^(131)I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133^+ HepG2干细胞的抑制作用 被引量：6

1

作者 侯妍利 陈兴月 +4 位作者 段丽群 唐敏 康强强 舒锦 李少林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期7-13,共7页

目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用。方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133... 目的:研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment,ScFv)在体外对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用。方法:免疫磁珠分选HepG2细胞,流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率,克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+HepG2细胞的"干性"。氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度。将分选出的CD133+HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组,MTT法检测各组中对CD133+HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+HepG2干细胞的生长抑制作用,流式细胞术检测各组细胞周期的变化。结果:分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞[(97.71±1.13)%vs(1.52±0.78)%,t=1.13、P=0.000]。CD133+HepG2细胞相对于CD133-HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力[(45.03±1.35)%vs(7.4±0.54)%;t=3.92,P=0.000]和体内成瘤能力。131I-CD133 ScFv的标记率为88.92%,放射化学纯度为98.63%。当131I为3.7 MBq/100μl、CD133抗体为1μg/100μl时,对CD133+HepG2细胞的抑制率最高,达(89.58±0.74)%;在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组,且呈时间依赖性。131I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为(27.50±1.12)%,较其余各组均明显减少(P<0.05)。结论:成功制备的131I-CD133 ScFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+HepG2干细胞的生长。 展开更多

关键词 肝癌干细胞 cd133 ^^131I 单克隆抗体 单链抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

人脐血CD133^+细胞体外短期培养中生物学特性的变化 被引量：9

2

作者 郝思国 孙关林 +1 位作者 邬维礼 吴英理 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期569-575,共7页

为了解脐血CD133+细胞的生物学特性及其在体外短期扩增培养中的变化 ,探讨其体外扩增的可行性 ,初步观察了脐血CD133+细胞的免疫表型、细胞周期、端粒酶活性以及粘附分子的表达等生物学特性及其在体外扩增中的动态变化并与CD34+细胞进... 为了解脐血CD133+细胞的生物学特性及其在体外短期扩增培养中的变化 ,探讨其体外扩增的可行性 ,初步观察了脐血CD133+细胞的免疫表型、细胞周期、端粒酶活性以及粘附分子的表达等生物学特性及其在体外扩增中的动态变化并与CD34+细胞进行比较。结果显示 ,新鲜脐血CD133+和CD34+细胞的含量分别为 ( 1.0 5±0 73) %和 ( 1.4 0± 0 .5 6 ) % ,CD34+细胞中 79.6 2 %为CD133+CD34+细胞 ,而CD133+细胞中 97%以上为CD133+CD34+细胞。短期扩增培养结果显示 ,CD133+细胞组扩增第 10天 ,CD133+,CD133+CD34+和CD34+CD38-细胞以及第 6天的CFU mix ,HPP CFC和CD34+CD38-细胞的扩增倍数要高于CD34+细胞组 ( P <0 .0 5 ) ;扩增中 ,CD133+CD34+细胞的比例逐渐下降 ,而CD133-CD34+和CD133-CD34-细胞的比例则逐渐上升。新鲜脐血CD133+和CD34+细胞的端粒酶活性较低 ,但高于CD34-细胞。扩增 1周后 ,端粒酶活性明显上调 ,15天以后又逐渐下降 ;90 %以上脐血CD133+细胞表达CD11a ,CD4 9d和CD5 4 ,约 5 0 %表达CD6 2L。扩增早期 ,CD4 9d表达上调 ,CD11a表达无明显变化 ,而CD5 4和CD6 2L则有下调趋势 ,随着扩增时间的延长 ,各种粘附分子的表达均有不同程度的下调。在整个扩增过程中 ,大部分CD34+细胞仍然表达CD11a,CD4 9d和CD5 4? 展开更多

关键词 脐血 ^cd133^+细胞 生物学 细胞周期 端粒酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

分离、鉴定CD133^+人肝癌干细胞以及^(131)I-CD133mAb对其生物学效应的影响 被引量：5

3

作者 侯妍利 唐敏 +4 位作者 陈兴月 段丽群 康强强 舒锦 李少林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期222-227,共6页

目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内... 目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131I标记CD133单克隆抗体(131ICD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131ICD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化。结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01)。CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力。131I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性。当131I 4.8 MBq/100μL、CD133mAb 4.8μg/100μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取此放射性浓度进行实验。24、48、72 h时各组对CD133+-Huh-7细胞的抑制作用明显高于Huh-7和HepG2细胞组,131I-CD133mAb组对3种细胞生长抑制率明显高于其余各组,抑制率随时间的增加而升高(P<0.01)。131I-CD133mAb作用CD133+-Huh-7细胞72 h后凋亡率为31.21%,明显高于其余2组(P<0.05)。细胞周期检测结果显示CD133+-Huh-7细胞G0/G1期减少54.77%,明显高于其余2组(P<0.05)。结论 CD133+细胞具有肿瘤干细胞特性,131I-CD133mAb能特异性结合CD133+-Huh-7细胞,调控细胞周期和诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 cd133 肝癌干细胞 ^^131I 单克隆抗体

在线阅读 下载PDF 职称材料

胃肠安及四藤方对人结肠癌细胞株干细胞CD133^+的影响 被引量：4

4

作者 祝利民 沈克平 +2 位作者 周浩 潘传芳 姚琼 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期161-165,171,共6页

目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预... 目的观察胃肠安和四藤方对结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29及其干细胞CD133^+的抑制作用。方法人结肠癌细胞株(HCT-116、SW480、HT-29)随机分为对照组和不同浓度胃肠安(500 mg/L和1 000mg/L)、四藤方(100 mg/L和200 mg/L)干预组,干预24 h后,CCK-8法测定细胞活力,倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪分析胃肠安和四藤方对HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+表达的影响。结果 CCK-8法检测结果显示,胃肠安及四藤方干预HCT-116、SW480、HT-29细胞后,细胞活力均下降且呈剂量依赖性;倒置显微镜观察发现:胃肠安及四藤方干预24 h,HCT-116、SW480、HT-29的细胞数量减少,细胞体积缩小,遮光性差,细胞悬浮、脱落而死亡。流式细胞术分析结果显示:对照组HCT-116、SW480、HT-29中CD133^+细胞的比例分别为12.52%、10.98%、2.33%;胃肠安方1 000 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.49%、5.36%、0.11%;四藤方组200 mg/L干预24 h后,CD133^+细胞比例分别下降为7.83%、6.45%、0.18%。结论不同结肠癌细胞株中CD133^+细胞比例有差异。胃肠安及四藤方均具有抑制结肠癌细胞株HCT-116、SW480、HT-29增殖的作用;但在同样的干预时间内,较高浓度胃肠安(1 000 mg/L)及四藤方(200 mg/L)才具有抑制3种细胞株干细胞CD133^+表达的作用。 展开更多

关键词 胃肠安 四藤方 结肠癌干细胞 ^cd133^+

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨髓基质细胞联合细胞因子对脐血CD133^+细胞体外扩增作用的研究 被引量：3

5

作者 毛平 曾进龙 +1 位作者 王彩霞 杜庆华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期319-323,共5页

为了探讨胚胎骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)中CD133+细胞的体外扩增作用,将新鲜脐血(CB)中分离出来的MNC接种于无血清培养体系中培养14天。实验分为4组:C组为空白对照组,不含基质细胞和细胞因子;S组为单用基质... 为了探讨胚胎骨髓基质细胞(FBMSC)联合细胞因子对脐血单个核细胞(MNC)中CD133+细胞的体外扩增作用,将新鲜脐血(CB)中分离出来的MNC接种于无血清培养体系中培养14天。实验分为4组:C组为空白对照组,不含基质细胞和细胞因子;S组为单用基质细胞组;F组为单用细胞因子组;SF组为联合使用基质细胞和细胞因子组。在第0,6,10及14天检测有核细胞总数、CD133+细胞数及集落形成单位(CFU)数。结果表明:各时间点SF组有核细胞总数的扩增倍数均高于其它组;除了第14天外,SF组在第6、10天时CD133+细胞数、CFU数的扩增倍数均高于其它组。结论:胚胎骨髓基质细胞对延缓造血细胞的分化具有重要的作用,基质细胞联合细胞因子可以有效的扩增脐血单个核细胞及其中的CD133+细胞,这是一种比较接近于临床移植要求的造血细胞体外扩增方法。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 造血干细胞 细胞扩增 ^cd133^+细胞 脐血 细胞因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

人胎盘CD133^＋细胞具有高增殖潜能集落形成细胞特性 被引量：2

6

作者 刘佳云 陈代雄 +5 位作者 方宁 章涛 刘祖林 祁莹 万卫红 刘金伟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期915-918,共4页

目的通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC)。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(M... 目的通过对人胎盘CD133+细胞群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)检测与生物学特性的分析,证明人胎盘存在早期造血干/祖细胞(HSPC)。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)单细胞悬液,用Histopaque-1007分离出单个核细胞(MNC),经磁式分选(MACS)富集CD133+细胞,培养28d后观察HPP-CFC集落形成能力,用流式细胞仪(FCM)对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析,实验全程用脐带血(UCB)作平行比较分析。结果培养28d后,PT-CD133+与UCB-CD133+细胞组份分别扩增了266和362倍,前者低于后者(P<0.01);PT-CD133+与UCB-CD133+细胞中HPP-CFC分别为(32.4±11.2)/5×103、(17.7±5.7)/5×103,前者形成的HPP-CFC数量明显高于后者(P<0.01);PT-CD133+、UCB-CD133+细胞培养至28d时,除UCB-CD133+组的CD133+CD34-亚群比例无明显改变外,CD133+CD34+、CD133-CD34+和CD133+CD34-(PT-CD133+组)亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133+细胞中存在HPP-CFC,说明胎盘CD133+细胞群中存在早期HSPC。 展开更多

关键词 ^cd133^+细胞 造血干/祖细胞 高增殖潜能集落形成细胞 胎盘 磁式分选 人

在线阅读 下载PDF 职称材料

人胎盘CD133^+细胞具有LTC-IC集落启动细胞特性 被引量：2

7

作者 刘虹麟 陈代雄 +5 位作者 方宁 章涛 刘祖林 刘金伟 万卫红 祁莹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期125-128,共4页

本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期... 本研究从功能上评价人胎盘CD133+细胞是否具有长期造血重建功能。采用免疫磁珠激活分选系统(MACS)富集胎盘CD133+细胞作为测试细胞,采用有限稀释法(LDA)设置4种不同浓度的测试细胞,用胎儿原代骨髓基质细胞制备的饲养层细胞共培养于长期培养体系中,以检测测试细胞中长期培养启动细胞(LTC-IC)的发生率及其增殖分化能力。结果表明:人胎盘CD133+细胞群中含有LTC-IC,其发生率为1/645;LTC-IC具有增殖分化为粒-单集落形成单位(CFU-GM)和混合集落形成单位(CFU-Mix)的能力;在所有LTC-IC阳性孔中,产生CFU-GM的孔占总阳性孔的71.4%,产生CFU-GM和CFU-Mix的孔占总阳性孔的28.6%。结论:人胎盘组织CD133+细胞群中存在LTC-IC,并具有造血早期祖细胞集落形成能力。 展开更多

关键词 ^cd133^+细胞 长期培养启动细胞 造血干/祖细胞 磁珠激活细胞分选 胎盘

在线阅读 下载PDF 职称材料

喉癌Hep-2细胞CD44^+CD133^+生物学特性研究 被引量：2

8

作者 孔令帅 温树信 +5 位作者 高伟 王珏 付荣 杨丽娟 李飞 杨雨燕 《中国现代医药杂志》 2016年第3期1-6,共6页

目的分选培养和鉴定人喉癌Hep-2细胞珠,并研究其体外生物学特性。方法通过磁珠细胞分选(magnetic bead cell sorting,MACS)方法,分选培养和鉴定CD44^+CD133^+喉癌干细胞,应用免疫磁珠分选技术分选CD44^+CD133^+、CD44^+CD133^-、CD44^-C... 目的分选培养和鉴定人喉癌Hep-2细胞珠,并研究其体外生物学特性。方法通过磁珠细胞分选(magnetic bead cell sorting,MACS)方法,分选培养和鉴定CD44^+CD133^+喉癌干细胞,应用免疫磁珠分选技术分选CD44^+CD133^+、CD44^+CD133^-、CD44^-CD133^+、CD44^-CD133^-4种亚群,对4种细胞绘制生长曲线,应用流式细胞仪检测其阳性率,应用侵袭实验、黏附实验和克隆形成实验评价其侵袭能力、黏附能力和克隆形成能力,用CCK8法检测其耐药性。结果对Hep-2、CD44^+CD133^+亚群、CD44^+CD133^-亚群、CD44^-CD133^+亚群、CD44^-CD133^-亚群5种细胞进行生物学特性研究,CD44^+CD133^+细胞亚群的增殖、侵袭、黏附、克隆形成能力及耐药性均增强,CD44^+CD133^+>CD44^-CD133^+>Hep-2>CD44^+CD133^->CD44^-CD133^-。结论免疫磁珠技术是分选CD44^+CD133^+的有效方法,CD44^+CD133^+细胞亚群具有明显的肿瘤干细胞特征,有望为喉癌细胞高表达标志物做一些新的探索。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 磁珠细胞分选 喉肿瘤 ^cd44^+ ^cd133^+

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨髓间充质干细胞与CD133^(+)肾脏细胞治疗急性肾损伤的机制研究

9

作者 黄远航 范立明 +5 位作者 黄盈 童若宇 申萌 周淑珍 李璟 丁遂碧 《广州医科大学学报》 2022年第5期6-11,共6页

目的:研究骨髓间充质干细胞(MSC)与分化抗原簇蛋白133(CD133)+肾脏细胞治疗急性肾损伤的机制。方法:选取6~8周龄雄性C57 BL/6的48只小鼠作为实验对象,根据不同的治疗方案将48只小鼠分为正常对照组、缺血再灌注损伤(I/R)组、I/R+MSCs组及... 目的:研究骨髓间充质干细胞(MSC)与分化抗原簇蛋白133(CD133)+肾脏细胞治疗急性肾损伤的机制。方法:选取6~8周龄雄性C57 BL/6的48只小鼠作为实验对象,根据不同的治疗方案将48只小鼠分为正常对照组、缺血再灌注损伤(I/R)组、I/R+MSCs组及I/R+CD133^(+)组4组,每组12只。比较各组小鼠术后不同时间点血清尿素氮(BUN)与肌酐(Cr)水平、ATN评分、肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白细胞介素⁃10(IL⁃10)、肝细胞生长因子(HGF)及骨形态发生蛋白⁃7(BMP⁃7)水平。结果:I/R+MSCs组、I/R+CD133^(+)组术后BUN、Cr水平、ATN评分、TNF⁃α水平均显著高于正常对照组;术后4、7 d的BUN、Cr水平、ATN评分、TNF⁃α水平均低于I/R组,其中I/R+MSCs组以术后8 d最为显著(P<0.05);I/R+CD133^(+)组以术后4 d最为显著(P<0.05)。I/R+MSCs组、I/R+CD133^(+)组术后IL⁃10、HGF、BMP⁃7水平均低于正常对照组,高于I/R组(P<0.05)。与I/R+MSCs组比较,I/R+CD133^(+)组术后BUN、Cr水平,ATN评分及TNF⁃α水平较低,IL⁃10、HGF、BMP⁃7水平较高。结论:骨髓MSCs、CD133^(+)肾脏细胞均可通过内分泌方式调控细胞因子,促进由I/R诱导的AKI恢复,但CD133^(+)肾脏细胞对AKI的修复作用更为显著。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 ^cd133^(+)肾脏细胞 急性肾损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

HepG2细胞系CD133^+细胞对多柔比星的抗性及其机制 被引量：1

10

作者 王平凡 张东生 +1 位作者 徐杨 马艳红 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期595-600,共6页

目的:探讨Hep G2中CD133^+细胞对多柔比星(doxorubicin,DOX)的抗性及其作用机制。方法:通过磁珠分选实验对Hep G2细胞中CD133^+细胞进行分选,流式细胞术检测CD133^+细胞阳性率,MTT法检测CD133^+细胞对DOX诱导凋亡的抗性,免疫荧光实验检... 目的:探讨Hep G2中CD133^+细胞对多柔比星(doxorubicin,DOX)的抗性及其作用机制。方法:通过磁珠分选实验对Hep G2细胞中CD133^+细胞进行分选,流式细胞术检测CD133^+细胞阳性率,MTT法检测CD133^+细胞对DOX诱导凋亡的抗性,免疫荧光实验检测DOX处理各组细胞后P65激活转运情况,q RT-PCR检测各组细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)m RNA表达水平;Western blotting检测CD133^+细胞凋亡相关蛋白的表达。结果:磁珠分选可以高效地富集Hep G2细胞中CD133^+细胞。与CD133-细胞相比,CD133^+细胞对DOX具有更强的抗性(P<0.05);与CD133-细胞、Hep G2细胞相比,CD133^+细胞中P65激活速度与表达水平明显提高(均P<0.05);CD133^+细胞中BCRP m RNA表达水平明显高于CD133-细胞和Hep G2细胞(均P<0.05);与Hep G2、CD133-组相比,CD133^+细胞组Bax和p53蛋白表达水平显著减少、Bcl-2和Survivin蛋白表达量显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论:Hep G2细胞中CD133^+细胞亚群对DOX高耐药性的分子机制在于高表达存活相关蛋白NF-κB、Bcl-2、Survivin以及耐药性转运蛋白BCRP,而低表达促凋亡相关蛋白p53、Bax。 展开更多

关键词 肝癌 HEPG2细胞 ^cd133^+细胞 多柔比星 抗性

在线阅读 下载PDF 职称材料

人脐带血中CD133^+细胞的分布情况以及与CD34的共表达 被引量：1

11

作者 刘红 张慧 南虎松 《吉林医学》 CAS 2016年第2期379-381,共3页

目的:了解CD133^+细胞在脐带血中的分布情况以及与CD34共表达的情况,为今后脐带血移植提供基础理论依据。方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合应用分离脐带血单个核细胞。采用流式细胞技术检测单个核细胞中的CD34^+/CD133^... 目的:了解CD133^+细胞在脐带血中的分布情况以及与CD34共表达的情况,为今后脐带血移植提供基础理论依据。方法:采用6%羟乙基淀粉沉降法和密度梯度离心法联合应用分离脐带血单个核细胞。采用流式细胞技术检测单个核细胞中的CD34^+/CD133^+百分率。结果:单个核细胞中CD133^+百分比为0.17%±0.08%,在CD34^+细胞中同时表达CD133的百分比为78.49%±7.53%。结论:CD133在人脐带血中主要表达与CD34^+细胞亚群上,且CD133^+细胞在单个核细胞中所占的比例较CD34^+细胞低。 展开更多

关键词 ^cd133^+细胞 脐带血 造血干细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

脐血CD133^＋细胞体外扩增巨核系祖细胞的研究

12

作者 王丽 陈代雄 +5 位作者 方宁 刘祖林 章涛 万卫红 祁莹 刘金伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期645-649,共5页

本研究探讨脐血CD133+(UCB-CD133+)细胞体外扩增巨核系祖细胞的能力和最佳收获时间。采用免疫磁珠激活细胞分选系统(MACS)分选UCB-CD133+细胞,将纯化的UCB-CD133+细胞接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增巨核系祖细胞... 本研究探讨脐血CD133+(UCB-CD133+)细胞体外扩增巨核系祖细胞的能力和最佳收获时间。采用免疫磁珠激活细胞分选系统(MACS)分选UCB-CD133+细胞,将纯化的UCB-CD133+细胞接种于含TPO、IL-3和SCF的无血清液体培养体系中体外扩增巨核系祖细胞,在培养第7、10和14天进行细胞计数,流式细胞仪检测扩增过程中CD133、CD34、CD41抗原表达的动态变化,并采用半固体法对不同扩增阶段的细胞进行巨核祖细胞集落形成单位(CFU-MK)培养。结果表明:培养至第7天时,UCB-CD133+细胞扩增效果最佳,扩增了8.2±2.2倍;培养至第14天,细胞总数扩增了116倍;培养至10天时,平均1个CD133+细胞所产生的CD133+CD41+和CD34+CD41+细胞数最多,分别为2.5±0.9和2.6±0.5个,所产生的CD41+细胞为20.3±5.9个;扩增前后的UCB-CD133+细胞均能形成CFU-MK,扩增第10天的UCB-CD133+细胞所形成的CFU-MK总数最多,CFU-MK扩增倍数为59.5±11.8倍。巨核细胞免疫组织化学染色显示,扩增后的巨核系细胞多呈幼稚状态,未见血小板形成。结论:UCB-CD133+细胞具有较强的体外扩增巨核系祖细胞的能力,培养第10天扩增效能最佳。 展开更多

关键词 ^cd133^+细胞 造血干/祖细胞 巨核系祖细胞 体外扩增 脐血

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同组合方式的细胞因子对人骨髓AC133^+和CD34^+细胞增殖的影响

13

作者 张春华 温泽清 朱勇 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第10期1020-1024,共5页

目的探讨细胞因子不同的组合方式对人骨髓CD34+富集细胞及AC133+富集细胞体外扩增潜能的影响。方法常规富集人骨髓CD34+及AC133+细胞,应用本研究组设计并已经证实的细胞因子组合方式,对人骨髓CD34+及AC133+富集细胞进行体外对照培养,分... 目的探讨细胞因子不同的组合方式对人骨髓CD34+富集细胞及AC133+富集细胞体外扩增潜能的影响。方法常规富集人骨髓CD34+及AC133+细胞,应用本研究组设计并已经证实的细胞因子组合方式,对人骨髓CD34+及AC133+富集细胞进行体外对照培养,分别观察CD34+和AC133+富集细胞的扩增情况;应用甲基纤维素半固体培养法,观察不同组别培养7、14、21 d CD34+和AC133+富集细胞的集落形成情况及细胞凋亡率。结果AC133+细胞实验组在相同条件下细胞扩增倍数以及集落生成数目上均明显高于CD34+细胞实验组,相同条件下细胞凋亡率明显低于CD34+细胞实验组。结论AC133+细胞包含有更多原始的造血干细胞,AC133作为造血干细胞抗原标记明显优于CD34。 展开更多

关键词 人 骨髓 造血干细胞 ^AC133^+细胞 ^cd34^+细胞 体外

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD_8^+CD_(28)^-T细胞介导大鼠远距离缺血预处理肾脏保护效应的研究

14

作者 李令勋 苏泽轩 +1 位作者 梁忠平 陈厚明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期2456-2459,共4页

目的探讨CD8+CD28-T细胞在远程缺血预处理保护早期肾脏热缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为假手术对照组(sham)、单纯缺血再灌注组(IRI)、肾脏缺血预处理+缺血再灌注组(KIP+IRI)、远程缺血预处理+缺血再灌注组(RIP+IR... 目的探讨CD8+CD28-T细胞在远程缺血预处理保护早期肾脏热缺血再灌注损伤中的作用。方法雄性SD大鼠40只随机分为假手术对照组(sham)、单纯缺血再灌注组(IRI)、肾脏缺血预处理+缺血再灌注组(KIP+IRI)、远程缺血预处理+缺血再灌注组(RIP+IRI),再灌注2h后各组抽血检测肌酐、IL-10、CD8及CD28并作肾脏组织学观察。结果RIP+IRI组、KIP+IRI组外周血CD8+CD28-T细胞比例、血清IL-10浓度高于IRI组、sham组(P<0.01),而外周血CD28+T细胞含量低于IRI组,并伴随血清肌酐、肾组织中肾小管损害程度Paller氏评分的下降(P<0.01),RIP+IRI和KIP+IRI组间以上指标差异无显著性(P>0.05)。结论远程缺血预处理与肾脏缺血预处理存在相似的保护早期肾脏热缺血再灌注损伤的作用,其中CD8+CD28-T细胞参与其中并发挥免疫抑制作用。 展开更多

关键词 ^cd8^+cd28^-T细胞 免疫抑制 远程缺血预处理 肾脏

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD_(133)^+、TLR2和TLR4表达水平对老年陈旧性心肌梗死患者细胞心肌成形术早期预后的影响

15

作者 张枫林 赵庆娜 +1 位作者 胡有东 李侠 《现代中西医结合杂志》 CAS 2013年第15期1597-1599,共3页

目的探讨循环CD133+、Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达水平对老年陈旧性心肌梗死患者细胞心肌成形术早期预后的影响。方法采用流式细胞仪检测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)+支架植入术患者和PCI+支架植入术+人脐带造血干细胞(hUC... 目的探讨循环CD133+、Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达水平对老年陈旧性心肌梗死患者细胞心肌成形术早期预后的影响。方法采用流式细胞仪检测经皮冠状动脉介入治疗(PCI)+支架植入术患者和PCI+支架植入术+人脐带造血干细胞(hUCM-SCs)移植术患者循环CD133+、TLR2和TLR4的表达水平与心肌梗死面积和左心室射血分数(LVEF)的关系。评估CD133+、TLR2和TLR4对细胞心肌成形术早期预后的影响。结果 PCI+支架植入术后8周CD133+(0.05±0.02)%、TLR2(5.9±2.2)荧光强度(MFI),TLR4(3.7±1.8)MFI;PCI+支架植入术+hUCM-SCs移植后8周CD133+(0.07±0.01)%,TLR2(3.6±0.3)MFI,TLR4(2.2±1.3)MFI。2组患者治疗8周后CD133+、TLR2和TLR4水平比较均有显著性差异(P均<0.01)。结论 CD133+、TLR2和TLR4表达水平可能影响老年陈旧性心肌梗死患者细胞心肌成形术的早期预后。 展开更多

关键词 ^cd133^+ Tell样受体 老年人 陈旧性心肌梗死 细胞心肌成形术

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD133^+脐血干细胞对大肠癌SW480细胞生长、黏附及迁移的影响 被引量：1

16

作者 熊汉真 杨敏 +1 位作者 杨朝晖 李学农 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2008年第4期241-244,共4页

背景与目的:转移是恶性肿瘤的最重要的生物学特性,是临床上癌症患者死亡的最主要原因,近年实验显示CD133+造血干细胞对鼠源性肿瘤细胞株具有促转移作用,但在人癌实验层次未见报道。本实验旨在体外探讨CD133+脐血干细胞对人大肠癌细胞株S... 背景与目的:转移是恶性肿瘤的最重要的生物学特性,是临床上癌症患者死亡的最主要原因,近年实验显示CD133+造血干细胞对鼠源性肿瘤细胞株具有促转移作用,但在人癌实验层次未见报道。本实验旨在体外探讨CD133+脐血干细胞对人大肠癌细胞株SW480增殖、迁移及黏附的影响。方法:采用密度梯度离心及免疫磁珠分选法分离并培养人CD133+脐血干细胞,将CD133+脐血干细胞与SW480共同趋化培养,用MTT法检测肿瘤细胞的增殖及黏附能力,用Transwell小室法检测肿瘤细胞的迁移能力。结果:CD133+人脐血干细胞能显著促进SW480细胞的生长(P<0.05),能促进肿瘤细胞的形态学改变,即肿瘤细胞的核深染,异型明显,细胞呈多角形,能显著促进SW480细胞的黏附及迁移能力(实验组A490为0.11±0.01,对照组A490为0.05±0.01,P<0.05)。结论:CD133+脐血干细胞可显著促进大肠癌细胞的增殖及侵袭能力,宿主造血干细胞可能对肿瘤转移形成具有重要影响。 展开更多

关键词 ^cd133^+细胞 脐血 大肠癌 肿瘤转移 SW480细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

CD133^+细胞在乳腺良恶性病变中的分布特点及其临床病理意义

17

作者 刘婷婷 李学锋 +6 位作者 王丽 陈玥 潘鑫艳 宋蜀伶 杨丽琳 崔静 杨举伦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期1196-1200,共5页

目的:研究CD133^+细胞在乳腺普通型增生、乳腺不典型增生、乳腺原位癌、浸润性乳腺癌中的分布特点及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法对45例正常乳腺组织、41例普通型增生乳腺组织、39例不典型增生乳腺组织、5... 目的:研究CD133^+细胞在乳腺普通型增生、乳腺不典型增生、乳腺原位癌、浸润性乳腺癌中的分布特点及其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法对45例正常乳腺组织、41例普通型增生乳腺组织、39例不典型增生乳腺组织、51例乳腺原位癌组织、121例乳腺癌组织中CD133^+的表达进行检测,分析CD133^+细胞在乳腺良恶性病变中的分布特点。结果:CD133^+在正常乳腺组织中不表达,在乳腺普通型增生、不典型增生、原位癌、浸润性癌的表达率逐渐增高,分别为31.7%(13/41)、48.7%(19/39)、64.7%(33/51)、74.4%(90/121),有显著性差异(P<0.01)。CD133^+的表达率随乳腺癌组织学分级[Ⅰ级63.6%(21/33)、Ⅱ级72.2%(26/36)、Ⅲ级82.7%(43/52),P<0.05]和TNM分期[Ⅰ期57.1%(12/21)、Ⅱ期69.4%(34/49)、Ⅲ期68.7%(11/16)、Ⅳ期94.3%(33/35),P<0.001]的增高而增高;有淋巴结转移或远处转移者分别高于无转移者、无远处转移者(P<0.05);有复发者高于无复发者(P<0.05);与患者年龄、月经状态、肿瘤的组织学类型、肿瘤大小、ER、PR、Her-2的表达无显著相关(P>0.05)。结论:CD133^+细胞可能在乳腺增生与癌变过程中起重要作用;CD133^+的乳腺癌细胞与乳腺癌的侵袭、转移和复发密切相关,CD133^+是提示乳腺癌恶性程度和预后的指标之一。 展开更多

关键词 乳腺癌 乳腺增生 ^cd133^+ 肿瘤干细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

双特异性CAR-T细胞对EGFRvⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤 被引量：8

18

作者 刘亚丹 谢甲贝 +3 位作者 朱琼琼 卢文杰 丁辉 韩双印 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期296-301,共6页

目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制... 目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制备慢病毒载体转染人外周血T细胞,FCM和WB法检测bs CAR转染效率和表达水平。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87胶质瘤干细胞共培养,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、IFN-γ分泌实验检测其特异性杀伤作用和对IFN-γ分泌的促进作用。制备裸鼠vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞移植瘤模型检测bs CAR-T细胞对移植瘤生长的抑制作用。结果:vⅢsc Fv和CD133sc Fv通过重叠PCR无缝连接入二代CAR表达框(S-vⅢscFv/CD133scFv-Hinge-TM-CD137-CD3ζ)中,然后克隆入p CDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP载体的Eco RⅠ和Bam HⅠ位点(pbs CAR)。3种质粒(p VSV-G、p CMV-d R8.9和pbs CAR)共转染HEK293T细胞制备慢病毒载体,转染外周血T细胞,FCM检测bs CAR表达率为71.1%,WB法结果显示bs CAR表达正确。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞共培养检测结果显示,bs CAR-T细胞对胶质瘤干细胞具有特异性杀伤作用,与效靶比呈正比;IFN-γ分泌量为(2350.6±92)pg·m L^(-1),明显高于对照组(P<0.01)。裸鼠移植瘤动物模型显示,bs CAR-T细胞在体内具有明显的移植瘤抑制作用(P<0.01)。结论:bs CAR-T细胞能够特异性靶向杀伤vⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞,实验结果为促进实体瘤的细胞免疫治疗提供了实验依据。 展开更多

关键词 表皮生长因子Ⅲ型突变体 cd133 双特异性CAR ^vⅢ^(+)/cd133^(+)U87胶质瘤干细胞 肿瘤干细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

雷帕霉素对人骨肉瘤CD133^(+)U2OS细胞增殖和干性维持的影响

19

作者 方涛 闫京 +4 位作者 张明 赵加力 潘伟 王新宏 周全 《广西医学》 CAS 2021年第24期2943-2946,共4页

目的探讨雷帕霉素对人骨肉瘤CD133^(+)U2OS细胞增殖和干性维持的影响。方法(1)自U2OS细胞中分离CD133^(+)U2OS细胞,分为预对照组、低剂量雷帕霉素组和高剂量雷帕霉素组,分别加入含0 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL雷帕霉素进行培养。干预2... 目的探讨雷帕霉素对人骨肉瘤CD133^(+)U2OS细胞增殖和干性维持的影响。方法(1)自U2OS细胞中分离CD133^(+)U2OS细胞,分为预对照组、低剂量雷帕霉素组和高剂量雷帕霉素组,分别加入含0 ng/mL、50 ng/mL和100 ng/mL雷帕霉素进行培养。干预24 h、48 h、72 h后检测各组细胞的增殖抑制情况,然后选择适宜的干预剂量和时间进行后续试验。(2)将CD133^(+)U2OS细胞分为对照组和雷帕霉素组,分别使用不含雷帕霉素的培养基、含雷帕霉素的培养基培养。干预48 h后检测两组细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR及干性标志蛋白[SRY盒转录因子2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)]的相对表达量。结果(1)与预对照组相比,低剂量雷帕霉素组和高剂量雷帕霉素组细胞的增殖均受到抑制,且随着干预时间的延长和剂量的增加细胞增殖抑制率有增高的趋势(均P<0.05)。故在后续实验选择100 ng/mL雷帕霉素干预48 h。(2)雷帕霉素组mTOR、磷酸化mTOR、Sox2、Oct4的相对表达量均较对照组降低(均P<0.05)。结论雷帕霉素能够抑制人骨肉瘤CD133^(+)U2OS细胞的增殖和干性维持,这可能与其降低mTOR信号通路活性有关。 展开更多

关键词 骨肉瘤 ^cd133^(+)U2OS细胞 雷帕霉素 细胞增殖 干性维持 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

适用于单细胞测序的肾脏消化及CD45^(+)单细胞分离方法

20

作者 贾建 谭睿陟 王丽 《西南医科大学学报》 2023年第3期217-221,共5页

目的比较Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶在不同时间对肾脏组织的消化效果,探讨磁珠分离法所得细胞对单细胞测序的适用性。方法采用Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶消化肾脏组织,消化时间分别为15 min、30 min和15 min^(+)15 min。比较两种消化酶在不同时间... 目的比较Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶在不同时间对肾脏组织的消化效果,探讨磁珠分离法所得细胞对单细胞测序的适用性。方法采用Ⅳ型胶原酶和胰蛋白酶消化肾脏组织,消化时间分别为15 min、30 min和15 min^(+)15 min。比较两种消化酶在不同时间对肾脏组织的消化效果,选择消化效果最佳的方法进行消化,所得肾脏细胞悬液通过用磁珠法分离CD45^(+)细胞。检测分离后所得细胞数量、活力、成团率并根据单细胞测序结果评价细胞状态。结果肾脏组织在经酶作用30 min后基本被消化完全,在相同消化时间和方法下,Ⅳ型胶原酶消化效率明显优于胰蛋白酶。与直接消化30 min相比,15 min+15min消化所得细胞状态更好,细胞碎片少且背景干净。通过Ⅳ型胶原酶15 min+15min消化方式所得细胞悬液分离出的CD45^(+)细胞的细胞总量、存活率、成团率等各项指标均符合单细胞测序要求。通过单细胞测序结果发现,细胞均表达CD45^(+),线粒体基因表达比例低,说明细胞在外界环境中被刺激的比例小。结论在相同消化时间条件下与胰蛋白酶相比,Ⅳ型胶原酶对肾脏组织的消化效果好,有利于减少细胞碎片的产生,经磁珠分离所得CD45^(+)肾脏单细胞悬液各项指标均符合单细胞测序要求且纯度高,有利于后续测序结果分析的准确性。 展开更多

关键词 单细胞测序 ^cd45^(+) 肾脏

在线阅读 下载PDF 职称材料