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TGF-β_1诱导Ⅱ型肺泡上皮-间充质转化及ERK1/2信号系统的变化 被引量：4
1
作者 孙志宏 许文兵 +2 位作者 朱元珏 张宏 顾培 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2012年第1期84-88,共5页
目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对Ⅱ型肺泡上皮-间充质转化的作用及与胞外调节激酶1/2(ERK1/2)信号系统的关系。方法体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞,分为阴性对照组和TGF-β1处理组(0.05、0.5、5、10μg/L,作用时间48 h)... 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对Ⅱ型肺泡上皮-间充质转化的作用及与胞外调节激酶1/2(ERK1/2)信号系统的关系。方法体外培养人Ⅱ型肺泡上皮细胞来源的A549细胞,分为阴性对照组和TGF-β1处理组(0.05、0.5、5、10μg/L,作用时间48 h)。免疫荧光及Western blot方法检测各组细胞E钙粘素(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vim)和纤维连接蛋白(Fn)的表达。在TGF-β1作用不同时间,采用Western blot及RT-PCR方法检测各组细胞α-SMA、E-cad、Vim、Fn、ERK1/2和p-ERK1/2的表达。结果与阴性对照组比较,TGF-β1组(5μg/L)α-SMA、Vim、Fn蛋白表达显著升高,而E-cad表达显著降低(P<0.05)。作用6 h后,TGF-β1组出现α-SMA mRNA表达显著升高,E-cad显著下降(P<0.05)。作用48 h后,TGF-β1组出现Vim、Fn蛋白表达显著升高,E-cad显著下降(P<0.01)。作用30 min后,TGF-β1组ERK/2磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结论 TGF-β1可在体外以浓度和时间依赖方式的诱导A549细胞发生上皮-间充质转化,其机制可能与上调ERK1/2信号转导通路有关。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 上皮-间充质细胞转化 胞外调节激酶1/2
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干扰素γ抑制转化生长因子β，诱导的A549细胞上皮-间充质转化及对ERK1／2和STAT3的作用 被引量：1
2
作者 孙志宏 许文兵 +2 位作者 朱元珏 张宏 顾培 《国际呼吸杂志》 2012年第2期81-85,共5页
目的探讨干扰素γ（IFN-γ）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的A549细胞上皮-间充质转化（EMT）过程的作用及对胞外调节激酶1／2（ERK1／2）和信号转导和转录激活因子3（STAT3）的作用。方法①体外培养A549细胞，分为TGF-β1，处理组... 目的探讨干扰素γ（IFN-γ）对转化生长因子β1（TGF-β1）诱导的A549细胞上皮-间充质转化（EMT）过程的作用及对胞外调节激酶1／2（ERK1／2）和信号转导和转录激活因子3（STAT3）的作用。方法①体外培养A549细胞，分为TGF-β1，处理组（5μg／L）、IFN-γ处理组（200μg／L）和TGF-1β（5μg／L）＋IFN-γ（10、100、200μg／L）联合处理组。处理时间48h，免疫荧光及Western blot方法检测各组细胞E-钙黏素（E-eadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（vimentin）和纤维连接蛋白（fibronectin）的蛋白表达。②处理不同时间（5、30和60min），Western blot方法检测各组细胞STAT3、p—STAT3和ERK1／2、p-ERK1／2的蛋白表达。结果①与TGF-t31单独处理组相比，IFN-7（200μg／L）＋TGF-1β联合处理组vimentin和fibronectin的蛋白表达减低（P〈0．05），而α-SMA和E—cadherin蛋白表达无显著变化。②作用后5、30和60min，IFN-γ（200μg／L）＋TGF-1β联合处理组STAT3磷酸化水平显著升高（P〈0．01）。作用后5、60min，IFN-γ（200μg／L）＋TGF-1β联合处理组ERK1／2磷酸化水平升高（P〈0．05）。结论IFN-γ可在体外抑制TGF-1β。诱导的A549细胞发生EMT，其机制可能与上调ERK1／2和STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 干扰素Γ 上皮-间充质转化 胞外调节激酶1/2 信号转导和转录激活因子3
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