目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对气道上皮细胞粘附迁移的影响及其作用机制。方法:利用不同浓度的CSE刺激气道上皮细胞观察其粘附迁移情况,以RT-PCR和Western blotting分别检测CSE对气道上皮细胞FIP200(FAK-familyinteracting protein of...目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对气道上皮细胞粘附迁移的影响及其作用机制。方法:利用不同浓度的CSE刺激气道上皮细胞观察其粘附迁移情况,以RT-PCR和Western blotting分别检测CSE对气道上皮细胞FIP200(FAK-familyinteracting protein of200kD)mRNA和FIP200蛋白表达水平的影响。结果:CSE干预的气道上皮细胞粘附率和迁移速度均明显降低,FIP200mRNA和蛋白表达水平显著增高,而且这些变化均随CSE浓度的增大而增大;气道上皮细胞FIP200mRNA和蛋白表达水平的增高与气道上皮细胞粘附迁移的降低呈显著正相关。结论:CSE显著抑制气道上皮细胞的粘附和迁移,FIP200的高表达及FIP200对FAK的抑制可能是其作用机制之一。展开更多
目的研究FIP200(FAK-family interacting protein of200kDa)对细胞外基质成份诱导的呼吸道上皮细胞增殖和细胞周期演进的影响及其作用机制。方法通过纤连接蛋白(FN)诱导培养呼吸道上皮细胞增殖,以FIP200反义寡核苷酸(ODN)经脂质体转染细...目的研究FIP200(FAK-family interacting protein of200kDa)对细胞外基质成份诱导的呼吸道上皮细胞增殖和细胞周期演进的影响及其作用机制。方法通过纤连接蛋白(FN)诱导培养呼吸道上皮细胞增殖,以FIP200反义寡核苷酸(ODN)经脂质体转染细胞;利用四唑盐(MTT)比色实验研究呼吸道上皮细胞增殖情况;采用流式细胞术分析呼吸道上皮细胞细胞周期各期分布情况;以Western blot检测FIP200和FAK蛋白表达水平;以免疫共沉淀检测FIP200和FAK结合情况和FAK磷酸化程度。结果FN诱导的呼吸道上皮细胞MTT吸光度明显增强,G1期细胞数量明显减少,S期和G2期细胞数量明显增多,同时FAK表达水平及其酪氨酸磷酸化程度显著增高,FIP200表达有降低趋势,FAK与FIP200的结合程度显著减低;与40mg/L FN组相比,经脂质体转染了反义FIP200寡核苷酸的气道上皮细胞MTT吸光度值显著增高,G1期细胞数明显减少,S期和G2期细胞数显著增多,FIP200表达水平显著降低,FAK表达水平无明显变化,与FIP200结合的FAK显著降低,FAK酪氨酸磷酸化程度明显增高。结论内源性FIP200和FAK的结合抑制FAK的活化,从而抑制呼吸道上皮细胞增殖和细胞周期演进,内源性FIP200作为FAK的抑制剂而存在;FN能够促使FAK和FIP200结合的解离而活化FAK,从而促进细胞增殖。展开更多
目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对气道上皮细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制.方法:利用MTT法研究CSE对气道上皮细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析气道上皮细胞细胞周期的影响,以RT-PCR和W estern b lot检测气道上皮细胞FIP200 mRN...目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对气道上皮细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制.方法:利用MTT法研究CSE对气道上皮细胞增殖的影响,采用流式细胞术分析气道上皮细胞细胞周期的影响,以RT-PCR和W estern b lot检测气道上皮细胞FIP200 mRNA和蛋白表达,以免疫共沉淀检测FIP200与局灶粘着斑激酶(FAK)连接状况.结果:CSE干预的气道上皮细胞MTT吸光度比对照组明显降低,G1期细胞增多,S和G2期细胞明显减少(P<0.01),FIP200 mRNA,FIP200的表达水平以及FIP200与FAK的连接均显著增高(P<0.01),且随CSE干预时间和CSE浓度而增大;气道上皮细胞FIP200表达水平和FIP200与FAK连接的增高均与G1期细胞增多呈正相关(P<0.01),与S和G2期细胞减少呈负相关(P<0.01).结论:CSE显著抑制气道上皮细胞的增殖,FIP200的高表达可能是其作用机制之一.展开更多
文摘目的:研究香烟烟雾提取物(CSE)对气道上皮细胞粘附迁移的影响及其作用机制。方法:利用不同浓度的CSE刺激气道上皮细胞观察其粘附迁移情况,以RT-PCR和Western blotting分别检测CSE对气道上皮细胞FIP200(FAK-familyinteracting protein of200kD)mRNA和FIP200蛋白表达水平的影响。结果:CSE干预的气道上皮细胞粘附率和迁移速度均明显降低,FIP200mRNA和蛋白表达水平显著增高,而且这些变化均随CSE浓度的增大而增大;气道上皮细胞FIP200mRNA和蛋白表达水平的增高与气道上皮细胞粘附迁移的降低呈显著正相关。结论:CSE显著抑制气道上皮细胞的粘附和迁移,FIP200的高表达及FIP200对FAK的抑制可能是其作用机制之一。
