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Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达
被引量:
3
1
作者
岳丽琴
沈叙庄
+3 位作者
张华捷
王咏红
俞桑洁
杨永弘
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期236-239,共4页
目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32...
目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。
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关键词
B族链球菌
表面免疫相关蛋白
原核表达
克隆
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职称材料
题名
Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达
被引量:
3
1
作者
岳丽琴
沈叙庄
张华捷
王咏红
俞桑洁
杨永弘
机构
北京
儿童
医院
微
生物
及免疫室
北京大学医学部基础医院病原生物系
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2006年第3期236-239,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371487).
文摘
目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surfaceimmunogenicprotein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白。方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18T载体,构建原核表达载体pET32aSIP,用BL21(DE3)/pET系统表达TrixSIP融合蛋白,SDSPAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化。结果PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中Ⅰa/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%。SDSPAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32aSIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66000的新蛋白带。质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74。结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础。
关键词
B族链球菌
表面免疫相关蛋白
原核表达
克隆
Keywords
Streptococcus group B
Surface immunogertic protein
Prokaryotic expression
分类号
R730.53 [医药卫生—肿瘤]
R378.911 [医药卫生—病原生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达
岳丽琴
沈叙庄
张华捷
王咏红
俞桑洁
杨永弘
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2006
3
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