合成生物学在多糖结合疫苗研发中的应用 被引量：3

1

作者 叶精勤 黄文华 +2 位作者 潘超 朱力 王恒樑 《合成生物学》 CSCD 北大核心 2024年第2期338-352,共15页

由于合成生物学的快速发展,目前已经实现了人工设计DNA和蛋白质的合成,对具有重要生物学功能、结构也更为复杂的糖类物质进行精准设计合成,也将是合成生物学未来发展的重要方向。近年来,一种基于细菌寡糖转移酶体系的蛋白多糖偶联技术... 由于合成生物学的快速发展,目前已经实现了人工设计DNA和蛋白质的合成,对具有重要生物学功能、结构也更为复杂的糖类物质进行精准设计合成,也将是合成生物学未来发展的重要方向。近年来,一种基于细菌寡糖转移酶体系的蛋白多糖偶联技术发展迅速,已被广泛应用于病原细菌多糖结合疫苗的生物合成制备。本文综述了该技术体系中的寡糖转移酶元件、载体蛋白元件、异源多糖抗原合成线路以及工程菌株改造等核心关键模块的最新研究进展。使用生物活体系统,发酵生产多糖结合疫苗,具有产物均一性好、步骤简便、绿色环保等优势,是一种亟待发展的新兴技术,同时也存在一些技术细节需要完善。未来,寡糖转移酶的定向进化、纳米颗粒型蛋白载体的应用、多糖合成基因的组合重排、工程菌株的代谢途径优化,将有望进一步促进多糖结合疫苗的生物合成研究。 展开更多

关键词 糖合成生物学 多糖结合疫苗 蛋白多糖偶联技术 寡糖转移酶

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CRISPR/Cas分子诊断技术在结核分枝杆菌耐药性检测中的研究进展

2

作者 王苑柠 杜宗敏 《中国防痨杂志》 北大核心 2025年第5期666-672,共7页

结核病是全球公共卫生面临的一项严峻挑战。我国是结核病高负担国家,也是耐多药和利福平耐药结核病高负担国家。发展快速、灵敏的结核分枝杆菌耐药性检测方法对结核病的控制和治疗具有重要意义。成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered... 结核病是全球公共卫生面临的一项严峻挑战。我国是结核病高负担国家,也是耐多药和利福平耐药结核病高负担国家。发展快速、灵敏的结核分枝杆菌耐药性检测方法对结核病的控制和治疗具有重要意义。成簇的规律间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)作为细菌适应性免疫的组成部分,能够高效、特异性地识别和切割外源核酸靶标;同时某些CRISPR相关蛋白(Cas)具有反式切割活性,这为建立CRISPR/Cas结核病耐药性诊断技术开辟了新的研究领域。本文对CRISPR/Cas技术检测结核分枝杆菌及其耐药性的最新研究动态进行综述,并探讨该领域的未来发展趋势。 展开更多

关键词 分枝杆菌 结核 结核 抗多种药物性 诊断技术 分子生物学检测 综述

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四氟甲醚菊酯对白纹伊蚊的空间驱避效果研究

3

作者 杜雨彤 蔡京虹 +6 位作者 周宁馨 刘庆 谢静文 王明 尹紫鸽 张恒端 赵彤言 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2024年第3期163-167,共5页

目的观察白纹伊蚊在三节管中对避蚊胺和四氟甲醚菊酯的反应,评价四氟甲醚菊酯的空间驱避效果。方法参考HITSS装置结构和原理仿制三节管,观察三节管内白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯和避蚊胺两组物质的行为反应,评价四氟甲醚菊酯对白纹伊蚊的空... 目的观察白纹伊蚊在三节管中对避蚊胺和四氟甲醚菊酯的反应,评价四氟甲醚菊酯的空间驱避效果。方法参考HITSS装置结构和原理仿制三节管,观察三节管内白纹伊蚊对四氟甲醚菊酯和避蚊胺两组物质的行为反应,评价四氟甲醚菊酯对白纹伊蚊的空间驱避效果。结果在三节管评价装置内,白纹伊蚊在空白条件下无驱避反应(P>0.05),1.0%~50.0%避蚊胺对白纹伊蚊具有驱避效果(P<0.05),0.0035%~0.0050%四氟甲醚菊酯具有驱避效果(P<0.05),0.0050%四氟甲醚菊酯与20%避蚊胺的驱避效果相当,无统计学差异(P>0.999)。结论0.0035%~0.0050%四氟甲醚菊酯具有良好的白纹伊蚊空间驱避效果。 展开更多

关键词 白纹伊蚊 空间驱避 四氟甲醚菊酯 避蚊胺

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血流感染样本宏基因组检测平台评估与流程优化研究 被引量：1

4

作者 彭鑫 范航 +7 位作者 崔梦楠 林磊 裴广倩 王云飞 左秀娟 方小凤 郭彦 崔玉军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期928-934,共7页

目的比较MGISEQ-2000、Illumina NextSeq 2000和Ion GeneStudio S5 Plus三种宏基因组测序平台之间的性能差异。同时,针对血流感染样本微生物浓度低的问题,对痕量样本测序流程进行优化。方法采用上述3种测序平台对DNA标准品和模拟样本进... 目的比较MGISEQ-2000、Illumina NextSeq 2000和Ion GeneStudio S5 Plus三种宏基因组测序平台之间的性能差异。同时,针对血流感染样本微生物浓度低的问题,对痕量样本测序流程进行优化。方法采用上述3种测序平台对DNA标准品和模拟样本进行高通量测序,通过分析原始数据质量、对微生物的检出能力等,比较3种平台之间存在的系统差异。同时通过在建库过程中加入外源核酸的方法,优化痕量样本的测序准确性及可靠性。结果在单批次数据量产出、碱基质量方面,MGISEQ-2000高于其它两种平台。在重复reads比例方面,Illumina NextSeq 2000最低,Ion GeneStudio S5 Plus最高,各平台间均有统计学差异(P<0.001)。在测序均一性方面,MGISEQ-2000高于Illumina NextSeq 2000,两者均高于Ion GeneStudio S5 Plus。在微生物检出能力方面,MGISEQ-2000表现出显著优势(P<0.001)。随着菌液浓度降低,差异逐渐减小。在单批次运行时间方面,Ion GeneStudio S5 Plus最短。此外,针对DNA含量≤0.05 ng的痕量样本,实验组(加入外源核酸)比对到的reads数高于对照组(不加外源核酸),倍数为11.09±8.03。结论不同测序平台各有优缺点,实验者可根据不同需求选择合适的测序平台。同时,加入外源核酸,可有效提高微生物的检出效率,为后续结果评估和临床诊断提供更佳支持。 展开更多

关键词 MGISEQ-2000 Illumina NextSeq 2000 Ion GeneStudio S5 Plus mNGS 痕量

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甘肃武威地区蜱类携带潜在新病毒的宏转录组研究

5

作者 杨佶虎 黄琳 +3 位作者 刘顺帅 黄爱霞 刘义文 江佳富 《寄生虫与医学昆虫学报》 2024年第4期216-223,共8页

目的 监测甘肃省蜱类自然携带病毒状况,明确丝绸之路经济带蜱媒病毒病传播风险。方法 选择甘肃省黄土高原、青藏高原和蒙新高原交汇的武威地区为样点,采集游离及寄生蜱样本,经形态鉴定后利用宏转录组测序技术获得病毒组数据,进而组装病... 目的 监测甘肃省蜱类自然携带病毒状况,明确丝绸之路经济带蜱媒病毒病传播风险。方法 选择甘肃省黄土高原、青藏高原和蒙新高原交汇的武威地区为样点,采集游离及寄生蜱样本,经形态鉴定后利用宏转录组测序技术获得病毒组数据,进而组装病毒序列并进行注释。依据序列系统发育分析探索蜱类自然携带病毒的多样性,发现潜在新病毒。结果 共获得武威地区蜱类3属5种98只,包括森林革蜱Dermacentor silvarum、亚洲璃眼蜱Hyalomma asiaticus、草原革蜱D.nuttalli、盾糙璃眼蜱Hy.scupense和柯洛宁血蜱Haemaphysalis kolonini。从中获得丰度最高的为楚病毒科(Chuviridae)的芈病毒属Mivirus;内罗病毒科(Nairoviridae)正内罗病毒属Orthonairovirus和痘病毒科(Poxviridae)正痘病毒属Orthopoxvirus次之。组装后序列比对为博乐蜱病毒1(Bole tick virus 1)、博乐蜱病毒3(Bole tick virus 3)、昌平蜱病毒1(Changping tick virus 1)、泰顺蜱病毒(Taishun tick virus)序列。同时,发现一种新的黄病毒科(Flaviviridae)病毒成员,与最接近的未定种黄病毒相似度为96.92%,暂命名为“类博乐蜱病毒4(Bole-like tick virus 4)”,有待进一步分离和鉴定。结论 甘肃省蜱类携带多种蜱媒病毒,可能存在新病毒,应持续、有效地开展监测和预防工作。 展开更多

关键词 宏转录组 蜱媒病毒 甘肃 蜱 类博乐蜱病毒

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巴贝虫生活史研究进展

6

作者 罗智 江佳富 +1 位作者 孙毅 杜春红 《寄生虫与医学昆虫学报》 2024年第4期251-256,共6页

巴贝虫是以红细胞为目标的细胞内寄生原虫,隶属于梨形虫科(Piroplasmidae)巴贝虫属Babesia,通过蜱叮咬、输血、器官移植、母体胎盘等途径传播,是一种重要的人畜共患寄生虫病。巴贝虫病的临床表现差异较大,从无症状到致命性器官衰竭,复... 巴贝虫是以红细胞为目标的细胞内寄生原虫,隶属于梨形虫科(Piroplasmidae)巴贝虫属Babesia,通过蜱叮咬、输血、器官移植、母体胎盘等途径传播,是一种重要的人畜共患寄生虫病。巴贝虫病的临床表现差异较大,从无症状到致命性器官衰竭,复杂多样。随着全球气温升高、医学媒介生物不断扩展分布范围,虫媒疾病越来越受到关注。近年,巴贝虫病的研究取得了长足进展。本文对其在宿主和媒介寄生过程中生活史各阶段的致病机制、在蜱体内的发育机制进行综述。 展开更多

关键词 巴贝虫 蜱 致病机制

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发展mRNA技术,推动生物医药高质量发展

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作者 秦成峰 王奇慧 高福 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第33期4783-4786,共4页

历经半个多世纪的发展,信使核糖核酸(mRNA)从一个朴素的科学概念,一跃成为家喻户晓的疫苗产品.新冠mRNA疫苗在世界范围内广泛接种,挽救了无数人的生命.目前,mRNA技术已广泛应用于疫苗、抗体与蛋白替代疗法、基因编辑等生物医药领域.全... 历经半个多世纪的发展,信使核糖核酸(mRNA)从一个朴素的科学概念,一跃成为家喻户晓的疫苗产品.新冠mRNA疫苗在世界范围内广泛接种,挽救了无数人的生命.目前,mRNA技术已广泛应用于疫苗、抗体与蛋白替代疗法、基因编辑等生物医药领域.全球多国正进行多项相关临床试验,几乎涵盖了肿瘤、传染病、血液系统疾病、罕见病等各个领域. 展开更多

关键词 罕见病 血液系统疾病 临床试验 人的生命 生物医药 基因编辑 替代疗法 传染病

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HIV-1耐药检测技术进展

8

作者 沈奎灵 闫会敏 +1 位作者 李林 李韩平 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第10期1353-1359,共7页

艾滋病病毒已在全球肆虐40多年,对全球公共卫生造成极大压力,时至今日艾滋病仍然是全球公共卫生面临的一道医学难题。高效联合抗病毒疗法(HAART)是艾滋病治疗的首选方案,已为众多艾滋病患者/人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者带来巨大福祉,... 艾滋病病毒已在全球肆虐40多年,对全球公共卫生造成极大压力,时至今日艾滋病仍然是全球公共卫生面临的一道医学难题。高效联合抗病毒疗法(HAART)是艾滋病治疗的首选方案,已为众多艾滋病患者/人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者带来巨大福祉,并为减缓艾滋病病毒的进一步传播发挥了很大作用。但随着这一方案的全面推广与应用,HIV-1耐药性也日益突出。HIV-1耐药性是影响临床抗病毒治疗效果的主要原因之一,因此进行HIV-1耐药性检测,对抗病毒药物的优化与选择、降低传播性耐药发生与防控十分重要。HIV-1耐药检测方法众多,因应用场景不同而方法各异,本文汇总国内外众多文献资料,就HIV-1耐药检测方法进行综述。 展开更多

关键词 艾滋病 HIV-1耐药检测 基因型耐药检测 表型耐药检测

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传染病多渠道监测预警数据与模型技术研究进展

9

作者 郭玉清 连怡遥 +6 位作者 吴彦霖 李开明 郑亚明 彭志行 方立群 李中杰 王丽萍 《疾病监测》 北大核心 2025年第1期30-37,共8页

随着信息技术和数据科学的快速进步,传染病监测预警技术得到了前所未有的发展和应用机遇。这些技术应用于及时发现疫情、实时跟踪传播动态、预测发展趋势等方面,在有效应对和快速控制新发传染病暴发和流行过程中发挥了至关重要的作用,... 随着信息技术和数据科学的快速进步,传染病监测预警技术得到了前所未有的发展和应用机遇。这些技术应用于及时发现疫情、实时跟踪传播动态、预测发展趋势等方面,在有效应对和快速控制新发传染病暴发和流行过程中发挥了至关重要的作用,为疫情防控提供了强有力的数据支持和决策依据。本研究系统梳理了多渠道数据源在国内外传染病防控中的应用,并深入探讨了主要预警模型的典型应用场景和优缺点,旨在为传染病监测预警工作提供技术和模型支撑,推动传染病防控工作更深入地向信息化、智能化和精准化的方向发展。 展开更多

关键词 传染病 多渠道监测 数据获取 预警模型

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新型冠状病毒感染后嗅觉障碍的分子机制:现有研究的新启示

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作者 周佳 秦成峰 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 北大核心 2025年第2期107-112,共6页

嗅觉障碍是新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染的常见症状之一。然而,新冠病毒感染导致嗅觉障碍的致病机制尚不明确。已有的研究提示,该临床表现可能是多种因素共同作用的结果,包括支持细胞死亡、嗅觉感受神经元功能受损、免疫及炎性反应... 嗅觉障碍是新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染的常见症状之一。然而,新冠病毒感染导致嗅觉障碍的致病机制尚不明确。已有的研究提示,该临床表现可能是多种因素共同作用的结果,包括支持细胞死亡、嗅觉感受神经元功能受损、免疫及炎性反应、嗅觉通路相关基因表达异常等。本文结合现有文献,重点比较了不同研究对象和感染模型中新冠病毒感染相关嗅觉障碍研究的结果差异,强调了嗅觉黏膜免疫在嗅觉功能损伤中的作用,并探讨了感染相关的传导性嗅觉障碍的机制。通过对新冠病毒感染相关嗅觉障碍的潜在分子机制的系统阐述,以期为深入认识新冠病毒的致病机制以及开发有效的临床治疗手段提供思路。 展开更多

关键词 冠状病毒感染 嗅觉功能 致病机制 嗅觉障碍 黏膜免疫 感染模型 传导性 细胞死亡

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qPCR检测白纹伊蚊携带Wolbachia分型及密度方法的建立与应用

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作者 熊易平 周宁馨 +7 位作者 梁国锐 李建航 李博 韩宛蓉 邢丹 郭晓霞 姜玉庭 赵彤言 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2024年第1期19-27,共9页

目的白纹伊蚊天然携带A与B亚组沃尔巴克氏体Wolbachia,这种共生菌能够通过抑制宿主传播病毒能力或降低宿主种群密度来控制虫媒疾病传播,且这种作用强度与其密度密切相关,本文旨在建立一种准确检测蚊虫携带Wolbachia分型与密度的方法。... 目的白纹伊蚊天然携带A与B亚组沃尔巴克氏体Wolbachia,这种共生菌能够通过抑制宿主传播病毒能力或降低宿主种群密度来控制虫媒疾病传播,且这种作用强度与其密度密切相关,本文旨在建立一种准确检测蚊虫携带Wolbachia分型与密度的方法。方法克隆白纹伊蚊携带Wolbachia的wsp基因并测序,在w AlbA与w AlbB wsp基因的非保守区设计特异性引物,建立qPCR检测方法。结果该方法灵敏性和特异性良好,两亚组Wolbachia无交叉反应。利用该方法检测不同浓度四环素处理后蚊虫携带Wolbachia密度下降程度,确定最适四环素处理浓度为0.1 mg/mL。结论本方法的建立为研究Wolbachia在蚊虫生理生殖和天然免疫方面的作用提供了技术支撑。 展开更多

关键词 白纹伊蚊 沃尔巴克氏体 qPCR 四环素

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呼吸道合胞病毒B亚型感染特性研究

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作者 唐维 张蓉蓉 +2 位作者 陈奇 叶青 黄升海 《军事医学》 CAS CSCD 2024年第10期730-736,共7页

目的明确呼吸道合胞病毒(RSV)B亚型18537株在不同宿主细胞系上的感染特征,并评价其在不同动物模型中的致病性及病理损伤特点,为RSV感染及致病机制研究提供实验与技术基础。方法通过评价感染细胞病变特征、病毒蚀斑形态、病毒蛋白表达以... 目的明确呼吸道合胞病毒(RSV)B亚型18537株在不同宿主细胞系上的感染特征,并评价其在不同动物模型中的致病性及病理损伤特点,为RSV感染及致病机制研究提供实验与技术基础。方法通过评价感染细胞病变特征、病毒蚀斑形态、病毒蛋白表达以及体外增殖效率等,明确其基本生物学特征;通过滴鼻途径感染10月龄BALB/c小鼠和6周龄棉鼠,检测感染后肺组织中的病毒载量,并分析病理损伤特征,完成其致病性评价。结果RSV B亚型18537株导致Hep-2细胞出现多细胞核融合性病变,在BHK-21细胞中可以形成典型的病毒蚀斑;同时,在Hep-2和A549细胞上可检测到病毒蛋白的表达。滴鼻途径感染BALB/c小鼠和棉鼠,感染后第5天可在肺组织中检测到病毒核酸,同时该剂量可造成肺组织肺泡壁轻度增厚,伴有散在的淋巴细胞与中性粒细胞浸润。结论RSV B亚型18537株可在Hep-2和A549细胞上有效增殖,并能感染BALB/c小鼠和棉鼠,导致肺组织出现一定程度的病理损伤。通过比较发现,相比A亚型A2株,RSV B亚型18537株在细胞和动物中的感染能力较弱。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 B亚型 HEP-2细胞 病毒感染特征 病毒致病性

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黄热病毒保护性抗体研究进展

13

作者 索星星 迟航 +1 位作者 邓永强 韩晓东 《军事医学》 CAS CSCD 2024年第8期636-640,共5页

黄热病毒(YFV)是世界上最重要的蚊媒黄病毒之一,每年造成约20万例感染和3万例死亡,严重威胁人民健康和经济发展。目前,临床上尚无批准的YFV特异性治疗药物。抗体药物安全性高、靶向性强、治疗显著,是病毒性传染病预防和治疗的有效手段... 黄热病毒(YFV)是世界上最重要的蚊媒黄病毒之一,每年造成约20万例感染和3万例死亡,严重威胁人民健康和经济发展。目前,临床上尚无批准的YFV特异性治疗药物。抗体药物安全性高、靶向性强、治疗显著,是病毒性传染病预防和治疗的有效手段之一。该文阐述了近年国内外研发的YFV保护性抗体及发展方向,以期为研制高效安全的YFV特异性治疗药物提供参考。 展开更多

关键词 黄热病毒 包膜蛋白 中和抗体

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A族链球菌疫苗研究进展

14

作者 王翔 黄文华 +1 位作者 姜永强 赵国芬 《军事医学》 CSCD 2024年第11期853-857,共5页

近年来,由A族链球菌感染引发的突发社会公共卫生事件给社会造成了严重的经济负担。A族链球菌疫苗研发始终是研究人员关注与研究的焦点,目前已有多种类型的疫苗正处于不同的研发阶段,然而仍未有成熟可用的疫苗可供使用。该文从M蛋白重组... 近年来,由A族链球菌感染引发的突发社会公共卫生事件给社会造成了严重的经济负担。A族链球菌疫苗研发始终是研究人员关注与研究的焦点,目前已有多种类型的疫苗正处于不同的研发阶段,然而仍未有成熟可用的疫苗可供使用。该文从M蛋白重组蛋白疫苗、非M蛋白重组蛋白疫苗以及多糖结合疫苗等方面综述A族链球菌疫苗研究现状。 展开更多

关键词 A族链球菌 重组蛋白疫苗 多糖结合疫苗

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长须血蜱嗅觉相关蛋白的分子特征研究

15

作者 刘智通 冯浩 +1 位作者 吴家红 孙毅 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2024年第3期274-280,共7页

目的了解蜱类的嗅觉感应分子基础和反应机制,明确长须血蜱嗅觉相关蛋白的分子结构,并预测其功能特征。方法利用转录组测序方法从长须血蜱中获得嗅觉相关蛋白转录子,利用ESPript 3.0和Swiss-Model软件预测和分析嗅觉相关蛋白的二级、三... 目的了解蜱类的嗅觉感应分子基础和反应机制,明确长须血蜱嗅觉相关蛋白的分子结构,并预测其功能特征。方法利用转录组测序方法从长须血蜱中获得嗅觉相关蛋白转录子,利用ESPript 3.0和Swiss-Model软件预测和分析嗅觉相关蛋白的二级、三级结构,在分子建模的基础上探讨长须血蜱嗅觉相关蛋白的结构特点和配基结合特性。结果从长须血蜱中共获得6个与嗅觉相关的转录子,其对应的蛋白序列分别与长角血蜱、森林革蜱对应的嗅觉结合蛋白C型尼曼-匹克蛋白2(Niemann-Pick C2 protein,NPC2)、气味结合蛋白样蛋白(odorant binding protein-like,OBPL)和microplusin样蛋白(ML)高度同源;其中OBPL的结构域由5个α-螺旋和41.83%的疏水性残基形成配基结合口袋,NPC2的结构域则由5个转角和9个β-折叠形成配基结合口袋,挥发性气味物质配基与这些结合口袋的配体在结合口袋中心重叠。结论长须血蜱的OBPL和NPC2具备了参与嗅觉感应的结构特征,提示OBPL和NPC2参与蜱类嗅觉感应。 展开更多

关键词 长须血蜱 嗅觉 C型尼曼-匹克蛋白2 气味结合蛋白样蛋白 Microplusin样蛋白

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基于细胞的新冠病毒蛋白酶活性报告系统及药物筛选应用

16

作者 董豹 陈月红 +1 位作者 冯烨 姜涛 《病毒学报》 北大核心 2025年第1期211-221,共11页

新型冠状病毒感染(Coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的全球暴发性传染病,严重危害人类的生命安全。为了遏制新型冠状病毒感染,研究学者致力于研发抗病毒药物。为快速直接评价抗新冠病毒药物的有效性... 新型冠状病毒感染(Coronavirus disease 2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的全球暴发性传染病,严重危害人类的生命安全。为了遏制新型冠状病毒感染,研究学者致力于研发抗病毒药物。为快速直接评价抗新冠病毒药物的有效性,研究构建了多种新冠病毒的新型报告系统。本文综述了基于目前新冠病毒两种蛋白酶(Mpro和PLpro)切割功能的报告系统相关研究进展,及其在抗病毒药物研发中的应用。 展开更多

关键词 新冠病毒 蛋白酶 报告系统 抑制剂 抗病毒药物

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脂氧合酶通过负调控自噬抑制新型布尼亚病毒感染

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作者 李爽 郑小杰 +5 位作者 张运发 张灵玉 杨童 黎浩 张小爱 刘玮 《军事医学》 2025年第1期27-34,共8页

目的 探究脂氧合酶(LOX)对发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)感染的影响及作用机制。方法 使用CCK-8法测定LOX对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性的影响;实时定量PCR(qPCR)检测细胞内及上清中病毒RNA的复制;通过间接免疫荧光实验(IFA)观察H... 目的 探究脂氧合酶(LOX)对发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)感染的影响及作用机制。方法 使用CCK-8法测定LOX对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性的影响;实时定量PCR(qPCR)检测细胞内及上清中病毒RNA的复制;通过间接免疫荧光实验(IFA)观察HUVEC中SFTSV的感染率;Western印迹检测细胞内病毒核蛋白(NP)及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、5'-单磷酸腺苷(AMP)活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达变化,采用脂质代谢组学分析LOX处理SFTSV感染的人肝癌细胞系(Huh 7)后,细胞内代谢物的表达差异。结果 CCK-8结果显示LOX浓度低于8 mg/mL时,对HUVEC无明显细胞毒性。随着LOX浓度增加,胞内病毒RNA和NP蛋白的表达量逐渐降低,病毒感染能力逐渐减弱。SFTSV感染后LC3Ⅱ蛋白的表达水平逐渐升高,激活自噬反应;与未处理组比较,经过LOX(2 mg/mL)处理后,SFTSV感染细胞的自噬程度减弱。经过LOX处理后,SFTSV感染细胞的中LC3Ⅱ表达水平和AMPK磷酸化水平降低,mTOR磷酸化水平升高。结论 LOX通过抑制AMPK/mTOR信号通路负调控自噬反应,从而抑制SFTSV复制。 展开更多

关键词 发热伴血小板减少综合征病毒 脂氧合酶 自噬 AMPK/mTOR 人脐静脉内皮细胞

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寨卡病毒E蛋白和NS1蛋白关键氨基酸突变可促进病毒在小鼠睾丸中的复制 被引量：1

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作者 李凯 闫秀丽 +4 位作者 贺梦娇 娄雅楠 黄星耀 孙梦许 李晓峰 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2827-2834,共8页

寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种蚊媒黄病毒,也可通过性传播,同时还能感染睾丸组织并导致损伤.探究寨卡病毒在睾丸内持续复制过程中病毒基因的变化规律,发现潜在的睾丸适应性突变位点,可为寨卡病毒变异的风险评估提供重要参考.为此,本... 寨卡病毒(Zika virus,ZIKV)是一种蚊媒黄病毒,也可通过性传播,同时还能感染睾丸组织并导致损伤.探究寨卡病毒在睾丸内持续复制过程中病毒基因的变化规律,发现潜在的睾丸适应性突变位点,可为寨卡病毒变异的风险评估提供重要参考.为此,本研究以寨卡病毒株FSS13025为研究对象,通过将其在A129小鼠睾丸中连续传代10轮后获得适应性传代毒株,将原始株(WT)、第5代(P5)和第10代(P10)病毒经腹腔接种A129小鼠后发现,睾丸中P5和P10的RNA载量较WT分别提高4.6和3.8倍;进一步通过深度测序分析P5和P10的基因组变异情况,结果显示二者的包膜蛋白(envelope,E)和非结构蛋白1(nonstructural protein 1,NS1)分别出现H401Y和K146E突变.在此基础上,以寨卡病毒FSS13025株为基因骨架,利用反向遗传学技术构建拯救携带上述突变的重组病毒H401Y+K146E,并评价其在细胞和小鼠体内的复制能力,结果显示病毒感染睾丸细胞15P-1和TM3后第48 h,细胞培养上清中的重组病毒RNA含量分别是WT的5.2和2.1倍;经腹腔途径感染A129小鼠后的第3和6天,睾丸中重组病毒RNA载量较WT分别提高97.5和58.4倍.上述结果表明,H401Y+K146E联合突变显著增强了寨卡病毒在睾丸细胞中的复制能力,同时明显提升了其对睾丸的嗜性和侵袭力,上述位点可作为寨卡病毒变异风险预警的监测靶点. 展开更多

关键词 寨卡病毒 睾丸 适应性突变 包膜蛋白 非结构蛋白1

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HIV耐药监测策略与监测方法

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作者 李韩平 李林 李敬云 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1087-1090,共4页

HIV耐药是实现全球艾滋病预防控制目标的重大现实威胁,耐药监测是应对HIV耐药的关键举措,世界卫生组织推荐HIV耐药监测应成为cART和PrEP项目的重要组成部分。本文简要回顾了全球HIV耐药监测策略的发展历程,介绍了耐药早期预警(EWI)、获... HIV耐药是实现全球艾滋病预防控制目标的重大现实威胁,耐药监测是应对HIV耐药的关键举措,世界卫生组织推荐HIV耐药监测应成为cART和PrEP项目的重要组成部分。本文简要回顾了全球HIV耐药监测策略的发展历程,介绍了耐药早期预警(EWI)、获得性耐药(ADR)、治疗前耐药(PDR)、传播性耐药(TDR)和PrEP耐药监测的基本方法,分析了各类监测方案随着治疗策略发展而发生的变化,强调监测不同于临床诊断,各类监测应正确使用耐药突变和耐药判断标准,TDR监测的耐药率只能计入监测的耐药突变(SDRMs),ADR和PDR监测应将低度以上耐药判断为耐药。我国HIV耐药监测取得了很大成绩,未来应根据我国流行的毒株特点、药物应用策略的变化调整监测方案,统一监测方法,从而获得准确的监测结果,指导cART和耐药的预防与控制。 展开更多

关键词 艾滋病病毒 耐药 监测 抗反转录病毒治疗

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甲型肝炎病毒细胞适应株在Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠体内的感染特征

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作者 高敏 马青青 +3 位作者 李剑 阮若彤 秦成峰 赵慧 《军事医学》 CAS CSCD 2024年第9期650-655,共6页

目的研究甲型肝炎病毒(HAV)细胞适应株在Ⅰ型干扰素(IFN)受体缺失的小鼠模型中的感染特征。方法采用间接免疫荧光、蛋白免疫印迹和实时定量RT-PCR方法对HAV细胞适应株HM175/18f在细胞水平上的病毒蛋白表达以及病毒复制特征进行鉴定。以... 目的研究甲型肝炎病毒(HAV)细胞适应株在Ⅰ型干扰素(IFN)受体缺失的小鼠模型中的感染特征。方法采用间接免疫荧光、蛋白免疫印迹和实时定量RT-PCR方法对HAV细胞适应株HM175/18f在细胞水平上的病毒蛋白表达以及病毒复制特征进行鉴定。以尾静脉注射的方式将HM175/18f感染缺失Ⅰ型IFN受体的A129小鼠,通过检测病毒血症、粪便排毒、肝脏中的病毒RNA载量、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肝脏病理分析和IgG抗体水平,确定HM175/18f在A129小鼠中感染和复制的动态变化及其诱导的机体免疫反应。结果HM175/18f感染的A129小鼠未出现明显的临床症状,ALT水平未见明显上调。但病毒RNA在感染小鼠肝脏中可持续存在,直至感染后42 d。感染小鼠肝脏组织有淋巴细胞和中性粒细胞的局灶性浸润,但未见局灶性坏死表现。值得重视的是,HM175/18f感染引起了明显的病毒血症和持续的粪便排毒。此外,在A129小鼠中HM175/18f诱导了显著的HAV特异性体液免疫应答。结论本研究揭示了HAV细胞适应株HM175/18f在Ⅰ型IFN受体缺失小鼠中的感染性,明确了HM175/18f的减毒特征,这不仅有助于加深对HAV致病机制的理解,也能拓展Ⅰ型IFN受体缺失小鼠模型在甲型肝炎研究中的应用。 展开更多

关键词 甲型肝炎 甲型肝炎病毒 细胞适应株 Ⅰ型干扰素受体缺失小鼠 小鼠模型

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