘国民 贾文科 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第11期136-139,共4页

利用研制的鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清,对信阳地区18家鸡场的351份鸡待检血清进行了血清抗体检测。结果显示:351份被检血清中,鸡鲍氏和痢疾志贺氏菌混合感染的抗体阳性率达8.33%(1/12)～73.91%(17/23),平均抗体阳性率为44.16%(... 利用研制的鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清,对信阳地区18家鸡场的351份鸡待检血清进行了血清抗体检测。结果显示:351份被检血清中,鸡鲍氏和痢疾志贺氏菌混合感染的抗体阳性率达8.33%(1/12)～73.91%(17/23),平均抗体阳性率为44.16%(155/351)。通过与鸡志贺氏菌单价凝集抗原的检测结果相比较,发现其吻合率高达98.58%(346/351),说明鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清用于血样的检测,具有高度的特异性,准确可靠、方法简便快速。 展开更多

关键词 鸡志贺氏菌多价凝集抗原 标准血清 血清学调查 抗体阳性率

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江苏地区鸡志贺氏菌病的血清流行病学调查

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作者 安东 王成丽 +3 位作者 曹斌 卢炜 葛梦婷 杨将辉 《中国畜禽种业》 2021年第11期47-48,共2页

为了解江苏地区鸡志贺氏菌病流行情况,做好相应的防治措施。本试验自制鸡志贺氏菌平板凝集染色抗原,通过平板凝集试验对该地区规模养殖场和农户散养鸡的700份血清进行检测。结果发现,存在不同程度的鲍氏志贺菌和痢疾志贺氏菌感染情况,... 为了解江苏地区鸡志贺氏菌病流行情况,做好相应的防治措施。本试验自制鸡志贺氏菌平板凝集染色抗原,通过平板凝集试验对该地区规模养殖场和农户散养鸡的700份血清进行检测。结果发现,存在不同程度的鲍氏志贺菌和痢疾志贺氏菌感染情况,其中规模养殖场阳性率为8.6%,农户散养阳性率为20.0%,其中鲍氏志贺菌感染率为49.40%,痢疾志贺氏菌感染率为32.53%,混合感染率为18.07%。不同鸡群间阳性率也存在较大差异,商品鸡阳性率最高,为14.88%,其次为后备母鸡、种母鸡,而种公鸡未检测出阳性结果。分析结果表明:江苏地区鸡志贺氏菌病主要以鲍氏志贺菌感染为主,且存在混合感染现象,鸡志贺氏菌发病与养殖方式和群体类型有关。 展开更多

关键词 鸡志贺氏菌病 抗原 鲍氏志贺菌 痢疾志贺氏菌

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鸡福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶SHV-12和TEM-1V基因的重组表达及酶特性 被引量：1

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作者 孙亚伟 胡功政 +5 位作者 陈红英 邓立新 刘建华 潘玉善 许兰菊 李胜利 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期566-571,共6页

通过PCR扩增获得鸡福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶SHV-12和TEM-1V型ESBLs基因片段,定向克隆入质粒载体构建重组质粒,酶切和DNA测序鉴定后转化受体菌BL21,用SDS-PAGE电泳观察目的基因在重组菌中的表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的... 通过PCR扩增获得鸡福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶SHV-12和TEM-1V型ESBLs基因片段,定向克隆入质粒载体构建重组质粒,酶切和DNA测序鉴定后转化受体菌BL21,用SDS-PAGE电泳观察目的基因在重组菌中的表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶作用。结果表明,构建的重组质粒经EcoRⅠ和XholⅠ双酶切后,可切下目的条带;DNA测序发现插入片段与SHV-12和TEM-1V ESBLs基因序列完全一致。重组质粒转化BL21所表达的重组蛋白有超广谱β-内酰胺酶活性。重组菌S-BL21、T-BL21的最优表达条件分别是IPTG浓度0.5、0.8mmol/L,诱导温度37℃、37℃,诱导时间5、4h。SHV-12和TEM-1V型ESBLs能水解青霉素G、氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋、头孢曲松和头孢噻肟;对头孢噻呋钠的Km值最小,分别为4.9和1.29;对头孢曲松钠的Km值最大,分别为53.43和24.13;抑制剂舒巴坦钠、它唑巴坦钠对SHV-12和TEM-1V型ESBLs水解抗生素有不同程度的抑制作用。 展开更多

关键词 鸡福氏志贺菌 超广谱Β-内酰胺酶 SHV-12 TEM-1V

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鸡源志贺氏菌IpaC基因新型表达载体构建及其在毕赤酵母中的表达

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作者 马金玉 韩志霞 +4 位作者 蒋大伟 王亚宾 许兰菊 苗银萍 孔江南 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期36-41,共6页

为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种... 为使鸡源志贺氏菌IpaC蛋白保持天然的生物学活性,在毕赤酵母表达系统中实现分泌表达,进一步研究IpaC蛋白的生物学功能,本研究在不改变IpaC蛋白氨基酸序列的情况下,根据酵母密码子偏爱性优化合成IpaC#基因,利用真核表达载体p GAPZA和8种真核信号肽,分别构建真核表达载体pGAPZA-Inu/Inv/Kil/Lys/Mat/Amy/Glu/Ser-IpaC#,然后将线性化的重组质粒电转化至毕赤酵母X-33中,对阳性转化子进行表达,并用SDS-PAGE及Western-blot检测其表达产物。结果表明:在8种重组菌表达产物的菌体沉淀中检测到大小约为60 ku的目的蛋白。说明鸡源志贺氏菌IpaC基因成功实现了在毕赤酵母的胞内表达。 展开更多

关键词 鸡源志贺氏菌 IpaC基因 毕赤酵母 pGAPZA 真核信号肽

原文传递

包被LPS抗原检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法的建立

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作者 邓久虎 许兰菊 +3 位作者 杨永珍 张丹鹤 苗银萍 李炜 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期91-96,共6页

以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适... 以鸡源鲍氏志贺氏菌菌体提取的脂多糖(LPS)成分作为检测抗原,以辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG抗体为第二抗体,以TMB为显色剂,成功建立了检测鸡源鲍氏志贺氏菌抗体的间接ELISA方法.通过对间接ELISA反应条件的一系列研究,确定了各种最适工作条件:鸡源鲍氏志贺氏菌LPS抗原最适包被质量浓度为5mg·L-1,最适包被条件为4℃过夜;待检血清的最佳稀释度为1∶160,与包被抗原在37℃作用1 h;酶标二抗的最适工作浓度为1∶2 000,血清与酶标二抗的反应条件为37℃1 h;最适封闭条件为37℃作用1 h;底物最适反应条件为室温避光20 min;阴阳性临界值为0.385.经特异性试验、敏感性试验和重复性试验,表明建立的间接ELISA方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等特点. 展开更多

关键词 鸡源鲍氏志贺氏菌 LPS 抗体 间接ELISA

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鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖的提取方法研究 被引量：4

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作者 潘国民 许兰菊 +4 位作者 蒋媛媛 李炜 邓九虎 白毅洁 李欣 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2010年第6期138-140,共3页

为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分... 为了提取和纯化鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖(LPS),利用1%葡萄糖肉汤培养基大量培养已分离鉴定的鸡鲍氏志贺氏菌,并应用酚水法提取鸡鲍氏志贺氏菌脂多糖。经聚乙二醇20000浓缩,DNA酶及RNA酶酶解,离心分离,冷冻干燥等制得纯化的LPS。对提取物分别进行糖、蛋白质及核酸含量测定,结果显示,所提取纯化的LPS糖含量为27.06 mg/L,蛋白质含量为0.25 g/L,核酸含量为40.20 mg/L,鲎试剂检测具有凝集活性。上述结果表明:该试验方法能有效提取鸡鲍氏志贺氏菌LPS,提取物纯度较高,核酸及蛋白质含量较低,是提取脂多糖的一种简便快捷的方法。 展开更多

关键词 鸡鲍氏志贺氏菌 脂多糖 提取 纯化

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禽4种常见细菌病多重PCR检测方法的初步研究 被引量：4

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作者 宫强 李战丽 牛明福 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期122-126,共5页

为了同时检测鸡金黄色葡萄球菌、鸡志贺氏菌、禽多杀性巴氏杆菌和鸡绿脓杆菌,试验采用单一PCR和多重PCR方法对上述4种病原菌的nu C、ipa H、ptf A和opr L基因进行了扩增,对退火温度进行了优化,检测了单一PCR和多重PCR的特异性和敏感性... 为了同时检测鸡金黄色葡萄球菌、鸡志贺氏菌、禽多杀性巴氏杆菌和鸡绿脓杆菌,试验采用单一PCR和多重PCR方法对上述4种病原菌的nu C、ipa H、ptf A和opr L基因进行了扩增,对退火温度进行了优化,检测了单一PCR和多重PCR的特异性和敏感性。结果表明：分别扩增出大小为280 bp、474 bp、150 bp和331 bp的目的基因片段,且单一PCR和多重PCR均未从鸡白痢沙门氏菌、鸡空肠弯杆菌和鸡致病性大肠杆菌中扩增出上述任何一种目的片段;4种病原菌单一PCR的敏感性分别为100 pg/μL、1 pg/μL、1 pg/μL和10 pg/μL,多重PCR中4种病原菌的检出限分别为100 pg/μL、1 pg/μL、10 pg/μL和10 pg/μL。说明试验建立的单一PCR和多重PCR检测方法均具有较好的特异性和较高的敏感性,可快速检测禽类的4种病原菌。 展开更多

关键词 鸡金黄色葡萄球菌 鸡志贺氏菌 禽多杀性巴氏杆菌 鸡绿脓杆菌 单一PCR 多重PCR 敏感性 特异性

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禽四种细菌病多联菊粉及油乳剂灭活疫苗的研究

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作者 田野 宫强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第2期167-170,共4页

为探讨菊粉对四种常见禽细菌病灭活疫苗的佐剂效应,试验将禽多杀性巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡志贺氏菌和鸡绿脓杆菌分别培养至浓度为2×1010cfu/mL,按等比例混合后以终浓度为0.35%甲醛37℃灭活24 h,分别制备油乳剂和菊粉多联灭... 为探讨菊粉对四种常见禽细菌病灭活疫苗的佐剂效应,试验将禽多杀性巴氏杆菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡志贺氏菌和鸡绿脓杆菌分别培养至浓度为2×1010cfu/mL,按等比例混合后以终浓度为0.35%甲醛37℃灭活24 h,分别制备油乳剂和菊粉多联灭活疫苗,以动物试验检测其安全性和效力。结果表明:两种灭活疫苗均具有良好的安全性,免疫后抗体水平均呈现上升趋势,且菊粉疫苗组稍高于油乳剂疫苗组。攻毒试验结果显示两种疫苗均可为试验动物提供80%以上的保护率,且菊粉疫苗组略优于油乳剂疫苗组,说明菊粉具有较好的免疫佐剂效应。 展开更多

关键词 禽多杀性巴氏杆菌 鸡白痢沙门氏菌 鸡志贺氏菌 鸡绿脓杆菌 多联灭活疫苗 油乳剂 菊粉

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