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旋毛虫成虫期特异性基因的筛选与序列分析 被引量：7
1
作者 杨静 诸欣平 +5 位作者 张新梅 杨雅平 周蕾 高欣 刘明远 Boireau Pascal 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期68-71,共4页
目的　获得旋毛虫成虫期特异性基因序列。方法　应用旋毛虫成虫期特异性探针对成虫cDNA文库进行杂交筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,采用DNAstar软件进行基因序列分析。结果　利用消减杂交 (subtractedhybridizat... 目的　获得旋毛虫成虫期特异性基因序列。方法　应用旋毛虫成虫期特异性探针对成虫cDNA文库进行杂交筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,采用DNAstar软件进行基因序列分析。结果　利用消减杂交 (subtractedhybridization)获得的旋毛虫成虫期特异性探针筛选成虫cDNA文库 ,获得一个长 16 2 9bp的基因。其开放阅读框架由 146 4个核苷酸组成 ,编码 487个氨基酸。序列分析表明 ,该序列是一个尚未见报道的旋毛虫基因序列 ,在 2 0 7～ 2 70位氨基酸间存在两个锌指结构 ,在 5 2～ 6 4,10 8～ 116 ,137～ 16 3,2 2 6～ 2 6 0位氨基酸处存在预测的抗原表位。结论　获得旋毛虫成虫期特异性基因 。 展开更多
关键词 旋毛虫 成虫 CDNA文库 CDNA克隆 序列分析 消减杂交
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旋毛虫5日龄成虫期特异性基因的筛选与序列分析 被引量：1
2
作者 王峰 杨继要 +3 位作者 武峰 付宝权 刘明远 赵培荣 《河南预防医学杂志》 2003年第3期131-133,130,共4页
目的　获得旋毛虫 5日龄成虫期特异性基因序列。方法　应用旋毛虫 5日龄成虫期待异性探针对 5日龄成虫cDNA文库进行杂交筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,登陆InterProScan进行基因、氨基酸序列分析。结果　利用消... 目的　获得旋毛虫 5日龄成虫期特异性基因序列。方法　应用旋毛虫 5日龄成虫期待异性探针对 5日龄成虫cDNA文库进行杂交筛选、克隆测序及核苷酸序列数据库 (GenBank)查寻比较 ,登陆InterProScan进行基因、氨基酸序列分析。结果　利用消减杂交 (subtractedhybridization)获得的旋毛虫 5日龄成虫期特异性探针筛选 5日龄成虫cDNA文库 ,获得一个长 1 1 32bp的基因。其开放阅读框架由 1 0 30个核苷酸组成 ,编码 343个氨基酸。序列分析表明 ,该序列是一个尚未见报道的旋毛虫基因序列 ,在序列 1 1 7～ 1 2 0位氨基酸为氨基葡聚糖 (GAG)结合位点 ,在 2 7～ 86 ,1 5 3～ 32 8位氨基酸处存在Gly -X -Y胶原蛋白重复序列 ,分别编码两个胶原蛋白多肽。结论　获得旋毛虫 5日龄成虫期特异性基因 。 展开更多
关键词 旋毛虫 CDNA文库 序列分析 消减杂交
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旋毛虫表皮胶原蛋白基因的原核表达 被引量：1
3
作者 王峰 武峰 +2 位作者 付宝权 对明远 赵培荣 《河南预防医学杂志》 2003年第4期196-198,共3页
目的构建表皮胶原蛋白基因X21的原核表达载体pET28-X21ex,诱导其表达胶原蛋白。方法应用PCR技术扩增目的基因X21,纯化后将其克隆入表达载体pET28a,重组质粒经酶切鉴定后,转入大肠杆菌DE3诱导表达,利用SDS-PAGE检测胶原蛋白的表达效果。... 目的构建表皮胶原蛋白基因X21的原核表达载体pET28-X21ex,诱导其表达胶原蛋白。方法应用PCR技术扩增目的基因X21,纯化后将其克隆入表达载体pET28a,重组质粒经酶切鉴定后,转入大肠杆菌DE3诱导表达,利用SDS-PAGE检测胶原蛋白的表达效果。结果利用DNA重组技术构建了表皮胶原蛋白基因X21的原核表达载体pET28-X21ex,转化大肠杆菌后经诱导表达了30kDa的融合蛋白,以诱导3h的表达量最高,在35%以上。结论旋毛虫表皮胶原蛋白基因X21在大肠杆菌中能够高效表达,为进一步研究旋毛虫表皮胶原蛋白的结构与功能奠定了基础。 展开更多
关键词 旋毛虫 基因 重组质粒 表达
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