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大鼠肾上腺单个嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的电化学检测 被引量:8
1
作者 徐建华 瞿安连 +2 位作者 叶琴 康华光 周专 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期405-409,共5页
报道以直径7μm的碳纤丝制作碳纤电极,在原代培养的大鼠肾上腺单个嗜铬细胞上检测诱发的儿茶酚胺激素分泌。当用微管向细胞吹加10mmol/L乙酰胆碱或60mmol/L氯化钾时,2-5s延迟后记录到数目不等的峰形信号。峰信... 报道以直径7μm的碳纤丝制作碳纤电极,在原代培养的大鼠肾上腺单个嗜铬细胞上检测诱发的儿茶酚胺激素分泌。当用微管向细胞吹加10mmol/L乙酰胆碱或60mmol/L氯化钾时,2-5s延迟后记录到数目不等的峰形信号。峰信号上升快(约1ms);衰减则较慢,呈指数形状。峰信号的检测要求电极上所加氧化电压足够大。实验表明,以高钾刺激时,该峰信号依赖于外钙(2mmol/L)的存在。根据峰信号对应于嗜铬细胞内单个囊泡的儿茶酚胺量子化释放的事实,我们推算每次量子化释放的儿茶酚胺约为10-20—10-18mol量级。 展开更多
关键词 嗜铬细胞 细胞生物物理 电化学测量 儿茶酚胺
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SH-SY5Y细胞胞内钙库特性研究 被引量:8
2
作者 徐涛 刘乃江 +2 位作者 瞿安连 韩济生 康华光 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期234-238,共5页
运用单细胞显微荧光测量技术测量了单个SH—SY5Y细胞内游离钙离子浓度的变化。首次报道了SH—SY5Y细胞内存在毒蕈碱敏感而非咖啡因敏感的钙库,并研究了它的动力学特征。N ̄ ̄C ̄hetwMadUgh*TOwhomC... 运用单细胞显微荧光测量技术测量了单个SH—SY5Y细胞内游离钙离子浓度的变化。首次报道了SH—SY5Y细胞内存在毒蕈碱敏感而非咖啡因敏感的钙库,并研究了它的动力学特征。N ̄ ̄C ̄hetwMadUgh*TOwhomCb ̄pondeneeshouldbe ̄. 展开更多
关键词 细胞 SH-SY5Y细胞 钙库
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钙的光释放技术及其在细胞研究中的应用 被引量:1
3
作者 徐建华 瞿安连 康华光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期132-135,189,共5页
Ca2 +的光释放技术通过光解作用使预先引入细胞内的光敏感性螯合剂对Ca2 +的亲和性改变 ,从而实现对细胞内游离钙离子浓度的调控 ,有助于阐明Ca2 +作为第二信使对电兴奋性、肌肉收缩。
关键词 光释放 细胞研究 生物物理学技术
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SH-SY5Y细胞的钙缓冲研究 被引量:1
4
作者 叶琴 陈良怡 +1 位作者 瞿安连 徐涛 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期352-355,共4页
目的 :研究SH SY5Y神经杂交瘤细胞的钙缓冲能力。方法 :通过膜片钳手段 ,测量未分化的SH SY5Y细胞钙离子通道电流 ;并应用显微荧光测量游离钙离子浓度和高钾去极化的方法 ,研究胞内Ca2 + 浓度上升后浓度恢复的动力学过程。结果 :未分化... 目的 :研究SH SY5Y神经杂交瘤细胞的钙缓冲能力。方法 :通过膜片钳手段 ,测量未分化的SH SY5Y细胞钙离子通道电流 ;并应用显微荧光测量游离钙离子浓度和高钾去极化的方法 ,研究胞内Ca2 + 浓度上升后浓度恢复的动力学过程。结果 :未分化的SH SY5Y细胞存在钙离子通道电流 ;在刺激时间间隔较短时 (<15 0s) ,胞内钙浓度的恢复过程会由于缓冲机制的饱和而变慢 ;而时间间隔 >15 0s时 ,缓冲物质则可以基本恢复使得胞内钙的恢复过程基本保持不变。结论 展开更多
关键词 钙通道 钙缓冲蛋白 SH-SY5Y细胞 胞内钙浓度
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一种跨膜受体偶联离子通道调控网络模型研究 被引量:1
5
作者 吴鸿修 仇建斌 韦顺会 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第9期103-105,共3页
以一种受体偶联钙离子通道为例,讨论了普遍存在的细胞信号跨膜传递中的离子通道启闭的控制功能,对Bray和Lay的跨膜信号传递模型进行了改进.给出了一种跨膜受体偶联离子通道调控的网络模型.运用单细胞显微荧光测量[Ca2+... 以一种受体偶联钙离子通道为例,讨论了普遍存在的细胞信号跨膜传递中的离子通道启闭的控制功能,对Bray和Lay的跨膜信号传递模型进行了改进.给出了一种跨膜受体偶联离子通道调控的网络模型.运用单细胞显微荧光测量[Ca2+]i技术,测量了单个SH-SY5Y细胞内游离钙离子浓度的变化,说明了此模型能够较好地完成离子通道的控制功能,并给出了关于此模型的一些讨论. 展开更多
关键词 跨膜信号传递 受体 离子通道调控 网络模型
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SH-SY5Y细胞上的钙库及钙振荡机理研究 被引量:7
6
作者 陈良怡 叶琴 +4 位作者 瞿安连 邹寿彬 康国新 周专 康华光 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期215-220,共6页
使用显微荧光测量的方法,对未分化和分化的SH-SY5Y神经杂交瘤细胞上进行的实验,发现存在着毒蕈碱受体激动剂Carbachol激发的钙振荡,并展示了几种类型的钙振荡模式。它是由于毒蕈碱受体M3引起的,其机理与细胞的钙... 使用显微荧光测量的方法,对未分化和分化的SH-SY5Y神经杂交瘤细胞上进行的实验,发现存在着毒蕈碱受体激动剂Carbachol激发的钙振荡,并展示了几种类型的钙振荡模式。它是由于毒蕈碱受体M3引起的,其机理与细胞的钙库和钙通道有关。在用钙通道阻滞剂Verapamil和CdCl2抑制钙通道的情况下,钙振荡仍能继续。但在胞外完全无钙时,振荡很大程度上被抑制。另外,振荡的频率也与刺激物浓度及胞外钙浓度有关。最后并讨论了振荡可能的发生机制。 展开更多
关键词 钙库 钙振荡 神经杂交瘤细胞 显微荧光测量
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极低频弱磁场对PC-12瘤细胞胞内游离钙离子浓度的影响 被引量:16
7
作者 黄春明 叶晖 +2 位作者 徐建华 林家瑞 瞿安连 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期63-65,94,共4页
采用极低频弱磁场对鼠嗜铬细胞瘤 PC- 12株系细胞进行照射 ,利用显微荧光技术动态监测胞内游离钙离子浓度 ([(Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明 :5 0 Hz,10 0 μT的正弦磁场照射引起 [Ca2 + ]i 明显升高 ;而在同等强度的静磁场和 2 0 0 0... 采用极低频弱磁场对鼠嗜铬细胞瘤 PC- 12株系细胞进行照射 ,利用显微荧光技术动态监测胞内游离钙离子浓度 ([(Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明 :5 0 Hz,10 0 μT的正弦磁场照射引起 [Ca2 + ]i 明显升高 ;而在同等强度的静磁场和 2 0 0 0 Hz正弦磁场照射下 ,[Ca2 + ]i 基本维持不变。进一步的实验说明 [Ca2 + ]i 的升高部分源于细胞外 Ca2 +的跨膜内流 ,部分源于胞内钙库的释放。证实了一定强度下特定频率的极低频弱磁场能够影响钙离子的跨膜运输和胞内钙库的释放 。 展开更多
关键词 极低频弱磁场 游离钙离子 浓度 嗜铬细胞瘤
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羟墓自由基引起神经细胞[Ca^(2+)]i增高的机制和Ebselen的抑制作用 被引量:6
8
作者 涂欢 徐涛 +2 位作者 易永 徐辉碧 康华光 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期522-526,共5页
用Fura-2显微荧光测量技术研究了羟基自由基对单个皮层神经细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i影响和硒化合物Ebelen对[Ca2+]i的抑制作用。结果表明羟基自由基的作用首先引起胞内[Ca2+]i以时间常数τ=38... 用Fura-2显微荧光测量技术研究了羟基自由基对单个皮层神经细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i影响和硒化合物Ebelen对[Ca2+]i的抑制作用。结果表明羟基自由基的作用首先引起胞内[Ca2+]i以时间常数τ=3895.4±507.2S速度缓慢增加,然后加入了以τ=420.6±122.0S的外钙大量涌入。钙通道阻断剂、疏基还原剂、疏基还原制和自由基清除剂对羟基自由基损伤作用的影响提示外钙的大量涌入部分与通道的开放有关,疏基损伤在羟基自由基引起的[Ca2+]i升高中起着重要的作用。具有类谷胱甘肽过氧化酶活性的小分子硒化合物Ebselen(10-5mol/L和10-6mol/L)抑制羟基自由基引起的[Ca2+]i升高,推测它可以抑制钙库的释放或促进内钙的外排以及抑制外钙的流入。 展开更多
关键词 羟基自由基 EBSELEN 神经细胞 钙离子
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大鼠胰岛β细胞原代培养的一种实用方法 被引量:7
9
作者 曾旭辉 徐建华 +1 位作者 周专 瞿安连 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第5期24-26,共3页
以V型胶原酶分离胰腺得到胰岛,在EGTA预孵育后以低浓度的胰蛋白酶和DNaseI酶联用消化胰岛,建立了大鼠胰腺β细胞的分离及原代培养方法.反复实验表明(n=10),所获得的细胞表面光洁、完整、呈球形,功能正常,能对生... 以V型胶原酶分离胰腺得到胰岛,在EGTA预孵育后以低浓度的胰蛋白酶和DNaseI酶联用消化胰岛,建立了大鼠胰腺β细胞的分离及原代培养方法.反复实验表明(n=10),所获得的细胞表面光洁、完整、呈球形,功能正常,能对生理剌激物迅速反应,适用于通常的单个细胞的电生理学实验. 展开更多
关键词 胰岛 Β细胞 原代培养 自由钙离子浓度 细胞
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M型受体在大鼠肾上腺嗜铬细胞内钙库释放和激素分泌中的作用 被引量:3
10
作者 徐建华 曾旭辉 +3 位作者 何立铭 瞿安连 周专 ustc.edu.cn 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期564-570,共7页
在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上,用显微荧光测量和碳纤电极记录方法,测量可激活毒草碱(muscarine,M)受体的激动剂乙酰甲胆碱(methachaoline,MCh)对胞内游离钙浓度[Ca2+]i和儿茶酚胺激素分泌的影响。在细胞外液含2mmol/LCa2+时,... 在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上,用显微荧光测量和碳纤电极记录方法,测量可激活毒草碱(muscarine,M)受体的激动剂乙酰甲胆碱(methachaoline,MCh)对胞内游离钙浓度[Ca2+]i和儿茶酚胺激素分泌的影响。在细胞外液含2mmol/LCa2+时,用含钙或不含钙的MCh(1mmol/L)刺激细胞,均引起[Ca2+]i的升高或钙振荡,并诱发激素的分泌。细胞外液不含Ca2+时,以类似方式施加MCh刺激也引起[Ca2+]i的升高和激素分泌。这些资料表明,激发嗜钻细胞毒蕈碱受体可引起钙库释放,并触发分泌。在无外钙条件下,还研究了连续刺激引起的[Ca2+]i变化,发现第一次的1mmol/LMCh刺激可升高[Ca2+]i,但与细胞外液中含Ca2+时不同的是,细胞对随后的MCh刺激不再响应。这表明,在无外Ca2+时,细胞内Ca2+库可以被单次MCh刺激所排空。 展开更多
关键词 嗜铬细胞 M型受体 钙离子库 碳纤电极 激素分泌
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胞内钙信号系统 被引量:12
11
作者 邹寿彬 陈良怡 康华光 《生命的化学》 CAS CSCD 2000年第6期254-257,共4页
关键词 钙通道 钙信号 钙振荡 细胞 钙离子
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大鼠胰腺β细胞离子通道的一些特性 被引量:2
12
作者 曾旭辉 娄雪林 +2 位作者 瞿安连 吴鸿修 周专 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期98-102,共5页
实验以单个Wistar大鼠胰腺 β细胞为对象 ,用穿孔膜片箝和细胞贴附式记录技术研究ATP敏感K+通道 (KATP)、延迟整流型K+通道 (KDR)、Ca2 +通道和Na+通道的有关特性。结果表明 :( 1)KATP通道的内流电导约 6 5pS ,外流电导约 31pS ,反转电... 实验以单个Wistar大鼠胰腺 β细胞为对象 ,用穿孔膜片箝和细胞贴附式记录技术研究ATP敏感K+通道 (KATP)、延迟整流型K+通道 (KDR)、Ca2 +通道和Na+通道的有关特性。结果表明 :( 1)KATP通道的内流电导约 6 5pS ,外流电导约 31pS ,反转电位在 - 6 0mV左右 ;( 2 )KDR通道在延迟 2 0ms后达到最大激活 ,KDR电流约为KATP的1/ 3;( 3)钙电流在 0mV左右达到 40~ 6 0pA的峰值 ,L 型钙通道是大鼠 β细胞主要的钙通道 ,其上还含另一种高电压激活的钙通道 ;( 4)约有一半的 β细胞有明显的钠电流 ,钠通道在 10mV左右达到 2 0 0~ 40 展开更多
关键词 糖尿病 大鼠β细胞 离子通道 穿孔膜片箝 膜电流
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大鼠嗜铬细胞分泌的膜片钳和 fura-2 联合检测 被引量:2
13
作者 韦顺会 瞿安连 +1 位作者 吴鸿修 周专 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第9期100-102,共3页
在原代培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞上,综合运用细胞内钙测定法和全细胞膜片钳法,以检测膜电容变化为手段测定单一肾上腺嗜铬细胞的胞吐过程.通过施加+20mV去极化时引起的钙电流,对细胞膜电容的变化以及细胞内钙浓度[Ca2+]... 在原代培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞上,综合运用细胞内钙测定法和全细胞膜片钳法,以检测膜电容变化为手段测定单一肾上腺嗜铬细胞的胞吐过程.通过施加+20mV去极化时引起的钙电流,对细胞膜电容的变化以及细胞内钙浓度[Ca2+]i变化的同时检测,多方位地确定影响细胞分泌的因素. 展开更多
关键词 嗜铬细胞 膜电容 肾上腺 内分泌 膜片钳法
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洛土辛对豚鼠心室肌细胞动作电位及L型钙电流的作用 被引量:3
14
作者 王嘉陵 牛小伟 +2 位作者 姚伟星 康华光 江明性 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第1期56-58,共3页
采用膜片钳技术全细胞记录方式,研究洛土辛(Lot)对单个豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)和L型钙通道电流(I_(Ca-L))的影响。结果表明,Lot 30 μmol/L明显延长 AP时程,但不影响静息电位和 AP幅度,另增... 采用膜片钳技术全细胞记录方式,研究洛土辛(Lot)对单个豚鼠心室肌细胞动作电位(AP)和L型钙通道电流(I_(Ca-L))的影响。结果表明,Lot 30 μmol/L明显延长 AP时程,但不影响静息电位和 AP幅度,另增加全细胞I_(Cc-L)。贴附式单通道记录表明,Lot 100 μmol/L不改变斜率电导,对L型钙通道的门控过程也无明显影响,但显著提高单通道的平均电流,使非空白记录从 25%增至 41%。提示,Lot增加 L型钙通道的可利用度可能是其促钙内流的主要作用机制。 展开更多
关键词 洛土辛 动作电位 L型钙电流 心室肌
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大鼠嗜铬细胞分泌的膜电容和微碳纤电极检测 被引量:1
15
作者 韦顺会 徐建华 +3 位作者 瞿安连 吴鸿修 叶琴 周专 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期40-46,共7页
在原代培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞上,综合运用细胞内钙测定法和全细胞膜片钳法,以检测膜电容变化为手段测定单一肾上腺嗜铬细胞的胞吐过程。-70mV到+20mV去极化引起的钙电流和细胞膜电容的变化以及吹加60mmol/LKC... 在原代培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞上,综合运用细胞内钙测定法和全细胞膜片钳法,以检测膜电容变化为手段测定单一肾上腺嗜铬细胞的胞吐过程。-70mV到+20mV去极化引起的钙电流和细胞膜电容的变化以及吹加60mmol/LKCl时,细胞内游离钙离子浓度[Ca2+]i和细胞膜电容变化的同时检测,表明了Ca2+对细胞胞吐的控制作用。而用微碳纤电极则能检测到吹加60mmol/LKCl导致嗜铬细胞胞吐时儿茶酚胺的量子化释放。 展开更多
关键词 嗜铬细胞 膜电容 去极化 胞吐 微碳纤电极
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Ebselen 抑制 ONOO^- 对神经元[Ca^(2+)]_i 的影响 被引量:3
16
作者 易永 蔡东 +1 位作者 瞿安连 黄开勋 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第5期20-23,共4页
Fura-2显微荧光测钙技术研究发现,过氧亚硝基阴离子(ONOO-)作用于MN9D细胞,数s内即可导致其胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的急剧升高.胞外液换为无钙液或向胞外液中加入硝苯吡啶(Nifedip-ine... Fura-2显微荧光测钙技术研究发现,过氧亚硝基阴离子(ONOO-)作用于MN9D细胞,数s内即可导致其胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的急剧升高.胞外液换为无钙液或向胞外液中加入硝苯吡啶(Nifedip-ine)、二硫苏糖醇(DTT)均可抑制ONOO-对[Ca2+]i的影响,提示L-型钙通道的激活是ONOO-引起[Ca2+]i升高的主要原因,ONOO-的这种作用可能与其氧化特性有关.Ebselen(2-苯基-1,2-苯并异硒唑-3(2H)酮)明显抑制ONOO-对[Ca2+]i的影响,并且存在一定的剂量效应关系. 展开更多
关键词 过氧亚硝基 阴离子 ONOO^- 细胞 神经元 EBSELEN
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谷氨酸对海马神经元钙信号的影响 被引量:1
17
作者 娄雪林 郝建东 +2 位作者 朱长庚 翟安连 周专 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期17-17,46,共2页
关键词 谷氨酸 海马神经元 钙信号
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咖啡因对大鼠肾上腺嗜铬细胞钙信号调节作用 被引量:1
18
作者 曾旭辉 娄雪林 +1 位作者 周专 瞿安连 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1999年第1期90-92,06,共4页
在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上,采用钙显微荧光测量方法,测量了咖啡因对胞内游离钙浓度的影响.实验结果表明,在2Ca2+外液中,咖啡因(1mmol/L,10mmol/L,40mmol/L)对细胞的自发振荡表现出明显的抑制作... 在单个大鼠肾上腺嗜铬细胞上,采用钙显微荧光测量方法,测量了咖啡因对胞内游离钙浓度的影响.实验结果表明,在2Ca2+外液中,咖啡因(1mmol/L,10mmol/L,40mmol/L)对细胞的自发振荡表现出明显的抑制作用;对不表现自发振荡的细胞,咖啡因能引起钙浓度的升高或钙振荡.在无外钙条件下研究连续咖啡因刺激引起的钙浓度变化,发现胞内钙库易排空,但随后的含钙咖啡因刺激仍可引起钙升高.同时,在无外钙条件下施加咖啡因可检测到激素的分泌。 展开更多
关键词 嗜铬细胞 咖啡因 钙信号 肾上腺 调节作用
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CCK-8可对抗μ-阿片受体介导的对大鼠背根节神经元钙通道的抑制效应 被引量:1
19
作者 刘乃江 徐涛 +4 位作者 李重庆 许畅 于英心 康华光 韩济生 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期103-107,共5页
CCK-8在脊髓水平可对抗μ-阿片受体介导的抗伤害性作用,但其作用位,点及机制尚不清楚。本实验以急性分离的大鼠背根节(DRG)神经元为标本,用全细胞膜片钳(whole-cellpatch-clamp)方法记录钙通道电... CCK-8在脊髓水平可对抗μ-阿片受体介导的抗伤害性作用,但其作用位,点及机制尚不清楚。本实验以急性分离的大鼠背根节(DRG)神经元为标本,用全细胞膜片钳(whole-cellpatch-clamp)方法记录钙通道电流,观察分析特异性μ-受体激动剂羟甲芬太尼(OMF)对电压依赖性钙通道电流的作用,以及在同一细胞上CCK-8对此作用的影响。结果显示OMF可明显抑制钙通道电流,其抑制作用可被μ-受体拮抗剂纳络酮或CCK-8所翻转,而CCK-8的作用又可被CCK-B受体拮抗剂L365,260所对抗。结果提示:CCK-8可在同一细胞上经CCK-B受体对抗阿片效应。CCK-8本身对钙通道电流并无增强效应,相反它可引起抑制作用。关于CCK-8如何对抗μ-受体介导的机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 羟甲芬太尼 CCK-8 背根节神经元 钙通道
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细胞电生理与膜片钳技术 被引量:13
20
作者 康华光 《中国医疗器械杂志》 CAS 2000年第3期155-160,共6页
本讲座介绍细胞电生理的基本知识及其基本方法。包括细胞的简单结构、细胞膜的化学组成和生物电信号的产生机制。膜片钳技术是现代电生理研究的基本方法 ,它涉及实验系统的组建和实验过程中的关键技术。
关键词 细胞电生理 生物电信号 膜片钳技术
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