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有氧糖酵解在胰腺癌中的研究 被引量：5
1
作者 张凯 郭明洲 张志谦 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第7期735-739,747,共6页
胰腺癌是一种具有极高死亡率的恶性肿瘤,有氧糖酵解是胰腺癌的一个显著特征。缺氧微环境、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIF)是胰腺癌有氧糖酵解发生的重要影响因素,KRAS、TP53、SMAD4等胰腺癌常见的基因突变通过一系列信号... 胰腺癌是一种具有极高死亡率的恶性肿瘤,有氧糖酵解是胰腺癌的一个显著特征。缺氧微环境、低氧诱导因子(hypoxia-inducible factors,HIF)是胰腺癌有氧糖酵解发生的重要影响因素,KRAS、TP53、SMAD4等胰腺癌常见的基因突变通过一系列信号通路调控糖酵解酶的异常表达进而促进胰腺癌有氧糖酵解的发生,糖酵解过程中的关键酶HK2、PGK1、PKM2和LDHA的异常表达在胰腺癌的发生发展过程中发挥了重要作用。针对HIF-1、HK2、PKM2、LDHA等分子阻断胰腺癌有氧糖酵解的靶向治疗也取得了一定进展,未来研究应该更加重视胰腺癌靶向治疗的临床效果。 展开更多
关键词 胰腺癌 有氧糖酵解 肿瘤微环境 HIF 基因突变
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利用规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9系统敲减α2δ1对人肝癌细胞系Hep-12干性的影响
2
作者 何琦 赵威 张志谦 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期882-887,共6页
目的通过规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统敲减人肝癌细胞系Hep12中电压依赖性钙离子通道α2δ1的表达,观察α2δ1敲减后对肝癌细胞干性的影响。方法设计3对靶向α2δ1的向导(sgRNA),长度为20 bp,构建到lenti CRI... 目的通过规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)系统敲减人肝癌细胞系Hep12中电压依赖性钙离子通道α2δ1的表达,观察α2δ1敲减后对肝癌细胞干性的影响。方法设计3对靶向α2δ1的向导(sgRNA),长度为20 bp,构建到lenti CRISPRv2-puro载体上,然后在体外检测sgRNA切割活性,利用慢病毒包装系统包装含有sgRNA的重组质粒,将包装好的病毒感染Hep-12细胞,2 d后加入嘌呤霉素筛选。利用Western blotting验证α2δ1的敲减效果和干性相关基因的表达。通过成球实验检测其体外自我更新能力的变化。结果测序结果显示,sgRNA成功插入载体质粒;体外切割实验显示,3条sgRNA均有切割活性;Western blotting结果显示,α2δ1基因的表达显著降低,干性相关基因B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1(BMI1)和Nanog的表达显著被抑制;无血清培养基成球实验结果表明,敲减α2δ1导致Hep-12细胞的体外自我更新能力减弱。结论利用CRISPR/Cas9技术成功构建敲除α2δ1基因的Hep-12细胞系;敲除α2δ1基因后能抑制Hep-12细胞肿瘤干细胞样特性。 展开更多
关键词 α2δ1 规律间隔成簇短回文重复序列/相关蛋白9 肝癌干细胞 基因敲减 自我更新 免疫印迹法 人
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