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1型鸭疫里氏杆菌的分离鉴定及其ompA基因B细胞表位预测 被引量:1
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作者 余波 徐景峨 +1 位作者 王璇 谭诗文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第12期51-55,共5页
本研究从贵州发病鸭中分离到1株致病菌,经生化试验、16S rRNA序列分析、血清学试验和动物回归试验,鉴定为1型鸭疫里氏杆菌(RA),药敏试验结果表明,其对头孢拉定、头孢曲松钠、头孢噻肟和氟苯尼考高度敏感;同时根据GenBank中鸭疫里氏杆菌o... 本研究从贵州发病鸭中分离到1株致病菌,经生化试验、16S rRNA序列分析、血清学试验和动物回归试验,鉴定为1型鸭疫里氏杆菌(RA),药敏试验结果表明,其对头孢拉定、头孢曲松钠、头孢噻肟和氟苯尼考高度敏感;同时根据GenBank中鸭疫里氏杆菌ompA基因序列,设计1对引物,成功克隆出鸭疫里氏杆菌ompA基因,扩增产物大小为1149 bp。采用DNAStar Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸭疫里氏杆菌ompA基因的氨基酸序列进行了B细胞表位预测,为进一步研究鸭疫里氏杆菌表位疫苗和分子诊断技术的建立奠定基础。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌 ompA基因 b细胞表位预测
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鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的克隆与B细胞表位预测
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作者 余波 徐景峨 +1 位作者 谭诗文 王璇 《上海畜牧兽医通讯》 2012年第4期6-7,共2页
根据Gen Bank中的鸡肠炎沙门氏菌ompA基因序列,设计了1对引物,成功克隆出鸡肠炎沙门氏菌ompA基因,扩增产物大小为1053bp。采用DNA Star Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的氨... 根据Gen Bank中的鸡肠炎沙门氏菌ompA基因序列,设计了1对引物,成功克隆出鸡肠炎沙门氏菌ompA基因,扩增产物大小为1053bp。采用DNA Star Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸡肠炎沙门氏菌ompA基因的氨基酸序列进行了B细胞表位预测,为进一步研究鸡肠炎沙门氏菌表位疫苗和分子诊断技术的建立奠定基础。 展开更多
关键词 鸡肠炎沙门氏菌 ompA基因 b细胞表位预测
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HPV58型E6蛋白B细胞表位预测与分析
3
作者 叶晓鲜 毛珊珊 +4 位作者 宋易玲 王路得 蒋朋飞 朱珊丽 张丽芳 《温州医科大学学报》 CAS 2018年第8期547-551,共5页
目的:预测分析高危型人乳头瘤病毒(HPV)58型E6蛋白的B细胞线性表位及其结构。方法:从瑞士生物信息研究所提供的Swissprot蛋白质数据库中检索到E6蛋白序列,采用计算机辅助生物信息学软件进行分析,用Expasy服务器在线软件分析预测E6蛋白... 目的:预测分析高危型人乳头瘤病毒(HPV)58型E6蛋白的B细胞线性表位及其结构。方法:从瑞士生物信息研究所提供的Swissprot蛋白质数据库中检索到E6蛋白序列,采用计算机辅助生物信息学软件进行分析,用Expasy服务器在线软件分析预测E6蛋白的理化性质、二级结构及三维空间结构,采用DNASTAR软件包中的protean软件进一步分析亲水性、柔韧性、表面可及性、抗原性与极性等特性,再结合氨基酸抗原指数(AI)计算法算出平均AI,根据AI大小预测HPV58型E6蛋白的B细胞线性表位的可能肽段,并进行同源性匹配分析。结果:HPV58型E6蛋白的B细胞线性表位可能位于以下肽段位置:N端8~15(KPRTLHDL)、27~44(ELKCVECKKTLQRSEVYD)、108~127(RPLCPQEKKRHVDLNKRFHN)、141~147(RPRRRQT)肽段及其周围。同源性分析得出肽段27~44、141~147为可能的B细胞线性表位,为HPV58型E6蛋白B细胞表位的独特序列,肽段8~15与HPV33型E6蛋白同源性匹配为100%,108~127与HPV33型E6、HPV9型E6蛋白同源性匹配为100%。结论:27~44、141~147肽段为可能的HPV58型E6蛋白的B细胞优势表位。 展开更多
关键词 HPV58型 E6蛋白 b细胞表位预测 生物信息学分析
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大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与B细胞表位预测
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作者 王芳 康超 +2 位作者 余波 李永霞 周思旋 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期14-16,22,共4页
为了研究大鲵虹彩病毒(GSIV)MCP基因以及预测其B细胞表位,试验采用PCR方法扩增大鲵虹彩病毒MCP基因,采用生物学软件对大鲵虹彩病毒MCP基因的氨基酸序列进行B细胞表位预测分析。结果表明:扩增产物大小为1 392 bp,将该序列与Gen Bank中大... 为了研究大鲵虹彩病毒(GSIV)MCP基因以及预测其B细胞表位,试验采用PCR方法扩增大鲵虹彩病毒MCP基因,采用生物学软件对大鲵虹彩病毒MCP基因的氨基酸序列进行B细胞表位预测分析。结果表明:扩增产物大小为1 392 bp,将该序列与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因中的中国分离株核苷酸相似性为99.8%。MCP蛋白有多个抗原表位位点,抗原性指数较高,而这些区域可能是B细胞抗原表位区域。说明预测的结构、亲水性、柔性区域和抗原指数可用于大鲵虹彩病毒亚单位疫苗和分子诊断试剂的研究。 展开更多
关键词 大鲵虹彩病毒(GSIV) MCP基因 b细胞表位预测 氨基酸序列 抗原指数
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鸭肠炎病毒UL6基因B细胞表位的预测及其主要抗原域的原核表达 被引量:6
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作者 孙涛 程安春 +3 位作者 汪铭书 郭宇飞 贾仁勇 沈婵娟 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期939-945,共7页
采用DNAStar Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸭肠炎病毒(DEV)CHv毒株UL6基因(GenBank登录号EF055890)的氨基酸序列进行了B细胞表位预测。结果显示,UL6蛋白羧基端第Thr507~Gln515、Thr521~... 采用DNAStar Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸭肠炎病毒(DEV)CHv毒株UL6基因(GenBank登录号EF055890)的氨基酸序列进行了B细胞表位预测。结果显示,UL6蛋白羧基端第Thr507~Gln515、Thr521~Met529、Asp531~Phe539、Gly544~Asn562、Thr568~Gln585、Lys592~Val604、A1a681~Ala778和Tyr780~Lys790区域内含有优势B细胞表位。以DEV CHv毒株基因组作为PCR模板,利用Oligo6.0软件设计了1对引物,整体扩增涵盖上述具有优势表位的基因片段,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得表达载体pET-32a—UL6M,再将其转化至E.coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导,外源基因获得了良好表达。以免抗DEV多克隆血清进行Western blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生特异性反应。提示,该氨基酸片段可能含有软件预测的线性表位区。 展开更多
关键词 鸭肠炎病毒 UL6基因 b细胞表位预测 抗原域 原核
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人类表皮生长因子受体2的B细胞表位初步预测分析 被引量:2
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作者 周珠哈 王安 +3 位作者 吴乐 朱珊丽 朱冠保 张丽芳 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期506-509,共4页
目的预测人类表皮生长因子受体2(HER2/neu)的B细胞表位,为肿瘤免疫治疗提供理论基础。方法以生物信息学软件综合预测筛选HER2/neu可能B细胞表位,以吴氏平均抗原性指数为标准,确定目的表位。结果HER2/neu为一跨膜蛋白,其二级结构中以无... 目的预测人类表皮生长因子受体2(HER2/neu)的B细胞表位,为肿瘤免疫治疗提供理论基础。方法以生物信息学软件综合预测筛选HER2/neu可能B细胞表位,以吴氏平均抗原性指数为标准,确定目的表位。结果HER2/neu为一跨膜蛋白,其二级结构中以无规则卷曲的区域出现较多。其N端第497~504,939~943,1 106~1 116,1 140~1 158,1 166~1 175,1 225~1 234,1 240~1 246区段,可能为HER2/neu的优势B细胞表位。结论应用多参数预测HER2/neu的B细胞表位,可进一步为HER2/neu相关肿瘤治疗性表位疫苗分子设计和研究提供理论依据。 展开更多
关键词 人类皮生长因子受体2 二级结构 b细胞表位预测 肿瘤疫苗
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预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其抗原性的鉴定
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作者 冯宇 万敏 +3 位作者 王宣军 张培因 于永利 王丽颖 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期113-116,共4页
目的研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性。方法用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段。通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的p... 目的研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性。方法用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段。通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的pET28a(+)载体中,构成重组载体pET28-chap10-S2epi。重组蛋白Chap10-S2epi在E.coliBL21(DE3)中表达并以SDS-PAGE和Westernblot进行鉴定。用纯化的chap10-S2epi免疫家兔制备抗血清,并通过ELISA判断Chap10-S2epi的抗原性。结果成功构建并在大肠杆菌中表达了Chap10-S2pei融合蛋白。Chap10-S2epi免疫的抗血清能识别真核细胞表达的SARS冠状病毒全长S2刺突蛋白。结论预测的SARS冠状病毒S2刺突蛋白B细胞表位肽能够诱导家兔产生针对S2蛋白的抗体,为研制抗SARS病毒基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒剌突蛋白 b细胞表位预测 伴侣10分子 S2亚基
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新型冠状病毒M蛋白结构和B细胞表位预测 被引量:2
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作者 叶晓鲜 李明洋 +3 位作者 朱珊丽 崔怀瑞 王昱 张丽芳 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期400-405,共6页
目的预测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)M蛋白的结构及可能的B细胞优势表位。方法从NCBI GenBank数据库中检索SARS-CoV-2 M蛋白的氨基酸序列,应用计算机辅助生物信息学软件进行分析,利用ExPASy服务器上的ProtParam、SOPMA、GOR、Swiss Model... 目的预测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)M蛋白的结构及可能的B细胞优势表位。方法从NCBI GenBank数据库中检索SARS-CoV-2 M蛋白的氨基酸序列,应用计算机辅助生物信息学软件进行分析,利用ExPASy服务器上的ProtParam、SOPMA、GOR、Swiss Model分别预测M蛋白的理化性质、二级结构、三级结构;利用TMHMM、Phobius线上软件预测M蛋白的跨膜区域,并结合DNASTAR软件进行亲水性、柔韧性、表面可能性、抗原性及极性等综合分析;利用Vector NTI软件分析冠状病毒属M蛋白的同源性。结果 SARS-COV-2 M蛋白由222个氨基酸组成,为稳定的跨膜蛋白,以α螺旋为主。多种参数进行综合分析推测,其可能的B细胞优势表位为第5-14位氨基酸(NGTITVEELK)。SARS-CoV-2 M蛋白与SARS-CoV M蛋白、Bat SARS-like CoV的M蛋白同源性匹配最高,达90%。结论 5-14肽段为SARS-CoV-2 M蛋白可能的B细胞优势表位。本研究为实验确定SARS-CoV-2 M蛋白的B细胞表位、免疫识别提供了参考,为进一步研发疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 M蛋白 生物信息学 b细胞表位预测 同源性分析
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PEDV N蛋白的原核表达纯化及B细胞抗原表位预测分析 被引量:3
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作者 郭富城 金丽 +4 位作者 苏强 粟雨芯 李方琳 陈士恩 马晓霞 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期762-769,共8页
本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌E.... 本研究旨在对猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)N基因进行克隆构建、表达与其B细胞抗原表位性质的预测。将PEDV的N基因进行PCR扩增,克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经酶切验证获得阳性克隆,将阳性克隆在表达菌E.coli BL21(DE3)中表达。通过对表达条件及纯化条件的优化,获得高纯度表达蛋白。利用生物信息同源模型化软件Swiss-Pdb Viewer建立PEDV-N蛋白的3D结构,并根据生物信息学软件DNA-Star预测PEDV-N蛋白的二级结构、抗原性、亲水性和表面可及性分析,综合分析预测其B细胞抗原表位。经预测PEDV-N蛋白氨基酸序列中存在13个B细胞优势抗原表位区域。研究结果将进一步为PEDV-N蛋白体外表达产物的应用及研制基因工程疫苗提供理论基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 N蛋白 纯化 二级结构 b细胞抗原预测
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吉林磐石新分离株PCV2全基因克隆及Cap蛋白B细胞抗原表位预测
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作者 苗丽娟 尹柏双 +1 位作者 张立春 刘东旭 《吉林农业科技学院学报》 2018年第4期1-3,7,115,共5页
对吉林市磐石某猪场采集疑似为猪圆环病毒2型感染的病死猪的脏器进行PCR检测,同时接种PK15细胞,成功分离到1株猪圆环病毒2型。通过对该毒株全基因组进行克隆并测序,采用DNAstar软件对Cap蛋白进行二级结构分析和B淋巴细胞抗原表位的预测... 对吉林市磐石某猪场采集疑似为猪圆环病毒2型感染的病死猪的脏器进行PCR检测,同时接种PK15细胞,成功分离到1株猪圆环病毒2型。通过对该毒株全基因组进行克隆并测序,采用DNAstar软件对Cap蛋白进行二级结构分析和B淋巴细胞抗原表位的预测,结果表明:该新分离株Cap蛋白具有多处抗原优势表位,为抗原表位鉴定、基因工程疫苗研制和单克隆制备奠定基础。 展开更多
关键词 PCV2 全基因克隆 b细胞抗原预测
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禽波氏杆菌HagA蛋白基因的序列分析及抗原表位预测
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作者 袁朋 朱瑞良 +1 位作者 崔晨晨 杨萍萍 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第10期1642-1647,共6页
试验旨在对禽波氏杆菌的血凝素HagA蛋白的二级结构与B细胞抗原优势表位进行预测,探讨以血凝素HagA蛋白制作单克隆抗体的可能性。首先对禽波氏杆菌的血凝素hagA基因进行了PCR扩增以及序列测定,利用生物信息学的相关软件与分析方法,对血凝... 试验旨在对禽波氏杆菌的血凝素HagA蛋白的二级结构与B细胞抗原优势表位进行预测,探讨以血凝素HagA蛋白制作单克隆抗体的可能性。首先对禽波氏杆菌的血凝素hagA基因进行了PCR扩增以及序列测定,利用生物信息学的相关软件与分析方法,对血凝素HagA蛋白的二级结构以及B细胞抗原表位进行分析预测。经综合分析表明,禽波氏杆菌的HagA蛋白氨基酸序列中存在7个B细胞优势抗原表位区域,6个可能的糖基化位点。研究结果为进一步分析禽波氏杆菌HagA蛋白的生物学功能、制备单抗和研制疫苗等奠定了基础。 展开更多
关键词 禽波氏杆菌 HagA蛋白 二级结构 b细胞抗原预测
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The Prediction of B Cell Epitopes for VP73 Protein of African Fever Virus 被引量:9
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作者 李倩 姚淑霞 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2008年第1期89-93,共5页
[Objective] The B cell epitopes for VP73 protein of African swine fever virus was predicted. [ Method] Based on the analysis of the amino acid sequence and the flexible regions of VP73 protein, the B cell epitopes for... [Objective] The B cell epitopes for VP73 protein of African swine fever virus was predicted. [ Method] Based on the analysis of the amino acid sequence and the flexible regions of VP73 protein, the B cell epitopes for VP73 protein of African swine fever virus were predicted by method of Kyte-Doolittie, Emini and Jameson-Wolf. [Result] The B cell epitopes were located at or adjacent to the N-terminal No. 11 - 18,26 -48,73 -82,136 - 150,159 - 174,181 - 189,191 - 210,247 - 276,279 - 295,313 - 323 and 382 - 392. [Conclusion] The multi-parameters analytic method was adopted to predict the B cell epitopes for VP73 protein of African swine fever virus, which laid solid foundation for further characterizing the protein of VP73 and researching epitope vaccine. 展开更多
关键词 African swine fever virus VP73 protein b cell epitope
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Prediction of Secondary Structure and B Cell Epitope of GH Protein from Acipenser sinensis 被引量:3
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作者 刘红艳 杨东 +1 位作者 张繁荣 余来宁 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第2期46-48,58,共4页
[ Objective] The aim was to predict the secondary structure and B cell epitope of growth hormone (GH) protein from Acipenser sinensis. [Method] With the amino acid sequence of GH protein from A. sinensis as the base... [ Objective] The aim was to predict the secondary structure and B cell epitope of growth hormone (GH) protein from Acipenser sinensis. [Method] With the amino acid sequence of GH protein from A. sinensis as the base, the secondary structure of GH protein from A. sinensis was predicted by the method of Gamier-Robson, Chou-Fasman and Karpius-Schulz, and its cell epitope was predicted by the method of Kyte- Doolittle, Emini and Jameson-Wolf. [Result] The sections of 18 -23, 55 -55, 67 -73, 83 -86,112 -114,151 -157 and 209 -211 in the N terminal of GH protein molecule had softer structure and these sections could sway or fold to produce more complex tertiary structure. The sections of 19 -23, 51 -71,84 -95, 128 -139, 164 -176 and 189 -195 in the N terminal of GH protein could be the epitope of B cell and there were flexible regions in these sections or near these sections of GH protein molecule. So the dominant regions could be in these sections or near these sections. [ Conclusion] The research provided the basis for the preparation of monoctonal antibody of GH protein from A. sinensis and provided the reference for the discussion for the molecular regulation mechanism of A. sinensis. 展开更多
关键词 Acipenser sinensis GH protein Secondary structure Cell epitope
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Advances of Bioinformatics Tools Applied in Virus Epitopes Prediction 被引量:7
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作者 Simon Rayner 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期1-7,共7页
In recent years,the in silico epitopes prediction tools have facilitated the progress of vaccines development significantly and many have been applied to predict epitopes in viruses successfully. Herein,a general over... In recent years,the in silico epitopes prediction tools have facilitated the progress of vaccines development significantly and many have been applied to predict epitopes in viruses successfully. Herein,a general overview of different tools currently available,including T cell and B cell epitopes prediction tools,is presented. And the principles of different prediction algorithms are reviewed briefly. Finally,several examples are present to illustrate the application of the prediction tools. 展开更多
关键词 EPITOPE bIOINFORMATICS Epitope prediction algorithms
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新型冠状病毒重组抗原制备、纯化及鉴定
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作者 范能全 张玲 +4 位作者 任学毅 杨辉 杨黎 范开 彭兰 《中国医药生物技术》 2022年第5期385-392,共8页
目的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的刺突蛋白(S)和核衣壳蛋白(N)重组抗原。方法利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列,用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模,运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表... 目的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的刺突蛋白(S)和核衣壳蛋白(N)重组抗原。方法利用Blast程序检索目标序列SARS-CoV-2的S蛋白和N蛋白的同源序列,用SWISS-MODEL软件对目标序列进行结构建模,运用DISCO TOPE对S蛋白和N蛋白的B细胞抗原表位进行分析,选取抗原表位较多的序列进行合成;重组抗原分离纯化后制备兔抗新冠病毒蛋白多抗,用Western blot检测抗原SARS-CoV-2的S蛋白以及N蛋白免疫学活性;用ELISA法检测自制抗原与市售抗体的结合能力。结果重组质粒pET-22b-SA、pET-22b-SB、pET-22b-SC、pET-22b-NA、pET-22b-NB测序鉴定结果显示正确;Western blot结果显示,重组抗原与山羊抗兔IgG-HRP有特异性结合反应,表明具有良好的免疫学反应;ELISA法结果显示,重组抗原结合能力明显强于市售抗N蛋白抗原。结论制备的抗原与不同靶IgG和IgM结合能力强,特异性高,具有开发成检测血清SARS-CoV-2特异性IgG和IgM抗体的试剂盒的潜力。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 刺突蛋白 核衣壳蛋白 b细胞表位预测 同源性分析
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毛皮动物肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛A基因克隆测序与生物信息分析 被引量:2
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作者 钟世勋 迟珊珊 +6 位作者 王振 姜晓东 刘丽萍 邵明旭 王传文 于翠莲 朱瑞良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期74-80,共7页
根据GenBank中肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛结构基因A(MrkA)JF759921的序列设计1对引物,对8株毛皮动物肺炎克雷伯菌进行克隆测序,并应用生物信息学相关软件和方法,预测MrkA蛋白二级结构和B细胞抗原表位。PCR扩增出了609bp的目的基因片段,生物... 根据GenBank中肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛结构基因A(MrkA)JF759921的序列设计1对引物,对8株毛皮动物肺炎克雷伯菌进行克隆测序,并应用生物信息学相关软件和方法,预测MrkA蛋白二级结构和B细胞抗原表位。PCR扩增出了609bp的目的基因片段,生物信息分析结果显示其开放阅读框架为609bp,编码202个氨基酸;二级结构以无规卷曲为主,有少量的α-螺旋和β-片层,少见β-转角,推测MrkA蛋白有8个B细胞优势抗原表位区域。结果表明,MrkA基因较稳定,其在进化过程中并未发生明显变异,为进一步分析肺炎克雷伯菌免疫机理、制备单克隆抗体和设计表位疫苗等奠定理论基础。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 MrkA基因 二级结构 b细胞抗原预测
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