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MANF对A2型反应性星形胶质细胞增殖、凋亡的影响 被引量：2
1
作者 刘锐 丁振飞 +4 位作者 戴策 钟林 汪萧和 尹宗生 高维陆 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第10期1511-1515,共5页
目的探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)对脊髓A2型反应性星形胶质细胞(RAS)增殖及凋亡的影响。方法取SD大鼠脊髓组织进行星形胶质细胞的分离及培养,并采用免疫荧光技术鉴定细胞。采用白细胞介素-1β(IL-1β)刺激星形胶质细胞... 目的探讨中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)对脊髓A2型反应性星形胶质细胞(RAS)增殖及凋亡的影响。方法取SD大鼠脊髓组织进行星形胶质细胞的分离及培养,并采用免疫荧光技术鉴定细胞。采用白细胞介素-1β(IL-1β)刺激星形胶质细胞制备A2型RAS,作为实验组,并用未处理组做空白对照组。然后采用免疫荧光染色法对制备的A2型RAS进行鉴定。将制备完成的细胞分成Control组和MANF组,以不同浓度(0、0.5、1、2μg/ml)的MANF蛋白及不同的作用时间(12、24、36、48 h)处理细胞,采用CCK-8法检测在450 nm处的吸光度。取一定浓度的MANF蛋白(1μg/ml)处理细胞,同样分为Control组和MANF组,采用EdU法验证对A2型RAS增殖能力的影响。采用TUNEL法验证对A2型RAS凋亡的影响。结果免疫荧光结果显示IL-1β可以刺激星形胶质细胞向A2型转化;CCK-8、EdU增殖实验结果显示,MANF蛋白干预后,细胞增殖能力均显著高于对照组(P<0.05);TUNEL凋亡实验显示经MANF蛋白干预后,凋亡细胞明显减少(P<0.05)。结论MANF蛋白对A2型RAS具有促进增殖、抑制凋亡的作用。 展开更多
关键词 中脑星形胶质细胞源性神经营养因子 a2型反应性星形胶质细胞 增殖 凋亡
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A1/A2型反应性星形胶质细胞的研究进展 被引量：5
2
作者 黎影 骆翔 《神经损伤与功能重建》 2022年第9期518-520,528,共4页
星形胶质细胞是主要的神经胶质细胞,对维持中枢神经系统的稳定性至关重要。星形胶质细胞在中枢神经系统损伤后会活化并改变其细胞特性,成为“反应性星形胶质细胞”。既往研究显示反应性星形胶质细胞可释放营养因子、突触生成因子和细胞... 星形胶质细胞是主要的神经胶质细胞,对维持中枢神经系统的稳定性至关重要。星形胶质细胞在中枢神经系统损伤后会活化并改变其细胞特性,成为“反应性星形胶质细胞”。既往研究显示反应性星形胶质细胞可释放营养因子、突触生成因子和细胞外基质,促进神经元存活、突触形成,同时星形胶质细胞也能产生促炎细胞因子、趋化因子和MMP降解细胞外基质,提示星形胶质细胞参与中枢神经系统损伤后的重塑。最近的转录组学证据表明反应性星形胶质细胞具有多种亚群及不同的功能,包括神经保护和神经毒性双重效应。本文以星形胶质细胞的差异性活化为切入点,探讨了不同活化表型(A1/A2)的反应性星形胶质细胞对中枢神经系统损伤和修复的影响。 展开更多
关键词 反应性星形胶质细胞 活化表型 中枢神经系统
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rhMANF通过激活ReIB/p52磷酸化诱导A2型反应性星形胶质细胞极化以促进脊髓损伤恢复
3
作者 陈太邦 王文婷 +1 位作者 崔蕾 付雅娜 《中华神经医学杂志》 北大核心 2025年第1期44-53,共10页
目的探讨重组人源中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(rhMANF)参与A2型反应性星形胶质细胞极化以促进脊髓损伤(SCI)恢复的机制。方法将120只雌性SPF级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SCI组、SCI+对照组、SCI+rhMANF组,每组30只。后3... 目的探讨重组人源中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(rhMANF)参与A2型反应性星形胶质细胞极化以促进脊髓损伤(SCI)恢复的机制。方法将120只雌性SPF级SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SCI组、SCI+对照组、SCI+rhMANF组,每组30只。后3组大鼠采用重物坠落法制备成SCI模型,后2组大鼠分别于造模后30 min鞘内注射10μL无菌生理盐水或10μL无菌生理盐水+5μg rhMANF。术后1、3、7、14、21、28 d采用Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分法评估各组大鼠的运动功能。术后3 d的行为学评估结束后,应用蛋白质印迹法检测各组大鼠脊髓组织中ReIB、p52、磷酸化(p)-ReIB、p-p52蛋白的表达,ELISA法检测脊髓组织中抗炎细胞因子、神经营养因子的表达。术后14 d的行为学评估结束后,采用免疫荧光双标染色检测各组大鼠脊髓组织中神经元核抗原(NeuN)、Syn、S100A10的表达。术后28 d的行为学评估结束后,采用HE染色及醋酸铀-枸橼酸铅双染色分别于光镜下和电镜下观察各组大鼠脊髓组织的病理变化。结果术后14、21、28 d时,与SCI组、SCI+对照组比较,SCI+rhMANF组大鼠的BBB评分均明显更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后3 d时,与SCI组(0.74±0.01、0.42±0.11)、SCI+对照组(0.79±0.00、0.64±0.02)比较,SCI+rhMANF组大鼠脊髓组织中p-ReIB、p-p52蛋白(1.17±0.02、1.00±0.07)表达均明显更高,差异均有统计学意义(P<0.05);与SCI组[(132.15±18.86)pg/mg、(173.48±18.24)pg/mg、(109.01±3.79)pg/mg、(104.64±18.21)pg/mg、(138.09±9.93)pg/mg、(91.26±11.09)pg/mg]、SCI+对照组[(137.80±27.70)pg/mg、(185.78±19.20)pg/mg、(112.44±13.51)pg/mg、(93.13±22.09)pg/mg、(159.48±32.50)pg/mg、(112.67±18.32)pg/mg]比较,SCI+rhMANF组大鼠脊髓组织中白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-13及神经营养因子-3、转化生长因子-β、粒细胞集落刺激因子[(217.58±16.06)pg/mg、(276.53±15.00)pg/mg、(178.88±7.03)pg/mg、(172.61±16.43)pg/mg、(241.00±15.80)pg/mg、(166.63±14.61)pg/mg]表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后14 d时,与SCI组(0.99±0.11/1.00±0.18、1.00±0.19/1.00±0.18)、SCI+对照组(1.39±0.09/0.93±0.20、1.26±0.35/0.94±0.19)比较,SCI+rhMANF组大鼠脊髓组织中NeuN/S100A10、NeuN/Syn免疫荧光染色强度(2.51±0.24/2.85±0.27、2.48±0.35/1.92±0.32)均明显更高,差异均有统计学意义(P<0.05)。光镜下显示SCI组、SCI+对照组大鼠脊髓中神经组织结构疏松、水肿并有空泡变性,假手术组和SCI+rhMANF组中神经组织结构致密,神经元呈圆形、锥形,细胞核大而圆,未见空泡变性组织。透射电镜下显示假手术组大鼠髓鞘和轴突结构完整,SCI组、SCI+对照组大鼠脊髓神经细胞松散皱缩、染色质凝聚、细胞膜出泡形成,SCI+rhMANF组细胞结构清晰,相对较完整。结论RhMANF可通过激活ReIB/p52磷酸化,上调抗炎细胞因子、神经营养因子表达,诱导A2型反应性星形胶质细胞极化及突触生长,减轻病理损伤,以促进SCI恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 a2型反应性星形胶质细胞 重组人源中脑星形胶质细胞源性神经营养因子 ReIB p52
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反应性星形胶质细胞在中枢神经系统疾病中的作用研究进展 被引量：1
4
作者 葛玉凤 王亭皓 +3 位作者 胡清 蔡亚宁 冯达云 屈延 《空军军医大学学报》 2025年第3期395-400,共6页
反应性星形胶质细胞是为响应中枢神经系统(CNS)损伤、疾病或感染而经历形态、分子和功能重塑的星形胶质细胞。在衰老、损伤或存在神经炎症的情况下,TNF-α、IL-1α和C1q激活的小胶质细胞信号会诱导神经毒性星形胶质细胞表型,称为星形胶... 反应性星形胶质细胞是为响应中枢神经系统(CNS)损伤、疾病或感染而经历形态、分子和功能重塑的星形胶质细胞。在衰老、损伤或存在神经炎症的情况下,TNF-α、IL-1α和C1q激活的小胶质细胞信号会诱导神经毒性星形胶质细胞表型,称为星形胶质细胞A1极化或反应性星形胶质细胞。反应性星形胶质细胞下调其支持功能并分泌神经毒性因子、补体因子(如C3)和趋化因子(如CXCL10)等,这可能促进免疫细胞跨过血脑屏障募集到CNS。目前还不清楚固定类别的神经系统疾病是否存在固定的反应性星形胶质细胞类型,如果存在,如何识别它们?本文综述了反应性星形胶质细胞在神经系统疾病中的重要作用,以期为探索反应性星形胶质细胞的病理作用和神经系统疾病的靶向治疗提供理论依据。 展开更多
关键词 反应性星形胶质细胞 A1星形胶质细胞 中枢神经系统疾病
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基于“中医阴阳学说”探讨反应性星型胶质细胞A1/A2表型与阿尔茨海默病的关系 被引量：1
5
作者 陈光磊 沈俊希 +6 位作者 郑宇皓 陈云志 金亚弦 赵芝兰 齐晓岚 况时祥 朱星 《中医药学报》 CAS 2024年第7期7-12,共6页
阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病,主要临床表现为认知和记忆障碍,发病机制异常复杂,涉及多种因素,防治不当,将给家庭和社会带来巨大负担。星形胶质细胞(AS)是中枢神经系统(CNS)中最丰富的一类神经胶质细胞,在AD的发生发展... 阿尔茨海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病,主要临床表现为认知和记忆障碍,发病机制异常复杂,涉及多种因素,防治不当,将给家庭和社会带来巨大负担。星形胶质细胞(AS)是中枢神经系统(CNS)中最丰富的一类神经胶质细胞,在AD的发生发展中扮演重要角色。在CNS受损后,AS被激活并改变其细胞特性,形成反应性星形胶质细胞(RAs),其表型可变为A1型AS(A1S)与A2型AS(A2S),两者在功能上分别表现为神经毒性与神经保护性。中医阴阳学说贯穿中医学的各个方面,用以解释人体生理和病理的变化,以及指导疾病的诊断、治疗和保健。A1S与A2S在功能上表现出双重特性,与中医阴阳学说有相似之处。因此,通过“抑阳扶阴”的方式,调整机体的“阴阳”平衡,有望抑制A1S的“阳性”作用,促进A2S的“阴性”作用,从而达到预防和治疗AD的目的。将中医阴阳学说与西医学相结合,不但有助于丰富中医阴阳理论的现代内涵,而且通过中医阴阳学说解读AS表型的变化,为中医药在防治AD方面提供新的靶点和思路。 展开更多
关键词 中医理论 阴阳学说 反应性星形胶质细胞 阿尔茨海默病
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大鼠延髓背角A1型反应性星形胶质细胞激活参与三叉神经痛慢性化
6
作者 罗骁 万通 +4 位作者 丁卓峰 侯新冉 王健 郭曲练 宋宗斌 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期21-28,共8页
目的:星形胶质细胞激活是慢性疼痛中的重要环节,本研究旨在观察三叉神经痛大鼠模型中延髓背角A1型反应性星形胶质细胞活化情况,并探究其引起中枢敏化的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组和眶下神经慢性缩窄性损伤(chronic ... 目的:星形胶质细胞激活是慢性疼痛中的重要环节,本研究旨在观察三叉神经痛大鼠模型中延髓背角A1型反应性星形胶质细胞活化情况,并探究其引起中枢敏化的机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术(sham)组和眶下神经慢性缩窄性损伤(chronic constriction injury of infraorbital nerve,ION-CCI)组。分别于造模前1 d及造模后第1、3、7、10、14天进行大鼠面部机械痛阈、热敏潜伏期测定。疼痛行为学检测完成后,采用免疫荧光染色检测大鼠延髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达,对GFAP、补体3(complement 3,C3)/S100A10、4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)进行免疫荧光共定位分析。取原代星形胶质细胞培养,并将其随机分为空白对照组和二氢红藻氨酸(dihydrokainic acid,DHK)组。DHK组加入1 mmol/L的星形胶质细胞激活抑制剂DHK,使用钙离子荧光探针Fura-2/AM对2组细胞进行钙荧光染色,连续观察高钾刺激下2组细胞的钙波活动差异。采用蛋白质印迹法检测C3的蛋白质表达水平。结果:ION-CCI组大鼠机械痛阈和热敏潜伏期均明显低于sham组(均P<0.05)。ION-CCI组延髓背角存在大量GFAP表达阳性的星形胶质细胞,GFAP荧光强度明显强于sham组(P<0.05)。GFAP和C3/S100A10共定位于延髓背角星形胶质细胞。与sham组比较,ION-CCI组C3的荧光强度和蛋白质表达均明显增加(均P<0.05)。与空白对照组比较,DHK组C3蛋白质表达水平明显下调(P<0.05)。在第60秒给予高钾刺激后,空白对照组和DHK组的钙荧光强度均明显增加,且空白对照组的钙荧光峰值和钙荧光升高幅度均高于DHK组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:三叉神经痛模型大鼠延髓背角A1型反应性星形胶质细胞明显增多,其可能通过影响钙波活动参与三叉神经痛的中枢敏化。 展开更多
关键词 三叉神经痛 A1型反应性星形胶质细胞 延髓背角 钙波
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黄芪甲苷可抑制炎性诱导星形胶质细胞激活及炎症反应 被引量：2
7
作者 于婧文 郭敏芳 +7 位作者 张冰心 穆秉桃 孟涛 张慧宇 马存根 殷金珠 宋丽娟 尉杰忠 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第31期5022-5028,共7页
背景:星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变,提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实,黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎性反... 背景:星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变,提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实,黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎性反应,其是否可以通过Notch-1及其下游信号通路调控星形胶质细胞表型和功能,尚不清楚。目的:探讨黄芪甲苷对炎性诱导的星形胶质细胞激活及炎症反应的影响及可能机制。方法:体外培养新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,CCK-8法检测星形胶质细胞活力确定黄芪甲苷及Notch活性抑制剂DAPT的最适浓度;然后将星形胶质细胞分为5组:PBS组、LPS组、LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组和LPS+DAPT+黄芪甲苷组,ELISA法检测炎性因子分泌水平,Griess法检测一氧化氮水平,用Transwell小室将星形胶质细胞与脾脏单个核细胞共培养,观察CD4 T细胞的迁移情况,免疫荧光染色检测星形胶质细胞活化标志物GFAP、星形胶质细胞的A1标记物C3、A2标记物S100A10以及信号通路相关Notch-1、Jag-1的表达,Western blot法检测CFB、C3、S100A10、PTX3、Notch-1、Jag-1和Hes的表达。结果与结论:①根据CCK-8结果,筛选黄芪甲苷终浓度为25μmol/L,DAPT终浓度为50μmol/L进行后续实验;②与PBS组相比,LPS组白细胞介素6、白细胞介素12和一氧化氮分泌水平显著升高(P<0.05,P<0.05,P<0.01);与LPS组相比,LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组白细胞介素6(均为P<0.05)、白细胞介素12(P>0.05,P<0.05,P<0.05)和一氧化氮(P<0.05,P<0.01,P<0.01)分泌显著减少;③与PBS组相比,LPS组星形胶质细胞激活明显,GFAP表达明显增多,CD4 T细胞的迁移数量明显增多(P<0.01);与LPS组相比,LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组星形胶质细胞激活受到显著抑制,CD4 T细胞迁移减少(P<0.05,P<0.05,P<0.01);④与PBS组相比,LPS组A1型标记物C3和CFB的表达增加(P<0.01,P<0.05),而A2型标记物S100A10和PTX3的表达减少(P<0.01,P<0.05);与LPS组相比,LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组C3(均为P<0.01)和CFB(均为P<0.05)的表达显著减少,S100A10(均为P<0.01)和PTX3(P<0.05,P<0.05和P>0.05)的表达增加;⑤与PBS组相比,LPS组Jag-1、Notch-1和Hes表达明显增加(均为P<0.01);与LPS组相比,LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组Jag-1(均为P<0.01)、Notch-1(均为P<0.01)和Hes(P<0.05,P<0.01,P<0.01)表达显著减少;⑥结果表明:黄芪甲苷可通过调控Notch-1信号通路促进星形胶质细胞由A1型向A2型转化,减少炎性因子的分泌和CD4 T细胞的迁移,从而抑制星形胶质细胞的激活和炎性反应。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 脂多糖 星形胶质细胞 Notch-1/Hes信号通路 神经炎性反应 DAPT
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小鼠流行性乙型脑炎疾病进展中反应性星形胶质细胞活化模式的变化及干预
8
作者 周子清 李婧 +5 位作者 王小可 思越 朱旭东 雷迎峰 马宏炜 张芳琳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期303-310,共8页
目的 明确星形胶质细胞活化模式与流行性乙型脑炎疾病进展的关系。方法 首先通过足垫注射乙型脑炎病毒(JEV)构建流行性乙型脑炎小鼠模型,采用免疫荧光技术(IFA)检测JEV非结构蛋白3(NS3)在小鼠全脑的表达情况;进一步利用IFA、 RNA测序技... 目的 明确星形胶质细胞活化模式与流行性乙型脑炎疾病进展的关系。方法 首先通过足垫注射乙型脑炎病毒(JEV)构建流行性乙型脑炎小鼠模型,采用免疫荧光技术(IFA)检测JEV非结构蛋白3(NS3)在小鼠全脑的表达情况;进一步利用IFA、 RNA测序技术(RNA-seq)、实时定量PCR明确流行性乙型脑炎发病不同阶段星形胶质细胞活化模式的变化;最后,通过侧脑室注射鸢尾素(irisin)调控补体C3阳性A1型星形胶质细胞、 S100钙结合蛋白A10(S100A10)阳性的A2型星形胶质细胞活化比例,探索其是否可改善乙型脑炎模型小鼠的体质量、行为学评分及脑组织损伤情况。结果 流行性乙型脑炎模型组小鼠的M1、 M2等运动皮层脑区和海马组织中NS3蛋白显著增加。上述区域胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞的数目和体积较对照组也显著增加,其中JEV感染后与A1/A2型星形胶质细胞活化相关的基因均显著升高。侧脑室或者腹腔注射irisin虽不能改善流行性乙型脑炎预后,但可在一定程度上抑制A1型星形胶质细胞活化,减轻神经炎症。结论 JEV主要感染小鼠的运动皮质和海马神经元,且星形胶质细胞异常激活导致神经炎症损伤。Irisin可能抑制A1型星形胶质细胞激活,减轻JEV感染后的神经炎症。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 星形胶质细胞 A1型星形胶质细胞 a2型星形胶质细胞 C3 S100A10
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2型转谷氨酰胺酶对人胶质母细胞瘤细胞U251放射敏感性的影响
9
作者 蓝瑞隆 伍兵 王锃 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期537-545,共9页
为探讨2型转谷氨酰胺酶(transglutaminase 2,TG2)对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)放射敏感性的影响。通过生信分析TG2表达与胶质瘤病人预后的关系,并分析了其在GBM放射抵抗细胞株U251中的水平;瞬时转染得到TG2过表达细胞(U251-TG2)或... 为探讨2型转谷氨酰胺酶(transglutaminase 2,TG2)对胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)放射敏感性的影响。通过生信分析TG2表达与胶质瘤病人预后的关系,并分析了其在GBM放射抵抗细胞株U251中的水平;瞬时转染得到TG2过表达细胞(U251-TG2)或空载细胞(U251-EV);CCK8法绘制生长曲线;transwell检测细胞迁移能力;不同剂量X射线照射后,检测细胞克隆形成能力、ROS水平;并通过免疫荧光检测γ-H2AX水平;Western blot检测自噬关键分子Beclin-1、LC3及mTOR磷酸化水平。结果显示,TG2高表达胶质瘤患者具有更差的无进展间隔期及总生存期,TG2在放射抵抗型U251中的表达显著高于野生型U251;U251-TG2细胞增殖能力高于U251-EV,且前者迁移能力高于后者;经X射线照射后,U251-TG2细胞克隆形成率高于U251-EV,前者ROS水平及γ-H2AX荧光焦点数均低于后者;自噬关键蛋白Beclin-1及自噬活性指标LC3-Ⅱ/Ⅰ比值在U251-TG2的水平均高于U251-EV,且前者mTOR磷酸化水平低于后者。实验结果证明,X射线照射后,TG2可能通过抑制mTOR磷酸化的方式促进自噬,进而降低GBM细胞U251的放射敏感性。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 2型转谷氨酰胺酶 放射敏感性
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高迁移率族蛋白B1对体外氧糖剥夺/复氧复糖后大鼠脊髓反应性星形胶质细胞不同亚型的作用 被引量：2
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作者 王丽平 李季声 +4 位作者 邓黎 王志强 刘晋明 邓晨 孙麟 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第24期3831-3837,共7页
背景:脊髓损伤后星形胶质细胞可以活化为A1、A2两种不同亚型的反应性星形胶质细胞,其在基因、分子和功能方面完全不同,对脊髓损伤修复的具体作用也不同。已经证明高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)是脊髓损伤后的重要... 背景:脊髓损伤后星形胶质细胞可以活化为A1、A2两种不同亚型的反应性星形胶质细胞,其在基因、分子和功能方面完全不同,对脊髓损伤修复的具体作用也不同。已经证明高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1)是脊髓损伤后的重要炎症、免疫因子,可以引起细胞水肿、炎症反应及细胞凋亡等,但其对A1、A2两种反应性星形胶质细胞的影响尚不清楚。目的:观察大鼠脊髓星形胶质细胞经氧糖剥夺/复氧复糖(oxygen-glucose deprivation/restoration,OGD/R)后激活为反应性星形胶质细胞的情况,探索损伤后产生的HMGB1对反应性星形胶质细胞不同亚型的影响及作用机制。方法:培养大鼠脊髓星形胶质细胞至第3代,经过OGD/R处理后观察细胞的形态变化,划痕实验检测细胞的迁移能力,Western blot检测反应性星形胶质细胞的激活情况。抑制HMGB1表达后分为5组:正常组、OGD6 h/R6 h组、HMGB1干扰组、阴性序列组、OGD6 h/R6 h+12μmol/L HMGB1抑制剂丙酮酸乙酯组,Western blot和细胞免疫荧光法检测反应性星形胶质细胞不同亚型特征性蛋白C3、S100A10的表达,划痕实验检测细胞的迁移能力。为探究HMGB1对反应性星形胶质细胞影响的可能机制,分为正常组、OGD6 h/R6 h组、OGD6 h/R6 h+5μmol/L TLR4抑制剂CLI-095组、OGD6 h/R6 h+5μmol/L NF-κB抑制剂BAY 11-7082组,Western blot检测TLR4、NF-κB、C3和S100A10的表达。结果与结论:(1)氧糖剥夺后细胞体积减小,边缘皱缩,迁移能力增加,复氧复糖后,细胞体积增大,活化为A1、A2型反应性星形胶质细胞,OGD6 h/R6 h时S100A10表达最多,OGD6 h/R12 h时C3表达最多(P<0.05);(2)沉默或抑制HMGB1的表达对反应性星形胶质细胞的影响:与OGD6 h/R6 h组相比,抑制HMGB1使C3表达减少(P<0.05),S100A10表达增多(P<0.05),细胞的迁移能力增强;(3)与OGD6 h/R6 h组相比,OGD6 h/R6 h+CLI 095组TLR4表达减少(P<0.05),OGD6 h/R6 h+CLI 095组和OGD6 h/R6 h+BAY 11-7082组NF-κB表达减少,C3表达减少,S100A10表达增多(P<0.05);(4)结果表明,星形胶质细胞在OGD/R后可以活化为2种不同亚型的反应性星形胶质细胞,抑制HMGB1表达可以减少A1型反应性星形胶质细胞,增多A2型反应性星形胶质细胞,细胞迁移能力增加,主要是通过TLR4/NF-κB通路产生影响。 展开更多
关键词 脊髓损伤 星形胶质细胞 氧糖剥夺 复氧复糖 高迁移率族蛋白B1 A1型反应性星形胶质细胞 a2型反应性星形胶质细胞 toll样受体4 核转录因子ΚB
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β淀粉样蛋白受体PirB对小鼠星形胶质细胞增殖及反应性增生的影响 被引量：1
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作者 赵沅杰 拓振杰 +2 位作者 尚培骏 杨锦雯 张晓华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期82-90,共9页
目的观察β淀粉样蛋白(Aβ)受体PirB对小鼠星形胶质细胞增殖和反应性增生的影响。方法培养小鼠原代星形胶质细胞,将细胞分为对照组、Aβ组、Aβ+0.2μmol/L PEP组、Aβ+0.4μmol/L PEP组、Aβ+Fluspirilene组、Aβ+GFP-LV组和Aβ+mPirB... 目的观察β淀粉样蛋白(Aβ)受体PirB对小鼠星形胶质细胞增殖和反应性增生的影响。方法培养小鼠原代星形胶质细胞,将细胞分为对照组、Aβ组、Aβ+0.2μmol/L PEP组、Aβ+0.4μmol/L PEP组、Aβ+Fluspirilene组、Aβ+GFP-LV组和Aβ+mPirB-LV组。分别采用PirB的可溶性胞外段PEP或PirB抑制剂Fluspirilene处理星形胶质细胞,抑制内源性PirB受体;或采用慢病毒转染过表达PirB基因,其后给予Aβ1-42寡聚体处理。采用RTCA和EdU法观察细胞增殖情况,Real-time PCR检测星形胶质细胞反应性增生相关S-100钙结合蛋白B(S-100β)、波形蛋白(Vimentin)、巢蛋白(Nestin)、淀粉样前体蛋白(APP)的mRNA表达水平,Western blotting检测神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达水平。结果RTCA法检测结果显示,给药后各组标准化细胞指数(NCI)值均骤降,其后逐步升高并趋于平稳。EdU染色结果显示,与对照组比较,Aβ组星形胶质细胞增殖活性明显增强(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.2μmol/L PEP组、Aβ+0.4μmol/L PEP组和Aβ+Fluspirilene组细胞增殖活性均明显降低(P<0.01或P<0.001)。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,Aβ组GFAP、S-100β、Vimentin、Nestin、APP和PirB的mRNA表达量均明显增高(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.4μmol/L PEP组GFAP、S-100β、Vimentin、Nestin、APP和PirB的m RNA表达量均明显下降(P<0.01);与Aβ+GFP-LV组比较,Aβ+mPirB-LV组GFAP、S-100β、Vimentin、Nestin、APP和PirB的mRNA表达量均明显增高(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与对照组比较,Aβ组GFAP表达明显增高(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+0.4μmol/L PEP组GFAP表达明显下降(P<0.05)。结论PirB是调节星形胶质细胞反应性增生和增殖的上游分子,抑制星形胶质细胞PirB受体可能是治疗阿尔茨海默病的潜在方法。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 反应性星形胶质细胞增生 PirB 星形胶质细胞 增殖
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通窍活血汤含药脑脊液抑制星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的机制研究
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作者 刘飞飞 申友奎 +1 位作者 陶开亮 张言涛 《浙江医学》 CAS 2024年第1期1-8,I0003,共9页
目的探讨通窍活血汤含药脑脊液(TQHXD-CSF)对星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的影响以及其调控IL-33/肿瘤发生抑制蛋白(ST)2信号通路相关机制。方法将体外培养的星形胶质细胞按随机数字表法分为正常组(含20%正常脑脊液)、模型组(含20... 目的探讨通窍活血汤含药脑脊液(TQHXD-CSF)对星形胶质细胞机械性损伤后炎症反应的影响以及其调控IL-33/肿瘤发生抑制蛋白(ST)2信号通路相关机制。方法将体外培养的星形胶质细胞按随机数字表法分为正常组(含20%正常脑脊液)、模型组(含20%正常脑脊液)、TQHXD-CSF组(含20%TQHXD-CSF)和跨膜型ST2(ST2L)中和抗体+TQHXD-CSF组(含20%TQHXD-CSF+5、10、20μg/mL ST2L中和抗体);除正常组外,其余各组均按星形胶质细胞机械性损伤模型构建方法处理细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性,ELISA法检测细胞上清液IL-33、ST2L、IL-1β及转化生长因子β1(TGF-β1)水平,Western blot、qRT-PCR法分别检测细胞IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组星形胶质细胞出现反应性增生改变,细胞活性及TGF-β1水平均明显降低(均P<0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05);与模型组比较,TQHXD-CSF组细胞形态明显改善,细胞活性及TGF-β1水平均明显升高(均P<0.05),IL-33、ST2L、IL-1β水平以及IL-33、ST2L蛋白及mRNA表达水平均明显降低(均P<0.05)。与TQHXD-CSF组比较,ST2L中和抗体(5、10、20μg/mL)+TQHXD-CSF组IL-1β水平均明显降低(均P<0.05),ST2L中和抗体(10、20μg/mL)+TQHXD-CSF组TGF-β1水平均明显升高(均P<0.05)。结论TQHXD-CSF能够抑制星形胶质细胞机械性损伤后的炎症反应,其作用机制可能与下调IL-33/ST2信号通路有关。 展开更多
关键词 通窍活血汤 星形胶质细胞 含药脑脊液 白细胞介素33 肿瘤发生抑制蛋白2 信号通路 炎症反应
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诱导型一氧化氮合酶在反应性及肿瘤性星形胶质细胞中的表达 被引量：2
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作者 王爱春 董燕燕 +3 位作者 张春庆 李丹阳 王丹丹 戚基萍 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第9期1061-1064,共4页
目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、突变型p53及VEGF在反应性及肿瘤性星形胶质细胞中的表达及其在星形胶质细胞瘤发生发展、血管形成中的作用。方法:应用组织芯片及免疫组织化学技术检测12例正常脑组织、49例星形细胞反应性增生、49... 目的:探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、突变型p53及VEGF在反应性及肿瘤性星形胶质细胞中的表达及其在星形胶质细胞瘤发生发展、血管形成中的作用。方法:应用组织芯片及免疫组织化学技术检测12例正常脑组织、49例星形细胞反应性增生、49例低级别(I-II级)及50例高级别(III-IV级)星形胶质细胞瘤中iNOS、突变型p53、VEGF表达情况。结果:在正常脑组织中三者均为阴性表达;从星形细胞反应性增生组到高级别星形细胞瘤组,三者的阳性表达率均呈升高趋势,分别为:iNOS:28.89%(13/45),57.75%(27/47),81.63%(40/49);p53:23.81%(10/42),53.66%(22/41),79.55%(35/44);VEGF:22.73%(10/44),44.19%(19/43),69.77%(30/43),并且三者在星形细胞反应性增生组及低级别星形胶质细胞瘤组中的表达差异显著(P<0.05);各实验组中iNOS与p53表达水平一致性较好,具有明显的相关性(P<0.05);而iNOS与VEGF在低级别及高级别星形胶质细胞瘤组中表达水平具有较好的一致性及明显的相关性(P<0.05),在反应性增生组表达无相关性(P>0.05)。结论:iNOS、突变型p53及VEGF的过表达是胶质瘤发生的早期分子生物学事件,三者相互作用共同促进星形胶质细胞瘤的发生发展及血管的形成;单一或联合检测可能有助于星形细胞反应性增生及低级别星形细胞瘤的鉴别诊断。 展开更多
关键词 诱导型一氧化氮合酶(iNOS) 突发型p53 VEGF 星形胶质细胞反应性增生 星形胶质细胞瘤 肿瘤发生 血管生成
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Bcl-2在反应性和肿瘤性星形胶质细胞中表达的区别及意义 被引量：1
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作者 张春庆 李丹阳 《齐齐哈尔医学院学报》 2007年第23期2828-2830,共3页
目的探讨Bcl—2和ki—67蛋白在星形胶质细胞反应性增生与低级别星形胶质细胞瘤中表达的区别及意义。方法应用组织芯片和免疫组化染色技术检测正常脑组织、星形胶质细胞反应性增生、低级别（I～Ⅱ级）和高级别（Ⅲ～Ⅳ级）星形胶质细胞瘤... 目的探讨Bcl—2和ki—67蛋白在星形胶质细胞反应性增生与低级别星形胶质细胞瘤中表达的区别及意义。方法应用组织芯片和免疫组化染色技术检测正常脑组织、星形胶质细胞反应性增生、低级别（I～Ⅱ级）和高级别（Ⅲ～Ⅳ级）星形胶质细胞瘤中Bcl—2和ki—67蛋白的表达情况。结果正常脑组织中两者均为阴性表达；星形胶质细胞反应性增生组中Bcl—2和ki—67阳性率分别为26．7％、22．2％；低级别星形胶质细胞瘤组中Bcl—2和ki—67阳性率分别为50．0％、70．2％；高级别星形胶质细胞瘤组中Bcl—2和ki—67阳性率分别为79．2％、95．2％。Bcl—2和ki—67在各实验组问比较均差异显著（P〈0．01）；Bcl—2和ki—67表达与组织学分级密切相关（P〈0．01）；Bcl—2与ki—67表达密切相关（P〈0．05）。结论Bcl—2在星形胶质细胞瘤的发生、发展中起重要作用；Bcl—2和ki—67联合应用在星形胶质细胞反应性增生与低级别星形胶质细胞瘤的鉴别诊断中可能会有一定的意义。 展开更多
关键词 组织芯片 星形胶质细胞反应性增生 星形胶质细胞瘤 Bcl—2
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CD4^(+)T细胞相关的细胞因子促使由诱导性多能干细胞衍生的中脑星形胶质细胞表现出慢性促炎症表型
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作者 Adina N MacMahon Copas Sarah F McComish +6 位作者 Andreea Petrasca Rachel McCormack Daniel Ivers Anna Stricker Jean M Fletcher Maeve A Caldwell 唐颖馨 《神经损伤与功能重建》 2024年第8期F0003-F0003,共1页
星形胶质细胞是维持稳态的介质,但在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中参与神经炎症。越来越多的证据表明外周免疫细胞参与了PD的发病机制。因此,本研究旨在确定外周免疫细胞分泌的细胞因子在调节中脑星形胶质细胞反应性中的潜在作... 星形胶质细胞是维持稳态的介质,但在帕金森病(Parkinson’s disease,PD)中参与神经炎症。越来越多的证据表明外周免疫细胞参与了PD的发病机制。因此,本研究旨在确定外周免疫细胞分泌的细胞因子在调节中脑星形胶质细胞反应性中的潜在作用。人类诱导性多能干细胞(iPSC)衍生的中脑星形胶质细胞暴露于5%和10%的CD4^(+)T细胞条件培养基(CD4CM)24小时、72小时和7天,以评估长期暴露的影响。此外,星形胶质细胞还暴露于Th17细胞细胞因子IL-17A(10 ng/mL),单独或与TNF-α(0.3 ng/mL)结合,在24小时、72小时和7天评估2种细胞因子可能的协同效应。CD4CM在中脑星形胶质细胞中引起了急性及长期的变化。观察到了NFκB向细胞核的转移增加,以及在24小时时促炎基因IL-1β和CXCL10的表达增加;在24小时和48小时时C3、LCN2和IL-6的表达增加;同时在这些时间点促炎细胞因子IL-6和CXCL10的释放也有所增加。IL-17A和TNF-α的组合对增加促炎基因表达和细胞因子释放产生了协同效应。IL-17A和TNF-α在24小时时增加了S100β的强度,在72小时时减少了细胞核面积并增加了星形胶质细胞的圆度。在72小时时观察到了γH2AX强度的协同效应,并且在7天时观察到了乳酸脱氢酶(LDH)释放的增加。我们的结果表明,IL-17A和TNF-α协同作用,增强了中脑星形胶质细胞的反应性,其程度类似于CD4CM。这突出了外周免疫细胞分泌的细胞因子在增强中脑星形胶质细胞反应状态方面的重要性,并提示了它们在PD发病机制中的可能作用。 展开更多
关键词 帕金森病 星形胶质细胞 细胞因子 诱导性多能干细胞 神经炎症 反应性星形胶质细胞
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少突胶质细胞与2型星形胶质细胞中S-100β表达差异性的研究
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作者 卢玉仙 张海燕 +2 位作者 刘珺 孙茂民 夏春林 《解剖科学进展》 CAS 2008年第3期309-311,共3页
目的研究少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)与2型星形胶质细胞(type-2astrocyte,T2A)中S-100的表达。方法根据各种胶质细胞的生长时间的差异及细胞的黏附性不同,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的O-2A祖细胞;免疫细胞化学染色法观... 目的研究少突胶质细胞(oligodendrocytes,OL)与2型星形胶质细胞(type-2astrocyte,T2A)中S-100的表达。方法根据各种胶质细胞的生长时间的差异及细胞的黏附性不同,通过机械振荡法和差速贴壁法获得纯化的O-2A祖细胞;免疫细胞化学染色法观察S-100β在O-2A谱系细胞中的表达情况。结果O-2A祖细胞在含有PDGF、bFGF的培养液中培养3d,分化成T2A,培养5d分化成OL;OL中S-100β免疫反应呈现阳性,T2A中不表达S-100β。结论O-2A谱系细胞中的S-100β的表达与O-2A祖细胞向OL分化有关。 展开更多
关键词 O-2A祖细胞 少突胶质细胞 2型星形胶质细胞 S-100Β
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小胶质细胞极化在神经系统炎症反应中的作用机制
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作者 曹文达 胡娜娜 +3 位作者 李磊 姚利和 王天红 谷有全 《新医学》 2025年第3期316-322,共7页
在中枢神经系统当中,小胶质细胞约占细胞总数的10%,它们是神经系统中的主要免疫细胞,负责免疫监测、炎症应答和清除有害物质。当神经系统遭受损伤、感染或炎症刺激时,小胶质细胞会被激活为巨噬细胞样态,并释放炎症介质和细胞因子。这些... 在中枢神经系统当中,小胶质细胞约占细胞总数的10%,它们是神经系统中的主要免疫细胞,负责免疫监测、炎症应答和清除有害物质。当神经系统遭受损伤、感染或炎症刺激时,小胶质细胞会被激活为巨噬细胞样态,并释放炎症介质和细胞因子。这些分子可以引导免疫细胞的迁移、调节炎症反应,并参与修复和恢复过程。文章主要针对神经系统炎症反应中小胶质细胞激活以及作用机制,深入阐述神经系统炎症反应过程,以及在一些特定神经系统疾病中小胶质细胞发挥的作用。 展开更多
关键词 神经系统炎症反应 小胶质细胞 M1型极化 M2型极化
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A1/A2反应性星形胶质细胞在缺血性脑卒中的作用 被引量：6
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作者 虞子宁 张丽梅 +1 位作者 黄志华 李良东 《赣南医学院学报》 2020年第5期445-450,共6页
缺血性脑卒中发生时,缺血缺氧会触发一系列事件,包括炎症反应、兴奋毒性、氧化应激和细胞程序性死亡,从而导致严重的脑损伤。缺血区星形胶质细胞活化,表现出两种不同的功能表型,即以炎症刺激为主诱导的神经毒性A1型星形胶质和缺血诱导... 缺血性脑卒中发生时,缺血缺氧会触发一系列事件,包括炎症反应、兴奋毒性、氧化应激和细胞程序性死亡,从而导致严重的脑损伤。缺血区星形胶质细胞活化,表现出两种不同的功能表型,即以炎症刺激为主诱导的神经毒性A1型星形胶质和缺血诱导的神经保护性A2型反应性星形胶质。A1型星形胶质细胞通过产生和释放促炎因子、趋化因子和神经毒性介质,使细胞存活、增殖、分化等功能紊乱,A2型星形胶质细胞通过其吞噬功能以及释放神经营养因子和神经源性转录因子发挥神经保护作用。因此,通过调节A1/A2反应性星形胶质细胞的激活,既可以减小毒性作用,又可以加强保护作用。本文讨论了星形胶质细胞的功能以及A1/A2反应性星形胶质细胞在缺血性脑卒中的作用,为如何减少星形胶质细胞的不利影响和放大星形胶质细胞对神经保护提供新思路,也为临床脑卒中治疗提供新策略。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 反应性星形胶质细胞 神经毒性 神经保护
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外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响
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作者 吴文涛 葛瑞民 +3 位作者 董林 刘秀秀 张小燕 沈丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期98-101,共4页
目的探讨外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响。方法构建可表达持续活化型Gli2的慢病毒载体,包装慢病毒颗粒,继而感染小鼠星形胶质细胞,对其生物学特性的改变进行鉴定。结果研究发现,含有外源表达的持续活化型Gli... 目的探讨外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响。方法构建可表达持续活化型Gli2的慢病毒载体,包装慢病毒颗粒,继而感染小鼠星形胶质细胞,对其生物学特性的改变进行鉴定。结果研究发现,含有外源表达的持续活化型Gli2的小鼠星形胶质细胞在神经干细胞培养基中连续培养13 d后可获得形成细胞球的能力,且形成的细胞球与正常的小鼠神经球在形态上相近;对所形成的细胞球做免疫荧光染色,结果显示神经干细胞的特异性标志物Nestin呈阳性。结论在小鼠星形胶质细胞中外源表达持续活化型Gli2后可使其获得形成神经球样细胞球的能力。 展开更多
关键词 神经干细胞 中枢神经系统损伤 持续活化型 GLI2 神经球 慢病毒转染法 星形胶质细胞 NESTIN
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Foxp1在两种模型小鼠脑内反应性星形胶质细胞中的表达差异
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作者 杨娜娜 龚劲雯 +3 位作者 杨倩颖 解学敏 赵海霞 苏炳银 《成都医学院学报》 CAS 2023年第4期409-415,共7页
目的观察Foxp1在两种模型小鼠脑内反应性星形胶质细胞中的表达差异。方法利用脂多糖(LPS)、大脑中动脉栓塞(MCAO)构建LPS模型和MCAO模型小鼠,诱导两种模型小鼠脑内产生反应性星形胶质细胞;通过免疫荧光染色方法,使用胶质纤维酸性蛋白(GF... 目的观察Foxp1在两种模型小鼠脑内反应性星形胶质细胞中的表达差异。方法利用脂多糖(LPS)、大脑中动脉栓塞(MCAO)构建LPS模型和MCAO模型小鼠,诱导两种模型小鼠脑内产生反应性星形胶质细胞;通过免疫荧光染色方法,使用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、离子钙结合适配器分子1(Iba1)、神经元特异性核蛋白(NeuN)分别标记模型小鼠脑内阳性的星形胶质细胞、小胶质细胞及神经元,并结合苏木精-伊红染色观察细胞形态,鉴定模型是否构建成功;采用免疫荧光双标方法检测Foxp1与GFAP或Iba1在两种模型小鼠大脑皮层(CTX)、纹状体(STR)、海马(HIP)3个脑区中的共标情况。结果两种模型小鼠构建成功,并且成功诱导小鼠脑内产生反应性星形胶质细胞;Foxp1和GFAP双阳性细胞数在LPS模型小鼠的CTX、STR、HIP3个脑区均明显增加(P<0.05),而在MCAO模型小鼠的CTX和STR区域中均明显减少(P<0.05),在HIP区域中无明显变化;在LPS模型及MCAO模型小鼠的STR区域中均未检测到Foxp1和Iba1双阳性细胞。结论Foxp1在LPS模型小鼠脑内的反应性星形胶质细胞中表达上升,而在MCAO模型中表达降低。 展开更多
关键词 Foxp1 反应性星形胶质细胞 脂多糖 脑缺血
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