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转OsDREB3基因大豆外源基因拷贝数的确定及标准分子的构建 被引量：1
1
作者 孙喆 刘营 +2 位作者 张明辉 李璐 高学军 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期61-67,共7页
为建立抗逆转OsDREB3基因大豆快速稳定的品系特异性检测方法,本试验通过实时Real-time PCR方法,以大豆凝集素基因(lectin)作为内源参照基因,确定了外源基因OsDREB3在转OsDREB3基因大豆基因组中的拷贝数为单拷贝,为建立快速、有效的品系... 为建立抗逆转OsDREB3基因大豆快速稳定的品系特异性检测方法,本试验通过实时Real-time PCR方法,以大豆凝集素基因(lectin)作为内源参照基因,确定了外源基因OsDREB3在转OsDREB3基因大豆基因组中的拷贝数为单拷贝,为建立快速、有效的品系特异性检测方法奠定基础.同时,在原有构建的含4种转基因大豆品系特异性序列的标准分子载体上又增加了转OsDREB3基因大豆品系特异性序列,新构建了含有5种转基因大豆品系特异性序列的标准分子及大豆内参照基因(lectin),已完全满足对现有国内覆盖面最大的5种转基因大豆同时、快速筛查检测工作的需要. 展开更多
关键词 转OsDREB3基因大豆 外源基因 拷贝数 标准分子
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转基因玉米NK603品系成分LAMP快速PCR检测方法的建立 被引量：8
2
作者 甄贞 张明辉 +7 位作者 刘营 敖金霞 于艳波 李璐 曲波 仇有文 高学军 张克俭 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期24-29,共6页
根据转基因玉米品系NK603外源插入片段与玉米基因组序列设计品系特异性引物,建立转基因玉米品系NK603的品系特异性环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对此方法进行灵敏度、特异性测试。试验表明... 根据转基因玉米品系NK603外源插入片段与玉米基因组序列设计品系特异性引物,建立转基因玉米品系NK603的品系特异性环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对此方法进行灵敏度、特异性测试。试验表明该方法能够快速检测出转基因玉米NK603品系成分,检测灵敏度为0.1%,并具有较高的特异性和较好的稳定性。 展开更多
关键词 转基因玉米 NK603品系 环介导等温扩增 快速检测
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转基因大豆OsDREB3品系特异性定性PCR检测方法的建立 被引量：3
3
作者 刘营 张明辉 +3 位作者 霍楠 仇有文 敖金霞 高学军 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期34-39,共6页
为建立转基因大豆OsDREB3品系特异性定性检测方法,以转基因大豆OsDREB3为研究对象,通过染色体步行方法,成功获得转基因大豆OsDREB3上pCAMBIA1301质粒外源基因插入位点的5′端旁侧序列,其扩增片段覆盖了转化载体及转基因大豆基因组旁侧序... 为建立转基因大豆OsDREB3品系特异性定性检测方法,以转基因大豆OsDREB3为研究对象,通过染色体步行方法,成功获得转基因大豆OsDREB3上pCAMBIA1301质粒外源基因插入位点的5′端旁侧序列,其扩增片段覆盖了转化载体及转基因大豆基因组旁侧序列,扩增片段大小为344bp。同时根据旁侧序列设计引物,建立OsDREB3品系特异性定性PCR方法,以典型的转基因作物证明该方法检测转基因大豆OsDREB3具有高特异性,灵敏度为0.1%。 展开更多
关键词 转基因大豆 OsDREB3 染色体步行 品系特异性 PCR检测
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