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脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析 被引量：5
1
作者 陈丽丹 曹虹 +3 位作者 黄胜和 杨军 周浩 贡树基 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期419-422,共4页
目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进... 目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 脑膜炎 大肠杆菌 cglE IbeA蛋白表达 生物信息学
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SARS冠状病毒M蛋白二级结构和B细胞抗原表位的稳定性分析 被引量：2
2
作者 胡族琼 赵卫 +2 位作者 龙北国 江丽芳 郭新雄 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期601-603,共3页
目的预测具有代表性的3株SARS冠状病毒M蛋白二级结构和B细胞抗原表位,探讨基因变异对M蛋白二级结构和B细胞抗原表位的影响。方法采用Chou-Fasman方法、Garnier-Robson方法和Karplus-Schulz方法预测SARS冠状病毒M蛋白二级结构;按Kyte-Doo... 目的预测具有代表性的3株SARS冠状病毒M蛋白二级结构和B细胞抗原表位,探讨基因变异对M蛋白二级结构和B细胞抗原表位的影响。方法采用Chou-Fasman方法、Garnier-Robson方法和Karplus-Schulz方法预测SARS冠状病毒M蛋白二级结构;按Kyte-Doolittle方案、Emini方案和Jameson-Wolf方案预测B细胞抗原表位。结果3株SARS冠状病毒M蛋白的二级结构和B细胞抗原表位完全一致。结论SARS冠状病毒M蛋白的二级结构和抗原表位比较稳定,提示利用某一毒株的M蛋白制备单克隆抗体和疫苗可应用于SARS的诊断和防治。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒 B细胞抗原表位 蛋白二级结构 稳定性分析 olf方案 单克隆抗体 M蛋白 基因变异 代表性 预测
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SARS冠状病毒M基因在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性初步研究 被引量：1
3
作者 晏辉钧 赵卫 +5 位作者 方丹云 周经姣 龙北国 张文炳 郭辉玉 江丽芳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期38-41,共4页
【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GS... 【目的】在大肠杆菌中表达SARS冠状病毒包膜(M)蛋白与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并对其进行血清学鉴定。【方法】克隆编码SARS冠状病毒M蛋白的基因,并在原核系统中表达GST-M融合蛋白,用Westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA)分析GST-M融合蛋白。【结果】10份SARS患者恢复期血清均能识别M-GST融合蛋白,并在Mr=52000附近出现特异性结合带;而10份正常人血清不与M-GST融合蛋白起反应。【结论】本研究获得了SARS冠状病毒GST-M融合蛋白,它可与SARS患者的恢复期血清产生特异性的结合反应,为研究SARS冠状病毒感染宿主细胞的过程和制备重组疫苗提供了条件。 展开更多
关键词 SARS冠状病毒 表达 GST融合蛋白 融合蛋白 恢复期 免疫学特性 血清 大肠杆菌 特异性结合 克隆
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SARS患者尸检肺组织的TGF-β检测
4
作者 周经姣 林汉良 +5 位作者 方丹云 吴惠茜 晏辉钧 赵卫 龙北国 江丽芳 《中国病毒学》 CSCD 2005年第3期225-227,F003,共4页
为了研究TGFβ1在严重急性呼吸综合征(Severeacuterespiratorysyndrome,SARS)尸检肺组织中的表达情况及其在患者肺组织损伤中的可能作用,对2例SARS尸检肺组织进行病理学观察;应用免疫组化方法检测TGFβ1在尸检肺组织及对照肺组织中的表... 为了研究TGFβ1在严重急性呼吸综合征(Severeacuterespiratorysyndrome,SARS)尸检肺组织中的表达情况及其在患者肺组织损伤中的可能作用,对2例SARS尸检肺组织进行病理学观察;应用免疫组化方法检测TGFβ1在尸检肺组织及对照肺组织中的表达情况,并进行半定量分析。结果显示病例一尸检肺组织主要病理改变为弥漫性肺泡损伤,透明膜形成及渗出性炎症。病例二尸检肺组织除了上述改变外,还伴有肺泡间质纤维增生和肺泡早期纤维化等机化性肺炎改变。TGFβ1平均灰度值在SARS患者肺组织为103.43±0.62;小叶性肺炎组织为131.47±2.64;正常肺组织中为144.24±0.09。3组比较有显著差别(P值<0.05)。SARS病毒感染后可引起急性肺间质和肺泡渗出性炎症,中后期病例还伴有肺泡间质纤维增生和肺泡早期纤维化;SARS患者肺组织损伤及纤维化与SARS冠状病毒感染后TGFβ1表达增强有关,提示抗TGFβ1治疗在SARS患者肺损伤、纤维化的预防、治疗过程中可能具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征 肺损伤 纤维化 TGF-Β1
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SARS冠状病毒S蛋白研究进展
5
作者 周浩 赵卫 龙北国 《国外医学（临床生物化学与检验学分册）》 2005年第9期603-605,共3页
SARS冠状病毒是引起传染性非典型肺炎的病原体,它具有4种结构蛋白,其中S蛋白含有主要的中和抗原表位,并有受体结合和膜融合活性,与SARS冠状病毒的组织嗜性、细胞融合性和病毒毒力密切相关,是制备保护性疫苗的重要靶位。
关键词 SARS病毒 S蛋白 基因组学 SARS冠状病毒S蛋白 传染性非典型肺炎 中和抗原表位 保护性疫苗 结构蛋白 受体结合 组织嗜性 病毒毒力 病原体
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小干扰RNA分子对乙肝病毒复制的抑制作用研究 被引量：2
6
作者 焦京 曹虹 +2 位作者 周美娟 刘志华 丁振华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期465-467,共3页
目的筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Westernblot检测细胞上清中乙肝表... 目的筛选特异高效抗乙型肝炎病毒(HBV)的小干扰RNA分子(siRNA),评价其干扰效果。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的3条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平;Westernblot检测细胞上清中乙肝表面抗原(HBsAg),分析siRNA对HBV基因表达的抑制作用。结果导入特异siRNA分子细胞中HBV的mRNA表达量明显降低(P<0.05),上清中HBsAg含量显著减少。阴性对照细胞中HBV的mRNA含量和上清中HBsAg含量基本不变(P>0.05)。结论所筛选的siRNA分子能特异性抑制HBV的mRNA和蛋白的合成。 展开更多
关键词 SIRNA RNA干扰 乙肝病毒表面抗原 MRNA
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白纹伊蚊气味结合蛋白的研究进展 被引量：1
7
作者 李跃 刘乾 郑学礼 《热带医学杂志》 CAS 2011年第11期1332-1334,共3页
气味结合蛋白(OBPs)是昆虫嗅觉系统的一类重要蛋白分子,可能与蚊虫的吸血、寻偶和产卵等生理行为密切相关,本文就白纹伊蚊的OBPs的研究进展、研究前景和意义进行综述。
关键词 白纹伊蚊 气味受体蛋白 埃及伊蚊 冈比亚按蚊
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