文摘目的探究长链非编码核糖核酸(LncRNA)LINC01503调控细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路磷酸化促进食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)放疗抵抗的作用机制。方法收集2014年6月~2017年12月内蒙古自治区人民医院ESCC患者癌组织及癌旁组织标本79例,采用实时荧光定量PCR检测LINC01503在ESCC组织中的表达水平,分析LINC01503与ESCC患者临床病理参数、放疗敏感性及预后的关系。构建ESCC放疗抵抗细胞株KYSE150R,检测KYSE150R细胞中LINC01503的表达;转染siRNA下调KYSE150R中LINC01503的表达。CCK8实验检测各组细胞放疗敏感性;流式细胞试验检测各组细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测各组细胞中ERK1/2,PERK1/2,细胞周期蛋白D1(cyclin D1),细胞周期素依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4),凋亡蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与癌旁组织相比,LINC01503在ESCC组织中表达上调(4.15±1.21 vs 0.96±0.43),差异有统计学意义(t=22.083,P<0.001)。LINC01503高表达与患者T分期、淋巴结转移、TNM分期、放疗抵抗有关,差异均有统计学意义(t=2.322~2.939,均P<0.05)。LINC01503预测预后的曲线下面积为0.780(95%CI:0.676~0.884),灵敏度和特异度分别为81.58%,67.05%。LINC01503高表达组5年生存率低于LINC01503低表达组[41.86%(18/43)vs 63.89%(23/36)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.430,P=0.035)。与si-NC组相比,si-LINC01503组KYSE150R细胞的放疗敏感性增加,差异均有统计学意义(t=17.391~33.692,均P<0.001);si-LINC01503组KYSE150R细胞周期阻滞在G0/G1期(61.47%±3.60%vs 52.15%±2.11%),细胞凋亡增加(31.95%±2.40%vs 3.68%±0.47%),差异均有统计学意义(t=4.602,20.022;P=0.004,0.002);PERK1/2(0.24±0.03 vs 1.25±0.09),cyclin D1(0.18±0.06 vs 1.40±0.14),CDK4(0.87±0.09 vs 1.37±0.16)和Bcl-2(0.16±0.03 vs 0.85±0.07)蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加(0.69±0.06 vs 0.22±0.05),差异均有统计学意义(t=4.718~18.440,均P<0.05)。结论LINC01503通过促进ERK磷酸化调控细胞周期和凋亡促进ESCC细胞放疗抵抗,是逆转ESCC放疗抵抗的潜在分子靶点。
