目的:探讨骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞PI3K-AKT信号通路的影响。方法:BSP基因沉默的乳腺癌MDA-MB-231细胞(简称231BO-BSP27)经重组人BSP(recombinant human BSP,rhBSP)和PI3K-AKT抑制剂LY294002处理后,W...目的:探讨骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞PI3K-AKT信号通路的影响。方法:BSP基因沉默的乳腺癌MDA-MB-231细胞(简称231BO-BSP27)经重组人BSP(recombinant human BSP,rhBSP)和PI3K-AKT抑制剂LY294002处理后,Western blotting检测磷酸化AKT水平的变化,实时定量PCR检测caspase-3、cyclin D1 mRNA表达水平,MTT法检测细胞增殖能力。结果:与BSP基因未沉默的对照组231BO-Scrambled细胞相比,BSP基因沉默的231BO-BSP27细胞BSP蛋白表达明显下调(74.32±2.18)%(P<0.01);AKT磷酸化水平明显下降(33.30±2.61)%(P<0.01),而caspase-3和cyclin D1 mRNA表达分别上升和下降(1.000±0.000 vs 1.733±0.039,1.000±0.000 vs 0.370±0.012;均P<0.01);231BO-BSP27细胞增殖能力显著下降(P<0.05)。外源添加rhBSP蛋白分别上调231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞AKT磷酸化水平(17.86±2.27)%和(33.78±1.51)%(均P<0.01),231BO-BSP27细胞caspase-3 mRNA表达降低(1.000±0.039 vs 0.541±0.091,P<0.01)、cyclin D1 mRNA表达升高(1.000±0.000 vs 2.921±0.032,P<0.01),促进231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞的增殖(均P<0.01)。LY294002则能逆转rhBSP对231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞AKT磷酸化激活作用(P<0.05),使231BO-BSP27细胞caspase-3 mRNA表达升高(P<0.01)、cyclin D1 mRNA表达降低(P<0.01),使该两种细胞增殖能力下降(均P<0.01)。结论:BSP通过PI3K-AKT信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞caspase-3和cyclin D1的表达,并影响细胞的增殖。展开更多
文摘目的:探讨骨唾液酸蛋白(bone sialoprotein,BSP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞PI3K-AKT信号通路的影响。方法:BSP基因沉默的乳腺癌MDA-MB-231细胞(简称231BO-BSP27)经重组人BSP(recombinant human BSP,rhBSP)和PI3K-AKT抑制剂LY294002处理后,Western blotting检测磷酸化AKT水平的变化,实时定量PCR检测caspase-3、cyclin D1 mRNA表达水平,MTT法检测细胞增殖能力。结果:与BSP基因未沉默的对照组231BO-Scrambled细胞相比,BSP基因沉默的231BO-BSP27细胞BSP蛋白表达明显下调(74.32±2.18)%(P<0.01);AKT磷酸化水平明显下降(33.30±2.61)%(P<0.01),而caspase-3和cyclin D1 mRNA表达分别上升和下降(1.000±0.000 vs 1.733±0.039,1.000±0.000 vs 0.370±0.012;均P<0.01);231BO-BSP27细胞增殖能力显著下降(P<0.05)。外源添加rhBSP蛋白分别上调231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞AKT磷酸化水平(17.86±2.27)%和(33.78±1.51)%(均P<0.01),231BO-BSP27细胞caspase-3 mRNA表达降低(1.000±0.039 vs 0.541±0.091,P<0.01)、cyclin D1 mRNA表达升高(1.000±0.000 vs 2.921±0.032,P<0.01),促进231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞的增殖(均P<0.01)。LY294002则能逆转rhBSP对231BO-Scrambled和231BO-BSP27细胞AKT磷酸化激活作用(P<0.05),使231BO-BSP27细胞caspase-3 mRNA表达升高(P<0.01)、cyclin D1 mRNA表达降低(P<0.01),使该两种细胞增殖能力下降(均P<0.01)。结论:BSP通过PI3K-AKT信号通路调控乳腺癌MDA-MB-231细胞caspase-3和cyclin D1的表达,并影响细胞的增殖。
