中医药干预核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体防治类风湿性关节炎的研究进展 被引量：1

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作者 汉博 王久夏 马仙康 《中国民间疗法》 2024年第15期113-117,共5页

类风湿性关节炎(RA)是一种慢性、全身性自身免疫性疾病,以软骨损伤、滑膜炎症等为主要病理特征。核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体是一种细胞内感应蛋白复合物,可感知内源性危险信号并鉴别外来... 类风湿性关节炎(RA)是一种慢性、全身性自身免疫性疾病,以软骨损伤、滑膜炎症等为主要病理特征。核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体是一种细胞内感应蛋白复合物,可感知内源性危险信号并鉴别外来病原体,从而释放白细胞介素-1β、白细胞介素-18等促炎因子,介导细胞凋亡。研究表明,NLRP3炎症小体可以诱发炎症级联反应,加速软骨破坏,与RA密切相关。中医药在防治RA方面已取得一定成果。多项研究证实,中医药可靶向干预NLRP3炎症小体介导RA的病变过程,但尚未有系统性的相关论述。该文论述NLRP3炎症小体参与RA的机制,总结归纳近几年中医药干预NLRP3炎症小体防治RA的研究进展,以期为RA靶向药物的研发与应用提供一定借鉴。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 NLRP3炎症小体 中医药 机制

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微小RNA-195通过靶向抑制PH结构域富亮氨酸重复蛋白磷酸酶2表达参与香烟烟雾诱导急性肺损伤机制研究

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作者 梁艳均 吴桂全 +1 位作者 漆勇 李静 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第5期523-525,530,共4页

目的:探究miR-195通过靶向抑制PH结构域富亮氨酸重复蛋白磷酸酶2(PHLPP2)表达参与香烟烟雾诱导急性肺损伤的机制。方法:选择90只健康小鼠,均分为A、B、C三组,使用香烟烟雾暴露建立小鼠急性肺损伤模型,A组为正常对照组,B组为低剂量干预... 目的:探究miR-195通过靶向抑制PH结构域富亮氨酸重复蛋白磷酸酶2(PHLPP2)表达参与香烟烟雾诱导急性肺损伤的机制。方法:选择90只健康小鼠,均分为A、B、C三组,使用香烟烟雾暴露建立小鼠急性肺损伤模型,A组为正常对照组,B组为低剂量干预组,C组为高剂量干预组,干预后检测三组小鼠肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-8(IL-8)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)水平,对比三组小鼠肺泡灌洗液中白细胞、中性粒细胞计数,对比三组小鼠肺组织中髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH)水平,最后检测三组小鼠肺组织中miR-195及PHLPP2蛋白表达量。结果:①肺泡灌洗液中TNF-α、IL-8及MMP-9水平C组>B组>A组,组间对比差异具有统计学意义(均P<0.05);②肺泡灌洗液中白细胞、中性粒细胞计数C组>B组>A组,组间对比差异具有统计学意义(均P<0.05);③肺泡灌洗液中MPO、SOD、GSH水平C组>B组>A组,组间对比差异具有统计学意义(均P<0.05);④肺组织中miR-195表达C组>B组>A组,PHLPP2蛋白表达C组<B组<A组,组间对比差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:香烟烟雾能够诱导小鼠肺组织出现炎性改变,其机制可能与miR-195过表达并抑制PHLPP2蛋白表达有关。 展开更多

关键词 微小RNA-195 ph结构域富亮氨酸重复蛋白磷酸酶2 香烟烟雾 肺损伤 蛋白表达 机制

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富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样结构域1(LRIG1)增强顺铂诱导的人垂体瘤细胞凋亡

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作者 周林裕 包春燕 +2 位作者 胡骁 代永庆 包志军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期9-15,共7页

目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1... 目的探讨富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1)在人垂体瘤组织中表达情况,并观察过表达LRIG1后对顺铂(DDP)诱导的垂体瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测45例垂体瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织中的LRIG1表达,分析LRIG1阳性表达与患者临床病理指标的相关性。选取原代分离培养的人垂体瘤细胞,采用脂质体介导的基因转染技术将LRIG1基因过表达质粒p EGFP-N1-LRIG1转染进细胞中,筛选LRIG1过表达的细胞,同时选取转染空质粒p EGFP-N1的细胞作为对照组。两组细胞均经20μg/m L DDP诱导48 h,流式细胞术检测细胞凋亡情况,平板克隆实验检测细胞的增殖能力,Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白BAX、胱天蛋白酶3(caspase-3)和Bcl2的相对表达量。结果垂体瘤患者肿瘤组织中LRIG1阳性率显著低于瘤旁组织,且LRIG1在侵袭性肿瘤表达显著降低。与对照组相比,过表达LRIG1后,DDP诱导的细胞凋亡率显著增加、细胞增殖显著降低、BAX、caspase-3的水平显著增加,而Bcl2水平显著降低。结论过表达LRIG1增加DDP诱导的人垂体瘤细胞凋亡并抑制其增殖。 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白结构域1(LRIG1) 顺铂 垂体瘤 表达 细胞增殖 细胞凋亡

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结直肠息肉患者的肠道菌群结构和丰度与结直肠组织PHLPP、IGFBP5相对表达水平的相关性研究

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作者 杨姗莹 庄羽骁 +1 位作者 郭丽坤 岑戎 《检验医学与临床》 2025年第6期737-741,共5页

目的探讨结直肠息肉患者的肠道菌群结构和丰度与结直肠组织PH结构域和富含亮氨酸的重复蛋白磷酸酶(PHLPP)、胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)相对表达水平的相关性。方法回顾性分析2021年1月至2023年12月上海中医药大学附属曙光医院... 目的探讨结直肠息肉患者的肠道菌群结构和丰度与结直肠组织PH结构域和富含亮氨酸的重复蛋白磷酸酶(PHLPP)、胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)相对表达水平的相关性。方法回顾性分析2021年1月至2023年12月上海中医药大学附属曙光医院内镜中心诊治的82例结直肠息肉患者(息肉组)和76例肠镜检查阴性者(对照组)的临床资料。比较2组结直肠组织PHLPP、IGFBP5相对表达水平、肠道菌群结构(包括Chao指数、Ace指数、Simpson指数)和肠道菌群(拟杆菌门、厚壁菌门、梭杆菌门、放线菌门、变形菌门和厌氧芽孢杆菌属、双歧杆菌属、埃希菌属、不动杆菌属、拟杆菌属)丰度。采用Pearson相关分析肠道菌群结构和丰度与结直肠组织PHLPP、IGFBP5相对表达水平的相关性。结果息肉组PHLPP相对表达水平低于对照组(P<0.05),IGFBP5相对表达水平高于对照组(P<0.05)。息肉组Chao指数、Ace指数均高于对照组(P<0.05),但息肉组和对照组Simpson指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。息肉组拟杆菌门、梭杆菌门丰度均低于对照组(P<0.05),而厚壁菌门、放线菌门、变形菌门丰度均高于对照组(P<0.05)。息肉组埃希菌属、拟杆菌属丰度均低于对照组(P<0.05),而厌氧芽孢杆菌属、双歧杆菌属、不动杆菌属丰度均高于对照组(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示:息肉组患者Chao指数、Ace指数及厚壁菌门、放线菌门、变形菌门、厌氧芽孢杆菌属、双歧杆菌属、不动杆菌属丰度均与结直肠组织PHLPP相对表达水平呈负相关(P<0.05),与结直肠组织IGFBP5相对表达水平呈正相关(P<0.05);息肉组患者拟杆菌门、梭杆菌门、埃希菌属、拟杆菌属丰度均与结直肠组织PHLPP相对表达水平呈正相关(P<0.05),与结直肠组织IGFBP5相对表达水平呈负相关(P<0.05)。结论结直肠息肉患者肠道菌群结构和肠道菌群丰度均发生异常变化,且肠道菌群结构和丰度与结直肠组织PHLPP、IGFBP5相对表达水平有关。 展开更多

关键词 结直肠息肉 肠道菌群 菌群丰度 菌群多样性 ph结构域和富含亮氨酸的重复蛋白磷酸酶 胰岛素样生长因子结合蛋白5

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富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因过表达增强膀胱癌T24细胞对顺铂敏感性的实验研究 被引量：2

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作者 严泽军 夏术阶 +5 位作者 蒋军辉 谢国海 钱君海 蒋照辉 周成 程跃 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期505-510,共6页

目的 探讨富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1 （leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1）基因过表达对膀胱癌T24细胞顺铂（cis-diaminodichloroplatinum,CDDP）敏感性的影响及其机制.方法 2012年12月至2014... 目的 探讨富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1 （leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains-1,LRIG1）基因过表达对膀胱癌T24细胞顺铂（cis-diaminodichloroplatinum,CDDP）敏感性的影响及其机制.方法 2012年12月至2014年2月选取膀胱癌T24细胞株,将建立并鉴定的过表达LRIG1基因的T24细胞分为3组：实验组,转染Ad-Surp-LRIGl;对照组,转染Adeno-SP-EGFP;空白组,未转染.将3组细胞分别加入CDDP,构建为CDDP/Ad-Surp-LRIG1组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组、CDDP组,与未加入CDDP的空白组共4组进行诱导凋亡实验.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测转染前后T24细胞中LRIG1和表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的表达水平.蛋白质印迹法检测CDDP对T24细胞的总EGFR和核磷酸化EGFR表达的影响.采用CCK-8法检测各组细胞对CDDP的敏感性.流式细胞学检测各组细胞的凋亡率.结果 实验组、对照组和空白组的LRIG1 mRNA和EGFR mRNA的表达量分别为2.79±0.15和0.65±0.05、0.76±0.09和1.98±0.07、0.66±0.05和2.05±0.04,LRIG1蛋白和EGFR蛋白分别为1.98±0.12和0.92±0.05、0.88 ±0.07和2.51 ±0.07、1.00 ±0.08和2.42±0.09,实验组与对照组和空白组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,对照组与空白组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的半数抑制浓度IC50值分别为（30.96±0.57）、（31.55 ±0.48）和（14.09±0.31） μg/ml,CDDP组与CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）,CDDP/Adeno-SP-EGFP组和CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的细胞凋亡率[（69.77±2.14）％]高于CDDP/Adeno-SP-EGFP组[（48.15±1.53）％]、CDDP组[（46.82±1.23）％]、空白组[（3.17±0.21）％],差异均有统计学意义（P＜0.05）,CDDP组和CDDP/Adeno-SP-EGFP组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.空白组、CDDP组、CDDP/Adeno-SP-EGFP组、CDDP/Ad-Surp-LRIGl组的总EGFR和核磷酸化EGFR的表达量分别为2.52±0.11和1.76±0.08、1.22±0.05和2.75±0.15、1.25±0.05和2.82±0.13、0.32 ±0.02和1.08±0.04,CDDP组与空白组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,CDDP/Adeno-SP-EGFP组与CDDP/Ad-Surp-LRIGl组比较差异有统计学意义（P＜0.05）,CDDP组与CDDP/Adeno-SP-EGFP组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 LRIG1通过下调EGFR和核磷酸化EGFR的表达促进CDDP诱导的T24细胞凋亡,提高T24细胞对CDDP的敏感性. 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复和免疫球蛋白样结构域1基因 顺铂 膀胱肿瘤 细胞凋亡

原文传递

富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1过表达对膀胱癌细胞免疫相关基因的影响 被引量：2

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作者 周治军 严泽军 +3 位作者 卢童 徐康 龚娟 章尹岗 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2666-2668,共3页

目的利用基因表达谱芯片技术筛选过表达富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1（LRIG1）的膀胱癌细胞与对照组膀胱癌细胞间差异表达的免疫相关基因，探讨LRIG1对膀胱癌细胞免疫功能影响的机制。方法分别提取转染LRIG1基因的膀胱... 目的利用基因表达谱芯片技术筛选过表达富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1（LRIG1）的膀胱癌细胞与对照组膀胱癌细胞间差异表达的免疫相关基因，探讨LRIG1对膀胱癌细胞免疫功能影响的机制。方法分别提取转染LRIG1基因的膀胱癌细胞BIU87-LRIG1和未转染LRIG1基因的膀胱癌细胞BIU87的总核糖核酸（RNA），反转录成cDNA并标记后，同22K人类基因表达谱芯片杂交后筛选出与免疫相关的差异表达基因，并进一步使用反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）验证。结果在21522条基因中，两组细胞间差异表达的免疫相关基因有9条，其中BIU87-LRIG1细胞中上调基因4条，下调基因5条。RT-PCR提示BIU87-LRIG1组的程序化死亡基因5（PDCD5）表达水平（1．22±0．04）较BIU87组（0．43±0．06）明显增高。结论使用基因芯片技术筛选出了LRIG1过表达可影响膀胱癌免疫功能的9种相关基因。 展开更多

关键词 膀胱癌 富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域基因1 基因表达谱芯片

原文传递

pH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白1与喉鳞癌转移的相关性及作用机制研究 被引量：2

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作者 肖林 饶晓花 +1 位作者 郑晶琼 顾衍 《中国卫生检验杂志》 CAS 2018年第14期1725-1728,1731,共5页

目的观察PHLPP1与喉鳞癌的相互作用,为寻找新的诊治靶点提供数据支撑。方法以80例喉鳞癌患者为研究对象,包括转移组30例和未转移组50例,采用免疫蛋白印记(WB)实验检测PHLPP1蛋白表达水平。并通过RNA干扰实验构建PHLPP1过表达和干扰重组... 目的观察PHLPP1与喉鳞癌的相互作用,为寻找新的诊治靶点提供数据支撑。方法以80例喉鳞癌患者为研究对象,包括转移组30例和未转移组50例,采用免疫蛋白印记(WB)实验检测PHLPP1蛋白表达水平。并通过RNA干扰实验构建PHLPP1过表达和干扰重组慢病毒载体,分别转染至HEP-2细胞共培养,观察细胞生长、迁移与侵袭能力,采用荧光定量PCR实验和WB实验测定细胞PHLPP1和P-AKT/AKT表达水平。结果转移组PHLPP1蛋白表达水平低于未转移组,未转移组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PHLPP1过表达组细胞生长速率、迁移和侵袭数目低于对照组,而PHLPP1沉默组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PHLPP1过表达组P-AKT/AKT mRNA与蛋白表达水平低于对照组,而PHLPP1沉默组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PHLPP1与喉鳞癌的发生与转移密切相关,可抑制喉鳞癌细胞的增殖与侵袭能力,且其作用可能与阻碍AKT磷酸化激活有关。 展开更多

关键词 ph值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白1 喉鳞癌 P-AKT/AKT

原文传递

富含亮氨酸重复结构域蛋白3炎症小体在高血压大鼠主动脉夹层模型形成中的作用 被引量：1

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作者 崔俊 夏军 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1156-1165,共10页

目的建立高血压大鼠主动脉夹层(AD)模型,探讨富含亮氨酸重复结构域蛋白(NLRP)3炎症小体在高血压促AD形成中的作用及相关分子机制。方法 40只雌性SD大鼠(3周龄,体质量60g左右)随机分为4组,每组10只:对照组:正常喂食饮水;β-氨基丙腈(BAPN... 目的建立高血压大鼠主动脉夹层(AD)模型,探讨富含亮氨酸重复结构域蛋白(NLRP)3炎症小体在高血压促AD形成中的作用及相关分子机制。方法 40只雌性SD大鼠(3周龄,体质量60g左右)随机分为4组,每组10只:对照组:正常喂食饮水;β-氨基丙腈(BAPN)组(AD模型组):0.25%BAPN喂食;醋酸去氧皮质酮(DOCA)组:0.25%BAPN喂食,并皮下注射DOCA油剂;左旋硝基精氨酸甲酯(l-NAME)组:0.25%BAPN喂食,饮含l-NAME水。记录各组大鼠饮水、体质量及血压;动物死亡后(对照组大鼠为处死,模型组为自然死亡)分离主动脉行Masson三色染色及EVG染色,分别观察主动脉内胶原纤维、弹力纤维的变化情况,行免疫组化染色观察主动脉中NLRP3炎症小体相关蛋白[NLRP3、Caspase-1、白细胞介素1β(IL-1β)]的表达情况,采用实时聚合酶链反应及Western blot法分别检测主动脉内NLRP3炎症小体相关蛋白的基因及蛋白表达情况。结果与对照组比较,BAPN喂养2周后大鼠体质量明显减轻,DOCA组大鼠饮水量明显增加。DOCA组、l-NAME组大鼠血压较BAPN组明显升高[干预第2周平均动脉压:(95.4±10.1)、(110.0±9.9)比(70.4±2.9)mm Hg;干预第3周平均动脉压:(128.4±13.8)、(118.5±8.1)比(76.4±5.3)mm Hg,均P<0.01]。Masson三色染色显示:DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中胶原纤维较BAPN组明显增多(均P<0.05)。EVG染色显示:DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中弹力纤维较BAPN组明显增多(均P<0.05),且排列更加紊乱,断裂情况更加严重。免疫组化显示:与BAPN组比较,DOCA组、l-NAME组大鼠主动脉中NLRP3炎症小体相关蛋白表达增加(NLRP3:6.63±0.51、6.78±0.47比3.32±0.39;Caspase-1:5.22±0.45、6.19±0.31比3.36±0.30;IL-1β:5.51±0.53、5.80±0.40比3.18±0.35;均P<0.05)。与BAPN组比较,DOCA组及l-NAME组大鼠主动脉内NLRP3炎症小体相关蛋白在基因水平、蛋白水平的表达显著增加(均P<0.05)。结论 NLRP3炎症小体参与高血压促大鼠AD的形成。 展开更多

关键词 主动脉夹层 高血压 弹性纤维 胶原纤维 富含亮氨酸重复结构域蛋白3炎症小体

原文传递

抑制PHLPP2通过NLRP3/caspase-1轴减轻细胞因子表达改善小鼠抑郁样行为进展

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作者 孔思瑾 王立金 +1 位作者 万娟 焦东亮 《蚌埠医科大学学报》 2025年第1期81-86,共6页

目的:探讨抑制PH结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2(PHLPP2)通过NLRP3/caspase-1轴减轻炎症因子表达从而改善小鼠抑郁样行为进展的分子机制。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(NC组)、小鼠慢性不可预知应激模型(CUMS)组... 目的:探讨抑制PH结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2(PHLPP2)通过NLRP3/caspase-1轴减轻炎症因子表达从而改善小鼠抑郁样行为进展的分子机制。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(NC组)、小鼠慢性不可预知应激模型(CUMS)组、CUMS+NSC45586(PHLPP2抑制剂)组、CUMS+氟西汀组,各5只。按照CUMS构建方法进行模型构建,各组灌胃给予相应药物。采用蔗糖偏好、强迫游泳、悬尾、旷场实验检测各组小鼠行为改变;ELISA法检测各组小鼠脑组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-18和IL-6水平;PCR检测小鼠脑组织中PHLPP2、NLRP3、caspase-1表达。结果:相较于NC组,CUMS组小鼠蔗糖偏好率、直立次数、穿越平台次数均降低(P<0.05),而悬尾不动、强迫游泳时间均延长(P<0.05);而相较于CUMS组,CUMS+NSC45586组和CUMS+氟西汀组小鼠蔗糖偏好率、直立次数、穿越平台次数均增高,悬尾不动、强迫游泳时间均缩短(P<0.05)。ELISA实验显示,相较于NC组,CUMS组TNF-α、IL-1β、IL-18和IL-6表达均升高(P<0.05);而相较于CUMS组,CUMS+NSC45586组和CUMS+氟西汀组TNF-α、IL-1β、IL-18、IL-6表达均降低(P<0.05)。PCR结果显示,相较于NC组,CUMS组PHLPP2、NLRP3、caspase-1表达均升高(P<0.05);而相较于CUMS组,CUMS+NSC45586组和CUMS+氟西汀组PHLPP2、NLRP3、caspase-1表达均降低(P<0.05)。结论:抑制PHLPP2通过NLRP3/caspase-1轴减轻炎症因子表达,从而改善小鼠抑郁样行为进展。 展开更多

关键词 抑郁症 ph结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2 NLRP3/caspase-1轴 炎症因子 小鼠

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PHLPP2对小鼠Burkitt淋巴瘤移植瘤的影响

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作者 吴怡珅 朱雄鹏 +4 位作者 郑艳 辛鹏亮 刘生全 彭群艺 李纯团 《山东第一医科大学（山东省医学科学院）学报》 CAS 2024年第11期641-646,共6页

目的 研究PH结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2(PH domain leucine-rich repeat-containing protein phosphatase 2,PHLPP2)基因过表达对伯基特淋巴瘤(Burkitt lymohima,BL)移植瘤的影响及其对蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信... 目的 研究PH结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2(PH domain leucine-rich repeat-containing protein phosphatase 2,PHLPP2)基因过表达对伯基特淋巴瘤(Burkitt lymohima,BL)移植瘤的影响及其对蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)信号通路相关蛋白表达的影响。方法 在BL细胞系(CA46)中构建PHLPP2稳定过表达模型,并接种于重度免疫缺陷(NOD/ShiltJGpt-Prkdcem26Cd52112rgem26Cd22/Gpt,NCG)小鼠构建异种移植瘤模型。观察小鼠成瘤情况,测量肿瘤大小,绘制瘤体生长曲线,实验终点对比两组小鼠肿瘤大小及质量,评估PHLPP2对肿瘤生长的抑制效果。免疫组织化学染色检测PHLPP2、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-AKT)蛋白表达情况,Western blot法检测PHLPP2、AKT、核糖体蛋白S6激酶β1 (ribosomal protein S6 kinase beta-1,S6K1)蛋白表达水平及AKT、S6K1蛋白磷酸化水平。结果 成功构建NCG小鼠BL动物模型:10只小鼠皮下均有肿瘤形成,成瘤率100%。PHLPP2基因对小鼠移植瘤的影响:对照组与实验组小鼠皮下移植瘤成瘤时间分别为(10.60±1.95)、(15.00±1.58)d;与对照组(2.00±1.01) mm3相比,实验组(0.63±0.18)mm3肿瘤体积明显减少;对照组肿瘤质量为(0.83±0.33)g,实验组为(0.31±0.03)g,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Western blot及免疫组化结果:Western blot检测到实验组PHLPP2表达水平高于对照组,实验组p-AKT表达水平低于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);免疫组化结果显示,实验组及对照组中PHLPP2蛋白及p-AKT蛋白在细胞膜、细胞质中表达,其中实验组PHLPP2蛋白呈强阳性,p-AKT蛋白呈弱阳性,对照组PHLPP2蛋白呈弱阳性,p-AKT呈强阳性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PHLPP2在BL发生发展过程中发挥着重要的抑制作用,其抑制作用可能通过抑制AKT信号通路相关下游蛋白的磷酸化水平而实现。 展开更多

关键词 ph结构域富含亮氨酸重复序列的蛋白磷酸酶2 BURKITT淋巴瘤 NCG小鼠 移植瘤

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肺腺癌组织中miR-190-5p、PHLPP1的表达与病理参数和预后的关系

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作者 宋靖舟 于严玲 张燕 《转化医学杂志》 2024年第9期1381-1384,共4页

目的探讨肺腺癌(LUAD)组织中微小核糖核酸(miRNA)-190-5p、PH结构域和富亮氨酸的重复蛋白磷酸酶1(PHLPP1)的表达及与病理参数和预后的关系。方法选取上海健康医学院附属崇明医院收治的LUAD患者93例,根据miR-190-5p、PHLPP1 mRNA在LUAD... 目的探讨肺腺癌(LUAD)组织中微小核糖核酸(miRNA)-190-5p、PH结构域和富亮氨酸的重复蛋白磷酸酶1(PHLPP1)的表达及与病理参数和预后的关系。方法选取上海健康医学院附属崇明医院收治的LUAD患者93例,根据miR-190-5p、PHLPP1 mRNA在LUAD的表达均值分为高、低表达组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测LUAD组织与癌旁组织miR-190-5p、PHLPP1 mRNA表达。比较LUAD组织miR-190-5p、PHLPP1 mRNA表达在不同病理参数中差异。K-M法绘制不同miR-190-5p、PHLPP1 mRNA表达患者生存曲线。结果与癌旁组织比较,LUAD组织miR-190-5p表达升高,PHLPP1 mRNA表达降低(P<0.05)。PHLPP1与miR-190-5p在LUAD组织呈负相关(P<0.05)。LUAD组织miR-190-5p、PHLPP1 mRNA表达在不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移中比较差异有统计学意义(P<0.05)。miR-190-5p高表达患者3年总生存率较低表达患者更低,PHLPP1 mRNA高表达患者3年总生存率较高于低表达患者更高(P<0.05)。结论LUAD组织miR-190-5p高表达和PHLPP1 mRNA低表达,与分化程度、TNM分期、淋巴结转移和不良预后有关。 展开更多

关键词 肺腺癌 微小核糖核酸-190-5p ph结构域和富亮氨酸的重复蛋白磷酸酶1 病理参数 预后

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刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化的影响

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作者 丁虹 王雪可 +1 位作者 芦晓帆 许誉琦 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期249-256,共8页

目的:探讨刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体活化的影响及其作用机制。方法:60只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组,模型组,刺芒柄花素低、高剂量组,... 目的:探讨刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体活化的影响及其作用机制。方法:60只雄性Balb/c小鼠分为正常对照组,模型组,刺芒柄花素低、高剂量组,刺芒柄花素+EX527组,每组12只。除正常对照组外,其余各组小鼠均以卵清蛋白(OVA)为致敏原构建变应性鼻炎模型。通过行为学观察小鼠鼻部症状(抓鼻、打喷嚏);ELISA法检测血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)和组胺水平。观察小鼠鼻黏膜组织形态学变化并计数嗜酸性粒细胞、杯状细胞与肥大细胞。采用相应试剂盒检测鼻黏膜组织中活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和Fe^(2+)水平;qRT-PCR法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和溶质载体家族7成员11(SLC7A11)mRNA的表达;Western blot法检测沉默信息调节因子1(SIRT1)、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、活化的半胱氨酸蛋白酶1(Cleaved Caspase-1)、活化的白细胞介素(IL)-1β(Cleaved IL-1β)、IL-18、GPX4和SLC7A11蛋白的表达;免疫共沉淀检测NLRP3乙酰化水平。结果:与模型组比较,刺芒柄花素低、高剂量组小鼠抓鼻和打喷嚏次数减少,血清OVA-sIgE和组胺含量降低,鼻黏膜受损程度减轻,嗜酸性粒细胞、肥大细胞和杯状细胞数减少(P<0.05);小鼠鼻黏膜组织中ROS、MDA和Fe^(2+)水平降低,GSH水平以及GPX4和SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);小鼠鼻黏膜组织中SIRT1、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1、Cleaved IL-1β、IL-18蛋白表达以及NLRP3乙酰化水平降低(P<0.05)。SIRT1抑制剂EX527减弱刺芒柄花素对变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化的抑制作用。结论:刺芒柄花素可能通过调控SIRT1蛋白抑制变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织铁死亡和NLRP3炎症小体活化。 展开更多

关键词 刺芒柄花素 变应性鼻炎 沉默信息调节因子1 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 铁死亡 小鼠

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白色念珠菌经组织蛋白酶B途径诱导小鼠腹腔巨噬细胞NLRP3炎性体表达 被引量：4

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作者 许莉 李东升 +3 位作者 董碧麟 陈宏翔 陈娜 王辉 《新乡医学院学报》 CAS 2014年第1期1-4,共4页

目的探讨含热蛋白结构域3富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域(NLRP3)在白色念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用及其激活途径。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,将其分为空白对照组、CA-074Me组、白色念珠... 目的探讨含热蛋白结构域3富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域(NLRP3)在白色念珠菌诱导的小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子产生中的作用及其激活途径。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,将其分为空白对照组、CA-074Me组、白色念珠菌组、白色念珠菌+10-6mol·L-1CA-074Me组和白色念珠菌+10-5mol·L-1CA-074Me组。实时荧光定量聚合酶链反应检测细胞内NLRP3 mRNA表达,Western blot检测细胞内溶酶体组织蛋白酶B(cathepsin B)和胱天蛋白酶-1(caspase-1)p20蛋白质水平,酶联免疫吸附试验测定各组细胞培养上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果白色念珠菌组细胞内NLRP3 mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白表达、细胞培养上清液中IL-1β水平均显著高于空白对照组(P<0.01)。加入10-5mol·L-1CA-074Me干预后,细胞内NLRP3mRNA表达、cathepsin B和caspase-1 p20蛋白的表达及细胞培养上清液中IL-1β水平与白色念珠菌组比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论白色念珠菌通过活化cathepsin B诱导巨噬细胞NLRP3的表达、caspase-1的活化和IL-1β的分泌。 展开更多

关键词 白色念珠菌 含热蛋白结构域3富含亮氨酸重复序列的核苷酸结合寡聚化结构域 组织蛋白酶B 胱天 蛋白酶-1 白细胞介素-1Β

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基于NLRP NLRP3信号通路探讨黑果小檗提取物对模型小鼠肝纤维化的影响

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作者 李渊 顾伟萍 +2 位作者 孙吉祥 毕慧 刘菁 《中国药业》 2025年第9期58-62,共5页

目的基于核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)信号通路探讨黑果小檗提取物(BHSTA)对模型小鼠肝纤维化的影响。方法将35只雄性小鼠随机分为正常对照组(A组,等量蒸馏水),模型对照组(B组,等量蒸馏水),秋水仙碱... 目的基于核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)信号通路探讨黑果小檗提取物(BHSTA)对模型小鼠肝纤维化的影响。方法将35只雄性小鼠随机分为正常对照组(A组,等量蒸馏水),模型对照组(B组,等量蒸馏水),秋水仙碱组(C组,2 mg/kg秋水仙碱),BHSTA低、高剂量组(D_(1)组、D_(2)组,10,40 mg/mLBHSTA),各7只。B组、C组、D_(1)组、D_(2)组小鼠均腹腔注射3μL/g四氯化碳(CCl4)油剂(CCl4∶橄榄油=1∶4,V/V)4周,每周2次,复制肝纤维化小鼠模型,A组小鼠仅腹腔注射3μL/g CCl44周,每周2次。之后各组小鼠每天灌胃1次相应药物,连续4周。观察小鼠的一般情况(包括精神状态、饮水量、饮食量、体质量、活动量);肝脏组织经苏木精-伊红(HE)染色,观察肝脏病理形态变化;检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平和NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、白细胞介素1β(IL-1β)、胱天蛋白酶1(caspase-1)的蛋白表达水平。结果与B组比较,D_(1)组、D_(2)组小鼠的精神状态尚可,饮食量、饮水量尚可,体质量增加,活动量正常;肝脏细胞形态趋于正常,炎性细胞浸润减少;ALT,AST水平及NLRP3,ASC,IL-1β,caspase-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论BHSTA可有效抑制肝纤维化模型小鼠肝星状细胞的活化,改善肝脏功能,减轻炎性反应,其作用机制可能与抑制NLRP3信号通路相关。 展开更多

关键词 黑果小檗提取物 肝纤维化 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 肝星状细胞 炎性反应 作用机制

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司美格鲁肽改善糖尿病肾病模型小鼠肾功能损伤的作用机制

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作者 姜啸 姜玫 +3 位作者 王智峰 赵涛 曹思明 李秋梅 《中国药业》 2025年第7期45-50,共6页

目的探讨司美格鲁肽改善糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾功能损伤的作用机制。方法随机选取30只SPF级小鼠予高脂饲料(66.5%维持饲料+10%猪油+20%蔗糖+2.5%胆固醇+1%胆酸钠)6周,之后腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素溶液,以复制DN小鼠模型,另选取10... 目的探讨司美格鲁肽改善糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾功能损伤的作用机制。方法随机选取30只SPF级小鼠予高脂饲料(66.5%维持饲料+10%猪油+20%蔗糖+2.5%胆固醇+1%胆酸钠)6周,之后腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素溶液,以复制DN小鼠模型,另选取10只小鼠予常规饲料。将予常规饲料的小鼠设为空白对照组(A组,等量生理盐水),将建模成功的小鼠随机分为模型对照组(B组,等量生理盐水),司美格鲁肽组(C组,60μg/kg),利拉鲁肽组(D组,200μg/kg),各10只,各组小鼠分别腹腔注射相应药物干预8周。检测小鼠的空腹血糖(FBG)、血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)水平及24 h尿蛋白定量(24 h UTP);采用苏木精-伊红(HE)染色法观察肾组织病理形态变化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β表达水平;采用免疫印迹(Western blot)法检测肾组织核因子-κB p65(NF-κB p65)、核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(caspase-1)蛋白表达水平。结果与B组比较,C组小鼠FBG,血清SCr和BUN水平,24 h UTP,肾脏病理评分,IL-18和IL-1β表达水平,NF-κB p65,NLRP3,caspase-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),肾组织病理损伤改善。结论司美格鲁肽可显著改善DN模型小鼠的肾功能损伤,其作用机制可能与调控NF-κB/NLRP3信号通路,减轻炎性反应,抑制细胞焦亡有关。 展开更多

关键词 司美格鲁肽 糖尿病肾病 胰高血糖素样肽-1受体激动剂 核因子-κB/核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3信号通路

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PHLPP与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制研究

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作者 段晓辉 王静 +2 位作者 陈杰 辛鹏 连琳琳 《临床和实验医学杂志》 2023年第22期2357-2361,共5页

目的探讨PH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白(PHLPP)与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制。方法采用回顾性研究方法,选取2016年7月至2022年7月在河北工程大学附属医院治疗的89例喉鳞状细胞癌患者病灶标本,同时选取病灶周边正常... 目的探讨PH值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白(PHLPP)与喉鳞状细胞癌转移的相关性及作用机制。方法采用回顾性研究方法,选取2016年7月至2022年7月在河北工程大学附属医院治疗的89例喉鳞状细胞癌患者病灶标本,同时选取病灶周边正常组织作为对照。采用免疫组织化学法检测PHLPP蛋白表达;同时选取喉鳞状细胞癌HEP-2细胞株,随机分为PHLPP沉默组、PHLPP过表达组和空白对照组,采用MTT法检测各组细胞增殖,采用Transwell小室试验检测各组细胞迁移和侵袭,采用蛋白质印迹法检测各组PHLPP、BAX、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果喉鳞状细胞癌组织PHLPP蛋白阳性表达率为38.20%,明显低于正常组织(95.51%),差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、有远端转移的患者PHLPP蛋白阳性表达率分别为20.59%、17.50%、0,均显著低于临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、无远端转移(79.41%、82.50%、100.00%),差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显高于PHLPP过表达组和空白对照组;PHLPP过表达组细胞培养24、48、72 h时吸光度值明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP沉默组细胞迁移和侵袭数均明显高于PHLPP过表达组和空白对照组(P<0.05);而PHLPP过表达组细细胞迁移和侵袭数均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。PHLPP过表达组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显高于PHLPP沉默组和空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显低于PHLPP沉默组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);PHLPP沉默组PHLPP、BAX蛋白表达量均明显低于空白对照组,而PI3K、p-AKT蛋白表达量均明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论喉鳞状细胞癌组织PHLPP表达下调,与临床分期、淋巴结转移和远处转移有关;调控PHLPP表达对癌细胞增殖、迁移和侵袭有所影响,可能与调控BAX、PI3K和p-AKT蛋白有关。 展开更多

关键词 ph值域和亮氨酸丰富重复蛋白质磷酸酶蛋白 喉鳞状细胞癌 临床病理特征 作用机制

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宁心缓痛汤对子宫内膜异位症痛经疼痛、细胞焦亡及NLRP3炎性小体的影响

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作者 司晴 王桂华 +2 位作者 张铁征 郑新平 马艳东 《安徽医药》 2025年第3期482-487,共6页

目的探究宁心缓痛汤调控核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎性小体介导的细胞焦亡对子宫内膜异位症痛经大鼠疼痛反应的影响。方法2022年1月至2023年5月,采用随机数字表法将50只大鼠分为假手术组10只和... 目的探究宁心缓痛汤调控核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎性小体介导的细胞焦亡对子宫内膜异位症痛经大鼠疼痛反应的影响。方法2022年1月至2023年5月,采用随机数字表法将50只大鼠分为假手术组10只和造模组40只。造模组在造模过程中有3只大鼠造模失败、1只大鼠死亡,造模成功后的36只大鼠采用随机数字表法分成四组:子宫内膜异位症疼痛大鼠模型组(EMT组)、低剂量宁心缓痛汤干预组(宁心缓痛汤-L组)、高剂量宁心缓痛汤干预组(宁心缓痛汤-H组)和孕三烯酮组,每组各9只。检测各组大鼠痛经状况和血清中前列腺素F2α(PGF2α)和前列腺素E2(PGE2)含量;苏木精-伊红(HE)染色检测异位子宫内膜组织病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶(TUNEL)检测异位子宫内膜组织细胞凋亡;蛋白质印迹法检测异位子宫内膜组织中胱天蛋白酶-1(caspase-1)、NLRP3、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18蛋白表达。结果和假手术组相比,EMT组大鼠扭体次数、血清中PGF2α含量[(208.91±17.06)ng/L比(115.36±10.27)ng/L]和PGF2α/PGE2(0.97±0.10比0.27±0.03)、异位子宫内膜组织中细胞凋亡率和NLRP3(0.81±0.09比0.15±0.02)、caspase-1(0.73±0.08比0.12±0.02)、GSDMD(0.91±0.11比0.30±0.03)、IL(白细胞介素)-1β(1.21±0.12比0.24±0.03)、IL-18蛋白(0.92±0.10比0.26±0.03)表达明显增加,疼痛潜伏期、血清中PGE2含量[(214.31±19.52)ng/L比(423.78±35.61)ng/L]明显减少(P<0.05);和EMT组相比,宁心缓痛汤-L组、宁心缓痛汤-H组和孕三烯酮组大鼠扭体次数、血清中PGF2α含量和PGF2α/PGE2、异位子宫内膜组织中细胞凋亡率和NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达明显减少,疼痛潜伏期、血清中PGE2含量明增加(P<0.05)。结论宁心缓痛汤可能通过抑制NLRP3介导的细胞焦亡,减轻炎症反应,调控血清中的PGE2、PGF2α的合成与释放,从而对子宫内膜异位症痛经大鼠发挥一定的治疗作用。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 宁心缓痛汤 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 细胞焦亡 痛经 疼痛反应 前列腺素

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Klotho通过抑制NLRP3炎症小体对自发性高血压大鼠肾损伤的影响

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作者 栗玮 王岩 赵伟 《国际医药卫生导报》 2025年第7期1149-1156,共8页

目的 探讨Klotho蛋白对自发性高血压大鼠肾损伤及核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体的影响。方法 实验时间为2024年1月10日至3月25日。选择14周龄、体质量220~260 g的SPF级雄性自发性高血压大鼠... 目的 探讨Klotho蛋白对自发性高血压大鼠肾损伤及核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)炎症小体的影响。方法 实验时间为2024年1月10日至3月25日。选择14周龄、体质量220~260 g的SPF级雄性自发性高血压大鼠,另取相同体质量范围的SPF级雄性WKY大鼠。所有大鼠单独饲养在温度25℃、相对湿度60%的光暗(12 h/12 h)循环中,经过7 d适应性喂养后,在随后21 d期间的上午同一时间对大鼠进行分组治疗。将自发性高血压大鼠分为模型组(给予等体积生理盐水灌胃)、阳性对照组(给予0.67 mg/kg依那普利灌胃治疗)和低、高剂量Klotho组(分别给予50、100 mg/kg Klotho灌胃治疗)、高剂量Klotho+NLRP3炎症小体激活剂组(给予100 mg/kg Klotho蛋白灌胃治疗后,再给予5 mg/kg尼日利亚菌素钠盐灌胃治疗),每组12只大鼠;另取12只WKY大鼠作为对照组(给予等体积生理盐水灌胃)。各组大鼠灌胃治疗1次/d,持续21 d,其他处理方式相同。检测各组大鼠尾动脉收缩压和舒张压、肾功能(血肌酐、尿素氮和尿微量白蛋白)、肾脏组织病理变化及纤维化程度、炎症因子[白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β]水平、Klotho蛋白、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白质(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)、CollagenⅢ和CollagenⅠ蛋白含量。采用单因素方差分析、LSD-t检验进行统计分析。结果 与对照组相比,模型组大鼠肾脏组织病损程度严重,尾动脉收缩压及舒张压、血肌酐、尿素氮和尿微量白蛋白含量、IL-6、TNF-α、IL-1β、胶原容积分数、肾脏组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、CollagenⅢ和CollagenⅠ蛋白表达量均升高,Klotho蛋白表达量降低(0.24±0.01比0.60±0.02),差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组相比,阳性对照组以及低、高剂量Klotho组大鼠肾脏组织病损减轻,尾动脉收缩压及舒张压、血肌酐、尿素氮和尿微量白蛋白含量、IL-6、TNF-α、IL-1β、胶原容积分数、肾脏组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、CollagenⅢ和CollagenⅠ蛋白表达量均降低,Klotho蛋白表达量均升高(0.53±0.03、0.36±0.03、0.51±0.04比0.24±0.01),差异均有统计学意义(均P<0.05);与高剂量Klotho组相比,高剂量Klotho+NLRP3炎症小体激活剂组大鼠肾脏组织病损严重、肾脏纤维化和炎症反应加剧、肾功能下降(均P<0.05)。结论 补充Klotho蛋白通过抑制NLRP3炎症小体通路,可以减轻自发性高血压大鼠肾脏组织的炎症反应和纤维化,从而改善肾损伤,增强肾功能。 展开更多

关键词 核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3 炎症小体 KLOTHO蛋白 自发性高血压大鼠 肾脏功能 肾损伤

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下调PHLPP1表达通过激活PI3K/AKT/mTOR通路改善高糖诱导的人足细胞自噬抑制和凋亡促进作用 被引量：7

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作者 蔡根深 张晶 王汝朋 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期8-15,共8页

目的研究富含亮氨酸重复序列的普列克底物蛋白同源结构域蛋白磷酸酶1(PHLPP1)在糖尿病肾病(DN)肾组织的表达及其对足细胞自噬、凋亡的影响并初步探究其相关作用机制。方法采用免疫组织化学检测DN肾组织及非糖尿病肾组织PHLPP1表达,免疫... 目的研究富含亮氨酸重复序列的普列克底物蛋白同源结构域蛋白磷酸酶1(PHLPP1)在糖尿病肾病(DN)肾组织的表达及其对足细胞自噬、凋亡的影响并初步探究其相关作用机制。方法采用免疫组织化学检测DN肾组织及非糖尿病肾组织PHLPP1表达,免疫荧光组织化学染色检测肾病蛋白(nephrin)、 PHLPP1的共表达以确定PHLPP1在足细胞的定位;在正常葡萄糖(NG)及高糖(HG)培养液中培养足细胞,实时荧光定量PCR检测细胞PHLPP1 mRNA表达。采用脂质体瞬时转染技术将靶向沉默PHLPP1的小干扰RNA(si-PHLPP1)转染入足细胞,实时定量PCR检测转染效率;按足细胞处理方式的不同将细胞分为NG组(正常葡萄糖浓度的培养液进行培养的足细胞)、 HG组(高糖培养液培养的足细胞)、 HG联合si-PHLPP1组(高糖培养液培养转染si-PHLPP1后的足细胞组)、羟氯喹(HCQ)处理的HG组(用自噬抑制剂HCQ与HG培养液联合处理的足细胞)。透射电镜观察各组足细胞中自噬小体的形成, Western blot法检测微管相关蛋白1轻涟3(LC3)、 P62、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、蛋白激酶B (AKT)及磷酸化的AKT(p-AKT)蛋白表达,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果 PHLPP1在DN患者肾组织中高表达,且主要表达于肾小球足细胞内。HG培养液能够促进足细胞中PHLPP1 mRNA表达,并具有时间依赖性;与NG组相比, HG组、 HG联合si-PHLPP1组及HG联合HCQ组的足细胞自噬水平、 PI3K蛋白表达与mTOR的磷酸化水平均显著减低,细胞凋亡率、 c-caspase-3蛋白表达水平均显著增加,但HG联合si-PHLPP1组细胞的AKT磷酸化水平明显升高,其余两组AKT磷酸化水平显著降低;与HG组相比, HG联合si-PHLPP1组细胞的凋亡率、c-caspase-3蛋白表达均明显降低,而自噬水平, PI3K蛋白表达与mTOR和AKT蛋白的磷酸化水平均显著增加, HG联合HCQ组细胞的自噬水平明显降低,凋亡率与c-caspase-3蛋白表达均显著增加,其他指标无明显变化。结论 PHLPP1在DN肾组织显著高表达,下调足细胞PHLPP1的表达通过激活PI3K/AKT/mTOR通路促进足细胞自噬水平,减少足细胞的凋亡。 展开更多

关键词 富含亮氨酸重复序列的普列克底物蛋白同源结构域蛋白磷酸酶1(phLPP1) 磷脂酰肌醇3激酶(PI3K) 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 蛋白激酶B(AKT) 足细胞 自噬

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FKBP51·PHLPP·Akt信号模块对大鼠脑缺血／再灌注后Akt磷酸化及海马神经元损伤的影响 被引量：2

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作者 魏秀娥 张风玉 +2 位作者 王凯 张清秀 荣良群 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期15-18,共4页

目的探讨FKBP51·PHLPP·Akt信号模块对大鼠脑缺血／再灌注（I／R）后Akt磷酸化及海马CAl区迟发性神经元损伤的影响。方法采用Pulsinelli-Brierley法制作全脑缺血损伤模型，每亚组6只动物，缺血前连续3d侧脑室注射PH结构域且富... 目的探讨FKBP51·PHLPP·Akt信号模块对大鼠脑缺血／再灌注（I／R）后Akt磷酸化及海马CAl区迟发性神经元损伤的影响。方法采用Pulsinelli-Brierley法制作全脑缺血损伤模型，每亚组6只动物，缺血前连续3d侧脑室注射PH结构域且富含亮氨酸重复基序的丝／苏氨酸蛋白磷酸酶2（PHdo．mainand Leucinerichrepeat Protein Phosphatases，PHLPP2）反义寡核苷酸（antisense oligodeoxynucleotides，ASODN）后缺血15rain，再灌注6h，应用免疫共沉淀及免疫印记分别检测PHLPP2、FK506连接蛋白5（FK506bindingprotein5，FKBP51）和蛋白激酶B（ProteinkinaseB，Akt）三者两两结合、检测Akt及其磷酸化的表达情况。再灌注5d，断头取脑，石蜡切片，苏木精一伊红染色，图像分析测定单位面积内染色细胞面积总和。I／R＋ASODN组分别与I／R组及I／R＋错义寡核苷酸（missense0ligodeoxynucleotides，MSODN）组比较，进行统计学分析。结果单因素方差分析结果显示：与I／R＋PHLPP2MSODN组（1．24＋0．24）比较，I／R＋PHLPP2ASODN组（1．06±0．01）PHLPP2与Akt间的两两结合水平明显受到抑制（P〈0．05）；与I／R＋PHLPP2MSODN组（1．68±0．11）比较，I／R＋PHLPP2ASODN组（1．04±0．13）FKBP51与Akt间的两两结合水平明显受到抑制（P〈0．05）；与I／R＋PHLPP2MSODN组（0．58±0．01）比较，I／R＋PHLPP2ASODN组（0．76±0．02），P-Akt表达水平明显增加（P〈0．05），而Akt总蛋白表达无明显变化（P〉0．05）；I／R5d＋PHLPP2ASODN组[（88-3±2．7）个]与I／R＋PHLPP2MSODN组[（20．1±2．5）个]比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论FKBP51·PHLPP·Akt模块可能通过Akt信号通路参与脑缺血再灌注损伤，促进海马CAl区神经元的迟发性损伤。 展开更多

关键词 全脑缺血 ph结构域且富含亮氨酸重复基序的丝 苏氨酸蛋白磷酸酶2 FK506连接 蛋白5 蛋白激酶B

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