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蒙药乌力地格调控PI3K/AKT/mTOR通路对肝门部胆管癌细胞增殖与迁移的影响
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作者 戚晓辉 贾剑超 +5 位作者 王小东 王鹏 胡向贇 魏一弘 张磊 王石 《中国实验诊断学》 2025年第3期336-344,共9页
目的探究蒙药乌力地格调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对肝门部胆管癌细胞增殖与迁移的影响。方法体外培养肝门部胆管癌QBC939细胞,分为对照组(细胞对照组为使用完全培养基作用于细胞,溶剂对照组为含0.1%DMSO的培养基作用于细胞)和不同浓度(1... 目的探究蒙药乌力地格调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对肝门部胆管癌细胞增殖与迁移的影响。方法体外培养肝门部胆管癌QBC939细胞,分为对照组(细胞对照组为使用完全培养基作用于细胞,溶剂对照组为含0.1%DMSO的培养基作用于细胞)和不同浓度(10、20、40、80μmol/L)蒙药乌力地格组。采用CCK-8法及平板克隆形成实验检测蒙药乌力地格对QBC939细胞的活性与增殖的影响,划痕实验和Transwell实验检测蒙药乌力地格对QBC939细胞迁移和侵袭能力的影响,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测蒙药乌力地格对QBC939细胞凋亡的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹实验(Western Blot)检测蒙药乌力地格对细胞PI3K、AKT、mTOR的mRNA相对表达水平及相关蛋白表达情况。结果与对照组相比,CCK-8法结果显示:蒙药乌力地格可降低QBC939细胞的活性及增殖能力,呈浓度和时间依赖性(P<0.05);划痕及Transwell实验结果显示:蒙药乌力地格使QBC939细胞的迁移及侵袭能力降低,抑制能力呈浓度依赖性(P<0.05);Annexin V-FITC/PI流式细胞术结果显示:蒙药乌力地格可促进QBC939细胞的凋亡,呈浓度依赖性(P<0.05);qRT-PCR及Western Blot实验结果显示:蒙药乌力地格可下调细胞内PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达,以及可降低细胞内p-PI3K、p-AKT、p-mTOR的表达,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论蒙药乌力地格对肝门部胆管癌QBC939细胞的活性、增殖、迁移及侵袭具有抑制作用且能够促进其凋亡,机制可能是通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路来抑制QBC939细胞的增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 乌力地格 肝门部胆管癌 PI3K/AKT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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蒙药乌力地格调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制肝门部胆管癌裸鼠移植瘤的机制研究
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作者 胡向贇 贾剑超 +1 位作者 戚晓辉 王石 《中国实验诊断学》 2025年第2期189-196,共8页
目的探索蒙药乌力地格对肝门部胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠的作用效果并同时研究其作用效果与PI3K/AKT/mTOR信号通路的关系。方法用QBC939细胞在裸鼠皮下造模成功后,随机将荷瘤裸鼠分为吉西他滨组、生理盐水空白对照组、二甲基亚砜(Dime... 目的探索蒙药乌力地格对肝门部胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠的作用效果并同时研究其作用效果与PI3K/AKT/mTOR信号通路的关系。方法用QBC939细胞在裸鼠皮下造模成功后,随机将荷瘤裸鼠分为吉西他滨组、生理盐水空白对照组、二甲基亚砜(Dimethy sulfoxide,DMSO)溶剂对照组、乌力地格组。按照分组情况给药,并且记录各组移植瘤体积及荷瘤裸鼠重量变化。连续给药15天,眼球采血后处死荷瘤裸鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤标记物CEA、CA19-9的含量。取部分荷瘤裸鼠肿瘤组织进行HE染色及免疫组织化学法观察肿瘤细胞的染色情况、结构形态、坏死程度,以及PI3K、AKT、mTOR蛋白的表达情况;其余肿瘤组织通过qRT-PCR测定PI3K、AKT、mTOR的RNA相对表达量。结果(1)通过测量各个组移植瘤体积,发现与生理盐水组和DMSO组相比,乌力地格组肿瘤体积较小,差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比,肿瘤体积差异无统计学意义(P>0.05)。(2)通过比较各个组荷瘤裸鼠体重,发现与吉西他滨组相比,乌力地格组体重较大,差异有统计学意义(P<0.05);与生理盐水组相比,乌力地格组体重较小,差异有统计学意义(P<0.05);而乌力地格组与DMSO组相比,体重差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与生理盐水组及DMSO组相比,乌力地格组的血清CEA、CA19-9含量均较低,差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比,CEA、CA19-9含量差异无统计学意义(P>0.05)。(4)HE染色验证造模成功后用免疫组织化学染色法检测,发现与生理盐水组、DMSO组相比,乌力地格组PI3K、AKT、mTOR蛋白均表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);乌力地格组与吉西他滨组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)qRT-PCR检测显示,与生理盐水组和DMSO组相比,乌力地格组中PI3K、AKT、mTOR的RNA相对表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05);而乌力地格组与吉西他滨组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乌力地格对肝门部胆管癌细胞株QBC939荷瘤裸鼠生长具有抑制作用且其抑制作用可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 肝门部胆管癌 PI3K/AKT/MTOR QBC939
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