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一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建
被引量：
7
1
作者
邓小昭
朱应
+2 位作者
刁振宇
齐义鹏
周宗安
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第2期155-160,共6页
用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以...
用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。
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关键词
bmnpv
bac
to
bac
策略
表达
系统
HBCAG
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职称材料
深海嗜压菌水通道蛋白AqpSS9在Bac-to-Bac家蚕杆状病毒系统中表达
被引量：
2
2
作者
陈旭
陈健
+4 位作者
黄磊
蔡谨
吕正兵
张耀洲
徐志南
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2011年第4期283-287,共5页
利用家蚕杆状病毒表达系统合成深海嗜压菌Photobacterium profundum SS9的新型水通道蛋白AqpSS9。首先通过家蚕核型多角体病毒BmNPV的Bac-to-Bac系统构建重组转移载体pFasBac HTB-AqpSS9,将其转化到含穿梭载体Bm-Bacmid的大肠杆菌Bm-DH1...
利用家蚕杆状病毒表达系统合成深海嗜压菌Photobacterium profundum SS9的新型水通道蛋白AqpSS9。首先通过家蚕核型多角体病毒BmNPV的Bac-to-Bac系统构建重组转移载体pFasBac HTB-AqpSS9,将其转化到含穿梭载体Bm-Bacmid的大肠杆菌Bm-DH10Bac中进行转座作用,白斑筛选得到重组穿梭载体Bacmid-AqpSS9。用脂质体介导将Bacmid-AqpSS9转染家蚕BmN细胞,在细胞内包装形成重组的BmNPV病毒rBm AqpSS9。利用SDS-PAGE及Western blot检测重组蛋白AqpSS9在家蚕培养细胞中的表达,结果显示目标蛋白被成功表达。该实验为新型水通道蛋白AqpSS9的进一步应用研究奠定了基础。
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关键词
水通道蛋白AqpSS9
bac-to—bac/bmnpv系统
表达
Photo
bac
terium
profundum
SS9
原文传递
题名
一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建
被引量：
7
1
作者
邓小昭
朱应
刁振宇
齐义鹏
周宗安
机构
南京军区军事医学研究所分子生物学实验室
武汉大学病毒研究所
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000年第2期155-160,共6页
基金
江苏省自然科学基金课题! (BK95 1 40 30 6 )
文摘
用家蚕核型多角体病毒的全基因组DNA与AcBacmidDNA共转染家蚕BmN细胞,构建转座一穿梭载体BmBacmid。另一供体质粒以转座方式将乙肝病毒e抗原基因HBeAg整合到BmBacmid的attTn7位点上成为重组rBmHBe。结果表明BmBacmid既能在大肠杆菌中以质粒的形式复制,又能在家蚕BmN细胞和草地夜蛾Sf9细胞中复制,形成感染性病毒粒子。Southernblotting证实重组病毒的构建是正确的。BmN细胞能正确识别与切割HBeAg信号肽序列,SDSPAGE表明HBeAg基因在家蚕细胞中高效表达,ELISA测定培养上清中HBeAg效价达1∶32000,细胞内HBeAg效价为1∶2000,培养液及细胞内的HBcAg含量极低(〈1∶160)。
关键词
bmnpv
bac
to
bac
策略
表达
系统
HBCAG
Keywords
Bm NPV, Ac
bac
mid, Transposon Tn7, HBeAg, Gene expression
分类号
S884.5 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
深海嗜压菌水通道蛋白AqpSS9在Bac-to-Bac家蚕杆状病毒系统中表达
被引量：
2
2
作者
陈旭
陈健
黄磊
蔡谨
吕正兵
张耀洲
徐志南
机构
浙江大学化学工程与生物工程系生物工程研究所
浙江理工大学生物化学研究所
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2011年第4期283-287,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.20736008
20876140)
浙江省杰出青年团队基金(R4090041)
文摘
利用家蚕杆状病毒表达系统合成深海嗜压菌Photobacterium profundum SS9的新型水通道蛋白AqpSS9。首先通过家蚕核型多角体病毒BmNPV的Bac-to-Bac系统构建重组转移载体pFasBac HTB-AqpSS9,将其转化到含穿梭载体Bm-Bacmid的大肠杆菌Bm-DH10Bac中进行转座作用,白斑筛选得到重组穿梭载体Bacmid-AqpSS9。用脂质体介导将Bacmid-AqpSS9转染家蚕BmN细胞,在细胞内包装形成重组的BmNPV病毒rBm AqpSS9。利用SDS-PAGE及Western blot检测重组蛋白AqpSS9在家蚕培养细胞中的表达,结果显示目标蛋白被成功表达。该实验为新型水通道蛋白AqpSS9的进一步应用研究奠定了基础。
关键词
水通道蛋白AqpSS9
bac-to—bac/bmnpv系统
表达
Photo
bac
terium
profundum
SS9
Keywords
Aquaporin AqpSS9,
bac
- to -
bac
/bmnpv
system, Expression, Photo
bac
terium profundum SS9
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
Q51 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种新型家蚕核多角体病毒Bac to Bac系统的构建
邓小昭
朱应
刁振宇
齐义鹏
周宗安
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2000
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
深海嗜压菌水通道蛋白AqpSS9在Bac-to-Bac家蚕杆状病毒系统中表达
陈旭
陈健
黄磊
蔡谨
吕正兵
张耀洲
徐志南
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2011
2
原文传递
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