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基于Raf/MEK/ERK信号通路探讨内异康复片对hEM15A细胞的影响 被引量:2
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作者 周奕含 庞丽丽 +4 位作者 杨唯 尹小兰 张颖 张丽叶 文怡 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2062-2068,共7页
目的探讨内异康复片对子宫内膜异位症(EMT)内膜间质细胞hEM15A的影响。方法制备内异康复片含药血清,将hEM15A细胞分为空白对照组,阴性对照组,5%、10%、20%含药血清组。采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测... 目的探讨内异康复片对子宫内膜异位症(EMT)内膜间质细胞hEM15A的影响。方法制备内异康复片含药血清,将hEM15A细胞分为空白对照组,阴性对照组,5%、10%、20%含药血清组。采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞迁移,Western blo法检测RKIP及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达。再将hEM15A细胞分为阴性对照组、10%含药血清组、si-RKIP-1组、si-RKIP-1+10%含药血清组,观察上述检测指标的变化。结果与阴性对照组比较,各浓度含药血清组hEM15A细胞活性降低(P<0.05),凋亡率、RKIP蛋白表达升高(P<0.05);10%及20%含药血清组hEM15A细胞迁移数、p-MEK及p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf蛋白表达降低(P<0.05)。与阴性对照组比较,si-RKIP-1组hEM15A细胞活性、迁移数升高(P<0.05),RKIP蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf、p-ERK1/2、p-MEK蛋白表达升高(P<0.05);与10%含药血清组比较,si-RKIP-1+10%含药血清组hEM15A细胞活性、迁移数升高(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),RKIP蛋白表达降低(P<0.05),p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05)。结论内异康复片可能通过调节RKIP及其介导的Raf/MEK/ERK信号通路抑制hEM15A细胞活性和迁移,促进ESC凋亡,发挥改善EMT的作用。 展开更多
关键词 内异康复片 子宫内膜异位症 raf激酶抑制蛋白(RKIP) raf/mek/erk信号通路
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中医药靶向干预RaF/MEK/ERK信号通路治疗肝细胞癌的研究进展
2
作者 张政 许斌 +3 位作者 俞渊 颜士朝 郭徽 张艺博 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2024年第3期333-337,共5页
肝细胞癌(HCC)是一种高度恶性肿瘤,具有特殊的多元难治性分子生物学机制。肝细胞癌的病理表现与病变细胞的分化程度有关,因此抑制肝癌细胞的分化、增殖是治疗该病的重要手段。中医药可以通过调控体内蛋白激酶(RaF)、丝原活化蛋白激酶(M... 肝细胞癌(HCC)是一种高度恶性肿瘤,具有特殊的多元难治性分子生物学机制。肝细胞癌的病理表现与病变细胞的分化程度有关,因此抑制肝癌细胞的分化、增殖是治疗该病的重要手段。中医药可以通过调控体内蛋白激酶(RaF)、丝原活化蛋白激酶(MEK)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及精准干预RaF/MEK/ERK通路来影响肝癌的发生进展,从而发挥治疗HCC的作用。该文主要针对RaF/MEK/ERK信号通路调控HCC发生发展的机制,以及中药单体及复方靶向干预RaF/MEK/ERK信号通路进行综述。 展开更多
关键词 raf/mek/erk信号通路 肝细胞癌 中医药 研究进展
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连翘脂素调节Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
3
作者 郑声友 李叶若 肖嘉伍 《河北医药》 CAS 2024年第12期1771-1776,共6页
目的 探究连翘脂素(PG)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化的影响及机制。方法 培养HCT116结直肠癌细胞,采用10~200μmol/L的连翘脂素处理细胞,检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度。将细胞分为对照组(Control组),连翘... 目的 探究连翘脂素(PG)对结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化的影响及机制。方法 培养HCT116结直肠癌细胞,采用10~200μmol/L的连翘脂素处理细胞,检测细胞存活率,筛选最佳实验浓度。将细胞分为对照组(Control组),连翘脂素低、中、高浓度组(PG-L组、PG-M组、PG-H组),连翘脂素高浓度+转染慢病毒阴性对照组(PG-H+NC组),连翘脂素高浓度+Ras慢病毒组(PG-H+Ras组)。平板克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;Transwell小室法检测细胞侵袭;流式细胞术以及Hoechst33258染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测上皮间质转化(EMT)标志蛋白E型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)以及信号通路相关蛋白p-Raf、p-MEK、p-ERK表达;建立荷瘤小鼠模型评价连翘脂素对结直肠癌肿瘤生长的影响。结果 10~200μmol/L的连翘脂素处理HCT116结直肠癌细胞,可以显著抑制细胞存活率,经计算IC50值为(140.4±2.147)μmol/L,选择10、50、100μmol/L连翘脂素进行后续实验;与Control组比较,PG-L组、PG-M组、PG-H组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著降低,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著升高,且呈浓度依赖性(P<0.05);与PG-H+NC组比较,PG-H+Ras组HCT116细胞克隆形成率、划痕愈合率、细胞侵袭个数以及Vimentin、p-Raf、p-MEK、p-ERK表达显著升高,细胞凋亡率以及E-cadherin表达显著降低(P<0.05);连翘脂素可以显著抑制结直肠癌移植瘤的生长。结论 连翘脂素可以抑制结直肠癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡以及上皮间质转化,其作用机制可能与抑制Ras/Raf/MEK/ERK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 连翘脂素 Ras/raf/mek/erk信号通路 结直肠癌 上皮间质转化 增殖 凋亡
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Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与自噬调控作用的研究进展 被引量:35
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作者 王雪 张评浒 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期110-116,共7页
自噬是机体保守的自我防御机制,是将细胞内变形坏死的细胞器和多余蛋白降解为小分子,以供循环利用。自噬在生理和病理状态下均发挥重要作用,可通过多条信号通路影响胞内物质的表达。目前已知Ras/Raf/MEK/ERK信号通路不仅广泛参与调控细... 自噬是机体保守的自我防御机制,是将细胞内变形坏死的细胞器和多余蛋白降解为小分子,以供循环利用。自噬在生理和病理状态下均发挥重要作用,可通过多条信号通路影响胞内物质的表达。目前已知Ras/Raf/MEK/ERK信号通路不仅广泛参与调控细胞生长、增殖、分化、凋亡等多个生理病理过程,并且参与调控自噬,并具有促进肿瘤细胞发生自噬性死亡的作用,但是其具体参与调控自噬的作用机制尚未完全阐明。本文就Ras/Raf/MEK/ERK信号通路参与调控自噬的作用的研究进展进行详细阐述,以期为研究Ras/Raf/MEK/ERK信号通路调控自噬的作用机制提供参考。 展开更多
关键词 Ras/raf/mek/erk信号通路 自噬 B-raf K-RAS 抗肿瘤
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基于Raf/MEK/ERK信号通路探讨黄芪建中汤治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡的作用机制 被引量:12
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作者 宋厚盼 陈小娟 +5 位作者 曾梅艳 陈新怡 杨焘 刘涛 吴海滨 仇婧玥 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1093-1100,共8页
目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组(4.17 mg·kg^(-1))以及黄芪建中汤高、低剂量组(18.54、9.27 g·kg^(-... 目的探讨黄芪建中汤通过Raf/MEK/ERK信号通路治疗大鼠脾胃虚寒型十二指肠溃疡(DU)的作用机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、埃索美拉唑组(4.17 mg·kg^(-1))以及黄芪建中汤高、低剂量组(18.54、9.27 g·kg^(-1))。采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合阿司匹林、无水乙醇构建脾胃虚寒型DU大鼠模型。灌胃给药,每天1次,连续4 d。观察大鼠十二指肠黏膜损伤情况并计算溃疡指数和治疗指数;采用HE染色法观察十二指肠黏膜组织病理形态学改变;采用酶联免疫吸附试验检测十二指肠组织中前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;免疫荧光法检测十二指肠黏膜磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-Raf)、磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶激酶1/2(p-MEK1/2)、磷酸化细胞外信号调节激酶1(p-ERK1)蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠的十二指肠溃疡指数显著升高(P<0.01);小肠绒毛脱落,隐窝脓肿,小肠绒毛长度和隐窝深度均显著降低(P<0.01);肠黏膜PGE2、IL-10含量均明显降低(P<0.01),TNF-α含量显著增加(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达量均明显增加(P<0.01)。与模型组比较,黄芪建中汤各剂量组的大鼠十二指肠溃疡指数均明显降低(P<0.01);肠黏膜损伤得到明显改善,黏膜形态趋于完整,小肠绒毛长度和隐窝深度均明显增加(P<0.01);肠黏膜PGE2和IL-10含量均明显提高(P<0.01),TNF-α含量显著降低(P<0.01);肠黏膜p-Raf、p-MEK1/2和p-ERK1蛋白表达均显著下调(P<0.01)。结论黄芪建中汤对脾胃虚寒型DU大鼠具有治疗作用,其机制可能与调控PGE2、TNF-α、IL-10等炎症介质水平,抑制Raf/MEK/ERK信号通路活化有关。 展开更多
关键词 黄芪建中汤 十二指肠溃疡 脾胃虚寒证 细胞外信号调节激酶 raf/mek/erk信号通路 大鼠
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RAF/MEK/ERK信号通路在胰腺癌发生发展中的作用机制及其临床应用价值 被引量:2
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作者 郭鑫 任思谦 +3 位作者 阿卜杜·海拜尔·萨杜拉 袁蒙 叶辰 原春辉 《腹部外科》 2020年第5期387-390,共4页
丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用。在胰腺癌中,受体酪氨酸激酶的异常活化可以激活MAPK信号通路,在MAPK家族中,细胞外信号调节激酶(RAF/MEK/ERK)信号通路是其中最重要的信号通路,活化的RAF/... 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的激活在多种肿瘤发生发展过程中起着重要作用。在胰腺癌中,受体酪氨酸激酶的异常活化可以激活MAPK信号通路,在MAPK家族中,细胞外信号调节激酶(RAF/MEK/ERK)信号通路是其中最重要的信号通路,活化的RAF/MEK/ERK信号通路能够传递细胞外信号调节肿瘤的增殖、凋亡、侵袭转移和血管生成。因此,RAF/MEK/ERK信号通路被认为是胰腺癌治疗的潜在治疗靶点。该文重点综述了RAF/MEK/ERK信号通路的异常活化在胰腺癌发生发展中的生物学作用,靶向抑制剂的研发及其在临床应用中存在问题和挑战。 展开更多
关键词 raf/mek/erk信号通路 胰腺癌 机制 应用价值
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异槲皮苷对HepG2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用 被引量:9
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作者 蒋国君 刘天旭 +3 位作者 黄桂红 巫亭 陶丽群 朱钊铭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1382-1387,共6页
目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L^(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况... 目的研究异槲皮苷对Hep G2细胞中Raf/MEK/ERK信号通路的干预作用。方法采用异槲皮苷(0、40、80、160、320μmol·L^(-1))作用于Hep G2细胞,MTT法检测异槲皮苷对Hep G2细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察24、48 h后,细胞形态及生长情况;流式细胞术检测异槲皮苷(0、40、80、160μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞48 h后细胞周期情况;荧光定量PCR及Western blot检测异槲皮苷作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及相关蛋白的表达。结果MTT检测发现异槲皮苷对Hep G2细胞生长有明显抑制作用,且与异槲皮苷的浓度及作用时间呈正相关;不同浓度的异槲皮苷作用Hep G2细胞24、48 h后,倒置显微镜下观察发现随着浓度的增高及作用时间的延长,细胞生存数量逐渐减少,且细胞形态发生明显变化;流式细胞术检测发现随着异槲皮苷浓度的增高,细胞被阻滞在G1期的数量逐渐增加;荧光定量PCR及Western blot结果均表明,与空白组相比,异槲皮苷(80μmol·L^(-1))作用Hep G2细胞后Ras、Raf、MEK、ERK mRNA及其相关蛋白的表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论异槲皮苷有诱导Hep G2细胞凋亡的作用,其作用机制可能与对Raf/MEK/ERK信号通路中相关因子的干预有关。 展开更多
关键词 异槲皮苷 诱导 HEP G2细胞 raf/mek/erk 信号通路 凋亡
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Ras/Raf/MEK/ERK信号通路与白血病 被引量:11
8
作者 刘静 吕娜 +1 位作者 李永辉 于力 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期947-951,共5页
Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对白血病的发生和发展具有不可忽视的作用。在该通路中关键信号元件的抑制剂的应用成为白血病治疗的新策略。近年来,对这些抑制剂的筛选和体内外研究成为治疗领域的热点,国内外已开展的体内外实验及早期临床研究... Ras/Raf/MEK/ERK信号通路对白血病的发生和发展具有不可忽视的作用。在该通路中关键信号元件的抑制剂的应用成为白血病治疗的新策略。近年来,对这些抑制剂的筛选和体内外研究成为治疗领域的热点,国内外已开展的体内外实验及早期临床研究,证实了这些抑制剂在白血病治疗中具有较好的效果及应用前景。本综述重点介绍Ras/Raf/MEK/ERK信号通路在白血病发生发展中的作用及其治疗方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 Ras/raf/mek/erk信号通路 白血病 抑制剂
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Ras/Raf/MEK/ERK信号通路与细胞命运的联系 被引量:12
9
作者 常超 《中国医药生物技术》 CSCD 2008年第4期310-312,共3页
细胞在接受特定的细胞外信号刺激后会产生相应的特异性生理应答。Ras/Raf/MEK/ERK信号级联通路是一条可被广泛激活的有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinase,MAPK)通路,它能将细胞外信号传递入细胞核内,引... 细胞在接受特定的细胞外信号刺激后会产生相应的特异性生理应答。Ras/Raf/MEK/ERK信号级联通路是一条可被广泛激活的有丝分裂原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinase,MAPK)通路,它能将细胞外信号传递入细胞核内,引起细胞内特异蛋白的表达谱变化,从而影响细胞命运。 展开更多
关键词 信号通路 细胞外 erk mek raf RAS 有丝分裂原活化蛋白激酶
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miR-27a-3p调控Ras/Raf/MEK/ERK信号通路抑制肾透明细胞癌细胞增殖的研究 被引量:5
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作者 毛万里 赵英 +3 位作者 王彬 张好春 王斌 胡攀攀 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2017年第4期217-220,共4页
目的探讨miR-27a-3p对肾透明细胞癌细胞Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的作用,观察其对肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法使用脂质体试剂lipofectamine 2000将miR-27a-3p模拟物或miR-NC转染至肾透明细胞癌细胞株Caki-1和A-498;qRT-PCR和Wester... 目的探讨miR-27a-3p对肾透明细胞癌细胞Ras/Raf/MEK/ERK信号通路的作用,观察其对肾透明细胞癌细胞增殖的影响。方法使用脂质体试剂lipofectamine 2000将miR-27a-3p模拟物或miR-NC转染至肾透明细胞癌细胞株Caki-1和A-498;qRT-PCR和Western blot检测miR-27a-3p的靶基因KRAS及下游通路蛋白的表达;流式细胞仪检测细胞周期;噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;集落形成实验检测细胞增殖能力。结果 KRAS基因和下游通路蛋白的表达降低;转染miR-27a-3p后的肾透明细胞癌细胞周期明显被抑制,G0/G1期的细胞比例上升(P<0.01);肾透明细胞癌细胞活力和增殖能力降低(P<0.05)。结论过表达miR-27a-3p在体外可以显著降低肾透明细胞癌细胞Ras/Raf/MEK/ERK蛋白的表达,进而显著抑制其增殖能力。 展开更多
关键词 微小RNA 肾透明细胞癌 Ras/raf/mek/erk通路 增殖
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LncRNA UCA1介导Raf/MEK/ERK信号通路调控乳腺癌细胞生物学作用的机制研究
11
作者 李阳 包刚 《现代检验医学杂志》 CAS 2022年第6期40-45,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞生物学作用的机制研究。方法实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qR... 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞生物学作用的机制研究。方法实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测LncRNA UCA1在正常人乳腺上皮细胞MCF-10A与乳腺癌细胞BT-474,MCF-7,SKBR-3和MDA-MB453中的表达;选择BT-474和MCF-7细胞随机分为三组,分别转染UCA1-siR,NC-siR及Control,再通过qRT-PCR法验证转染后BT-474和MCF-7细胞中LncRNA UCA1表达;通过CCK-8法、Transwell实验和流式细胞仪检测BT-474和MCF-7细胞增殖、侵袭、凋亡能力;利用Western blot检测两种细胞中RAF/MEK/ERK通路相关蛋白的表达。结果与MCF-10A相比,LncRNA UCA1在BT-474,MCF-7,SKBR-3和MDA-MB453细胞中表达水平分别上调了133.8%,169.2%,35.4%和73.8%,差异有统计学意义(F=34.152,P=0.002)。转染处理后,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组Lnc RNA UCA1表达量分别为1.52±0.36,1.49±0.17和0.63±0.11,差异有统计学意义(F=42.628,P<0.001)。MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组Lnc RNA UCA1表达量分别为1.75±0.25,1.70±0.22和0.74±0.08,差异亦有统计学意义(F=39.372,P<0.001)。CKK-8结果表明,与Control组和NC-siR组相比,UCA1-siR组BT-474和MCF-7细胞增殖能力均显著下降,差异有统计学意义(F=57.382~198.251,均P<0.001)。Transwell结果显示,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组穿膜数分别为205±12个,192±16个和114±9个,差异有统计学意义(F=108.250,P<0.001),MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组穿膜数分别为187±9个,175±13个和96±12个,差异亦有统计学意义(F=139.062,P<0.001)。流式结果显示,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组凋亡率分别为4.25%,4.44%和10.28%,差异有统计学意义(F=49.134,P<0.001),MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组凋亡率分别为2.30%,3.05%和8.98%,差异亦有统计学意义(F=62.750,P<0.001)。Western blot结果显示,与Control组和NC-siR组相比,UCA1-siR组BT-474和MCF-7细胞中Raf,p-MEK/MEK及p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达均显著下调,差异有统计学意义(F=42.384~76.092,均P<0.001)。结论LncRNA UCA1在乳腺癌细胞系中呈高表达,沉默LncRNA UCA1基因可以抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭,促进凋亡,其作用机制可能与阻断Raf/MEK/ERK磷酸化通路有关。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞 长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1 生物学作用 raf/mek/erk通路
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基于RGS14/MEK/ERK信号通路研究石菖蒲和 α -细辛醚促进疲劳运动大鼠学习记忆的作用机制
12
作者 廖忠鑫 谢石凤 +1 位作者 朱梅菊 王文莉 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第2期304-310,共7页
研究石菖蒲和α-细辛醚抵抗大鼠疲劳运动后学习记忆下降的RGS14/MEK/ERK信号通路作用机制。80只SD大鼠按完全随机法分为:正常组(normal,Nor)、运动组(exercise,E)、运动+石菖蒲组(exercise+Acorus tatarinowii Schott,EAT)、运动+α-细... 研究石菖蒲和α-细辛醚抵抗大鼠疲劳运动后学习记忆下降的RGS14/MEK/ERK信号通路作用机制。80只SD大鼠按完全随机法分为:正常组(normal,Nor)、运动组(exercise,E)、运动+石菖蒲组(exercise+Acorus tatarinowii Schott,EAT)、运动+α-细辛醚组(exercise+α-asarone,EαA)、运动+石菖蒲+RGS14拮抗剂CCG-63802组(EATC)、运动+α-细辛醚+RGS14拮抗剂CCG-63802(EαAR)、运动+石菖蒲+MEK拮抗剂U0126组(EATU)、运动+α-细辛醚+MEK拮抗剂U0126组(EαAU),每组10只。开展水迷宫实验进行学习记忆检测;利用免疫组化、免疫印迹(Western blot)和荧光实时定量PCR(RT-PCR)等方法检测G蛋白信号调节蛋白14(regulator of G protein signaling 14,RGS14)、Raf-1、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶(phosphorylated mitogen-activated protein kinase kinase,p-MEK)和磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)表达水平。结果表明EAT和EαA组大鼠逃避潜伏期显著低于E组;穿越平台次数显著高于E组(P<0.01)。EATC和EαAR组大鼠逃避潜伏期最短,穿越平台次数最多(P<0.01)。EATU和EαAU大鼠逃避潜伏期最长,穿越平台次数最少(P<0.01)。EAT和EαA组RGS14蛋白和mRNA表达水平显著低于E组,Raf-1、p-MEK和p-ERK1/2表达水平则显著高于E组(P<0.01)。EATC和EαAR组RGS14蛋白和mRNA表达水平最低,显著低于其他各组,Raf-1、p-MEK和p-ERK1/2表达水平最高,显著高于其他各组(P<0.01或P<0.05)。EATU和EαAU组p-MEK、p-ERK1/2表达水平最低,显著低于其他各组(P<0.01)。以上实验结果表明石菖蒲和α-细辛醚能够基于对海马RGS14/MEK/ERK信号通路的调节,从而显著提高疲劳运动大鼠的学习记忆。 展开更多
关键词 石菖蒲 Α-细辛醚 学习记忆 运动性疲劳 RGS14/mek/erk信号通路
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基于RAS/RAF/MEK/ERK信号通路探讨黑逍遥散干预AD模型大鼠氧化应激的作用机制 被引量:5
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作者 王虎平 吕育洁 +3 位作者 胡韵韵 孟志鹏 杨娇 陈怡琴 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期35-42,共8页
目的:探讨黑逍遥散调控RAS蛋白(RAS)/RAF激酶(RAF)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路干预阿尔茨海默病(AD)大鼠氧化应激的作用及其机制。方法:4月龄SPF级Wistar雄性大鼠100只,随机选取10只作为空白组,1... 目的:探讨黑逍遥散调控RAS蛋白(RAS)/RAF激酶(RAF)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路干预阿尔茨海默病(AD)大鼠氧化应激的作用及其机制。方法:4月龄SPF级Wistar雄性大鼠100只,随机选取10只作为空白组,10只作为假手术组(双侧海马注射生理盐水1μL),其余80只双侧海马注射β淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42))溶液1μL复制AD模型。遴选造模合格大鼠50只,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.5 mg·kg^(-1))及黑逍遥散高、中、低剂量组(15.30、7.65、3.82 g·kg^(-1))。连续灌胃42 d,每天1次。灌胃结束后,Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,尼式染色法检测海马CA3区神经元病理结构改变,免疫荧光观察Aβ沉积和tau蛋白磷酸化水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马组织RAS、RAF、磷酸化(p)-RAF、MEK、p-MEK、ERK、p-ERK蛋白表达,生化法检测海马组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠第5天逃避潜伏期显著延长(P<0.01),目标象限游泳距离显著缩短(P<0.01),尼氏小体数量减少,染色不均;Aβ、p-tau荧光强度显著增强(P<0.01),海马组织中RAS、p-RAF、p-MEK、p-ERK蛋白表达显著增高(P<0.01),ROS和MDA含量显著增高(P<0.01),SOD活性显著降低(P<0.01);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组和黑逍遥散高、中、低剂量组大鼠第5天逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),目标象限游泳距离显著增加(P<0.01);尼氏染色显示神经元排列整齐,细胞形态、结构完整,尼氏小体清晰可见,盐酸多奈哌齐组和黑逍遥散高、中、低剂量组Aβ、p-tau荧光强度显著下调(P<0.01),RAS、p-RAF、p-MEK、p-ERK蛋白表达明显增高(P<0.05,P<0.01),ROS、MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性显著增高(P<0.01)。结论:黑逍遥散可能通过RAS/RAF/MEK/ERK信号通路干预氧化应激,降低Aβ和p-tau水平,抑制海马神经元损伤,从而改善学习记忆能力。 展开更多
关键词 黑逍遥散 阿尔茨海默病 RAS蛋白(RAS)/raf激酶(raf)/有丝分裂原活化蛋白激酶激酶(mek)/细胞外信号调节激酶(erk)信号通路 氧化应激
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杞菊地黄丸调控Raf/MEK/ERK通路改善糖尿病视网膜病变小鼠炎症反应实验研究
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作者 赵春林 马广成 +4 位作者 陶思翰 陈卓琳 王明月 方祎鸣 施炜 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第1期152-156,I0029-I0031,共8页
目的基于纤维肉瘤蛋白(rapid accelerated fibrosarcoma,Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)信号通... 目的基于纤维肉瘤蛋白(rapid accelerated fibrosarcoma,Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase,MEK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)信号通路探讨杞菊地黄丸改善糖尿病视网膜病变炎症反应的价值。方法将50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组,模型组,杞菊地黄丸低剂量组,杞菊地黄丸中剂量组以及杞菊地黄丸高剂量组。通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立糖尿病模型。造模12周后,正常组、模型组每天予生理盐水灌胃1次,杞菊地黄丸各剂量组每天予相应杞菊地黄丸药液(11,22以及44 g·kg^(-1))灌胃1次,连续8周。每月测定血糖、饮水量、排尿量、进食量以及体质量变化;影像学检测[眼底血管荧光造影(Fundus angiofluorescence,FFA)、光学相干断层扫描血管成像(Optical coherence tomography angiography,OCTA)以及光学相干断层扫描(Optical coherence tomography,OCT)]评估视网膜病变情况;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色评估视网膜组织病理学变化;免疫荧光(immunofluorescence,IF)检测视网膜组织白介素-6(interleukin-6,IL-6),白介素-17(interleukin-17,IL-17)以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)表达;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中IL-6、IL-17以及TNF-α水平。蛋白免疫印迹法(western blot,WB)检测视网膜组织中Raf、p-Raf、MEK、p-MEK、ERK以及p-ERK表达。结果与正常组相比,模型组小鼠随机血糖高,多饮、多尿、多食以及体质量下降症状明显;视网膜血管密度低,管径增粗,走行迂曲;视网膜各层结构疏松,总体厚度变薄明显;IL-6、IL-17、TNF-α、p-Raf、p-MEK以及p-ERK表达明显增多(P<0.01)。与模型组相比,杞菊地黄丸组小鼠随机血糖高,多饮、多尿、多食以及体质量下降症状明显改善;血管密度低,管径增粗,走行迂曲程度明显减轻;视网膜各层结构疏松,总体厚度变薄显著缓解;IL-6、IL-17、TNF-α、p-Raf、p-MEK以及p-ERK表达明显减少(P<0.01)。结论杞菊地黄丸能有效保护视网膜,延缓DR进展,可能与其调控Raf/MEK/ERK信号通路,发挥抗炎作用相关。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 杞菊地黄丸 炎症 raf/mek/erk通路
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川陈皮素调节RAS/RAF/MEK/ERK信号通路对直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
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作者 李赟 阮英 +2 位作者 孙燕玲 李涛岚 吴喆 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第11期2567-2573,共7页
目的探究川陈皮素调节肾素血管紧张素系统(RAS)/蛋白激酶(RAF)/促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法用质量浓度为5、10、20、40、80μg·mL^(−1)的川陈皮素处... 目的探究川陈皮素调节肾素血管紧张素系统(RAS)/蛋白激酶(RAF)/促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路对直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法用质量浓度为5、10、20、40、80μg·mL^(−1)的川陈皮素处理人直肠癌细胞(SW480),筛选合适的实验浓度;随机将SW480细胞分为对照组,川陈皮素低、中、高质量浓度(10、20、40μg·mL^(−1))组,川陈皮素40μg·mL^(−1)+RAS激活剂(RASALl)组;检测SW480细胞增殖、迁移、侵袭能力;Western blotting检测蛋白表达;裸鼠成瘤实验检测川陈皮素对直肠肿瘤的影响。结果与对照组比较,川陈皮素低、中、高质量浓度组5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(Edu)阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率下降,细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、RAS、RAF、MEK、ERK蛋白表达水平下降(P<0.05);与川陈皮素高质量浓度组相比,RASALl组Edu阳性率、细胞侵袭数、划痕愈合率升高,CDK1、MMP-2、MMP-9、RAS、RAF、MEK、ERK蛋白表达水平升高(P<0.05)。川陈皮素组移植瘤生长速度比对照组缓慢,瘤体积减小,瘤质量下降,RAS、RAF、MEK、ERK蛋白表达下调(P<0.001)。结论川陈皮素抑制RAS/RAF/MEK/ERK信号通路的激活,进而抑制直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 直肠癌 川陈皮素 肾素血管紧张素系统(RAS)/蛋白激酶(raf)/促分裂原活化蛋白激酶激酶(mek)/细胞外信号调节激酶(erk)信号通路 增殖 迁移 侵袭
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电针对骶上脊髓损伤后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓Raf/MEK/ERK信号通路的影响 被引量:4
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作者 许明 艾坤 +6 位作者 邓石峰 刘琼 展立芬 陈晓雯 李亚 匡静之 张泓 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期977-985,共9页
目的:观察电针对骶上脊髓损伤(SSCI)后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)与丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,探讨电针改善SSCI后逼尿肌反射亢... 目的:观察电针对骶上脊髓损伤(SSCI)后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)与丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,探讨电针改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠膀胱功能的可能机制。方法:72只SD大鼠随机分为空白组和假手术组各12只,其余48只大鼠采用脊髓横断法造模,在符合模型标准的大鼠中随机抽取36只分为模型组、电针组和电针+PD98059组各12只。电针组大鼠于“次髎”“中极”“三阴交”“大椎”给予电针治疗,20 min/次,1次/d,连续7 d;电针+PD98059组大鼠在同样电针干预前2 h给予腹腔注射PD98059(5 mg/kg)。采用尿流动力学检测大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力、最大容量及顺应性,HE染色观察大鼠膀胱逼尿肌组织形态,用TUNEL法测定脊髓组织细胞凋亡情况,用Western blot法检测脊髓组织中环磷酸腺苷直接激活交换蛋白2(Epac2)、小分子G蛋白Rap、磷酸化(p)-Raf、p-MEK、p-ERK 1/2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.01),而膀胱最大容量减少(P<0.01),膀胱顺应性降低(P<0.01),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.01),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均降低(P<0.05),膀胱最大容量增加(P<0.05),膀胱顺应性升高(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率降低(P<0.05),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。与电针组比较,电针+PD98059组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.05),膀胱最大容量减少(P<0.05),膀胱顺应性降低(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.05),脊髓组织p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。HE染色结果显示,空白组和假手术组大鼠膀胱逼尿肌组织细胞排列紧密整齐,细胞形态完整;模型组大鼠膀胱逼尿肌移行上皮细胞排列紊乱,固有膜被破坏,伴单核细胞浸润;与模型组比较,电针组膀胱逼尿肌组织弹性纤维增生程度减轻,肌纤维排列层次较清晰,可观察到更多形态饱满的完整细胞;与电针组比较,电针+PD98059组逼尿肌组织肌纤维排列层次欠清晰,细胞间隙大。结论:电针可改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠的膀胱功能,其机制可能与电针上调脊髓Epac2、Rap,启动Raf-MEK-ERK级联反应,减少细胞凋亡,改善膀胱神经支配有关。 展开更多
关键词 电针 骶上脊髓损伤 神经源性膀胱 raf/mek/erk信号通路 尿流动力学
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清肝九味散对肝纤维化大鼠Raf/MEK/ERK信号通路的影响 被引量:4
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作者 戈宏焱 王安庆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期848-854,共7页
目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝... 目的观察清肝九味散对肝纤维化大鼠的干预作用及其潜机制。方法采用随机数字表法将50只SD大鼠分为正常组、模型组、阳性对照组、蒙药低剂量组及蒙药高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组大鼠均通过腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))建立肝纤维化模型。造模成功后,正常组大鼠给予蒸馏水灌胃,阳性对照组灌服水飞蓟素(SIL)10 mg/kg;蒙药低、高剂量组每日分别灌服清肝九味散水煎液0.525、4.725 g/kg。各组均每天灌胃1次,连续8周。采用全自动生化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性水平;HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、Ⅰ型胶原α(COL1α)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)mRNA水平;蛋白免疫印迹(Western Blot)检测肝组织MMP2、TIMP1蛋白表达及Raf蛋白激酶1(Raf-1)、丝裂原活化细胞外信号调节激酶(MEK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)磷酸化水平的变化。结果与正常组比较,模型组大鼠明显消瘦、暴躁,肝脏经HE染色后可见典型纤维化病理表现;阳性对照组和蒙药低、高剂量组大鼠一般状态有明显改善,肝脏病理损伤减轻,血清ALT、AST水平较模型组显著下降(P<0.01);RT-PCR结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、COL1α、TIMP1 mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、蒙药低、高剂量组MMP2 mRNA表达明显升高,TIMP1、COL1αmRNA表达明显降低(P<0.01)。免疫组化结果显示:与正常组比较,模型组α-SMA蛋白阳性面积显著升高(P<0.01);与模型组比较,蒙药低、高剂量组α-SMA蛋白表达均显著降低(P<0.01)。Western Blot结果显示:与正常组比较,模型组MMP2、TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达均显著升高(P<0.05):与模型组比较,阳性对照组及蒙药高剂量组MMP2蛋白表达明显升高,阳性对照组及蒙药各剂量组TIMP1、p-Raf、p-MEK、p-ERK蛋白表达明显下降(P<0.05,P<0.01),且蒙药高剂量组较蒙药低剂量组下降更明显(P<0.01)。结论蒙药清肝九味散对CCl_(4)诱导的肝纤维化大鼠一般状态有改善作用,能减轻大鼠肝脏的纤维增生程度,并通过调节MMPs/TIMPs体系促进细胞外基质(ECM)降解,其抗肝纤维化机制可能与抑制Raf/MEK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 清肝九味散 肝纤维化 raf/mek/erk信号通路 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂
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基于Ras/Raf/Mek/Erk信号通路探讨化湿定痛汤减轻膝骨关节炎大鼠滑膜炎症的机制 被引量:8
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作者 葛海雅 李楠 +3 位作者 张燕 耿秋东 黄泽灵 赵常云蕾 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期4428-4432,共5页
目的:基于Ras/Raf/Mek/Erk信号通路探讨化湿定痛汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的可能作用机制。方法:采用膝关节腔注射Ⅱ型胶原酶建立KOA模型,将38只大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组及Mek抑制剂组。空白组和模型组给予0.9... 目的:基于Ras/Raf/Mek/Erk信号通路探讨化湿定痛汤对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的可能作用机制。方法:采用膝关节腔注射Ⅱ型胶原酶建立KOA模型,将38只大鼠随机分为空白组、模型组、化湿定痛汤组及Mek抑制剂组。空白组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,化湿定痛汤组给予化湿定痛汤4.68 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,Mek抑制剂组给予腹腔注射PD98059 1 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续28 d。观察大鼠膝关节直径变化,MRI观察大鼠膝关节影像学变化,HE染色观察大鼠关节软骨及滑膜病理改变,Western Blot检测大鼠滑膜中Ras、Raf、p-Mek、p-Erk蛋白表达,RT-qPCR检测大鼠滑膜中Ras、Raf、Mek、Erk的mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠膝关节核磁共振评分(MOAKS)显著升高(P<0.01)。与模型组比较,化湿定痛汤组及Mek抑制剂组大鼠第35天膝关节直径显著减小(P<0.01,P<0.05),滑膜组织炎症浸润减轻,Ras、Mek、Erk mRNA和Ras、Raf、p-Mek、p-Erk蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:化湿定痛汤可能通过调节大鼠膝关节滑膜中Ras/Raf/Mek/Erk信号通路改善炎症损伤。 展开更多
关键词 化湿定痛汤 膝骨关节炎 滑膜 Ras/raf/mek/erk信号通路 炎症
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乳腺癌细胞过表达HER2/neu时经PI3K和Ras/Raf/MEK/ERK信号通路下调野生型p53蛋白含量 被引量:8
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作者 郑莉 任加强 +2 位作者 张琳 陈琦 朱虹光 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期358-362,共5页
目的 研究HER2/neu基因过表达对乳腺癌细胞野生型p53蛋白含量的影响并探讨其分子机制。方法 脂质体介导的HER2/neu基因转染MCF7细胞,G418筛选阳性克隆。Western印迹法鉴定HER2/neu蛋白表达,并同时检测p53及信号转导分子Akt,p-Akt,p-Raf,... 目的 研究HER2/neu基因过表达对乳腺癌细胞野生型p53蛋白含量的影响并探讨其分子机制。方法 脂质体介导的HER2/neu基因转染MCF7细胞,G418筛选阳性克隆。Western印迹法鉴定HER2/neu蛋白表达,并同时检测p53及信号转导分子Akt,p-Akt,p-Raf,p-MEK,p-ERK蛋白含量,以及P13K信号通路抑制剂LY294002和MEK抑制剂U0126处理对p53蛋白含量的影响。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测p53 mRNA水平。结果 成功建立稳定过表达HER2/neu的MCF7细胞(MCF7-neu3),其HER2/neu蛋白表达量是对照组MCF7细胞的13倍。MCF7-neu3中p-Akt,p-Raf,p-MEK,P-ERK蛋白含量分别较MCF7细胞升高了2.5倍、2倍、1.6倍和1.6倍(P<0.01),p53蛋白含量仅为对照组细胞的40%(P<0.01),但p53mRNA表达无明显差异。在经PI3K信号通路抑制剂LY294002及MEK抑制剂U0126处理24 h后,MCF7-neu3细胞p53蛋白含量分别上升了1.7和1.5倍(P<0.01),在LY294002和U0126处理48 h后,p53蛋白含量分别升高了4.7倍和5.3倍(P<0.01)。LY294002和U0126处理对MDA-MB-453细胞突变型p53蛋白含量不产生影响。结论 乳腺癌细胞中HER2/neu基因的过表达能够通过激活P13K和Ras/Raf/MEK/ERK通路导致野生型p53蛋白含量减少,可能是HER2/neu过表达乳腺癌患者预后不良及对治疗产生抗性的分子机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 HER2/NEU 信号通路下调 p53 基因过表达 分子机制 信号转导分子 C-ERBB-2 Ras/raf/mek/erk
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Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血早期作用的研究 被引量:4
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作者 王文娟 武晓宁 +2 位作者 贾玉洁 谷成 闵连秋 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1122-1124,1127,共4页
目的探讨高血糖加重脑梗死机制与Ras/Raf/丝裂原激活蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号传导通路的关系。方法通过大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)及大脑中动脉闭塞(MCAO)术造成大鼠糖尿病脑缺血模型。将大鼠分成假手术组、健康... 目的探讨高血糖加重脑梗死机制与Ras/Raf/丝裂原激活蛋白激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号传导通路的关系。方法通过大鼠尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)及大脑中动脉闭塞(MCAO)术造成大鼠糖尿病脑缺血模型。将大鼠分成假手术组、健康大鼠脑缺血组、2型糖尿病(T2DM)大鼠脑缺血组、PD98059组,每组12只。PD98059组于MCAO术前30min尾静脉注射PD98059(3mL/kg)。MCAO术后2h给各组大鼠做神经学评分,取脑组织标本。应用免疫组织化学、蛋白质印迹法(Western blotting)测定大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白的表达,应用TUNEL检测神经细胞凋亡情况。结果除假手术组外,其他3组均有不同程度的神经功能缺损、神经细胞凋亡,且差异有统计学意义(P<0.01)。p-ERK1/2蛋白在假手术组偶见表达,在健康大鼠脑缺血组、T2DM大鼠脑缺血组表达明显升高(P<0.01),且T2DM大鼠脑缺血组升高更加明显(P<0.01)。PD98059组p-ERK1/2蛋白表达较少。免疫组织化学和Western blotting结果基本一致。结论 Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路在局灶性脑缺血早期能促进神经细胞的凋亡,糖尿病加重脑梗死与Ras/Raf/MEK/ERK信号传导通路有关。 展开更多
关键词 脑缺血 糖尿病 2型 大鼠 Ras raf mek erk通路 PD98059
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