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SERPINA3在子宫内膜癌中表达上调的临床意义及功能研究 被引量:7
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作者 杨广东 任渊 张蓉 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期284-291,共8页
背景与目的:SERPINA3是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的一员,已有研究证实其在多种肿瘤细胞中异常表达。然而,它在子宫内膜癌中生物学功能及临床意义尚不清楚。本研究旨在探讨SERPINA3在子宫内膜癌细胞中的功能和子宫内膜癌预后评估中的价... 背景与目的:SERPINA3是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的一员,已有研究证实其在多种肿瘤细胞中异常表达。然而,它在子宫内膜癌中生物学功能及临床意义尚不清楚。本研究旨在探讨SERPINA3在子宫内膜癌细胞中的功能和子宫内膜癌预后评估中的价值。方法:①收集20对子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织,用实时定量PCR(quantitative real-time PCR)检测SERPINA3 mRNA在内膜组织中表达情况;②使用免疫组化方法,检测组织芯片(子宫内膜癌81例和正常对照37例)的SERPINA3表达情况,依据染色结果,用SPSS软件分析SERPINA3与子宫内膜癌临床病理特征之间的关系;③检测5株子宫内膜癌细胞系中SERPINA3的表达情况,选取表达量最高的HEC-1A细胞,利用小片段干扰RNA(small interfering RNA)干扰SERPINA3基因在HEC-1A细胞中的表达;④蛋白质印迹法(Western blot)和qPCR检测干扰后HEC-1A中SERPINA3基因在mRNA和蛋白水平表达情况,细胞迁移实验检测细胞运动能力的变化。结果:①SERPINA3 mRNA在内膜癌中表达明显高于对照内膜组织(n=20,P<0.05);②免疫组化结果显示SERPINA3在子宫内膜癌中的表达水平高于正常子宫内膜组织(P<0.001)。SERPINA3的表达水平与子宫内膜癌的临床分期、肿瘤细胞级别、脉管浸润、淋巴结转移之间比较差异有统计学意义(P<0.05);③干扰SERPINA3组细胞迁移能力显著减弱。结论:SERPINA3基因在子宫内膜癌中表达显著上调,可能与子宫内膜癌的侵袭和转移等相关。SERPINA3有望成为评估子宫内膜癌预后的生物学标志物,并可能作为子宫内膜癌生物靶向治疗的靶标之一。 展开更多
关键词 SERPINA3 子宫内膜癌 组织微阵列 小干扰RNA干扰 迁移
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CXXC指蛋白5在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义 被引量:2
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作者 汪景灏 任渊 +4 位作者 张蓉 韩英 盛友华 侯文静 敖洪峰 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期260-268,共9页
背景与目的:上皮性卵巢癌是最常见的卵巢肿瘤类型,发病率高,治疗效果不满意,生存率低。CXXC指蛋白5(CXXC finger protein 5,CXXC5)在上皮性卵巢癌中的研究鲜见报道,该研究通过对CXXC5在上皮性卵巢癌中的表达和对上皮性卵巢癌细胞功能的... 背景与目的:上皮性卵巢癌是最常见的卵巢肿瘤类型,发病率高,治疗效果不满意,生存率低。CXXC指蛋白5(CXXC finger protein 5,CXXC5)在上皮性卵巢癌中的研究鲜见报道,该研究通过对CXXC5在上皮性卵巢癌中的表达和对上皮性卵巢癌细胞功能的研究,旨在探讨CXXC5在上皮性卵巢癌中可能的作用和临床意义。方法:1通过肿瘤基因图集(The Cancer Genoma Atlas,TCGA)数据库提供的数据分析CXXC5在上皮性卵巢癌基因组中的变异;2通过免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测CXXC5在上皮性卵巢癌组织芯片中的表达情况,并分析CXXC5的表达与临床病理特征之间的关系;3通过蛋白[质]印迹法(Western blot)和实时定量PCR(real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测CXXC5在5株上皮性卵巢癌细胞系中的表达情况,选取表达量最高的ES-2细胞株;4使用慢病毒包装质粒转染ES-2细胞株,经嘌呤霉素筛选后构建稳定转染干扰细胞株;使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测细胞增殖能力的变化。结果:1CXXC5在TCGA提供的上皮性卵巢癌基因组中以表达为主;2CXXC5在上皮性卵巢和卵巢良性上皮性囊肿中的高表达率分别为39.3%和13.5%,差异有统计学意义(P=0.003);CXXC5在浆液性卵巢癌、黏液性卵巢癌、子宫内膜样卵巢癌和卵巢透明细胞癌中的高表达率分别为43.0%、22.9%、23.5%和66.7%,两两比较差异均有统计学意义(P均=0.014);CXXC5在有淋巴结转移和无淋巴结转移的上皮性卵巢癌中表达率为60.0%和35.8%,差异有统计学意义(P=0.022);3CXXC5稳定干扰后,卵巢癌透明细胞株ES-2的增殖能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CXXC5基因可能有促进卵巢癌细胞增殖的作用,可能是上皮性卵巢癌预后不良的生物标志物。 展开更多
关键词 CXXC指蛋白5 上皮性卵巢癌 组织微阵列 免疫组织化学 增殖
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宫颈癌微环境的研究进展 被引量:1
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作者 汪景灏 张蓉 《中国临床医学》 2014年第6期750-752,共3页
宫颈癌发病率居全球妇科恶性肿瘤的第2位。宫颈癌患者中有80%来自发展中国家。我国是宫颈癌的高发国家,近20年来我国宫颈癌患者早期检出率增加,且患者趋于年轻化[1]。肿瘤微环境是肿瘤周围的内环境,包括肿瘤周围的血管、免疫细胞、成纤... 宫颈癌发病率居全球妇科恶性肿瘤的第2位。宫颈癌患者中有80%来自发展中国家。我国是宫颈癌的高发国家,近20年来我国宫颈癌患者早期检出率增加,且患者趋于年轻化[1]。肿瘤微环境是肿瘤周围的内环境,包括肿瘤周围的血管、免疫细胞、成纤维细胞、信号因子及细胞外基质。一方面,肿瘤通过释放细胞外信号调控微环境。 展开更多
关键词 肿瘤微环境 细胞外基质 早期检出率 妇科恶性肿瘤 细胞外信号 成纤维细胞 肿瘤血管 巨噬细胞 信号因子 浸润型宫颈癌
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人EZH2基因编码区及3'非翻译区融合蛋白重组慢病毒表达载体构建及其在293T细胞中的表达 被引量:4
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作者 彭攸 赵卫卫 +4 位作者 李晓娇 王玉平 卢晓佳 邬美玉 冯景 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2012年第24期8151-8155,共5页
目的构建携带人EZH2基因编码区(coding region,CDS)及3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)融合红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)重组慢病毒表达载体,使mCherry-EZH2融合蛋白在293T细胞中稳定表达。方法运用I... 目的构建携带人EZH2基因编码区(coding region,CDS)及3'非翻译区(3'untranslated region,3'UTR)融合红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)重组慢病毒表达载体,使mCherry-EZH2融合蛋白在293T细胞中稳定表达。方法运用In-Fusion定向克隆技术构建人EZH2基因CDS区及3'UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体,测序无误后抽提质粒,转染293T细胞,包装病毒,测定病毒滴度。Western blot检测mCherry-EZH2的表达。结果测序证实重组慢病毒表达载体基因序列完全正确;病毒颗粒包装成功,滴度为1.59×109IU/ml;Western blot检测293T细胞中可以表达mCherry-EZH2融合蛋白。结论成功构建人EZH2基因CDS区及3'UTR融合蛋白重组慢病毒表达载体及病毒,其mCherry-EZH2可以在293T细胞中稳定表达。为进一步分析可能调控EZH2基因CDS区及3'UTR表达的miRNA奠定前期实验基础。 展开更多
关键词 3’非翻译区 EZH2基因 红色荧光蛋白 慢病毒载体
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剪接因子PUF60——基因治疗的新靶点
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作者 张灿灿 张蓉 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2017年第7期531-533,共3页
聚-U结合剪接因子60 KDa(PUF60)是一个与U2相关的剪接因子,在剪接体组装早期的3′剪接位点的识别中发挥重要作用.PUF60蛋白高表达与结直肠癌、卵巢癌、胃癌、肝癌等多种肿瘤的发生相关,其可通过人转录因子Ⅱ调控c-myc的表达.PUF60抗... 聚-U结合剪接因子60 KDa(PUF60)是一个与U2相关的剪接因子,在剪接体组装早期的3′剪接位点的识别中发挥重要作用.PUF60蛋白高表达与结直肠癌、卵巢癌、胃癌、肝癌等多种肿瘤的发生相关,其可通过人转录因子Ⅱ调控c-myc的表达.PUF60抗体可以在早期和复发肿瘤患者的血清中检测到,术前的检出率明显高于术后.PUF60可作为肿瘤诊断的联合或独立检测指标,为基因治疗提供新的靶点. 展开更多
关键词 肿瘤 基因 myc DNA 重组
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